Клетките SiHa - хвърлят светлина върху изследванията на рака на маточната шийка

КлеткитеSiHa са клетки за рак на маточната шийка, широко използвани в биомедицинските изследвания. Те са отлични носители на трансфекция и следователно са подходящи за изследвания на генната експресия. Поради човешкия им произход и значението им за рака на маточната шийка, тези клетки се използват главно в биологията на рака, вирусологията и проучванията за разработване на лекарства.

Общи характеристики и произход на клетките SiHa

Разбирането на произхода и общите характеристики на дадена клетъчна линия е от решаващо значение, тъй като това оказва влияние върху нейното използване в рамките на вашите изследвания. В този раздел на статията ще научите за произхода на SiHa клетъчната линия, отличителните характеристики и много други неща: Какво представлява раковата клетъчна линия SiHa? Какво представляват клетките SiHa HPV? Какъв е произходът на клетъчната линия SiHa? Каква е морфологията на SiHa?

SiHa, клетъчната линия за карцином на маточната шийка, е получена от фрагменти от първична биопсия на матката на азиатка (55-годишна) с плоскоклетъчен рак [1].
Клетъчната линия SiHa показва хипертриплоиден кариотип. Повечето от клетките имат среден брой хромозоми между 69 и 72. Около 24 % от клетките обаче имат модерен хромозомен номер от 71.
Клетките SiHa са положителни за човешки папилома вирус 16. При тях се наблюдава интегриране на около 1 до 2 копия на HPV генома на клетка [2].
Тези клетки на рака на маточната шийка имат епителна морфология.

Разделяне на клетките на рака на маточната шийка HeLa под микроскоп.

Клетъчна линия SiHa: Информация за култивиране

Поддържането на култура на клетъчна линия не е лесно, докато не се запознаят с всички ключови моменти за нейното култивиране. Трябва да знаете: Какво е времето за удвояване на SiHa? Каква е клетъчната среда на SiHa? Как се култивира клетъчната линия SiHa?

Ключови моменти за култивиране на клетките SiHa

Време за удвояване:	Времето за удвояване на клетките SiHa е приблизително 17 часа.
Прилепнали или в суспензия:	SiHa е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение на субкултивиране:	Съотношението на субкултивиране за клетките SiHa е от 1:2 до 1:4. За пасажиране адхезивните клетки се изплакват с 1x PBS. Добавя се разтвор на акутаза и клетките се инкубират за 8 до 10 минути при стайна температура. След това се добавя хранителна среда и клетките се центрофугират. Клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се преливат в нова колба за култивиране.
Растежна среда:	За идеалния растеж на клетките SiHa се използва минимално необходимата среда на Eagle (EMEM), съдържаща 10 % FBS, 2 mM L-Glutamine, 2,2 g/L NaHCO3 и балансиран солен разтвор на Earle (EBSS). Средата се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:	Клетките SiHa се поддържат в овлажнен инкубатор с температура 37 °C и 5 % CO2.
Съхранение:	Замразените флакони с клетъчна линия SiHa за рак на маточната шийка се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер или в парната фаза на течен азот за по-дълго време.
Процес на замразяване и среда:	За замразяването на клетките SiHa се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват по метод на бавно замразяване, който позволява намаляване на температурата само с 1 °C в минута, за да се защити жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:	Замразените клетки се държат за 40 до 60 секунди на водна баня при 37 °C, докато остане малка ледена бучка. След това се добавя свежа среда за растеж и клетките се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се разпределят в колба за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:	За работа и поддържане на клетъчни култури SiHa се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Сраснал се слой от SiHa клетки при 10x и 20x увеличение.

Предимства и недостатъци на клетъчната линия SiHa

Подобно на други човешки карциномни клетъчни линии, SiHa също притежава някои отличителни характеристики, свързани с определени предимства и недостатъци. Тук сме разгледали няколко важни от тях.

Предимства на клетъчната линия за рак на маточната шийка SiHa

Модел на рак на маточната шийка
- Произхожда от плоскоклетъчен карцином на маточната шийка.
- Използва се за изучаване на механизмите, растежа и развитието на рака на маточната шийка.
- Експресира гени p53+ и pRB+, които са свързани с възстановяването на ДНК, регулирането на клетъчния цикъл и потискането на тумора.
Туморогенен потенциал
- SiHa клетките са туморогенни и могат да предизвикат слабо диференцирани епидермоидни тумори от III степен при голи мишки.
- Използват се за in vivo изследвания на рака и тестване на противоракови лечения.

Недостатъци на SiHa клетките

Степен на пролиферация
- SiHa клетките се размножават бързо, което води до прекомерно разрастване.
- Изисква се често пасиране, което увеличава риска от генетична нестабилност, която може да повлияе на поведението на клетките с течение на времето.

Научноизследователски приложения на клетките SiHa

Клетъчната линия SiHa се използва широко в изследванията на рака на маточната шийка. Тук са разгледани няколко конкретни приложения на тази клетъчна линия.

Изследвания, свързани с човешкия папиломавирус (HPV): SiHa клетките са HPV 16 положителни, поради което те са ценна единица за изучаване на инфекцията с човешки папиломавирус, нейните молекулярни механизми и ролята ѝ в развитието и прогресията на рака на маточната шийка. Изследователите използват тези клетки и за изследване на вирусната репликация, интеграция и въздействието ѝ върху процесите в клетките-гостоприемници. В проучване, проведено през 2020 г., е използвана клетъчната линия SiHa, за да се изследва ролята на HPV E6/E7 онкопротеините в развитието на рака на маточната шийка чрез насочването им с технологията CRISPR. Резултатите разкриват, че нокаутирането на гените E6/E7 води до инхибиране на растежа и апоптоза на клетките SiHa. Следователно тези вирусни гени могат да служат като решаващи лекарствени цели за разработване на терапии срещу HPV-асоциирания рак на маточната шийка [3].
Ракова биология: SiHa клетките служат като безценен модел за изучаване на биологията на рака на маточната шийка, включително развитието на рака, прогресията, метастазите и инвазията. Изследователите използват тези клетки, за да проучат генетичните мутации и основните молекулярни пътища, допринасящи за развитието и растежа на рака на маточната шийка, като например проучване, в което са използвани SiHa клетки и е установено, че регулираната SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) насърчава пролиферацията на клетките на рака на маточната шийка чрез активиране на MAPK каскадата [4].
Скрининг и тестване на лекарства: SiHa е широко използвана линия за рак на маточната шийка за оценка на ефикасността на потенциални противоракови лекарства, специфични за HPV-свързания рак на маточната шийка. Изследователите проучват антипролиферативния, апоптотичния и антиметастатичния потенциал на лекарствата, използвайки тези клетки. Като например проучване, проведено през 2019 г., в което се изследва цитотоксичният потенциал на екстракти от плодове на Vatica diospyroides Symington Type SS върху клетъчна линия SiHa от рак на маточната шийка [5].

Клетки SiHa за вашите изследвания!

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305023

Научни публикации с участието на клетки SiHa

Някои значими и често цитирани научни публикации са с участието на клетъчната линия SiHa за цервикален сквамозен карцином.

Антитуморният ефект на алое-емодин върху клетките на рака на маточната шийка е свързан с човешкия папиломен вирус E6/E7 и метаболизма на глюкозата

В тази публикация в OncoTargets and Therapy (2019 г.) се предлага природното съединение алое-емодин да упражнява апоптотични ефекти, свързани с HPV E6/E7 и метаболизма на глюкозата, в клетките на рака на маточната шийка SiHa.

Оценка на противораковия потенциал на екстракт от листа на Excoecaria agallocha (L.) върху клетъчна линия на човешки рак на маточната шийка (SiHa) и оценка на основния механизъм на действие

Тази статия е публикувана в списание Future Journal of Pharmaceutical Sciences през 2022 г. В това проучване е изследвана антитуморната активност на екстракта от листа на растението Excoecaria agallocha (L.) при клетъчна линия на рак на маточната шийка SiHa.

Антипролиферативен ефект на 1, 10-фенантролин, свързан със сулфатирани наночастици ZnO, в клетъчна линия на рак на шийката на матката SiHa

В това проучване, публикувано в Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), се предлага молекулата на 1, 10-фенантролин при свързване с наночастици от цинков сулфат да оказва значителен антипролиферативен ефект в клетките SiHa.

Астрагалозид IV инхибира инвазията и метастазирането на клетките на рака на маточната шийка SiHa чрез пътищата PI3K и MAPK, медиирани от TGF-β1

Това изследване е публикувано в Oncology Reports през 2019 г. Изследването разкрива, че Astragaloside IV, естествен продукт, потиска миграцията и инвазията на клетките SiHa чрез модулиране на TGF-β1-медиираните PI3K и MAPK сигнални пътища.

IFI16 насърчава прогресията на рака на маточната шийка чрез регулиране на PD-L1 в имуномикросредата чрез пътя STING-TBK1-NF-kB

Това проучване в Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) разкрива, че IFI16 (интерферон-гама индуцируем протеин 16) регулира гена PD-L1 чрез активиране на пътя STING-TBK1-NF-kB, за да насърчи растежа на клетките на рака на маточната шийка SiHa.

Ресурси за клетъчната линия SiHa: Протоколи, видеоклипове и др

Ето някои онлайн ресурси, свързани с клетките SiHa.

Трансекция на SiHa клетки: Тази научна статия съдържа протокол за поддържане на SiHa клетки от рак на маточната шийка и за трансфекция на SiHa клетки.

Следната връзка съдържа информация за клетъчни култури за SiHa клетки.

Клетъчна линия SiHa: Този уебсайт съдържа много ценни данни за клетъчната линия SiHa. Това включва информация за средите за растеж, условията за култивиране, протоколите за субкултивиране на SiHa клетките и работата с нейните пролиферативни и криоконсервирани култури.

Често задавани въпроси за SiHa клетките на цервикалния карцином

Препратки

Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Стволови клетки, 2018 г. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Изследване на влиянието на високорисковия човешки папиломен вирус върху биохимичния състав на клетките на рака на маточната шийка с помощта на вибрационна спектроскопия. Анализатор, 2010 г. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7' mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system (Инхибиране на растежа in vitro и in vivo на човешки клетки на рак на маточната шийка чрез разцепване на човешки папиломен вирус E6/E7 чрез системата CRISPR/Cas13a ). Antiviral Research, 2020 г. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G насърчава пролиферацията на рака на маточната шийка чрез активиране на MAPK сигналния път. Маркери на заболяванията, 2022 г. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines (Противораков потенциал на плодови екстракти от Vatica diospyroides symington тип SS и ефектът им върху програмната клетъчна смърт на клетъчни линии на рак на маточната шийка ). The Scientific World Journal, 2019. 2019.