Клетки NCI-H1299: Изследвания и клинично значение на клетките NCI-H1299 от белодробен рак
NCI-H1299 е иммортализирана клетъчна линия от човешки недребноклетъчен белодробен рак, широко използвана в имуноонкологията, онкологията и изследванията за откриване на лекарства. Освен това изследователите използват тези клетки за проучване на чувствителността към лекарства, основните сигнални пътища и молекулярните механизми, свързани с рака на белия дроб. Тези клетки се използват и за изучаване на вирусни инфекции като SARS-CoV-2.
- Среда за отглеждане
- RPM1 1640 е идеалната среда за клетъчната линия NCI-H1299. Тя е обогатена с 10% фетално телешко серум, 4500 mg/L глюкоза, 2,0 mM L-глутамин, 1 mM натриев пируват, 1500 mg/L NaHCO3 и 10 mM HEPES. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на NCI-H1299 варира между 22 и 30 часа.
- Тип растеж
- NCI-H1299 е адхезивна клетъчна линия.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Наличен от
- Cytion — Поръчайте NCI-H1299
- Общи характеристики и произход на клетките NCI-H1299
- Информация за култивиране
- Закупете клетъчна линия NCI-H1299: висококачествени инструменти за изследване на биологията на рака на белия дроб
- Предимства и недостатъци на клетките NCI-H1299
- Приложения на клетките NCI-H1299 в научните изследвания
- Научни публикации, посветени на клетките NCI-H1299
- Ресурси за клетъчната линия NCI-H1299: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси за клетъчната линия NCI-H1299
- Източници
- Често задавани въпроси
Общи характеристики и произход на клетките NCI-H1299
Първото нещо, което трябва да знаете за една клетъчна линия, е нейният произход и общите й характеристики, тъй като те ви помагат да планирате използването ѝ във вашите изследвания. Тази част от статията ще ви помогне да научите важна информация за произхода и характеристиките на NCI-H1299. Например, какво представляват клетките на белодробния рак NCI-H1299? Какъв тип клетки са NCI-H1299? Какъв е размерът на клетките NCI-H1299? Каква е разликата между A549 и NCI-H1299?
- Клетъчната линия NCI-H1299 произхожда от метастаза в лимфен възел на белия дроб на 43-годишен пациент от кавказката раса с рак.
- Тези клетки притежават хомозиготна частична делеция на гена p53; поради това те не експресират протеина p53. Липсата на експресия на протеина p53 в NCI-H1299 допринася за пролиферативната тенденция на белодробните ракови клетки H1299.
- Освен p53, за тези безсмъртни клетки е съобщено, че притежават мутация в гена KRAS, която е отговорна за техните свойства на растеж, пролиферация, миграция и инвазия.
- Кариотипът на NCI-H1299 е близо до диплоиден.
- Клетките NCI-H1299 имат морфология, подобна на тази на епителните клетки.
- Тези клетки са сплескани и имат дебелина по-малка от 5 µm.
NCI-H1299 и A549
NCI-H1299 и A549 са клетъчни линии на недребноклетъчен рак на белия дроб. Клетките NCI-H1299 са по-агресивни и чувствителни в сравнение с A549. И двете имат относително сходни мутации, като например KRAS. Въпреки това, за разлика от клетките NCI-H1299, клетките A549 експресират гена P53.
Информация за култивирането
Поддържането на култура от клетъчна линия не е лесно, докато не се запознаете с цялата ключова информация за нея, включително: Какво е времето за удвояване на NCI-H1299? Каква е плътността на засяване на NCI-H1299? Каква е клетъчната среда за NCI-H1299? Как се култивират клетъчните линии NCI-H1299? Тази секция ще ви помогне да научите отговорите на всички тези въпроси относно култивирането на клетки NCI-H1299.
Ключови моменти при култивирането на клетки NCI-H1299
Време за удвояване:
Времето за удвояване на NCI-H1299 варира между 22 и 30 часа.
Прилепваща или в суспензия:
NCI-H1299 е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение при субкултивиране:
Клетките NCI-H1299 се субкултивират при препоръчително съотношение от 1:3 до 1:6. За засяване адхезивните клетки се промиват с 1x PBS и се инкубират с разтвор за пасажиране Accutase в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. Отлепените клетки се добавят към свежа културална среда и се центрофугират. След това клетъчният пелетен остатък се ресуспендира и клетките се прехвърлят в нови колби, съдържащи среда за растеж.
Среда за растеж:
RPM1 1640 е идеална среда за клетки NCI-H1299. Тя се допълва с 10% фетално телешко серум, 4500 mg/L глюкоза, 2,0 mM L-глутамин, 1 mM натриев пируват, 1500 mg/L NaHCO3 и 10 mM HEPES. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:
Културите от клетки на белодробен рак NCI-H1299 се поддържат във влажен инкубатор при 37 °C с подаване на 5% CO₂.
Съхранение:
Клетъчната линия NCI-H1299 може да се съхранява дългосрочно във фазата на пари на течен азот или във фризери с ултраниска температура при температура под -150 °C.
Процес на замразяване и среда:
CM-1 или CM-ACF са среди за замразяване на клетки NCI-H1299. Клетките се замразяват чрез процес на бавно замразяване, който позволява понижение на температурата само с 1 градус на минута, за да се запази жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:
Замразените клетки NCI-H1299 се разбъркват бързо в предварително загрята водна баня при 37 градуса Целзий в продължение на 40 до 60 секунди, докато остане само малко парченце лед. Към размразените клетки се добавя свежа среда и те могат да бъдат култивирани директно в нови колби или центрофугирани. В първия случай средата трябва да се смени след 24 часа инкубация. Центрофугирането спомага за отстраняването на елементите от средата за замразяване. След това събраните клетки се ресуспендират в свежа среда и се прехвърлят в нова колба за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с клетъчната култура NCI-H1299 е необходима лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.
Закупете клетъчна линия NCI-H1299: висококачествени инструменти за научни изследвания в областта на биологията на рака на белия дроб
Предимства и недостатъци на клетките NCI-H1299
Подобно на други човешки ракови клетъчни линии, NCI-H1299 също притежава някои отличителни характеристики, свързани с конкретни предимства и недостатъци. Тук сме обобщили няколко от най-значимите от тях.
Предимства
Основните предимства на клетъчната линия NCI-H1299 за недребноклетъчен белодробен рак са:
-
Модел на белодробен рак in vitro
Клетъчните линии NCI-H1299 са разработени от метастази в лимфните възли на белодробен карцином и поради това притежават относително сходни свойства. Следователно тези клетки могат да служат като in vitro модел за изследване на биологията на белодробния рак, клетъчните и молекулярните механизми, както и за скрининг и тестване на потенциални терапевтични средства.
-
Лесни за култивиране
Клетките NCI-H1299 са лесни за култивиране и поддържане в изследователска лаборатория. Няма строги изисквания и процедури за култивиране на клетките.
-
Мутации в гените p53 и KRAS при NCI-H1299
Клетките NCI-H1299 нямат експресия на гена p53, което позволява на клетките да пролиферират интензивно. Освен това те притежават мутация в гена KRAS, която допринася за клетъчния растеж, пролиферацията, инвазията и миграцията. Предвид това изследователите използват клетки H1299 за изследване на молекулярните механизми, свързани с мутациите в гените KRAS и P53.
Недостатъци
Недостатъците на клетките NCI-H1299 са:
-
Тъканна специфичност
NCI-H1299 произхождат от белодробна тъкан. Поради това приложимостта им е ограничена предимно до изследвания на белодробния карцином. Те може да не отразяват напълно хетерогенността и общите характеристики на други видове рак.
Приложения на клетките NCI-H1299 в научните изследвания
Клетъчната линия NCI-H1299 се използва широко в изследванията на рака на белия дроб. Тук са споменати няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия.
- Биология на рака: Клетките NCI-H1299 служат като отличен изследователски инструмент за проучване на развитието и прогресията на рака, както и на свързаните с тях клетъчни и молекулярни механизми. Тези клетки притежават определени мутации, което позволява на изследователите да изследват свързаното с тях поведение на раковите клетки, сигналните пътища и профилите на генната експресия. В редица проучвания е използвана клетъчната линия NCI-H1299 на недребноклетъчен белодробен карцином за изучаване на биологията на рака на белия дроб. Например, в проучване, проведено през 2018 г., бе изследван сигналният път, участващ в апоптозата на раковите клетки на белия дроб, като се използваха клетки NCI-H1299. Изследователите установиха, че пътят PI3K/AKT допринася за клетъчната пролиферация, а неговото инхибиране може да доведе до смърт на раковите клетки [1]. По същия начин друго проучване изследва механизмите, участващи в епително-мезенхимния преход (EMT) на NCI-H1299. Това проучване предложи хипотезата, че екстрацелуларният протеин SPARC (секретиран киселинен протеин, богат на цистеин) допринася за EMT и миграцията на NCI-H1299, като по този начин стимулира туморогенезата в клетките — протеинът SPARC действа като медиатор на TGF-β1 сигнализацията [2].
- Откриване и скрининг на лекарства: NCI-H1299, клетъчна линия от човешки белодробен рак, се използва широко за оценка на токсичността и ефикасността на потенциални лекарства. Освен това тя се използва от изследователи за проучване на механизма на действие на противотуморни лекарства. В проучвания тези клетки са използвани и за идентифициране на възможни лекарствени мишени и механизми на резистентност. Например, изследване, проведено от Xiao-Yun Shen и колеги, проучи противораковия потенциал на природното съединение бруцеин D (BD). Резултатите показаха, че BD значително възпрепятства пролиферацията, инвазията и миграцията на клетките NCI-H1299. Следователно тя може да се счита за потенциална адювантна терапия за лечение на недребноклетъчен белодробен карцином [3]. По подобен начин в едно проучване са оценени цитотоксичните ефекти на ксантохумол самостоятелно и в комбинация с химиотерапевтичния лекарствен препарат цисплатин върху белодробни ракови клетки NCI-H1299 [4].
Научни публикации, посветени на клетките NCI-H1299
Тук са представени някои значими и най-често цитирани научни публикации относно клетъчната линия NCI-H1299 на белодробен карцином.
Тази статия е публикувана в списанието „Human and Experimental Toxicology“ (2021 г.). Проучването предполага, че индол-3-карбинол индуцира апоптоза в H1299 чрез повишаване на нивата на реактивни кислородни видове (ROS).
Това изследване е публикувано през 2018 г. в списанието „Cellular Physiology and Biochemistry“. Резултатите от изследването разкриват, че комбинацията от кафеена киселина и паклитаксел оказва синергичен противораков ефект върху клетъчната линия NCI-H1299 на недребноклетъчен белодробен рак.
Тази научна статия беше публикувана в списанието „Molecular Medicine Reports“ (2018 г.). Проучването оцени антитуморния ефект на тубеимозид-1, тритерпеноиден сапонин, и основните механизми в клетъчната линия NCI-H1299.
В тази статия, публикувана в списанието „Journal of Cancer“ (2020 г.), се предлага хипотезата, че Пристимерин, естествено съединение, потиска пролиферацията и миграцията на клетките NCI-H1299.
Механизъм на регулиране на гена VIPR1 в клетките на човешкия белодробен аденокарцином H1299
Това проучване, публикувано в списанието „Medical Oncology“ (2019 г.), изследва потенциалните ефекти от свръхекспресията на гена VIPR1 върху клетъчната линия на аденокарцином NCI-H1299.
Ресурси за клетъчната линия NCI-H1299: протоколи, видеоклипове и други
Ето някои онлайн ресурси, посветени на клетките NCI-H1299.
- Трансфекция на NCI-H1299: Това видео ще ви обясни протокола за временна трансфекция на клетъчни линии NCI-H1299.
- Субкультивиране на адхезивна клетъчна линия: Това видео ще ви помогне да научите общата процедура за субкултивиране на адхезивна клетъчна линия.
Следният линк съдържа информация за клетъчната култура на клетките NCI-H1299.
- Клетъчна линия NCI-H1299: Този линк може да ви помогне да се запознаете с протокола за пасажиране и трансфекция на клетките NCI-H1299.
Често задавани въпроси относно клетъчната линия NCI-H1299
Източници
- Gu, J. и др., Изследване на индуцираната от EGCG апоптоза в клетки на белодробен рак чрез инхибиране на сигналния път PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): стр. 4557-4563.
- Sun, W., и др., SPARC действа като медиатор на TGF‐β1 при стимулирането на епителиално-мезенхимния преход в клетките на белодробен рак A549 и H1299. Biofactors, 2018. 44(5): стр. 453-464.
- Шен, X.-Y. и др., Изследване на механизма на действие на бруцеин D при лечението на клетки H1299 от недребноклетъчен белодробен рак. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): стр. 500.
- Long, B. и др., „Цитотоксични ефекти на ксантохумол и неговата комбинация с цисплатин върху човешки метастатични белодробни ракови клетки H1299“. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): стр. 1–15.