Клетъчна линия HT-29
HT-29 е клетъчна линия от човешки колоректален рак с широк спектър от приложения в изследванията в областта на рака и токсикологията. Например, тези клетки са чувствителни към стандартните химиотерапевтични лечения срещу колоректален рак. Освен това клетъчната линия HT-29 е добре характеризиран in vitro модел за изследване на реакцията на чревния епител към бактериална инфекция. Клетките HT-29 имитират характеристиките на зрелите чревни клетки, т.е. ентероцитите, и по този начин са подходящи за изследвания на прикрепването и механизмите.
- Среда за растеж
- Вижте страницата на продукта
- Време за удвояване
- Вижте страницата на продукта
- Тип растеж
- Прилепващ
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Наличен от
- Cytion — Поръчайте HT-29
Клетки HT-29: Произход и обща информация
Преди да използвате която и да е клетъчна линия, трябва да сте запознати с общите характеристики и произхода на клетъчната линия. Тази секция ще ви помогне да научите: Какви са клетките HT-29? HT-29 е ли клетъчна линия на колоректален рак? Каква е морфологията на клетките HT-29?
Какво представлява клетъчната линия HT-29? HT-29 е клетъчна линия от колоректален аденокарцином, създадена през 1964 г. от Trempe и Fogh. Клетките са получени първоначално от първичния тумор на жена от кавказката раса (на 44 години) с колоректален аденокарцином [1]. От създаването си тази клетъчна линия се използва за изучаване на биологията на раковите заболявания.
Морфология на клетките HT-29: Клетъчната линия HT-29 като цяло има епителиоподобна морфология. Диференцираните клетки растат в монослоеве, образуват плътни клетъчно-клетъчни връзки и притежават апикална четка. Ако тези клетки се отглеждат в среда с дефицит на глюкоза или им се дават индуктори като бутират или киселина, те проявяват ентероцитоподобни характеристики.
Размер на клетките: Диаметърът на клетъчната линия HT-29 за колоректален рак е 11 μm.
Геном и плоидност: Модалният брой хромозоми за клетъчната линия HT-29 е 71. Той може да варира от 68 до 72. Освен това, опростеният брой хромозоми за клетките HT-29 е хипертриплоиден, като 2S компонентът се среща с честота 2,4 %.
Какво е HT29 MTX? HT29 MTX е клетъчна линия, резистентна към метотрексат, изолирана от оригиналната клетъчна линия HT-29 на човешки колоректален рак чрез адаптация към 10 µM метотрексат. Тези клетки притежават характеристики на зрели чашковидни клетки, секретиращи слуз.
Информация за клетъчната култура на клетъчната линия HT-29
Познаването на основните изисквания за култивиране на клетъчна линия може да улесни работата ви с нея. Трябва да знаете: какво е времето за удвояване на клетъчната линия HT-29? Каква е плътността на засяване на клетките HT-29? Какви среди се използват за клетките HT-29?
Време за удвояване
Средното време за удвояване на клетъчната линия HT-29 е 24 часа.
Адхезивна/суспензионна
HT-29 е адхезивна клетъчна линия.
Плътност на засяване
Препоръчителната плътност на засяване за клетки HT-29 е 3 x 104 клетки/cm2. Отгледаните клетки се промиват с 1X PBS и се отделят след инкубация с Accutase в продължение на 8-10 минути. Добавя се свежа среда и клетките се центрофугират. Клетъчният пелетен се ресуспендира и клетките се разпределят в нови колби при препоръчителна клетъчна плътност.
Среда за отглеждане
За оптимално култивиране на HT-29 клетки се използва минимална есенциална среда на Игъл (EMEM), допълнена с 2,5 mM L-глутамин и 10 % FBS. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж
Клетките HT-29 изискват за растежа си инкубатор с влажност, температура 37 °C и 5 % CO2.
Съхранение
Тези клетки се съхраняват във фазата на пари на течен азот при температура под -195 °C.
Среда и процес на замразяване
Средството за замразяване, използвано за клетъчната линия HT-29, е CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез процес на бавно замразяване, който води до спад на температурата с 1 °C и ефективно предпазва жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване
Замразените HT-29 клетки се размразяват във водна баня, настроена на температура 37°C. Тези клетки могат да бъдат ресуспендирани и директно прехвърлени в колба с прясна среда за отглеждане. В противовес на това, размразените клетки могат да бъдат центрофугирани, за да се отстранят елементите на замразяващата среда, да бъдат ресуспендирани в свежа среда и култивирани в колби.
Ниво на биологична безопасност
За работа и поддържане на клетъчната линия HT-29 се използва ниво на биологична безопасност 1.
Клетки HT-29: Предимства и ограничения
Всяка клетъчна линия има уникални предимства и недостатъци, които я отличават от другите клетъчни линии. В тази секция ще бъдат разгледани основните предимства и ограничения, свързани с HT-29 клетките.
Предимства
Основните предимства на HT-29 клетките са:
-
Лесни за култивиране
Клетъчната линия HT-29 е лесна за работа и поддържане, без сложни изисквания за култивиране. Тя се култивира широко в изследователски лаборатории.
-
Ин витро модел на чревни клетки
Клетките HT-29 могат да се диференцират в зрели чревни клетки (ентероцити и клетки, произвеждащи слуз) при специфични условия на култивиране. Те се използват като клетъчен модел за изучаване на храносмилането и биодостъпността.
-
Висока ефективност на трансфекцията
Клетките HT-29 от рак на дебелото черво предлагат висока ефективност на трансфекция, което ги прави подходящи за изследвания на генната експресия и регулация. Могат да се провеждат както преходни, така и стабилни експерименти по трансфекция, като се използват различни методи.
-
Чувствителност към лекарства
Клетките HT-29 са чувствителни към химиотерапевтични лекарства като флуороурацил и оксалиплатин, които се използват често при лечението на рак на дебелото черво. Те се използват за проучване на лекарствената резистентност и за скрининг на потенциални терапевтични лекарства за колоректален карцином.
Ограничения
-
Хетерогенност
Клетките HT-29, подобно на други ракови клетъчни линии, проявяват хетерогенност и може да не образуват еднородна клетъчна популация. Това може да повлияе на възпроизводимостта на резултатите в определени тестове и да доведе до незначителни вариации в експерименталните резултати.
-
Ограничена диференциация
Клетките HT-29 имат ограничен потенциал за диференциация. Те не се диференцират напълно в чревни или колонични клетки, а проявяват само няколко характерни черти. Това ограничение може да ограничи тяхното използване при изучаването на по-сложни биологични процеси.
Клетки HT-29: Приложения
Клетъчната линия HT-29 се култивира широко в изследователски лаборатории поради широкия си спектър на приложения. В тази секция ще бъдат разгледани само няколко значими приложения на клетките HT-29.
Изследвания на рака: HT-29 е клетъчна линия на колоректален аденокарцином, така че се използва за изучаване на прогресията, развитието и основните молекулни механизми на рака. Проучване, проведено през 2018 г., използва клетъчната линия HT-29 за изследване на клетъчните молекули, отговорни за метастазирането. Това проучване установи, че гените виментинин и CXCR4 регулират клетъчната метастаза. Докато трансфекцията на миметик на микроРНК-193a-5p може да намали нивата на мРНК на тези гени и успешно да намали метастазите на раковите клетки [2].
Токсикологични изследвания: Клетъчната линия HT-29 се използва широко в токсикологичните изследвания. Тези клетки от колоректален карцином се използват за оценка на токсичността на различни кандидат-лекарства чрез различни тестове. Например, едно проучване изследва потенциалната токсичност на етанолен екстракт от растението Syzygium cumini върху клетъчната линия HT-29. Резултатите показаха значително потискане на растежа на HT-29 клетките, което показва обещаващите противоракови свойства на екстракта [3].
Микробиология: HT-29 може да се използва като система от приемни клетки за изследване на патогенезата на потенциални микроби, т.е. бактерии и вируси. Изследователите могат да инфектират HT-29 клетки с микроби, за да изследват тяхната вирулентност и реакцията на приемника. В едно такова проучване HT-29 клетките бяха използвани за изследване на пробиотичните свойства на млечнокиселите бактерии [4]. В друго проучване HT-29 клетките бяха използвани за оценка на ефикасността и безопасността на терапиите с бактериофаги [5].
5. Научни публикации за клетките HT-29
В тази секция ще бъдат представени някои значими публикации относно клетките HT-29, които ще ви помогнат при изготвянето на вашето научно изследване.
Това проучване предлага етанолния екстракт от Syzygium cumini като потенциално противораково средство срещу колоректалната клетъчна линия HT-29. Екстрактът значително потиска растежа на раковите клетки.
Тази публикация в Bioscience Reports тества противораковата активност на съединението тетрандрин върху клетки HT-29. Резултатите показаха, че тетрандрин инхибира пролиферацията и растежа на раковите клетки чрез регулиране на клетъчните сигнални пътища.
Това проучване предлага, че miRNA-193a-5p може потенциално да регулира метастазите на HT-29 клетките чрез регулиране на гени, свързани с метастазите.
Тази статия е публикувана в Nature Scientific Reports през 2018 г. Това проучване използва туморогенната клетъчна линия HT-29 като чревен клетъчен модел за оценка на ефикасността на предложеното лечение с бактериофаги.
В това проучване изследователите са използвали HT-29 клетки, за да изследват пробиотичната активност на млечнокиселите бактерии. Интересното е, че проучването показва, че лактобацилите предотвратяват адхезията на патогенни бактерии към клетките на дебелото черво.
Клетки HT-29 Ресурси: протоколи, видеоклипове и др.
В тази секция ще бъдат представени някои онлайн ресурси за клетките HT-29, които ще ви помогнат да научите протоколите за тяхното поддържане, култивиране и трансфекция.
Протоколи за клетъчна култура
Следните ресурси ще ви насочат относно субкултивирането на HT-29 клетки.
- Култивиране на HT-29 клетки: Този линк ще ви предостави основни познания за средата за растеж, размразяването и субкултивирането на HT-29 клетки.
- Поддържане на HT-29 култури: Тази статия съдържа цялата полезна информация за култивирането и поддържането на HT-29 клетки.
Протоколи за трансфекция
Клетъчната линия HT-29 има висока ефективност на трансфекция и често се използва в проучвания на генната експресия. Следните ресурси описват възможните протоколи за трансфекция на тези клетки.
- Трансфекция на HT-29: Този линк към уебсайт съдържа подробен протокол за трансфекция на HT-29 клетки.
- Трансфекция на клетъчна линия HT-29: Този документ описва протокола за трансфекция на клетъчната линия HT-29 с плазмидна ДНК.
Видеоклипове, свързани с клетъчната линия HT-29
Ето няколко видеоклипа за култивирането и поддържането на тази туморогенна клетъчна линия.
- Пасиране на клетки: Това видео показва протокола за пасиране на адхезивни клетъчни линии.
- Трансфекция на HT-29 клетки: Това видео ще ви насочи относно метода на трансфекция, използван за HT-29 клетки.
Надяваме се, че информацията в тази статия е полезна и достатъчна, за да можете да се справите с работата и поддържането на клетъчната линия HT-29. Ако планирате да използвате клетки HT-29 във вашето проучване, поръчайте от нас.
Източници
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles и I. Recio, клетъчна линия HT29. Въздействието на биоактивните вещества в храната върху здравето: in vitro и ex vivo модели, 2015: стр. 113-124.
- Shirafkan, N. и др., microRNA‐193a‐5p инхибира миграцията на човешки HT‐29 клетки от рак на дебелото черво чрез потискане на метастазния път. Списание за клетъчна биохимия, 2019. 120(5): стр. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., Р. Зареан и Р. Сафарализаде, Оценка на противораковия ефект на етанолния екстракт от Syzygium cumini върху колоректалната клетъчна линия HT-29. Списание за рак на стомашно-чревния тракт, 2021. 52: стр. 575-581.
- Фонсека, Х.С. и др., Пробиотични свойства на лактобацилите и тяхната способност да инхибират адхезията на ентеропатогенни бактерии към клетки Caco-2 и HT-29. Пробиотици и антимикробни протеини, 2021. 13: стр. 102-112.
- Shan, J., et al., Бактериофагите са по-вирулентни към бактерии с човешки клетки, отколкото в бактериална култура; изводи от клетки HT-29. Научни доклади, 2018. 8(1): стр. 5091.