Клетъчна линия BxPC-3
BxPC-3 е клетъчна линия от човешки панкреатичен рак. Тя се използва широко в изследванията на рака. Изследователите използват тези клетки главно за изучаване на биологията на панкреатичния рак, идентифициране на терапевтични цели и разработване на лекарства срещу рака.
- Среда за отглеждане
- За култивиране на клетъчната линия BxPC-3 се използва среда RPMI 1640. Тя се допълва с 10% фетално телешко серум, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3 за постигане на идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на клетките BxPC-3 варира между 48 и 60 часа.
- Тип растеж
- BxPC-3 е адхезивна клетъчна линия.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-3
- Налично от
- Cytion — Поръчайте BxPC-3
Тази статия съдържа важна информация за клетъчната линия BxPC-3, която може значително да ви помогне при работата с нея. Основно в нея се разглеждат:
- Обща информация и произход на клетъчната линия BxPC-3
- Култивиране на BxPC-3 клетки
- Клетъчна линия BxPC-3: предимства и ограничения
- Приложения на клетките BxPC-3 в научните изследвания
- Научни публикации за клетките BxPC-3
- Ресурси за клетъчната линия BxPC-3: протоколи, видеоклипове и др.
- Обща информация и произход на клетъчната линия BxPC-3
- Култивиране на BxPC-3 клетки
- Клетъчна линия BxPC-3: предимства и ограничения
- Приложения на клетките BxPC-3 в научните изследвания
- 5. Научни публикации за клетките BxPC-3
- Ресурси за клетъчната линия BxPC-3: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Обща информация и произход на клетъчната линия BxPC-3
Познаването на произхода на клетъчната линия е от решаващо значение за нейното приложение в научните изследвания. Запознаването с нейните характеристики, включително морфология, размер на клетките и плоидност, прави нейното използване по-лесно и удобно. Тук ще научите за произхода и общите характеристики на клетките BxPC-3: Какви са клетките BxPC-3? Какво представлява клетъчната линия BxPC-3? Какъв е произходът на клетъчната линия BxPC-3? Каква е морфологията на BxPC-3?
- BxPC-3, човешки клетки от карцином на панкреаса, са получени от 61-годишна европейка с аденокарцином на панкреаса през 1986 г. Тези клетки са потвърдени като туморогенни дори след като пациентката е преминала през няколко сесии радио- и химиотерапия. По този начин установената клетъчна линия е безценен модел за изучаване на развитието и прогресията на рака.
- Клетките BxPC-3 притежават морфология, подобна на епителните клетки.
- Модалният брой хромозоми за BxPC-3 е 59. Тези клетки имат хомозиготна делеция на хромозома 18q, която кодира протеина SMAD4/DPC4. Освен това, клетъчната линия няма мутацията BxPC-3 kras, която е често срещана при туморите на панкреаса. В тези клетки на рак на панкреаса се открива и делеция на BxPC-3 braf.
Каква е разликата между BxPC3 и PANC-1?
Клетките BxPC-3 PADC (панкреатичен дуктален аденокарцином) и PANC-1 са първични клетъчни линии на рак на панкреаса с епителна морфология. При това първите клетки притежават повече епителни свойства, докато вторите проявяват повече мезенхимни характеристики [1].
Отглеждане на клетки BxPC-3
Клетъчната линия BxPC-3 се използва широко в лабораториите за изследване на рака. Трябва да знаете следните ключови моменти за ефективното култивиране на тази клетъчна линия на рак на панкреаса. Ще научите: Какво е времето за удвояване на bxpc3? Как се култивира клетъчната линия BxPC-3?
Ключови моменти при култивирането на BxPC-3 клетки
Време за удвояване на популацията:
Времето за удвояване на клетките BxPC-3 варира между 48 и 60 часа.
Адхезивни или в суспензия:
BxPC-3 е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение на разделяне:
Клетките BxPC-3 се субкултивират в съотношение от 1:2 до 1:4. Клетките се промиват с 1 x PBS и се инкубират с разтвор за пасажиране, наречен accutase. След 8-10 минути към клетките се добавя свежа среда и клетките се центрофугират. Пелетата се ресуспендира отново в среда и клетките се изсипват в нов съд за култивиране за растеж.
Среда за растеж:
За култивиране на клетъчната линия BxPC-3 се използва среда RPMI 1640. Тя се допълва с 10% фетално телешко серум, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3 за постигане на идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:
Клетъчните култури BxPC-3 се поддържат в овлажнен инкубатор при 37 °C, свързан с 5% CO2.
Съхранение:
Замразените клетки обикновено се съхраняват при температура под -150 °C или във фазата на пари на течен азот, за да се защити жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:
За замразяване на клетъчни култури BxPC-3 могат да се използват CM-1 или CM-ACF. Използва се процес на бавно замразяване, при който температурата спада само с 1 °C, за да се предотврати шок за клетките.
Процес на размразяване:
Замразените BxPC-3 клетки се размразяват в предварително настроена водна баня при 37 °C за 40 до 60 секунди. След като остане малък леден буцик, към клетките се добавя свежа културална среда и се центрофугират, за да се отстранят елементите на средата за замразяване. След това клетъчният пелетен се ресуспендира и клетките се разпределят в колбата за растеж.
Ниво на биологична безопасност:
Клетъчните култури BxPC-3 се поддържат в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.
Клетъчна линия BxPC-3: предимства и ограничения
BxPC-3 е добре известна клетъчна линия на панкреатичен аденокарцином, свързана с редица предимства и ограничения. Основните предимства и недостатъци на клетъчната линия са изброени тук.
Предимства
Основните предимства на клетките BxPC-3 са:
-
In vitro модел на рак на панкреаса
Клетките BxPC-3, получени от пациенти с аденокарцином на панкреаса, проявяват съответните характеристики, което ги прави подходящ модел за изучаване на поведението на рака на панкреаса in vitro.
-
Туморогенна клетъчна линия
Клетките BxPC-3 притежават туморогенни свойства и могат да образуват тумори, когато се инжектират в голи или имунокомпрометирани мишки. Тези тумори много наподобяват първичните тумори на аденокарцином на панкреаса, което прави ксенографтовия модел BxPC-3 идеален за изучаване на растежа и прогресията на рака.
Ограничения
Ограниченията, свързани с клетъчната линия BxPC-3, са:
-
Кръстосано заразяване
Клетъчната линия BxPC-3, както всяка друга, носи риск от кръстосано заразяване. Изследователите трябва да проявяват предпазливост и да спазват строги протоколи за предотвратяване на заразяването при работа с тези клетки.
-
Бавен темп на растеж
Клетките BxPC-3 се характеризират със сравнително бавен темп на пролиферация, като времето за удвояване варира между 48 и 60 часа. Тази характеристика може да наложи по-дълги периоди на инкубация за конкретни експерименти, което потенциално може да доведе до забавяне на напредъка в изследванията.
Приложения на клетките BxPC-3 в научните изследвания
Клетките BxPC-3 предлагат много приложения в изследванията на рака. Най-често срещаните приложения са:
- Изследвания на рака на панкреаса: Клетките BxPC-3 имитират аденокарцином на панкреаса и затова се използват за проучване на генетичните и молекулярните механизми, лежащи в основата на развитието и растежа на тумора. Освен това изследователите откриват нови биомаркери и терапевтични цели с помощта на тези клетки. Освен това, BxPC-3 клетките изразяват значително ангиогенни фактори, т.е. интерлевкин-8 (IL-8), простагландин E2 (PGE2) и васкуларен ендотелиален растежен фактор (VEGF), което ги прави подходящи за изучаване на ангиогенезата. В този контекст ангиогенезата е ключов процес, свързан с растежа и метастазирането на рака. Проучване, публикувано през 2022 г., установи, че свръхекспресията на ламинин-5 гама-2 (LAMC2) в BxPC3 PDAC (панкреатичен дуктален аденокарцином) усилва туморогенезата чрез регулиране на сигналния път BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR сигналния път [2].
- Откриване и разработване на лекарства: Клетъчната линия BxPC-3 служи като безценен модел за тестване на лекарства срещу рак. Изследователите изследват цитотоксичните, антиметастатичните и апоптотичните ефекти на потенциални лекарства върху BxPC3 PDAC. Проучване, проведено от Александрия Търнър и колеги през 2020 г., изследва апоптотичните свойства на екстракти от плодове на Elaeocarpus reticulatus в клетки на панкреатичен рак BxPC-3 [3]. По подобен начин през 2020 г. беше проведено проучване, което определи противораковия потенциал на метанолен екстракт от растение, наречено Oxialis obtriangulata, в клетки BxPC-3. Освен това изследователите проучиха и клетъчния механизъм, чрез който растителният екстракт оказва терапевтично действие [4].
5. Научни публикации за клетките BxPC-3
В тази секция са изброени някои от най-цитираните и интересни публикации, посветени на клетъчната линия BxPC-3.
Тази публикация в Chemico-Biological Interactions (2020) изследва апоптотичните ефекти на естествения продукт ликокумарон върху клетките на панкреатичен рак BxPC-3.
Тази научна статия е публикувана в Anticancer Research (2022). Проучването предлага хидроксихлорохин да причинява клетъчна смърт на BxPC3 чрез инхибиране на гена BCL-XL.
Това изследване беше публикувано през 2020 г. в списанието „Journal of Cellular Biochemistry“. Проучването посочва, че естественото съединение салидрозид проявява противоракови свойства в клетките BxPC-3 чрез регулиране на HIF-1α (фактор, индуциран от хипоксия) и сигналната каскада LOXL2.
Тази статия в списанието „Biomedicine & Pharmacotherapy“ предполага, че ибрутиниб може да се използва като отличен радиосенсибилизатор при пациенти с рак на панкреаса. In vitro проучването върху BxPC-3 клетки показва, че той намалява фосфорилирането на BxPC3 EGFR и експресията на pAKT и надолу по веригата гени, чиято експресия се повишава от лъчетерапията.
Хелидонинът индуцира апоптоза чрез GADD45a-p53 регулация в човешки клетки на рак на панкреаса
Това проучване, публикувано в Integrative Cancer Therapies, предлага, че естественият продукт хелидонин проявява апоптотична активност в човешките панкреатични клетки BxPC-3 чрез регулиране на сигнализирането на BxPC3 p53 и GADD45a.
Ресурси за клетъчната линия BxPC-3: протоколи, видеоклипове и др.
Клетъчната линия BxPC-3 има много привлекателни предимства, които я правят подходяща за изследователски цели. Много онлайн ресурси за клетъчната линия BxPC-3 споменават протоколите за работа, поддържане и трансфекция.
- Трансфекция на BxPC3: Това видео е стъпка по стъпка ръководство за изучаване на протокола за трансфекция на BxPC-3 клетки.
Тази част от статията съдържа няколко линка, обясняващи протоколите за клетъчна култура на BxPC3.
- Клетъчна култура BxPC3: Този уебсайт ще ви помогне да научите протоколите за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури BxPC-3.
Източници
- Kim, Y., et al., Сравнително протеомно профилиране на клетъчни линии на дуктален аденокарцином на панкреаса. Mol Cells, 2014. 37(12): стр. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Свръхекспресията на ламинин-5 гама-2 стимулира туморогенезата на дукталния аденокарцином на панкреаса чрез каскадата EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): стр. 362.
- Търнър, А. и др., Екстрактите от плодове на Elaeocarpus reticulatus намаляват жизнеспособността и индуцират апоптоза в клетките на рак на панкреаса in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: стр. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Противораков потенциал на Oxialis obtriangulata в клетките на рак на панкреаса чрез регулиране на ERK/Src/STAT3-медиирания път. Молекули, 2020. 25(10): стр. 2301.