Клетки PC-3: Ин витро модел на андроген-зависим рак на простатата
Клетъчната линия PC-3 е получена през 1979 г. от костна метастаза на 62-годишен кавказки мъж с аденокарцином на простатата от IV степен. Този произход е значим, тъй като отразява високия метастатичен потенциал на клетъчната линия, отразяващ агресивния характер на късния стадий на рака на простатата, от който е произлязла.
Характеристики
- Нереагираща на андрогенния рецептор (AR): Клетките PC-3 се отличават с липса на реакция към андрогени, които са мъжки хормони като тестостерона. Това е показателно за напреднал стадий на рак на простатата, при който ракът се развива независимо от тези хормони.
- Реакции на растежни фактори: Въпреки липсата на реакция към андрогени, PC-3 клетките се влияят от епидермални растежни фактори, които могат да повлияят на тяхната пролиферация и оцеляване.
- Морфология: Те имат епителноподобна морфология, типична за клетките, които покриват повърхността на органите и структурите в тялото, което е очаквано предвид произхода им от аденокарцином - вид рак, който се образува в жлези, отделящи слуз.
- Размер: Клетките са сравнително големи, с диаметър между 15,1 и 16,6 µm, което може да бъде важен фактор в експерименталните постановки, като например ефективността на трансфекцията и изследванията за усвояване на лекарства.
- Хромозомни характеристики: Клетките PC-3 са почти триплоидни с модален брой хромозоми 62. Наличието на около 20 маркерни хромозоми и отсъствието на нормални хромозоми N2, N3, N4, N5, N12 и N15 подчертава тяхната генетична нестабилност, която е отличителен белег на раковите клетки.
Сравнение с други клетъчни линии за рак на простатата
PC-3 спрямо LNCaP:
Метастатичен потенциал: Клетките LNCaP имат по-нисък метастатичен потенциал в сравнение с PC-3, което прави PC-3 по-подходяща за изучаване на механизмите на метастазиране и за тестване на лекарства, насочени към предотвратяване на разпространението на рака.
Андрогенна реактивност: Клетките LNCaP експресират андрогенни рецептори и простатноспецифичен антиген (PSA) - маркери за луминална диференциация и андрогенна чувствителност, за разлика от андрогенната независимост на PC-3.
PC-3 спрямо DU145:
Експресия на андрогенни рецептори: Подобно на клетките на човешкия карцином на простатата PC-3,клетките DU145 също са андроген-рецептор-негативни, което отговаря на модела на независимите от андрогенно изчерпване (ADI) ракови заболявания на простатата.
Метастатичен потенциал: Въпреки че и двете се използват за изследване на ADI рак на простатата, клетките PC-3 имат по-висок метастатичен потенциал от DU145, което ги прави особено полезни за изследване на агресивен рак.
Характеристиките на клетъчната линия PC-3, като липса на реактивност към андрогенни рецептори, висок метастатичен потенциал и специфични хромозомни аберации, я правят безценен модел за изучаване на механизмите на напреднал рак на простатата и тестване на нови терапевтични стратегии.
Култивиране на PC3 клетки
Клетъчната линия PC-3 е основна в лабораториите за изследване на рака поради значението ѝ за изследванията на рака на простатата. Култивирането на тази клетъчна линия изисква точни условия, за да се гарантира жизнеспособността на клетките и точните експериментални резултати. По-долу ще намерите важна информация за култивирането на PC-3 клетки, включително насоки за времето на удвояване, плътността на посявката, растежната среда и процесите на замразяване, размразяване и съхранение.
Основни точки за култивиране на PC-3 клетки
Време за удвояване на популацията: PC-3 клетки имат приблизително време за удвояване от 40 часа, което е от съществено значение за планиране на графика за субкултивиране.
Прилепване: Въпреки че PC-3 клетките обикновено са адхезивни, те могат да се адаптират към растеж в суспензионни култури, което предлага гъвкавост в методите на култивиране.
Плътност на посявката: За започване на нова култура PC-3 е необходима плътност на засяване от 3 x 10^4 клетки/cm^2. За субкултивиране се поддържа по-ниска плътност от 1 x 10^4 клетки/cm^2.
Възстановяване на клетките и посявка: За субкултивиране на адхерентни клетки те се промиват с PBS и се обработват с TrypleExpress или Accutase. След отделянето им клетките се събират чрез центрофугиране, ресуспендират се и се засяват в нови колби с растежна среда.
Растежна среда: Клетките PC-3 се развиват в среда DMEM или Ham's F12, допълнена с 5% FBS и 2,5 mM L-глутамин.
Условия на растеж: Оптимален растеж се постига при 37 °C в овлажнен инкубатор, снабден с 5 % CO2.
Съхранение: За дългосрочна жизнеспособност PC-3 клетките се криоконсервират в парната фаза на течен азот при температури под -150°C.
Процес на замразяване: Препоръчва се процес на замразяване с контролирана скорост, който включва постепенно понижаване на температурата с 1 °C в минута, като се използва CM-1 или CM-ACF като среда за замразяване.
Процес на размразяване: При размразяване флаконите се разбъркват на водна баня с температура 37°C, докато остане само малка ледена бучка. След разреждане с прясна среда клетките се центрофугират, за да се отстрани средата за замразяване, и се ресуспендират в растежна среда за култивиране.
Предпазни мерки за биобезопасност: Култивирането на PC-3 клетки изисква лабораторни условия от поне първо ниво на биологична безопасност, за да се осигури безопасна работна среда.
Като се придържат към тези ключови точки, изследователите могат успешно да култивират и поддържат PC-3 клетки, улеснявайки изследванията в областта на биологията и лечението на рака на простатата.
Клетки PC3: Изследване на предимствата и предизвикателствата
Предимства на PC-3 клетките
Метастатичен потенциал: Клетките PC-3 са признати заради значителния си метастатичен потенциал. Това ги прави изключително полезни за изследване на сложните процеси, които стимулират метастазирането на рака, като осигуряват реалистичен модел за изследване на разпространението на тумора.
Моделиране на андроген-зависим рак: Като представител на андрогенно-независимия рак на простатата, клетките PC-3 са от решаващо значение за разбирането на този агресивен тип рак. Липсата на експресия на андрогенен рецептор (АР) и простатноспецифичен антиген (ПСА) позволява на изследователите да изучават поведението на раковите клетки, което не се влияе от андрогените, предлагайки прозрения за механизмите на резистентност срещу стандартните терапии.
Ефективност на трансфекцията: Линията PC-3 е особено възприемчива към трансфекция, което я прави отличен инструмент за генетични манипулации и изследвания на генната експресия, което е от съществено значение за разкриване на функциите на различни гени и техния принос за прогресията на рака.
Лесно култивиране: Тези клетки са лесни за употреба в лабораторни условия, като не изискват специализирани процедури за поддържането им, което опростява използването им и ги прави достъпни за различни експерименти.
Предизвикателства при PC-3 клетките
Неотзивчивост към андрогенна стимулация: Поради липсата на AR клетките PC-3 не са подходящи за изследвания, които изискват разбиране на андроген-зависимите механизми на рака на простатата, което може да бъде значително ограничение, когато се търси решение на целия спектър от видове рак на простатата.
Бърза пролиферация: Бързият темп на растеж на PC-3 клетките може да доведе до прекомерно влияние, което може да наруши поведението на клетките и генната експресия, като по този начин потенциално повлияе на последователността и надеждността на експерименталните резултати.
Научни приложения на PC-3 клетките
Модели на ксенографт на тумори: Клетките PC-3 играят важна роля при създаването на подкожни модели на тумори при мишки, като осигуряват безценен ресурс за изследване на туморната микросреда и тестване на ефективността на нови лекарства. Тези модели са особено полезни за оценка на естествените съединения, като α-пинен, за техните противоракови свойства.
Разбиране на биологията на рака: Изследването на клетъчните механизми на рака на простатата се подобрява чрез използването на PC-3 клетки. Те имат ключово значение за изясняване на ролята на дългите некодиращи РНК и специфични гени в поведението на раковите клетки, като хвърлят светлина върху потенциални нови цели за лечение.
Откриване и валидиране на лекарства: Клетъчната линия PC-3 се използва рутинно при скрининга и валидирането на нови кандидати за лекарства. Например, проучвания са показали ефикасността на растителни екстракти, като тези от растението розмарин, при инхибиране на пролиферацията на тези ракови клетки, което предполага възможно терапевтично приложение.
Като подчертават силните страни и предизвикателствата, свързани с PC-3 клетките, изследователите могат да вземат информирани решения за използването им в различни експериментални контексти - от фундаменталната биология до предклиничното тестване на нови терапевтични средства.
Дайте тласък на лабораторните си открития с нашата клетъчна линия PC-3.
Научни публикации с участието на клетки PC-3
- α-Пиненът инхибира растежа на човешкия рак на простатата в ксенографски модел на мишка: Публикувано в Chemotherapy Journal през 2018 г., това проучване изследва как α-Пиненът влияе върху прогресията на рака на простатата в миши модел PC-3
- Кверцетинът засилва терапевтичните ефекти на паклитаксел спрямо PC-3 рак на простатата чрез индукция на ER стрес и производство на ROS: Тази публикация показва, че комбинацията от паклитаксел и кверцетин води до синергичен ефект в борбата с рака на простатата
- Зинжеронът потиска клетъчната пролиферация чрез индуциране на клетъчна апоптоза и инхибиране на PI3K/AKT/mTOR сигналния път при човешки клетки на рак на простатата PC-3: Това изследване, представено в Journal of Biochemical and Molecular Toxicology (2021 г.), изследва антипролиферативните ефекти на зингерона
- TRPM 4 регулира активността на Akt/GSK 3-β и засилва β-катенин сигнализацията и клетъчната пролиферация в клетките на рака на простатата: Както е съобщено в списание Molecular Oncology през 2018 г., това проучване се фокусира върху ролята на гена TRPM 4 в пролиферацията на клетките PC-3
- Екстракт от корен на микроразмножено лечебно растение Prunus africana предизвиква апоптоза в човешки клетки на рак на простатата (PC-3) чрез активиране на каспаза-3: Това проучване от 2022 г., публикувано в списание Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, показва, че екстрактът от Prunus africana може да предизвика апоптоза в клетките PC-3
Изчерпателно ръководство за ресурси на клетъчни линии PC-3
Клетъчната линия PC-3 е известна със значителната си полезност в изследванията на рака на простатата и в различни други научни изследвания. Налице е богат набор от ресурси, които помагат на изследователите да работят, поддържат и манипулират ефективно тази клетъчна линия. Следните ресурси са подбрани така, че да предлагат насоки за различни лабораторни процедури, включващи PC-3 клетки.
- Култивиране на PC-3 клетки: Този видеоклип предоставя ясна демонстрация на протоколите за субкултивиране или пасиране, които са от съществено значение за поддържане на жизнеността на PC-3 клетките от рак на простатата.
- Ръководство за криоконсервация на клетки: Това изчерпателно видео служи като ръководство стъпка по стъпка за правилните процедури за замразяване на клетки, което гарантира тяхното запазване за бъдещи изследвания.
- Протоколи за трансфектиране на PC-3 клетки: Този ресурс описва подробни протоколи за трансфектиране на PC-3 клетки, включително оптимална употреба на реагенти и техника.
- Урок за трансфекция на PC-3 клетки: Образователен видеоклип, предлагащ информация за процеса на трансфекция in vitro на PC-3 клетки, който подобрява разбирането на изследванията на генната експресия.
Протоколи за поддържане на клетъчни култури
За конкретни подробности относно протоколите за поддържане на клетъчни култури от PC-3 клетки, моля, вижте връзката по-долу.
- Субкултивиране на PC-3 клетки: Получете достъп до кратка колекция от протоколи за субкултивиране, замразяване и размразяване на PC-3 клетки, които са от решаващо значение за непрекъснатостта на клетъчните култури и експериментите.
Често задавани въпроси относно клетките PC3
Препратки
- Tai, S., и др., PC3 е клетъчна линия, характерна за дребноклетъчния карцином на простатата. The Prostate, 2011 г. 71(15): p. 1668-1679.
- Litvinov, I.V., et al., PC3, but not DU145, human prostate cancer cells retain the coregulators required for tumor suppressor ability of androgen receptor. The Prostate, 2006 г. 66(12): p. 1329-1338.
- Zhao, Y., et al., α-Pinene inhibits human prostate cancer growth in a mouse xenograft model (α-пинен инхибира растежа на човешкия рак на простатата в ксенографски модел на мишка ). Chemotherapy, 2018 г. 63(1): p. 1-7.
- Xing, P., et al., Knockdown of lncRNAMIR4435-2HGand ST8SIA1 expression inhibits the proliferation, invasion and migration of prostate cancer cells in vitro and in vivo by blocking the activation of theFAK/AKT/β-cateninsignaling pathway. Международно списание за молекулярна медицина, 2021 г. 47(6): p. 1-13.
- Qian, S., et al., Zingerone suppresses cell proliferation via inducing cellular apoptosis and inhibition of the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway in human prostate cancer PC-3 cells (Циен, С. и др., Зинжеронът потиска клетъчната пролиферация чрез индуциране на клетъчна апоптоза и инхибиране на PI3K/AKT/mTOR сигналния път при човешки клетки на рак на простатата). Journal of Biochemical and Molecular Toxicology, 2021 г. 35(1): p. e22611.
- Jaglanian, A., D. Termini и E. Tsiani, Екстракт от розмарин (Rosmarinus officinalis L.) инхибира пролиферацията и оцеляването на клетките на рака на простатата чрез таргетиране на Akt и mTOR. Биомедицина и фармакотерапия, 2020 г. 131: p. 110717.