Клетки Hep3B: Изследване и откриване на хепатоцелуларен карцином

HEP3B е имортализирана клетъчна линия за хепатоцитен карцином, получена от човека. Тя се използва широко в изследванията на хепатотоксичността и метаболизма на лекарствата. Ефективността на трансфекцията на HEP3B е значителна; поради това тези клетки обикновено се използват за изследване на развитието, прогресията и терапевтичните интервенции на чернодробния рак. Тази статия обхваща цялата необходима информация за клетъчната линия HEP3B, за да ви помогне при работата с нея. Основно тя включва:

Общи характеристики и произход на HEP3B клетките
Информация за култивирането на клетъчната линия HEP3B
HEP3B клетъчна линия: Предимства и ограничения
Приложения на HEP3B клетки в научните изследвания
Публикации за клетъчната линия HEP3B
Ресурси за HEP3B клетъчна линия: Протоколи, видеоклипове и др

1.общи характеристики и произход на HEP3B клетките

Основната информация, която ви е необходима за дадена клетъчна линия, е нейният произход и общи характеристики. Тя може да ви помогне да вземете решение за нейното използване във вашите изследвания и да ви помогне при работата с нея. Този раздел на статията обхваща цялата основна информация за произхода и характеристиките на HEP3B. Тук ще научите: Какво представлява клетъчната линия Hep 3B? Какъв е произходът на клетките Hep3B? Каква е морфологията на HEP3B клетките?

HEP3B, непрекъсната човешка хепатомна клетъчна линия, произхожда от чернодробната тъкан на 8-годишно африканско момче с хепатоцелуларен карцином (HCC). Тя е създадена от Аден и колегите му през 1979 г. в лабораторията на Барбара Б. Ноулс, Институт Уистар, Филаделфия, САЩ [1].
Клетките HEP3B имат интеграция на генома на вируса на хепатит В (HBV) в своята хромозома.
Тези клетки на хепатоцитен карцином показват епителна морфология.
HEP3B клетките имат модален хромозомен номер от 60. За разлика от HepG2, те не притежават пренаредена хромозома 1.

Каква е разликата между HepG2 и Hep3B?

HepG2 и HEP3B се различават по броя на хромозомите в една клетка. HEP3B съдържа 60 хромозоми, докато клетките на HepG2 имат средно 55 хромозоми. Освен това HepG2 не е туморогенна и е отрицателна за хепатит В, докато HEP3B е туморогенна и положителна за HBV.

Карцином на черния дроб при голямо увеличение под микроскоп.

2.информация за култивирането на клетъчната линия HEP3B

Познаването на информацията за култивирането на дадена клетъчна линия може да ви улесни при работата с нея. Този раздел обхваща всички ключови точки за култивиране на клетъчната линия HEP3B HBV, включително: Какво е времето за удвояване на клетките HEp3B? Какви са условията за култивиране на HEP3B? Как се култивират HEP3B клетки на НВѴ?

Ключови моменти за култивиране на HEP3B клетки

Време на удвояване:	Времето за удвояване на HEP3B клетките е приблизително 36 часа.
Прилепнали или в суспензия:	Тази хепатомна клетъчна линия е адхезивна.
Съотношение на разделяне:	HEP3B клетките се субкултивират в съотношение 1:2 до 1:4. Адхезивните HEP3B клетки се изплакват с 1 x PBS и след това се инкубират с разтвора за дисоциация на Accutase. След 8 до 10 min се добавя свежа среда и клетките се центрофугират. След това събраните клетки се ресуспендират внимателно и се изсипват в колби, съдържащи културална среда в препоръчаното съотношение на разделяне.
Растежна среда:	За култивиране на HEP3B клетки се използва среда EMEM, съдържаща 10 % FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-глутамин и балансиран солен разтвор на Earle (EBSS).
Условия за растеж:	HEP3B клетките се култивират в овлажнен инкубатор с температура 37 °C и непрекъснато подаване на 5 % CO2.
Съхранение:	Замразените HEP3B клетки се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер или в парната фаза на течен азот.
Процес на замразяване и среда:	Препоръчваната среда за замразяване на HEP3B клетки е CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез бавен процес на замразяване, който позволява намаляване на температурата само с 1 °C в минута, за да се защити жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:	Замразените клетки се размразяват на водна баня, предварително настроена на 37 °C, за 40 до 60 секунди. По-късно тези клетки се добавят към прясна хранителна среда и се центрофугират, за да се отстранят елементите на замразяващата среда. Събраните клетки се ресуспендират и се разпределят в нови колби за растеж.
Ниво на биологична безопасност:	За култивирането на HEP3B клетки се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Адхерентен полуконфлуентен слой от Hep3B клетки при 10x и 20x увеличение.

3.клетъчна линия HEP3B: Предимства и ограничения

HEP3B е широко използвана клетъчна линия за хепатоцелуларен карцином. В този раздел ще се спрем на някои основни предимства и ограничения на тези хепатомни клетки.

Предимства

Основните предимства на HEP3B клетките са:

Лесни за култивиране	Клетките HEP3B нямат строги изисквания за клетъчно култивиране, което ги прави лесни за работа и поддържане в изследователската лаборатория. Това опростява експерименталните процедури.
Висока ефективност на трансфекцията	HEP3B клетките се отличават със забележителна ефективност на трансфекция, което ги прави широко използвани при генетични манипулации и изследвания, свързани с генната експресия.
Туморогенност	HEP3B е туморогенна клетъчна линия на хепатоцелуларен карцином, способна да образува тумори при инжектиране в имунокомпрометирана мишка. Това спомага за изучаване на прогресията и развитието на рака чрез използване на ксенографт модели HEP3B.
Статус на HEP3B P53	Клетките HEP3B притежават мутация на гена P53, подобна на тази при хепатоцелуларния карцином (HCC) и други видове рак, което ги прави подходящи за изучаване на въздействието на мутацията на P53 върху растежа, развитието и прогресията на рака.

Ограничения

Ограничението, свързано с клетъчната линия HEP3B, е:

Клетъчен модел in vitro

Клетъчната линия HEP3B служи като in vitro модел на клетки на хепатоцелуларен карцином (HCC). Въпреки това, тя може да не представя напълно сложността на HCC, както е в живите организми. Следователно експерименталните резултати in vitro могат да се различават от тези, наблюдавани in vivo.

4.приложения на HEP3B клетки в научните изследвания

Клетъчната линия HEP3B предлага няколко приложения в биомедицинските изследвания. Някои от ключовите приложения на HEP3B клетките в научните изследвания включват:

Ракова биология : HEP3B е клетъчна линия за човешки хепатоцелуларен карцином. Тя е безценен клетъчен модел за изследване на клетъчните и молекулярните механизми, които са в основата на развитието и прогресията на HCC. Изследователите използват тези клетки за изучаване на генетични мутации, клетъчни процеси и клетъчни сигнални пътища, свързани с рака на черния дроб. В едно проучване са използвани HEP3B клетки и е установено, че микроРНК-223-3p регулира компонентите на NLRP3 инфламазома, инхибира пролиферацията и засилва апоптозата на HEP3B хепатокарциномните клетки [2].
Скрининг и разработване на лекарства: Клетъчната линия HEP3B се използва и за изпитване, скрининг и разработване на нови терапевтични средства срещу чернодробен карцином. Освен това тя се използва за оценка на токсичността и ефикасността на различни противоракови лекарства и лечения. Изследователите използват тези хепатомни клетки и за изследване на метаболизма на лекарствата. Изследователите са използвали HEP3B клетки и са оценили цитотоксичния потенциал на растителен екстракт от Cotinus coggygria върху HEP3B хепатоцитни карциномни клетки [3].
Вирусни инфекции: HEP3B е клетъчна линия, положителна за вируса на хепатит В; следователно тя се използва за изследване на вирусни инфекции, които могат да доведат до развитие на рак на черния дроб, т.е. HBV и HCV. Това може да помогне за по-доброто разбиране на вирусните инфекции и за разработването на потенциални антивирусни лечения. Например в едно проучване са използвани HEP3B клетки за рак на хепатоцитите и е изследвано значението на убиквитирането за разпространението на вируса на хепатит С. Резултатите показват, че убиквитин-специфичната протеаза 15 (USP15) участва в разпространението на HCV чрез регулиране на специфични за хепатоцитите функции, включително образуването на липидни капки и транслацията на HCV РНК [4].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305141

5.публикации за клетъчната линия HEP3B

В този раздел на статията ще бъдат разгледани няколко интересни научни публикации за HEP3B клетки.

Регулиране на апоптозата и автофагията чрез лутеолин в човешки хепатоцелуларен рак Hep3B клетки

В тази публикация в Biochemical and Biophysical Research Communications (2019 г.) се предлага, че индуцираният от съединението лутеолин стрес на ендоплазмения ретикулум може да окаже антитуморен ефект в P53-нулеви HEP3B клетки по независим от P53 начин.

Потенциално насочване към клетките на чернодробен рак Hep3B чрез лупеол, изолиран от Avicennia marina

Това проучване в Archiv der Pharmazie (2021) предлага пентацикличен тритерпеноид, лупеол, като потенциално противораково средство срещу HEP3B клетки.

Етанолов екстракт от Cnidium monnieri (L.) Cusson предизвиква спиране на клетъчния цикъл и апоптоза чрез регулиране на р53-независим път в клетки на хепатоцелуларен карцином HepG2 и Hep3B

Тази статия е публикувана в Molecular Medicine Reports (2017). Резултатите от изследването гласят, че етаноловият екстракт от Cnidium monnieri (L.) Cusson предизвиква клетъчна смърт (апоптоза) и спиране на клетъчния цикъл в хепатокарциномни клетки HepG2 и HEP3B чрез регулация на p53 и Akt/GSK-3β сигналния път.

Ауранофинът усилва сулфорафан-медиираната апоптоза в клетки на хепатоцелуларен карцином Hep3B чрез инактивиране на PI3K/Akt сигналния път

В това изследване, публикувано в Biomolecules and Therapeutics (2020), се предлага, че ауранофинът проявява синергична активност и подпомага сулфорафаномедиираната апоптоза на HEP3B клетки чрез активиране на PI3K/AKT пътя.

Кръговата РНК-0072309 има антитуморни въздействия в клетъчна линия Hep3B чрез таргетиране на микроРНК-665

В тази научна статия в BioFactors (2023) се предлага, че кръговата РНК-0072309 оказва антитуморно въздействие в клетките на хепатоцелуларния карцином HEP3B чрез таргетиране на miRNA-665.

6.ресурси за клетъчната линия HEP3B: Протоколи, видеоклипове и др

По-долу са изброени няколко налични ресурса за клетките HEP3B:

HEP3B трансфекция: Този видеоклип обяснява протокола за трансфекция на HEP3B клетки.
Ефективност на трансфекцията на HEP3B: Този линк ще ви помогне да научите състава на HEP3B DMEM средата, пасирането на клетките и протокола за трансфекция на HEP3B клетки. Освен това то предоставя информация за оптимизиране на реактива HEP3B lipofectamine 3000 във вашия протокол за трансфекция.

Следната връзка съдържа протокола за клетъчна култура HEP3B:

HEP3B условия за култивиране: Този линк ще ви помогне да се запознаете с протокола за работа и поддържане на култури Huh7 и HEP3B.
HEP3B клетки: Този уебсайт съдържа много информация за HEP3B клетките, включително HEP3B среди, протокол за разделяне на клетките, размразяване и работа с пролиферативни и криоконсервирани култури.

Препратки

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines (Произход и свойства на клетъчните линии на хепатоцелуларния карцином ). Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p регулира NLRP3 за насърчаване на апоптозата и инхибиране на пролиферацията на hep3B клетки. Експериментална и терапевтична медицина, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. and S. Selen-Isbilir, Cytotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line (Цитотоксичен ефект на екстракт от Cotinus coggygria върху ракова клетъчна линия Hep3B ). Natural Product Research, 2022: стр. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 участва в размножаването на вируса на хепатит С чрез регулиране на транслацията на вирусната РНК и образуването на липидни капки. Journal of Virology, 2019 г. 93(6): стр. 10.1128/jvi. 01708-18.