Съвети за безопасност на течния азот за безопасно съхранение на клетки

В лабораториите за клетъчни култури течният азот е от съществено значение за дългосрочното съхранение и опазване на ценни клетъчни линии. В Cytion даваме приоритет както на качеството на нашите клетъчни линии, така и на безопасността на лабораторния персонал, работещ с криогенни материали. Това изчерпателно ръководство очертава важни мерки за безопасност и най-добри практики за работа с течен азот в приложения за съхранение на клетки.

Основни лични предпазни средства (ЛПС) за работа с течен азот

Когато работите с течен азот за запазване на клетъчни линии като клетки HeLa или MCF-7, подходящите лични предпазни средства не подлежат на обсъждане. Целолицевата козирка е задължителна, за да предпазва от пръски и пари, които могат да причинят сериозни увреждания на очите и тъканите на лицето. Термоизолираните криогенни ръкавици трябва да се простират доста нагоре по предмишницата, тъй като стандартните лабораторни ръкавици не осигуряват достатъчна защита срещу екстремния студ. Като външен защитен слой трябва да се носи лабораторна престилка, която в идеалния случай се допълва от пластмасова престилка, устойчива на пръски, за да се осигури допълнителна защита срещу случайни разливи. Когато прехвърляте клетки от нашата среда за замразяване CM-1 в течен азот, уверете се, че личните ви предпазни средства са в добро състояние, без признаци на износване или повреда. Помнете, че дори малки излагания на течен азот могат да причинят незабавно увреждане на тъканите, което прави цялостните лични предпазни средства от съществено значение за всяко взаимодействие със системите за съхранение на LN2.

Изисквания за вентилация и мониторинг на кислорода

Правилната вентилация е от решаващо значение при съхраняването на ценни изследователски материали като клетки U937 и клетки RAJI в течен азот. Когато LN2 се изпарява, той се разширява бързо - един литър течен азот произвежда приблизително 700 литра азотен газ, който може бързо да измести кислорода в затворени пространства. Зоната за съхранение на течен азот трябва да бъде оборудвана с механични вентилационни системи и устройства за наблюдение на кислорода. За помещения, в които се съхраняват множество клетъчни линии и големи количества замразяваща среда CM-1 - 500 ml, препоръчваме да се инсталират постоянни монитори за кислород със звукови аларми, настроени да се задействат при 18% концентрация на кислород. Зоната за съхранение трябва да има точки за вентилация на високо ниво, тъй като азотният газ е малко по-лек от въздуха, когато се затопли. Никога не разчитайте само на естествена вентилация - механичните вентилационни системи трябва да се проверяват редовно и да се поддържат в съответствие със спецификациите на производителя, за да се осигури постоянна скорост на въздухообмен.

Протокол за безопасност за двама души

Когато работите с течен азот за криоконсервация на чувствителни клетъчни линии, като например HUVEC клетки или човешки мезенхимни стволови клетки - костен мозък, винаги работете по двама. Тази система на приятелство е особено важна по време на ключови операции, като прехвърляне на проби в хранилището, пълнене на криогенни съдове или работа с големи обеми замразяваща среда CM-1. Вторият човек служи като наблюдател по безопасността и може да реагира незабавно в случай на извънредни ситуации, като например разливане, изчерпване на кислорода или нараняване на хора. Те трябва да бъдат разположени в близост до изхода на лабораторията, като поддържат визуален контакт и същевременно не се доближават до непосредствената работна зона. И двамата членове на екипа трябва да са напълно обучени за аварийните процедури и да знаят местоположението на оборудването за безопасност. Планирайте операциите по работа с течен азот през редовното работно време, когато присъства помощен персонал, и никога не опитвайте криогенни операции в извънработно време или през уикенда.

Задължителни изисквания за обучение за работа с LN2

Преди да започнете работа със системи за съхранение на течен азот, съдържащи ценни проби като HeLa клетки, или да работите със замразяваща среда CM-ACF, без серум, е задължително да преминете цялостно обучение. Това обучение трябва да включва правилни техники за работа, разбиране на криогенните опасности и процедури за реагиране при извънредни ситуации. Членовете на персонала, работещи с нашите клетъчни линии, трябва да демонстрират компетентност по отношение на процедурите за безопасно пълнене, правилното използване на личните предпазни средства и разбирането на рисковете от изчерпване на кислорода. Обучението трябва да включва практическа работа с по-малки обеми под наблюдение, преди да се работи с по-големи количества. Трябва да се поддържа документация за завършеното обучение и да се планират редовни опреснителни сесии. Новите членове на персонала трябва да наблюдават опитен персонал за поне три пълни процедури за работа с LN2, преди да работят самостоятелно като част от екип. Не забравяйте, че дори опитният персонал се нуждае от периодично преквалифициране, за да се гарантира, че протоколите за безопасност остават свежи и актуални.

Системи за мониторинг на кислорода и алармени системи

Когато съхранявате критични изследователски материали, като например човешки мезенхимни стволови клетки - мастна тъкан и човешки мезенхимни стволови клетки - желе на Уортън, в течен азот, надеждните системи за мониторинг на кислорода са задължителни. Трябва да се инсталират стационарни монитори за кислород с аларми, настроени да се задействат при 18% концентрация на кислорода (v/v). Тези системи изискват стратегическо разположение: близо до нивото на пода, където първоначално се събират по-тежки от въздуха газове, на работна височина и в близост до съдовете за съхранение на LN2. Когато съхранявате проби в среда за замразяване CM-ACF - без серум - 500 ml, уверете се, че зоните за съхранение са оборудвани със звукови и визуални аларми, които могат да бъдат разпознати над фоновия шум в лабораторията. Въведете месечен график за тестване на всички системи за мониторинг на кислорода, поддържайте записи за калибриране и установете ясни процедури за евакуация при задействане на алармите. Персоналът никога не трябва да се опитва да отмени или деактивира тези системи за безопасност, независимо от продължителността на планираната работа с течен азот.