Клетъчна линия HT22

HT22 е невронна клетъчна линия от мишки, която често се използва в неврологичните изследвания. Тя е ценна за изучаване на неврогенеративни нарушения и тестване на потенциални невропротективни терапии или лечения. Освен това клетките HT22 са чувствителни към глутамат, поради което се използват за изследване на индуцираната от глутамат токсичност или увреждане на невроните.

В тази статия се изтъкват задължителните аспекти на клетките HT22, които могат да ви помогнат в изследователската ви работа. В нея ще бъдат разгледани главно:

Общи характеристики и произход на HT22 клетките
Информация за култивирането на клетъчната линия HT22
Предимства и недостатъци на клетъчната линия HT22
Изследователски приложения на клетъчната линия HT22
Изследователски публикации с участието на HT22 клетки
Ресурси за HT22 клетки: Протоколи, видеоклипове и др

1. Общи характеристики и произход на клетките HT22

Този раздел от статията ще хвърли светлина върху произхода и общите характеристики на клетките HT22. Познаването на тази информация за дадена клетъчна линия е необходимо, преди да се започне работа с нея. Тук ще научите: Какво представляват клетките HT22? Каква е морфологията на хипокампалните клетки HT22? Какъв е размерът на клетките HT22?

HT22 е непрекъсната клетъчна линия, получена от областта на хипокампуса на мозъка на мишка. Тя е подклон на родителската клетъчна линия HT-4, разработена чрез имортализация на миши невронни тъкани чрез температурно чувствителен полиомавирус симиански вирус 40 (SV40) Т антиген.

Тези клетки се различават от зрелите хипокампални клетки, тъй като нямат глутаматни и холинергични рецептори като зрелите неврони от хипокампален произход. Поради това те не са подходящи за изследвания, свързани с паметта [1].

Клетките HT22 имат вид, подобен на епителни клетки.

Амилоидни плаки, образуващи се между невроните при болестта на Алцхаймер.

2. Информация за култивирането на клетъчната линия HT22

Клетките HT22 се използват в лабораториите за неврологични изследвания. Преди да култивират тези клетки, изследователите търсят съществена информация за клетъчните култури, която да улесни и направи ефективна работата им. Този раздел обхваща всички ключови моменти за култивиране на HT22 клетки. Ще знаете: Какво е времето за удвояване на клетките HT22? Как се култивират клетки HT22? Какъв е протоколът за култивиране на клетки HT22? Каква е хранителната среда за клетки HT22?

Ключови моменти при култивирането на клетките HT22

Време за удвояване:	Времето за удвояване на клетките HT22 е приблизително 15 часа.
Прилепнали или в суспензия:	Клетките HT22 са адхезивни.
Съотношение на субкултивиране:	Съотношението на субкултивиране за HT22 хипокампални клетки е 1:3 до 1:6. Накратко, средата се отстранява и адхезивните клетки се изплакват с 1 x PBS. Разтворът за дисоциация на акутаза се добавя в колбата и клетките се инкубират за 8 до 10 минути при стайна температура. След това се добавя свежа културална среда и клетките се събират във флакон за центрофугиране. Получената клетъчна пелета се ресуспендира внимателно и клетките се разпределят в колба за култивиране за растеж.
Растежна среда:	За култивирането на клетките HT22 се използва среда DMEM. Тя се допълва с 10 % FBS, 4,5 g/L глюкоза, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3 и 1,0 mM натриев пируват за оптимален клетъчен растеж.
Условия за растеж:	Клетъчните култури HT22 се съхраняват в овлажнен инкубатор (температура 37 °C) с 5 %_CO2.
Съхранение:	Замразените HT22 клетки могат да се съхраняват при температура под -150 °C или в парната фаза на течен азот, или в електрически фризер за ултраниски температури за дълъг период от време.
Процес на замразяване и среда:	Клетките HT22 могат да бъдат замразени в среда CM-1 или CM-ACF, като се използва метод на бавно замразяване. Този процес позволява намаляване на температурата на пробата само с 1 °C в минута, предпазва клетките от шок и спомага за запазване на тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:	Клетките се размразяват на водна баня с температура 37 °C за 40 до 60 секунди, докато остане малка ледена бучка. След това в клетките се добавя културална среда и те се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се изсипват в нова колба, съдържаща хранителна среда. След това клетките се инкубират при 37 °C в инкубатор в продължение на поне 24 часа.
Ниво на биологична безопасност:	За култивиране на клетки HT22 е задължително да се използват лабораторни условия от ниво на биологична безопасност 1.

30% и 90% сляти монослоеве от клетки HT22 в клетъчна култура.

3. Предимства и недостатъци на клетъчната линия HT22

Хипокампалните клетки HT22 са свързани с някои плюсове и минуси, които ги отличават от други невронни клетъчни линии. Тук са посочени някои забележителни предимства и недостатъци на клетъчната линия.

Предимства

Предимствата на невронната клетъчна линия HT22 за мишки са:

Бърз растеж
Клетките HT22 имат време за удвояване от 15 часа, което позволява бързи и ефикасни експерименти и спомага за навременни резултати от изследванията.
Имортализация
HT22 е имортализирана клетъчна линия, която осигурява непрекъснат растеж за дълъг период от време. Това осигурява постоянна наличност на клетки, намалява времето и разходите и улеснява дългосрочните експерименти с постоянни резултати.

Недостатъци

Недостатъците на клетките HT22 са:

Произход от мишки
Клетъчната линия HT22 е получена от тъкан на мишия мозъчен хипокампус, която може да не отразява напълно сложността на физиологията и поведението на човешките невронни клетки, което ограничава тяхната приложимост.

4. Изследователски приложения на клетъчната линия HT22

Клетките HT22 се използват широко в невробиологичните изследвания. Няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия са разгледани в този раздел на статията:

Неврологични изследвания: Клетките HT22 се използват широко в изследванията на невродегенеративни заболявания, т.е. болестта на Алцхаймер и Паркинсон. Те се считат за ценен изследователски инструмент за изучаване на механизмите на невротоксичност и оксидативен стрес, свързани с тези заболявания. Изследвания, проведени през 2020 г., установиха, че пътят PI3K/AKT/CREB участва в индуцираната от хипергликемия невротоксичност в клетките HT22 [2]. По подобен начин в едно неотдавнашно проучване се предлага, че пътят Nrf2/HO-1 и сигналната ос NF- κB играят значителна роля в токсичността на амилоид бета в HT22 [3].
Скрининг на лекарства: Клетките HT22 се използват широко за целите на тестването и скрининга на лекарства. Те помагат на изследователите да идентифицират потенциални терапевтични агенти, проявяващи невропротективни ефекти за борба с невродегенеративните заболявания. Проучване, проведено през 2019 г., изследва невропротективния потенциал на съединението тетрахидрокуркумин в третирани с глутамат HT22 хипокампални клетки. В него глутаматът предизвиква оксидативен стрес в клетките HT22 и причинява клетъчна смърт чрез активиране на митоген-активирани протеин кинази [4].

800,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305158

5. Научни публикации с участието на клетки HT22

Ето някои интересни научни статии с участието на клетъчната линия HT22:

Изследване на невропротективните ефекти на кроцина чрез антиоксидантна активност в клетки HT22 и при мишки с болестта на Алцхаймер

Това проучване в International Journal of Molecular Medicine (2019 г.) предлага невропротективния потенциал на кроцина, съединение, изолирано от Crocus sativus L., вувреденитеот L-глутаматHT22 клетки.

Нови оксиндолови производни предотвратяват индуцираната от оксидативен стрес клетъчна смърт в миши хипокампални HT22 клетки

В тази публикация в Neuropharmacology (2018 г.) се съобщава, че оксиндоловите производни предпазват от клетъчна смърт на HT22, предизвикана от оксидативен стрес.

Гинсенозид Rb2 потиска опосредствания от глутамат оксидативен стрес и невроналната клетъчна смърт в HT22 клетки

Тази научна статия е публикувана в Journal of Ginseng Research през 2019 г. В това проучване са изследвани невропротективните ефекти на естествен продукт, женсенозид Rb2, като е използвана клетъчна линия HT22. Проучването установи, че гинсенозид rb2 ефикасно намалява индуцирания от глутамат оксидативен стрес и клетъчната смърт в миши хипокампални клетки HT22.

Сребърните наночастици предизвикват цитотоксичност в клетките HT22 чрез автофагия и апоптоза по сигналния път PI3K/AKT/mTOR

В това проучване в Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) е оценен цитотоксичният потенциал на сребърните наночастици в клетъчната линия HT22.

Феростатин-1 предпазва клетките HT-22 от оксидативна токсичност

Тази научна статия е публикувана през 2020 г. в Neural regeneration research. В нея се предлага феростатин-1, инхибитор на фероптозата, да предотвратява оксидативната токсичност в хипокампални клетки HT22.

6. Ресурси за HT22 клетки: Протоколи, видеоклипове и др

Някои онлайн ресурси за клетките HT22 обясняват техните протоколи за трансфекция, диференциация и клетъчни култури:

HT22 трансфекция: Този документ съдържа оптимизиран протокол за трансфекция на HT22 в 24- и 96-ямкови плаки за клетъчни култури.
Диференциране на клетките HT22: Тази статия ще ви даде изчерпателни указания за протокола за диференциране на HT22.

Следната връзка съдържа протокола за култивиране на HT22 клетки:

HT22 клетъчно субкултивиране: Този линк ще ви помогне да научите протокола за субкултивиране на клетъчната линия HT22. Освен това то ще ви помогне да научите протокола за предизвикване на невротоксичност в клетките.
HT22 хипокампални клетки: Този уебсайт съдържа много полезна информация за времето за удвояване на клетките HT22, медиите и протоколите за клетъчно култивиране.

Препратки

He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons (Диференциацията намалява чувствителността към възбудителна токсичност при невроните HT22 ). Neural Regen Res, 2013 г. 8(14): p. 1297-306.
Zhang, S., et al., Fisetin prevents HT22 cells from high glucose-induced neurotoxicity via PI3K/Akt/CREB signaling pathway. Frontiers in Neuroscience, 2020 г. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al., Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Биоорганична химия, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al., Neuroprotective effects of tetrahydrocurcumin against glutamate-induced oxidative stress in hippocampal HT22 cells. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.