Клетки U87MG - Изследвания на глиобластома с използване на U87MG и влиянието им върху изследванията на рака на мозъка
Клетъчната линияU-87 MG, първична човешка клетка за глиобластом, се използва широко в биологичните изследвания. Особено тези клетки се използват в областта на неврологията и имуноонкологията.
Общи характеристики и произход на клетъчната линия U-87 MG
В този раздел ще бъдат разгледани произходът и общите характеристики на клетъчната линия U-87. Ще научите какво представляват клетките U-87 MG? Откъде произлизат клетките U87? Каква е пълната форма на U-87 MG? Колко големи са клетките U87? Каква е морфологията на клетъчната линия U87?
- Клетъчната линия U87 е клетъчна линия на глиобластом и астроцитом. Създадена е през 1966 г. в университета в Упсала. Клетките са получени от 44-годишен мъж от европеидна раса, страдащ от глиобластомно заболяване. Тази клетъчна линия официално се нарича U 87 MG, което означава Uppsala 87 Malignant Glioma (злокачествен глиом на Упсала 87).
- Клетките U 87 MG имат морфология, подобна на тази на епителните клетки.
- Размерът на клетките U 87 MG варира между 12 и 14 µm в диаметър.
- Тази човешка клетъчна линия на глиобластом е хиподиплоидна и притежава модален брой хромозоми 44 в приблизително 48 % от клетъчната популация. Въпреки това в 5,9 % от клетъчната популация се срещат и по-високи плоиди.
Информация за култивиране на MG клетки U-87
Преди да започнете работа с U 87 MG клетки, трябва да се запознаете със следните основни моменти при култивирането на тези глиобластомни клетки. По-специално, трябва да знаете: Какво е времето за удвояване на популацията на U 87 MG клетките? Каква среда се използва за култивиране на U87 клетки? Каква е плътността на посявката на клетъчната линия U 87 MG?
Ключови моменти за култивиране на U-87 MG клетки
|
Време за удвояване на популацията: |
Времето за удвояване на популацията на U 87 MG клетките варира от 18 до 38 часа. |
|
Прилепнали или в суспензия: |
U 87 MG е адхезивна клетъчна линия. Клетките имат издължена форма и растат като монослоеве. |
|
Гъстота на засяване: |
Препоръчва се клетъчната линия на глиобластома U 87 MG да се засява при клетъчна плътност 1 x104 клетки/cm2. Адхезираните клетки U87 се промиват с 1 x PBS и се инкубират с разтвор на Accutase. След това дисоциираните клетки се центрофугират и възстановяват. Клетките се ресуспендират внимателно и се добавят в нови колби, съдържащи растежна среда. |
|
Растежна среда: |
Клетъчната линия U 87 MG се култивира в EMEM (минимална есенциална среда на Eagle), обогатена с 1,0 g/L L-глюкоза, 2,0 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM натриев пируват и 10 % FBS разтвор. Средата трябва да се подновява на всеки 2 до 3 дни. |
|
Условия за растеж: |
За оптимален растеж на клетките U-87 MG е необходим овлажнен инкубатор с 5 % CO2 и температура 37 °C. |
|
Съхранение: |
Клетките U87 се съхраняват или в парната фаза на течен азот, или при температура под -150 °C, за да се запази максималната жизнеспособност на глиобластомните клетки. |
|
Процес на замразяване и среда: |
CM-1 или CM-ACF са подходящи за замразяване на U 87 MG клетки. Препоръчва се бавен процес на замразяване, тъй като той предпазва клетките от шок и защитава тяхната жизнеспособност. |
|
Процес на размразяване: |
Замразените флакони с клетъчна линия U-87 MG се размразяват на водна баня при 37 °C. Клетките се добавят към растежната среда, ресуспендират се и се разпределят за култивиране в нови колби. За разлика от това, клетките U87 могат да се центрофугират, за да се отстрани замразяващата среда, и след това да се култивират. |
|
Ниво на биологична безопасност: |
За работа с клетъчни култури U 87 MG се изисква ниво на биологична безопасност 1. |
Предимства и недостатъци на клетките U-87 MG
Когато мислим за клетъчна линия, първото нещо, което ни хрумва, е: Какви са предимствата на използването на U-87 MG клетки? Какви са недостатъците на клетките U87?
Предимства
Клетъчните линии U 87 MG се използват широко в научните изследвания. Няколко предимства, свързани с тази клетъчна линия, са:
Предимства
- Лесна за отглеждане: U 87 MG клетките са лесни за поддържане в култура. Те не изискват сложни изисквания за култивиране на клетките
- Хомогенност: U-87 MG е хомогенна клетъчна линия. Повечето клетки в популацията притежават един и същ генетичен състав и по този начин имат сходни характеристики. Тези клетки се използват за изследване на клетъчни процеси, скрининг на лекарства и тестове
- Добре характеризирана: Тази клетъчна линия на глиобластом е добре характеризирана по отношение на характеристиките на растежа, морфологията и генната експресия, което я прави ценен инструмент за изследвания
Недостатъци
- Ограничена приложимост: U 87 MG е глиобластомна клетъчна линия, така че приложенията ѝ са ограничени предимно до изследване на глиобластоми и молекулярни механизми, които ги обуславят. Тя може да не е подходяща за изследване на други видове рак.
Изследователски приложения, в които се използват клетки U-87 MG
Клетъчната линия за глиобластом U87MG се използва широко в проучванията на рака, особено в изследванията на глиобластома. Някои от изследователските приложения на клетките U 87 MG са:
- Изследвания в областта на биологията на рака: Клетъчната линия U87 се използва за изследване на растежа и развитието на рака, основните молекулярни механизми, сигналните пътища и туморната микросреда. В проучване, публикувано през 2020 г., е използван in vitro модел на глиобластом - клетъчната линия U 87 MG, за да се изследва генът BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) като терапевтична цел. Резултатите показват, че генът BMAL1 инхибира пролиферацията, миграцията и инвазията на глиобластомните клетки чрез потискане на експресията на гените циклин В1, металопротеиназа-9 и фосфо-АКТ [1]. В друго изследване, проведено през 2019 г., е използвана клетъчната линия U87 и е изследвано, че понижената експресия на транскрипционния фактор липополизахарид-индуциран тумор некротизиращ фактор алфа (LITAF) може да повиши радиочувствителността на глиомалните клетки чрез регулиране на пътя FOXO-1. LITAF е известен също като p53-индуциран ген 7 (PIG7) [2].
- Откриване и разработване на лекарства: Клетките U-87 MG могат да се използват за целите на скрининга и тестването на лекарства, което позволява на изследователите да идентифицират нови потенциални противоракови лекарства и да оценят тяхната ефикасност и токсичност. Като изследване е използвана клетъчна линия U 87 MG глиобластом за оценка на противораковия и антиоксидантния потенциал на антиоксидантната и противораковата активност на екстракт от Inula helenium (L.) [3]. По подобен начин в друга публикация се споменава използването на клетъчната линия U87 за тестване на цитотоксичния и апоптотичния ефект на растителните екстракти [4]. Освен това в изследване, публикувано през 2018 г., се изследва цитотоксичният ефект на сескитерпенови алкалоиди, извлечени от растенията Nuphar, върху чувствителни и резистентни към лекарства клетъчни линии U 87 MG [5].
Поръчайте своята клетъчна линия U87 MG Glioma днес
Клетъчна линия U-87 MG: Научни публикации
Ето някои известни научни публикации, в които е представена клетъчната линия U 87 MG.
В тази статия, публикувана в Neuroreport 2018, се предлага, че хипоксията може да увеличи миграцията и инвазията на човешките глиобластомни клетки чрез регулиране на сигналния път PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Това проучване е публикувано в Frontiers in Pharmacology през 2020 г. В резултатите от изследването се посочва, че флавоноидът ериодиктиол оказва противораково действие върху клетъчната линия U87 и потиска клетъчната пролиферация и метастазиране. Съединението медиира своите антитуморни свойства чрез модулиране на пътя PI3K/Akt/NF-κB.
Това изследване в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018 г.) показва, че китайска билкова формула, наречена Xihuang pill, може да индуцира апоптоза в клетки U87 чрез насочване към ROS-активираната каскада Akt/mTOR/FOXO1.
LITAF повишава радиочувствителността на човешки глиомни клетки чрез пътя на FoxO1
Тази научна статия е публикувана в списание Cellular and Molecular Neurobiology през 2019 г. В изследването се предлага, че транскрипционният фактор LITAF понижава и повишава радиочувствителността на глиомни клетки чрез регулиране на сигналния път FOXO-1.
Тази статия е публикувана в Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Изследователите използват клетки U 87 MG за изследване на цитотоксичния ефект на заредени с куркумин PLGA наночастици.
Ресурси за U-87 MG клетки: Протоколи, видеоклипове и др
Клетъчната линия за глиобластом U87MG се използва в много лаборатории за изследване на рака. Няколко ресурса, включващи тази клетъчна линия, са:
- Трансфекция на клетъчна линия U87: Този документ ще ви опише протокола за трансфекция на U 87 MG клетки.
- Трансфекция на клетъчна линия U 87 MG: Това видео представлява урок, в който стъпка по стъпка се обяснява протоколът за трансфекция на клетки U87.
Ресурсът за протокола за клетъчно култивиране на клетки U87 е посочен по-долу:
- U87 MG клетки: Този линк съдържа основна информация за клетъчната линия U 87 MG. То включва кратки протоколи за разделяне, замразяване и размразяване на клетките.
Прозрения в изследванията на U87 MG глиома: Често задавани въпроси
Препратки
- Gwon, D.H., и др., BMAL1 потиска пролиферацията, миграцията и инвазията на U87MG клетките чрез понижаване на циклин B1, фосфо-AKT и металопротеиназа-9. Int J Mol Sci, 2020 г. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway (LITAF повишава радиочувствителността на човешки глиомни клетки чрез пътя на FoxO1 ). Cell Mol Neurobiol, 2019 г. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant and anticancer activities of extract of Inula helenium (L.) in human U-87 MG glioblastoma cell line (Антиоксидантна и противоракова активност на екстракт от Inula helenium (L.) при човешка клетъчна линия U-87 MG глиобластом). J Cancer Res Ther, 2018 г. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts (Цитотоксичност и индукция на апоптоза при клетки на рак на гърдата, рак на кожата и глиобластом чрез растителни екстракти ). Mol Biol Rep, 2019 г. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines (Цитотоксичност на сескитерпенови алкалоиди от растения от рода Nuphar към чувствителни и резистентни на лекарства клетъчни линии). Food Funct, 2018 г. 9(12): p. 6279-6286.