Клетки NCI-H460 – Насоки за изследванията в областта на рака на белия дроб с помощта на данните за NCI-H460
NCI-H460 са клетки от недребноклетъчен белодробен карцином с човешки произход, които често се използват в изследванията на белодробния карцином и токсикологията. Тази клетъчна линия е ценен инструмент за изучаване на различни аспекти на биологията на рака, свързани с развитието, растежа и лекарствената резистентност на туморите. Освен това клетките NCI-H460 са подходящ модел за разработване на противоракови реагенти.
- Среда за отглеждане
- Като среда за култивиране на NCI-H460 се използва RPMI 1640. Тя се допълва с 10% фетално телешко серум, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на NCI-H460 е приблизително 33 часа.
- Тип растеж
- Клетките на белодробния рак NCI-H460 са адхезивни.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-4
- Налични от
- Cytion — Поръчайте NCI-H460
Клетки NCI-H460: Произход и общи характеристики
Произходът и общите характеристики на дадена клетъчна линия допринасят в голяма степен за нейните приложения в научните изследвания. Тази част от статията ще ви помогне да се запознаете с произхода и основните характеристики на клетките на белодробен рак NCI-H460. Ще научите: Какви са клетките NCI-H460? Какъв е типът на клетъчната линия NCI-H460? Каква е морфологията на NCI-H460?
- Клетъчната линия NCI-H460 произхожда от плеврален излив на европейски мъж с едроклетъчен рак на белия дроб. Тя е създадена през 1982 г. от А.Ф. Газдар и колеги.
- Клетките на белодробния рак NCI-H460 притежават епителна морфология.
- NCI-H460 е туморогенна клетъчна линия с хипотриплоиден кариотип. Модалният брой хромозоми за тези клетки е 57. Клетките NCI-H460 притежават също 58 модални броя хромозоми при сравними честоти.
- Тези белодробни ракови клетки имат много мутации, характерни за недребноклетъчните белодробни тумори, като например мутацията NCI-H460 KRAS, които участват в клетъчната пролиферация, растежа, инвазията и метастазирането.
Информация за култивирането на клетки NCI-H460
Трябва да знаете следните ключови моменти за правилното боравене и поддържане на клетъчната линия NCI-H460. Тук ще намерите информация за времето за удвояване на NCI-H460, културалната среда за NCI-H460 и основните процедури за култивиране на клетките NCI-H460, произхождащи от рак на белия дроб.
Ключови моменти при култивирането на клетки NCI-H460
Време за удвояване:
Времето за удвояване на NCI-H460 е приблизително 33 часа.
Прилепнали или в суспензия:
Клетките на белодробен рак NCI-H460 са адхезивни.
Съотношение при субкултивиране:
Препоръчителното съотношение на разделяне за клетъчната линия NCI-H460 е 1:2 и 1:4. След отстраняване на старата среда адхезивните клетки се изплакват с 1 x фосфатен буферен разтвор. След това клетките се инкубират с разтвор за пасажиране Accutase в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. Дисоциираните клетки се ресуспендират в културална среда и се центрофугират. Събраните клетки се ресуспендират отново и се прехвърлят в нова колба за култивиране.
Среда за растеж:
Като културална среда за NCI-H460 се използва RPMI 1640. Тя се допълва с 10% фетално телешко серум, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:
Културите NCI-H460 се поддържат при температура 37 °C във влажен инкубатор с непрекъснато подаване на 5% CO₂.
Съхранение:
Клетките на белодробен рак NCI-H460 могат да се съхраняват в парофазата на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури за дългосрочно съхранение.
Процес на замразяване и среда:
За замразяване и съхранение на клетките NCI-H460 се използва среда CM-1 или CM-ACF. Препоръчва се метод на бавно замразяване, за да се запази максимална жизнеспособност на клетките.
Процес на размразяване:
Замразените клетки NCI-H460 се размразяват в предварително загрята водна баня (при температура 37 °C) в продължение на 40 до 60 секунди, докато остане малък леден буцик. Към размразените клетки се добавя свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира отново, а клетките се разпределят в нови колби, съдържащи среда за растеж. Клетките NCI-H460 могат да отнемат почти 24 часа, за да се прикрепят към повърхността на колбата.
Ниво на биологична безопасност:
Клетките от белодробен рак NCI-H460 се обработват и поддържат в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.
Публикувано: 2023 г. | Последно преразгледано: май 2026 г.
Предимства и недостатъци на клетките NCI-H460
NCI-H460 е широко използвана клетъчна линия в изследванията на рака на белия дроб. В тази секция ще бъдат разгледани общите предимства и недостатъци, свързани с раковите клетки NCI-H460.
Предимства
Предимствата на клетъчната линия NCI-H460 за недребноклетъчен рак на белия дроб са:
-
Произход на тумора
Клетъчната линия NCI-H460 е получена от пациент с едроклетъчен белодробен карцином, като представлява този конкретен тип рак на белия дроб. Тя се използва като модел за изучаване на биологията на рака на белия дроб и разработване на нови и ефективни методи на лечение. Клетките NCI-H460 притежават туморогенен потенциал и могат да бъдат инжектирани в имунодефицитни мишки за създаване на in vivo туморни модели за изучаване на туморния растеж, развитие и ефикасността на потенциални лекарства.
-
Високи темпове на пролиферация
NCI-H460 показва по-високи темпове на растеж в сравнение с други клетъчни линии на недребноклетъчен белодробен карцином, като например A549. Това предимство увеличава тяхната достъпност и помага на изследователите да провеждат възпроизводими и чувствителни към времето експерименти.
Недостатъци
Недостатъците, свързани с клетките на белодробен рак NCI-H460, са:
-
Хомогенност
Клетките NCI-H460 са хомогенни, тъй като са получени от тумор на един-единствен пациент. Поради това те като цяло не притежават сложността и хетерогенността, наблюдавани в туморите на пациентите.
Приложения на клетките NCI-H460 в научните изследвания
Клетките на белодробния рак NCI-H460 се използват широко в проучвания, свързани с белодробния карцином. Ето някои от важните приложения на клетките NCI-H460 в научните изследвания:
- Изследвания на рака на белия дроб: Клетките NCI-H460 са безценен модел за изследване на клетъчните и молекулярните механизми, участващи в развитието, растежа и метастазирането на тумора. Освен това те се използват за изучаване на ключови сигнални пътища, молекулярни мишени и различни генетични мутации, свързани с прогресията на рака на белия дроб. Проведени са няколко проучвания върху клетките NCI-H460 с цел ефективно изследване на тези фактори. Проучване, проведено през 2019 г., предложи, че свръхекспресираният ядрен субстрат на казеин и циклин-зависимите кинази (NUCKS) участва в растежа на туморните клетки чрез регулиране на сигналния път PI3K/AKT [1]. По подобен начин в едно in vitro и in vivo проучване бяха използвани клетки NCI-H460 за изследване на ролята на гена eIF4E. Резултатите показаха, че генът eIF4E участва в растежа на белодробния карцином и ангиогенезата и може да бъде мишена за разработване на обещаващи лекарства срещу рак на белия дроб [2].
- Откриване и разработване на лекарства: NCI-H460, клетъчна линия от човешки белодробен рак, се използва широко в проучвания за откриване и разработване на лекарства. Изследователите използват тези клетки, за да изследват токсичността и ефикасността на нови кандидат-лекарства, целеви терапии и лечения, насочени главно към KRAS мутациите в NCI-H460. В проучване, проведено от Haoyue Hu и колеги през 2023 г., бяха използвани клетки NCI-H460 за изследване на противораковите ефекти на лекарството анлотиниб. Резултатите показаха, че анлотиниб частично засяга растежа на клетките на белодробен рак с мутация в гена KRAS чрез инхибиране на сигналната каскада MEK/ERK [3]. По същия начин фенолното съединение карнозинова киселина беше подложено на скрининг за антипролиферативна и проапоптотична активност с използване на клетки NCI-H460 [4].
- Лекарствена резистентност: Клетъчната линия NCI-H460 е идеална за изучаване на механизма на лекарствената резистентност при белодробния карцином. Изследователите използват тези клетки за разработване на модели на лекарствена резистентност, с цел идентифициране на основните гени, молекулярни фактори и сигнални пътища. Например, в едно проучване бяха използвани NCI-H460 клетки, резистентни към пеметрексед – многоцелево антифолатно средство – за изследване на основните молекулярни механизми на резистентността към пеметрексед в клетките на недребноклетъчен белодробен карцином [5].
Закупете клетъчната линия NCI-H460: Вашият пропуск към изследванията в областта на рака на белия дроб
Научни публикации, посветени на клетките NCI-H460
Ето някои интересни научни публикации за клетъчната линия NCI-H460 на белодробен карцином.
Естествен глюкан от черен боб инхибира пролиферацията на раковите клетки чрез PI3K-Akt и MAPK пътя
Това проучване, публикувано в списанието „Molecules“ (2023 г.), предлага хипотезата, че естественият α-1,6-глюкан BBWPW, извлечен от черния боб, инхибира пролиферацията на клетките NCI-H460 чрез регулиране на PI3K/AKT/MAPK пътя.
В тази статия, публикувана в списанието „Phytomedicine“ (2019 г.), е проучено, че диоскин-6′-O-ацетат, ново естествено съединение, оказва антипролиферативен ефект върху клетките на белодробен рак NCI-H460.
miRNA-425-5p ускорява растежа на рака на белия дроб чрез сигналната ос PTEN/PI3K/AKT
Изследване, публикувано в списанието „BMC Pulmonary Medicine“ (2020 г.), посочва, че микроРНК-425-5p ускорява туморогенезата при белодробния карцином чрез сигналния път PTEN/PI3K/AKT.
В тази статия, публикувана в Molecular Medicine Reports (2017 г.), се разглеждат противотуморният потенциал и основните механизми на действие на съединението хинализарин върху клетките NCI-H460 и други клетки на белодробен рак.
Това проучване, публикувано в списанието „Food and Function“ (2019 г.), подчертава потенциалния противораков ефект на екстракта от Eucalyptus globulus Labill., използван върху клетки NCI-H460. Резултатите показаха, че растителният екстракт проявява тези ефекти чрез повишаване на експресията на p53 в NCI-H460 и модулиране на профила на клетъчния цикъл.
Ресурси за клетъчната линия NCI-H460: протоколи, видеоклипове и други
Ето някои онлайн ресурси, посветени на клетките от белодробен рак NCI-H460.
- Трансфекция на клетки NCI-H460: Това видеоуроци е стъпка по стъпка ръководство за трансфекция на клетки NCI-H460 с плазмидна ДНК.
Следните връзки съдържат важна информация за култивирането на клетките H460.
- Клетки NCI-H460: Този уебсайт ще ви предостави важна информация за средите за култивиране на клетки NCI-H460, както и за процедурите по субкултивиране, замразяване и размразяване.
- Пасажиране на клетки NCI-H460: Този документ ще ви насочи относно пасажирането и субкултивирането на клетъчната линия NCI-H460. Освен това той ще ви помогне да се запознаете с протокола за трансфекция на клетки NCI-H460.
Изследване на клетъчната линия NCI-H460: често задавани въпроси и интересни факти
Клетъчната линия NCI-H460 произхожда от пациент с едроклетъчен белодробен карцином, което я прави ценен модел за изучаване на този вид рак на белия дроб.
Клетките NCI-H460 се използват за изследване на биологията на рака на белия дроб, за разработване на нови методи на лечение и за оценка на ефикасността на потенциални лекарства. Те могат да се инжектират и в имунодефицитни мишки за създаване на in vivo туморни модели за изследване на растежа и развитието на туморите.
И двете клетъчни линии NCI-H460 и A549 са получени от белодробни карциноми, но NCI-H460 представлява едроклетъчен карцином, докато A549 представлява аденокарцином. Тази разлика в хистологичния подтип оказва влияние върху техните характеристики и поведение.
Да, клетките NCI-H460 имат туморогенен потенциал и могат да бъдат имплантирани в имунодефицитни мишки за създаване на ксенографт модели, което улеснява изследването на едроклетъчния белодробен карцином in vivo.
Комбинирането на паклитаксел с други съединения може да засили цитотоксичния му ефект върху клетките NCI-H460, което потенциално може да подобри резултатите от лечението на рак на белия дроб.
Да, клетките NCI-H460 експресират хипоксантин гуанин фосфорибозилтрансфераза, която е от съществено значение за нуклеотидния метаболизъм и клетъчната пролиферация.
Клетките NCI-H460 често се използват в изследванията на рака и токсикологията за изучаване на туморния растеж, оценка на цитотоксичните ефекти на съединенията и изследване на механизмите на лекарствена резистентност.
Клетките NCI-H460 обикновено експресират неврофиламентни триплетни протеини, които участват в поддържането на цитоскелетната структура и могат да играят роля в миграцията и инвазията на раковите клетки.
Пътят κB, наред с други, е замесен в регулирането на пролиферацията и оцеляването на клетките NCI-H460, което предлага потенциални цели за терапевтична намеса при рак на белия дроб.
Да, клетките NCI-H460 често се използват като in vitro модели за оценка на цитотоксичните ефекти на химиотерапевтичните агенти, включително паклитаксел и карбоплатин, което спомага за разработването на ефективни лечения на рака.
Източници
- Hu, C. и др., NUCKS стимулира пролиферацията, миграцията и инвазията на клетките на белодробния рак чрез сигналния път Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): стр. E55-61.
- Qi, X., и др., EGPI-1, нов инхибитор на взаимодействието между eIF4E и eIF4G, инхибира растежа на клетките на белодробния рак и ангиогенезата чрез сигналния път Ras/MNK/ERK/eIF4E. Химико-биологични взаимодействия, 2022. 352: стр. 109773.
- Ху, Х., и др., Анлотиниб оказва противоракови ефекти върху клетки на белодробен рак с мутация в KRAS чрез потискане на MEK/ERK пътя. Cancer Management and Research, 2020: стр. 3579-3587.
- Corveloni, A.C. и др., Карнозиновата киселина проявява антипролиферативни и проапоптотични ефекти в туморните NCI-H460 и нетуморните IMR-90 белодробни клетки. Journal of Toxicology and Environmental Health, Част A, 2020. 83(10): стр. 412–421.
- Xu, Y.-L. и др., Създаване и характеризиране на резистентни към пеметрексед клетки NCI-H460/PMT. „Антиракови средства в медицинската химия“ (по-рано „Актуална медицинска химия – антиракови средства“), 2019 г. 19(6): стр. 731–739.