Клетки RBL-2H3 - Значение на RBL-2H3 в алергичния отговор и имунологичните изследвания

Клетъчната линия RBL-2H3 е базофилна левкемична клетъчна линия, получена от плъхове, която се използва в имунологичните изследвания. Тя служи като моделна система за изучаване на физиологията, поведението и функциите на мастоцитите. Тези клетки се използват също така за изследване на алергични реакции, имунологични процеси, както и за изпитване и разработване на лекарства.

Статията ще предостави информация за произхода на RBL-2H3, общите характеристики, изискванията за култивиране и приложенията в изследванията.

Клетки RBL-2H3: Произход и общи характеристики

Преди да използвате базофилна клетъчна линия във вашите изследвания, трябва да знаете нейния произход и общи характеристики. Този раздел от статията ще ви информира за основните характеристики на клетките RBL-2H3. Например: Какво представляват мастоцитите RBL-2H3? Защо се използват клетки RBL-2H3? Какво представляват клетките RBL-2H3 при базофилната левкемия при плъхове? Каква е морфологията на RBL-2H3? Безсмъртни ли са клетките RBL-2H3?

RBL-2H3 са клетки на базофилна левкемия, получени от базофилни клетки на плъхове Wistar през 1978 г. в Лабораторията по имунология на Националния институт по дентални изследвания.
Клетките RBL-2H3 притежават рецепторна тирозин киназа c-kit и рецептори за протеаза на мастоцитите II (RMCP-II), което ги прави потенциален модел на мастоцити. Поради това те обикновено се наричат мастоцити, въпреки че произхождат от базофили на плъхове [1].
Те освобождават хистамин и други медиатори при активиране и експресират високоафинитетни IgE рецептори.
Клетките RBL-2H3 имат фибробластоподобна морфология.

Микроскопска визуализация на мастоцитна клетка.

Клетки RBL-2H3: Информация за култивиране

Този раздел ще ви помогне да се запознаете с някои ключови аспекти при култивирането на клетъчната линия RBL-2H3. Ще знаете: Какво е времето за удвояване на клетките RBL-2H3? Каква е гъстотата на засяване на клетките RBL-2H3? Какъв е протоколът за култивиране на RBL-2H3 клетки? Каква е средата за замразяване на клетъчната линия RBL-2H3?

Ключови моменти при култивирането на клетките RBL-2H3

Време за удвояване на популацията:	Времето за удвояване на мастните клетки RBL-2H3 е приблизително 50-60 часа.
Прилепнали или в суспензия:	RBL-2H3 е адхезивна клетъчна линия.
Съотношение на субкултивиране:	За клетките RBL-2H3 съотношението на разделяне се поддържа между 1:2 и 1:4. Адхезивните клетки се промиват с 1 x PBS разтвор без магнезий и калций. Добавя се разтвор за пасиране Accutase и клетките се държат на стайна температура в продължение на 10 минути, за да се отделят от дъното на съда за култивиране. Добавя се свежа среда и клетките се центрофугират. Събраните клетки се ресуспендират внимателно в прясна среда и се преливат в нови колби, съдържащи растежна среда.
Растежна среда:	За култивиране на клетките RBL-2H3 се използва среда EMEM, съдържаща 10 % FBS, 2 mM L-Glutamine, 2,2 g/L NaHCO3 и сол EBSS. Средата трябва да се подменя 2-3 пъти седмично.
Условия за растеж:	Клетките RBL-2H3 се култивират в овлажнен инкубатор, настроен на температура 37 °C и свързан с източник на 5 %_CO2.
Съхранение:	Клетките се съхраняват в парната фаза на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер, за да се запази жизнеспособността на клетките за дълъг период от време.
Процес на замразяване и среда:	За замразяване на клетките RBL-2H3 се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF, като се използва процес на бавно замразяване. Накратко, този метод позволява намаляване на температурата с 1 °C в минута и предпазва клетките от шок.
Процес на размразяване:	Клетките RBL-2H3 се размразяват на предварително настроена водна баня (37 °C) за около 60 секунди. След това клетките се добавят към прясна хранителна среда и се центрофугират. Тази стъпка е от съществено значение за отстраняване на компонентите на замразяващата среда. След това клетъчната пелета се ресуспендира в среда за растеж и клетките се разпределят в колба за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:	Клетките RBL-2H3 трябва да се поддържат в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.

Адхерентни монослоеве от клетки RBL-2H3 при различна степен на срастване 20- и 10-кратно увеличение.

Предимства и ограничения на RBL-2H3 Базофилна клетъчна линия

Клетките RBL-2H3 обикновено се използват в имунологични изследвания. В този раздел са описани основните им предимства и ограничения.

Предимства

Лесни за култивиране: Клетките RBL-2H3 могат лесно да се култивират и поддържат в лабораторна среда. Това улеснява икономически ефективните и възпроизводими експерименти, което ги прави популярен избор за първоначални изследвания в областта на имунологията.

Ограничения

Нечовешки произход: Произхождащи от базофили на плъхове, клетките RBL-2H3 може да не имитират точно биологичните процеси при човека, което може да ограничи приложимостта им в специфични за човека научни изследвания. Това налага предпазливо тълкуване на данните при екстраполиране на резултатите към човешки системи.
Опростен модел на мастоцити: Въпреки че тези клетки представляват основен модел за изследване на функциите на мастоцитите, те не представят напълно сложната природа на взаимодействията между мастоцитите в човешката имунна система. Следователно те може да не моделират адекватно многостранните роли на мастоцитите в имунните реакции или болестните състояния in vivo.

Клетъчна линия RBL-2H3: Кръстопът в имунологичните изследвания

Изследвания на базофили и мастоцити с използване на клетъчната линия RBL-2H3

Клетъчната линия RBL-2H3, получена от Rattus norvegicus, служи като основен модел за изследване на биологията на базофилите и мастоцитите. Тези мастоцити на плъхове предоставят съществена информация за освобождаването на медиатори от мастоцитите, което е от решаващо значение за разбирането на алергични състояния като алергичен ринит. Чрез тези клетки изследователите проучват динамиката на клетъчните рецептори и създаването на имунологични синапси, които са от основно значение за отговора на имунната система към алергени. интересно проучване, публикувано през 2019 г., използва клетъчната линия RBL-2H3 и изследва механизмите зад псевдоалергичните реакции, предизвикани от инжектиране на Цинкайлинг. Проучването установи, че сигналната каскада PI3K-RAC1 частично предизвиква тази алергична реакция в клетките [2]

Динамика на имунологичните синапси в изследванията на алергиите

Използвани широко в имунологичните изследвания, клетките RBL-2H3 са особено ефективни за изследване на динамиката на имунологичните синапси. Това спомага за изясняване на комуникационните процеси на имунната система, като намира приложение при изследването на мастоцитите от периферната кръв и перитонеума. Такива изследвания са жизненоважни за цялостното разбиране на имунния отговор както в системен, така и в локален контекст

Скрининг на лекарства и тестване на токсичността

При скрининга и тестването на лекарства се използва реактивността на RBL клетките към различни стимули, включително изследване на това как H2O2 инхибира IgE-медиираните реакции. Тези клетки играят съществена роля при разработването на лечения за заболявания като стрептококови инфекции, при които стрептококите от групата mitis потискат активирането на мастоцитите. Освен това изследователите оценяват токсичните ефекти на различни вещества, включително химикали, лекарства и наночастици, като използват този модел на RBL 2H3 mc. Така например в едно неотдавнашно проучване (2022 г.) се оценява цитотоксичността на полистиренови микропластмаси върху клетките RBL-2H3. Те установяват, че микропластмасата уврежда клетъчните органели на RBL-2H3 и стимулира клетъчната смърт [3]. В друго проучване от 2021 г. е оценен антиалергичният и противовъзпалителният потенциал на природен продукт - неферин, като е използван моделът на RBL 2H3 mc. Проучването разкри добрите антиалергични и противовъзпалителни свойства на съединението [4]

Усъвършенствани методики за имунологични измервания

Последователното и измеримо освобождаване на медиатори от клетките RBL 2H3 ги прави идеални за удобна флуориметрия, улесняваща прецизните и точни измервания, които са от решаващо значение за изучаването на заболяванията и оценката на терапевтичните средства.

Клетъчната линия RBL-2H3, произхождаща от Rattus norvegicus, е безценно средство както за фундаментални, така и за приложни изследвания в областта на имунологията. Тя предлага широки възможности за подобряване на познанията и лечението на имунологичните заболявания

Клетъчна линия RBL-2H3 за съвременни имунологични изследвания

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305194

RBL-2H3 клетки: Научни публикации

По-долу са представени някои интересни научни публикации, свързани с мастоцитите RBL-2H3:

Инхибираща активност на нарирутин върху дегранулацията на RBL-2H3 клетките

Тази научна статия е публикувана в Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). В изследването се предлага, че нарирутинът, природно съединение, оказва инхибиращо действие върху дегранулацията на RBL 2H3 чрез регулиране на NF-κB, MAPK и тирозин киназния сигнален път.

Ефекти на апигенин върху RBL-2H3, RAW264. 7 и HaCaT клетки: антиалергични, противовъзпалителни и защитни свойства на кожата

Това изследване в International Journal of Molecular Sciences (2020) предлага съединението апигенин значително да потиска алергичните и възпалителните реакции на RBL-2H3 и RAW264.7 клетки. Поради това то може да служи като потенциално средство за борба с имунните заболявания.

Противовъзпалителни и антиалергични ефекти на сапонарин и влиянието му върху сигналните пътища на RAW264.7, RBL-2H3 и HaCaT клетки

В тази научна статия в International Journal of Molecular Sciences (2021 г.) се оценяват антиалергичните и противовъзпалителните ефекти на естествен продукт - сапонарин, като се използват различни клетъчни линии, включително RBL-2H3.

Инхибиторен ефект върху освобождаването на β -хексозамидаза от клетки RBL-2H3 на екстракти и някои чисти съставки на Benchalokawichian, тайландско билково средство, използвано за лечение на алергични разстройства

Това проучване, основано на доказателства в областта на допълващата и алтернативната медицина (2014 г.), установява, че екстрактите от Benchalokawichian и някои активни съставки оказват потенциално инхибиращо действие върху освобождаването на ß-хексозамидаза от RBL 2H3.

Пептиди от Spirulina maxima потискат дегранулацията на мастоцитите чрез инактивиране на фосфорилирането на Akt и MAPKs в клетките RBL 2H3

Тази статия е публикувана през 2018 г. в International Journal of Biological Macromolecules. В проучването се посочва, че спирулина максима, естествен продукт, потиска дегранулацията на RBL 2H3 чрез предотвратяване на фосфорилирането на MAPKs и AKT.

Ресурси за клетъчната линия RBL-2H3: Протоколи, видеоклипове и др

RBL-2H3 е широко използвана линия мастоцити. Тук са посочени наличните ресурси, обхващащи протоколи за култивиране и трансфекция на RBL-2H3:

RBL 2H3 MC модел: Тази научна статия включва протоколи за поддържане на култури на RBL-2H3 и за трансфекция на RBL-2H3.

Тук са посочени някои ресурси, които обясняват протокола за култивиране на RBL-2H3 клетки:

RBL-2H3 клетки: Този уебсайт е полезен за изучаване на протоколите за клетъчни култури за клетъчната линия RBL-2H3. Освен това той съдържа информация за клетъчните среди и условията за култивиране на RBL-2H3.

Клетъчна линия RBL-2H3: Основни въпроси и отговори за изследователите

Препратки

Passante, E. и N. Frankish, Клетъчната линия RBL-2H3: произход и пригодност като модел за мастоцитите. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
Li, Q., et al., Pseudo-allergic reaction caused by Qingkailing injection partially via the PI3K-Rac1 signaling pathway in RBL-2H3 cells. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
Liu, L., et al., Polystyrene micro (nano) plastics damage the organelles of RBL-2H3 cells and promote MOAP-1 to induce apoptosis (Полистиренови микро (нано) пластмаси увреждат органелите на клетките RBL-2H3 и стимулират MOAP-1 да индуцира апоптоза ). Journal of Hazardous Materials, 2022 г. 438: p. 129550.
Chiu, K.-M., et al., Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells (Антиалергични и противовъзпалителни ефекти на неферин върху клетките RBL-2H3). Международен журнал за молекулярни науки, 2021. 22(20): p. 10994.