Клетъчна линия KG-1
Общи характеристики и произход на клетъчната линия KG-1
Произходът и общите характеристики на дадена клетъчна линия помагат на изследователя да реши как да я използва в работата си. Можете да проучите тази информация, преди да започнете да работите с нея. Тази част от статията е посветена изцяло на произхода и характеристиките на макрофагите KG-1. Тук ще научите: Какви са клетките KG-1? Каква е клетъчната линия KG-1a? Какъв е произходът на клетъчната линия KG-1? Каква е морфологията на KG-1?
- KG-1 е лимфобластоподобна клетъчна линия, получена от аспират от костния мозък на мъж от кавказката раса (на 59 години) с остра миелогенна левкемия. Тя е създадена от Koeffler и Golde през 1978 г. Тези клетки са предимно в стадий на зреене на промиелоцити или миелобласти [1].
- Клетките KG-1 притежават лимфобластоподобна морфология.
- Кариотипът на клетъчната линия KG-1 показва псевдодиплоиден модален брой хромозоми.
KG-1 и KG-1a
KG-1a е подлиния на родителските KG-1 клетки. Тя е разработена след 35 пасажа на клетъчната линия KG-1. Тя е по-малко диференцирана в сравнение с клетъчната линия KG-1. Освен това тази подлиния е цитохимично, морфологично и функционално по-малко зряла в сравнение с родителската клетъчна линия (KG-1).
Информация за култивирането на клетъчната линия KG-1
В тази част от статията ще бъдат разгледани всички важни сведения за култивирането на клетки от линията KG-1, които могат да улеснят работата ви. Тук ще научите: Какво е времето за удвояване на клетъчната линия KG-1? Какви са условията за култивиране на макрофагите KG-1? Как се култивират клетките KG-1?
Ключови моменти при култивирането на клетки KG-1
Време за удвояване:
Времето за удвояване на KG-1 е приблизително 45 часа. То обаче може да варира в зависимост от условията на култивиране.
Адхезивно или в суспензия:
Клетките KG-1 растат в суспензия.
Клетъчна плътност:
Оптималната клетъчна плътност за клетъчната линия KG-1 е от 1 до 3 x 105 клетки/мл. За субкултивиране клетъчната суспензия се прехвърля в стерилна епруветка и се центрофугира. След това към събраните клетки се добавя свежа среда и се ресуспендират внимателно. След това клетките се разпределят в нови колби и се култивират при оптимална клетъчна плътност. Клетките могат да бъдат разделени, когато достигнат максимална клетъчна плътност от 1 – 2 × 10⁶ клетки/мл.
Среда за растеж:
IMDM (модифицирана среда на Искоув-Дълбеко), съдържаща 10% FBS, 4,5 g/L глюкоза, 4 mM L-глутамин, 1,0 mM натриев пируват и 3,0 g/L NaHCO₃ се използва за култивиране на клетки KG-1. Средата трябва да се сменя след три дни.
Условия за отглеждане:
Клетъчната линия KG1 AML се култивира в овлажнен инкубатор при температура 37 °C и с подаване на 5 % CO₂.
Съхранение:
Замразените клетки се съхраняват във фазата на пари на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури, за да се запази жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:
CM-1 или CM-ACF са подходящи за замразяване на клетки KG-1. Клетките се замразяват чрез процес на бавно замразяване, за да се предпазят от термичен шок. Този метод позволява постепенно понижаване на температурата с 1 °C на минута.
Процес на размразяване:
Клетките се размразяват в предварително загрята водна баня при 37 °C, докато остане малък леден буцик. Към размразените клетки се добавя свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Клетъчният пелетен остатък се ресуспендира внимателно и се изсипва в нови колби, съдържащи среда за растеж.
Ниво на биологична безопасност:
Лабораторията с ниво на биологична безопасност 1 е от съществено значение за поддържането на клетъчни култури KG-1.
Публикувано: 2023 г. | Последно преразгледано: май 2026 г.
- Клетъчна линия KG-1: Предимства и ограничения
- Приложения на клетките KG-1 в научните изследвания
- Публикации за клетките KG-1
- Информация за култивирането на клетъчната линия KG-1
- Общи характеристики и произход на клетъчната линия KG-1
- 6. Ресурси за клетъчната линия KG-1: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Клетъчна линия KG-1: предимства и ограничения
Подобно на други клетъчни линии, клетъчната линия KG-1 за миелоидна левкемия също има редица предимства и ограничения. В тази секция ще разгледаме някои от най-важните от тях, които могат да бъдат решаващи при вземането на решение за използването ѝ във вашите изследвания.
Предимства
Основните предимства на клетките KG-1 са:
-
Лесност на култивиране
Клетките KG-1 се култивират лесно в изследователски лаборатории, като изискванията за клетъчната култура са прости. Лесната им поддръжка и условията за растеж осигуряват достъпност за широк кръг изследователи, разполагащи с основни съоръжения за клетъчна култура.
-
Модел на остра миелоидна левкемия (ОМЛ)
Получена от мъж с остра миелоидна левкемия (AML), клетъчната линия KG-1 AML служи като ценен инструмент за изследване на биологията на AML и провеждане на изследвания върху потенциални терапевтични средства, като предлага по-добро разбиране на основните механизми на заболяването и стратегиите за лечение.
Ограничения
Ограниченията, свързани с клетъчната линия KG1, са:
-
Модел in vitro
Клетките KG-1 са ценен in vitro модел за изследвания на AML; важно е обаче да се отбележи, че те може да не възпроизвеждат напълно сложността на заболяването in vivo, като служат като опростен клетъчен модел, който може да не обхваща всички аспекти на биологията на AML.
Приложения на клетките KG-1 в научните изследвания
KG-1 предлага няколко обещаващи приложения в биомедицинските изследвания. Някои от важните изследвания, в които се използват макрофагите KG1, включват:
- Изследвания на рака: Клетките KG-1 са получени от пациент с остра миелоидна левкемия и поради това се считат за ценен изследователски инструмент за проучване на биологията на ОМЛ. Изследователите използват тези клетки, за да изучават клетъчните и молекулярните механизми, които обуславят развитието, растежа и лекарствената резистентност при ОМЛ. Това включва също така идентифициране и откриване на нови биомаркери, генетични мутации и сигнални пътища, свързани с ОМЛ. Например, проучване, проведено през 2019 г., установи, че дългият некодиращ РНК linc00239 улеснява резистентността към доксорубицин и злокачественото поведение в клетките на острата миелоидна левкемия KG-1. По-нататъшни проучвания разкриха, че lncRNA активира PI3K/Akt/mTOR сигналния път, за да окаже тези ефекти в клетките на ОМЛ [2].
- Токсикология: Клетъчната линия KG1 се използва широко в токсикологичните изследвания. Изследователите тестват токсичността и ефикасността на потенциални терапевтични средства, включително химиотерапевтични лекарства и целеви терапии, върху миелоидни левкемични клетки KG1, за да идентифицират обещаващи кандидат-лекарства за бъдещи предклинични и клинични оценки. Проучване, проведено през 2018 г., анализира токсичността на нано-ниозоми, съдържащи доксорубицин, върху клетъчната линия KG1 на ОМЛ. Проучването предложи, че нано-ниозомите са подходящ носител за доставка на лекарства, тъй като повишават ефективността на лечението [3]. В друго проучване изследователите изследваха терапевтичните ефекти на чай от коприва, приготвен от листата на растението Urtica dioica. Проучването разкри, че този воден екстракт от листата на растението проявява антитуморни ефекти върху клетките на остра миелоидна левкемия KG-1 и U937 [4].
Публикации относно клетките KG-1
В тази част на статията са изброени няколко интересни научни публикации относно клетките KG-1.
Тази статия е публикувана в списанието „Journal of Cellular Physiology“ (2019 г.). Проучването предполага, че съединението кверцетин повишава чувствителността на клетъчната линия KG1 на остра миелоидна левкемия към TNF-свързания апоптоза-индуциращ лиганд (TRAIL) и може да засили ефекта на TRAIL-индуцираната цитотоксичност в клетките.
KLF8 усилва растежа на клетките на острата миелоидна левкемия и гликолизата чрез AKT/mTOR пътя
В тази статия, публикувана в списанието „Tropical Journal of Pharmaceutical Research“ (2022 г.), се предлага хипотезата, че понижената експресия на транскрипционния фактор 8 от типа на Krüppel потиска пролиферацията и гликолизата на AML-клетките, като стимулира апоптозата чрез регулиране на сигналния път AKT/mTOR.
Ефекти на сорафениб и арсенов триоксид върху клетъчните линии U937 и KG-1: апоптоза или автофагия?
Това проучване, публикувано в списанието „Cell Journal“ (Yakhteh) (2020 г.), изследва потенциалните ефекти на арсеновия триоксид и сорафениб върху клетките U937 и KG-1.
Това проучване, публикувано в списанието „Medical Oncology“ (2020 г.), оценява OXPHOS и гликолизата като терапевтични мишени в клетъчната линия на острата миелоидна левкемия (AML) KG-1.
В тази публикация в списанието „Drug Design, Development, and Therapy“ от 2020 г. се предлага, че съединенията куркумин и талидомид синергично оказват апоптотични ефекти в клетките KG-1 чрез намаляване на експресията на STAT3 и Bcl-xL.
6. Ресурси за клетъчната линия KG-1: протоколи, видеоклипове и други
По-долу са изброени няколко онлайн ресурса, свързани с клетките KG-1.
- Субкультивиране на суспензионни клетки: Това видео описва протокола за субкултивиране на суспензионни клетъчни култури като KG-1.
Следният линк съдържа протокола за клетъчна култура KG-1:
- Клетъчна линия KG-1: Този уебсайт съдържа основна информация за клетъчните култури на клетъчната линия KG-1. Той включва информация за среди за клетъчни линии и протоколи за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.
Източници
- Pelliccia, F., V. Ubertini и N. Bosco, Значението на молекулярно-цитогенетичния анализ преди използването на клетъчни линии в научните изследвания: Случаят с левкемичната клетъчна линия KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): стр. 237–240.
- Yang, Y. и др., Дългата некодираща РНК linc00239 стимулира злокачественото поведение и химиорезистентността спрямо доксорубицин частично чрез активиране на PI3K/Akt/mTOR пътя в клетките на остра миелоидна левкемия. Oncology Reports, 2019. 41(4): стр. 2311–2320.
- Бахрами-Банан, Ф., и др., „Получаване и изследване на нано-ниозоми, съдържащи доксорубицин, и оценка на тяхната токсичност върху клетъчната линия KG-1 на остра миелобластна левкемия“. Payavard Salamat, 2018. 12(4): стр. 309–323.
- Ходродж, М.Х. и др., Чаят от коприва инхибира растежа на клетките на остра миелоидна левкемия in vitro чрез стимулиране на апоптозата. Nutrients, 2020. 12(9): стр. 2629.