Клетъчна линия HT22
HT22 е миши невронна клетъчна линия, често използвана в неврологичните изследвания. Тя е ценна за изучаване на невродегенеративни заболявания и тестване на потенциални невропротективни терапии или лечения. Освен това, клетките HT22 са чувствителни към глутамат, поради което се използват за изследване на индуцирана от глутамат токсичност или невронно увреждане.
- Среда за растеж
- За култивиране на HT22 клетки се използва среда DMEM. Тя се допълва с 10% FBS, 4,5 g/L глюкоза, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3 и 1,0 mM натриев пируват за оптимален клетъчен растеж.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на клетките HT22 е приблизително 15 часа.
- Тип растеж
- Клетките HT22 са адхезивни.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Налични от
- Cytion — Поръчайте HT22
Тази статия подчертава важните аспекти на клетките HT22, които могат да ви помогнат в изследователската ви работа. В нея се обсъждат основно:
- Общи характеристики и произход на клетките HT22
- Информация за култивирането на клетъчната линия HT22
- Предимства и недостатъци на клетъчната линия HT22
- Изследователски приложения на клетъчната линия HT22
- Научни публикации, посветени на HT22 клетките
- Ресурси за клетки HT22: протоколи, видеоклипове и др.
Общи характеристики и произход на клетките HT22
Тази част от статията ще хвърли светлина върху произхода и общите характеристики на HT22 клетките. Познаването на тази информация за клетъчната линия е необходимо, преди да започнете работа с нея. Тук ще научите: Какви са HT22 клетките? Каква е морфологията на HT22 хипокампалните клетки? Какъв е размерът на HT22 клетките?
HT22 е непрекъсната клетъчна линия, получена от хипокампалната област на мозъка на мишка. Тя е субклон на родителската клетъчна линия HT-4, разработена чрез иммортализация на миши невронни тъкани чрез температурно-чувствителен полиомавирус simian virus 40 (SV40) T антиген.
Тези клетки се различават от зрелите хипокампални клетки, тъй като им липсват глутаматни и холинергични рецептори, каквито имат зрелите неврони с хипокампален произход. Поради това те не са подходящи за научни изследвания, свързани с паметта [1].
Клетките HT22 имат вид, подобен на епителни клетки.
Информация за култивирането на клетъчната линия HT22
Клетките HT22 се използват в изследователски лаборатории по невронауки. Преди да започнат култивирането на тези клетки, изследователите търсят основна информация за клетъчната култура, която да улесни и направи работата им по-ефективна. Тази секция обхваща всички ключови моменти при култивирането на клетки HT22. Ще научите: Какво е времето за удвояване на клетките HT22? Как се култивират клетки HT22? Какъв е протоколът за култивиране на клетки HT22? Каква е средата за култивиране на клетки HT22?
Ключови моменти при култивирането на клетки HT22
Време за удвояване:
Времето за удвояване на клетките HT22 е приблизително 15 часа.
Прилепнали или в суспензия:
Клетките HT22 са адхезивни.
Съотношение на субкултивиране:
Съотношението на субкултивиране за хипокампалните клетки HT22 е 1:3 до 1:6. Накратко, средата се отстранява и адхезивните клетки се изплакват с 1 x PBS. В колбата се добавя разтворител Accutase и клетките се инкубират в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. След това се добавя свежа културална среда и клетките се събират във флакон за центрофугиране. Полученият клетъчен пелетен остатък се ресуспендира внимателно и клетките се прехвърлят в културална колба за растеж.
Среда за растеж:
За култивиране на HT22 клетки се използва среда DMEM. Тя се допълва с 10% FBS, 4,5 g/L глюкоза, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3 и 1,0 mM натриев пируват за оптимален клетъчен растеж.
Условия за отглеждане:
Клетъчните култури HT22 се съхраняват в овлажнен инкубатор (температура 37 °C) с 5% CO2.
Съхранение:
Замразените HT22 клетки могат да се съхраняват при температура под -150 °C или във фазата на пари на течен азот, или в електрически фризер с ултраниска температура за дългосрочно съхранение.
Процес на замразяване и среда:
Клетките HT22 могат да се замразяват в среди CM-1 или CM-ACF, като се използва метод на бавно замразяване. Този процес позволява понижение на температурата на пробата само с 1 °C на минута, предпазва клетките от шок и спомага за поддържане на тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:
Клетките се размразяват във водна баня при 37 °C за 40 до 60 секунди, докато остане малък леден буцик. След това към клетките се добавя културална среда и те се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Клетъчният пелетен се ресуспендира и клетките се изсипват в нова колба, съдържаща културална среда. След това клетките се инкубират при 37 °C в инкубатор за най-малко 24 часа.
Ниво на биологична безопасност:
За култивирането на HT22 клетки са задължителни лабораторни условия с ниво на биологична безопасност 1.
Предимства и недостатъци на клетъчната линия HT22
Хипокампалните клетки HT22 имат някои предимства и недостатъци, които ги отличават от другите невронни клетъчни линии. Тук са посочени някои от най-важните предимства и недостатъци на тази клетъчна линия.
Предимства
Предимствата на мишия невронен клетъчен линия HT22 са:
-
Бърз темп на растеж
Клетките HT22 имат време за удвояване от 15 часа, което позволява бързи и ефективни експерименти и спомага за навременни резултати от изследванията.
-
Имунализация
HT22 е безсмъртна клетъчна линия, което гарантира непрекъснат растеж за продължителни периоди. Това осигурява постоянна наличност на клетки, намалява времето и разходите и улеснява дългосрочните експерименти с постоянни резултати.
Недостатъци
Недостатъците на HT22 клетките са:
-
Миши произход
Клетъчната линия HT22 е получена от тъкан на хипокампуса на миши мозък, което може да не отразява напълно сложността на физиологията и поведението на човешките неврони, което ограничава тяхната транслационна релевантност.
4. Изследвания с клетъчната линия HT22
Клетките HT22 се използват широко в невробиологичните изследвания. В тази част на статията се разглеждат няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия:
- Изследвания в областта на невронауките: Клетките HT22 се използват широко в изследванията на невродегенеративни заболявания, т.е. болестта на Алцхаймер и болестта на Паркинсон. Те се считат за ценен изследователски инструмент за изучаване на механизмите на невротоксичност и оксидативен стрес, свързани с тези заболявания. Изследване, проведено през 2020 г., установи, че PI3K/AKT/CREB пътят е свързан с невротоксичността, предизвикана от хипергликемия в HT22 клетки [2]. По подобен начин, едно скорошно проучване предложи, че Nrf2/HO‐1 пътят и NF-κB сигналната ос играят значителна роля в амилоидната бета токсичност на HT22 [3].
- Скрининг на лекарства: HT22 клетките се използват широко за тестване и скрининг на лекарства. Те помагат на изследователите да идентифицират потенциални терапевтични средства, проявяващи невропротективни ефекти за борба с невродегенеративните заболявания. Проучване, проведено през 2019 г., изследва невропротективния потенциал на тетрахидрокуркуминовото съединение в HT22 хипокампални клетки, третирани с глутамат. В този случай глутаматът предизвиква оксидативен стрес в HT22 клетките и причинява клетъчна смърт чрез активиране на митоген-активирани протеинкинази [4].
5. Научни публикации, посветени на клетките HT22
Ето някои интересни научни статии, посветени на клетъчната линия HT22:
Това проучване, публикувано в International Journal of Molecular Medicine (2019), предлага невропротективния потенциал на кроцин, съединение, изолирано от Crocus sativus L., в HT22 клетки, увредени от L-глутамат.
Тази публикация в Neuropharmacology (2018) съобщава, че производните на оксиндола предпазват от клетъчна смърт на HT22, предизвикана от оксидативен стрес.
Тази научна статия е публикувана в списанието „Journal of Ginseng Research“ през 2019 г. Това проучване изследва невропротективните ефекти на естествения продукт гинзенозид Rb2, като използва клетъчната линия HT22. Проучването установи, че гинзенозид Rb2 ефективно намалява индуцирания от глутамат оксидативен стрес и клетъчната смърт в миши хипокампални клетки HT22.
Това проучване, публикувано в Ecotoxicology and Environmental Safety (2021), оцени цитотоксичния потенциал на сребърните наночастици в клетъчната линия HT22.
Феростатин-1 предпазва HT-22 клетките от оксидативна токсичност
Тази научна статия е публикувана през 2020 г. в списанието „Neural regeneration research“. В нея се предлага, че феростатин-1, инхибитор на фероптозата, предотвратява оксидативната токсичност в хипокампалните клетки HT22.
Ресурси за HT22 клетки: протоколи, видеоклипове и др.
Някои онлайн ресурси за клетките HT22 обясняват протоколите за трансфекция, диференциация и клетъчна култура:
- Трансфекция на HT22: Този документ съдържа оптимизиран протокол за трансфекция на HT22 в 24- и 96-лункови плаки за клетъчна култура.
- Диференциация на HT22 клетки: Тази статия ще ви даде изчерпателна информация за протокола за диференциация на HT22.
Следният линк съдържа протокола за клетъчна култура на HT22:
- Субкултивиране на HT22 клетки: Този линк ще ви помогне да научите протокола за субкултивиране на клетъчната линия HT22. Освен това, той ще ви помогне да научите протокола за индуциране на невротоксичност в клетките.
- Хипокампални клетки HT22: Този уебсайт съдържа много полезна информация за времето за удвояване на клетките HT22, среди и протоколи за клетъчна култура.
Източници
- He, M., et al., Диференциацията води до податливост към ексайтотоксичност в невроните HT22. Neural Regen Res, 2013. 8(14): стр. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Фисетин предпазва HT22 клетките от невротоксичност, предизвикана от високи нива на глюкоза, чрез сигналния път PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: стр. 241.
- Zhang, R.-l., et al., Защитни ефекти на берберина срещу невротоксичност, предизвикана от β-амилоид в HT22 клетки чрез Nrf2/HO‐1 пътя. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: стр. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Невропротективни ефекти на тетрахидрокуркумин срещу индуциран от глутамат оксидативен стрес в HT22 клетки на хипокампуса. Molecules, 2019. 25(1): стр. 144.