Клетъчна линия HT-29

HT-29 е човешка клетъчна линия за колоректален рак с широк спектър от приложения в областта на раковите и токсикологичните изследвания. Например тези клетки са чувствителни към стандартните химиотерапевтични лечения срещу колоректален рак. Освен това клетъчната линия HT-29 е добре характеризиран in vitro модел за изследване на отговора на чревния епител към бактериална инфекция. Клетките HT-29 имитират характеристиките на зрелите чревни клетки, т.е. ентероцитите, и по този начин са подходящи за прикрепване и механистични изследвания.

В тази статия ще бъдат разгледани всички аспекти на клетъчната линия HT-29, които трябва да знаете, преди да работите с нея. Основно тя ще включва:

Клетки HT-29: Произход и обща информация
Информация за клетъчните култури на клетъчната линия HT-29
HT-29 клетки: Предимства и ограничения
Клетки HT-29: Приложения
Научни публикации за клетките HT-29
Ресурси за HT-29 клетки: Протоколи, видеоклипове и др

1. Клетки HT-29: Произход и обща информация

Преди да използвате която и да е клетъчна линия, трябва да се запознаете с общите характеристики и произхода на клетъчната линия. Този раздел ще ви помогне да научите: Какво представляват клетките HT-29? Клетъчна линия за колоректален рак ли е HT-29? Каква е морфологията на клетките HT-29?

Какво представлява клетъчната линия HT-29? HT-29 е клетъчна линия на колоректален аденокарцином, създадена през 1964 г. от Trempe и Fogh. Клетките първоначално са получени от първичния тумор на жена от европеидна раса (на 44 години) с колоректален аденокарцином [1]. От създаването си тази клетъчна линия се използва за изследване на биологията на раковите заболявания.

Морфология на клетките HT-29: Клетъчната линия HT-29 обикновено има епителиална морфология. Диференцираните клетки растат в монослоеве, образуват тесни клетъчни връзки и притежават апикална четка. Ако тези клетки се отглеждат в среда с недостиг на глюкоза или им се дават индуктори като бутират или киселина, те проявяват ентероцитоподобни характеристики.

Размер на клетките: Диаметърът на клетъчната линия HT-29 за колоректален рак е 11 μm.

Геном и плоидност: Модалният брой хромозоми за клетъчната линия HT-29 е 71. Той може да варира от 68 до 72. Освен това обтекаемият брой хромозоми за клетките HT-29 е хипертриплоиден, като компонентът 2S се среща в размер на 2,4 %.

Какво представлява HT29 MTX? HT29 MTX е клетъчна линия, резистентна към метотрексат, изолирана от оригиналната клетъчна линия HT-29 за човешки рак на дебелото черво чрез адаптиране към 10 µM метотрексат. Тези клетки притежават характеристиките на зрели гоблетни клетки, секретиращи слуз.

Деление и движение на клетките на колоректалния рак под микроскоп.

2. Информация за клетъчната култура на клетъчната линия HT-29

Познаването на основните изисквания за култивиране на дадена клетъчна линия може да улесни работата ви с нея. Трябва да знаете: какво е времето за удвояване на клетъчната линия HT-29? Каква е гъстотата на посяване на клетките HT-29? Какви среди за HT-29 клетки?

Време на удвояване	Средното време за удвояване на клетъчната линия HT-29 е 24 часа.
Адхезия/суспензия	HT-29 е адхезивна клетъчна линия.
Гъстота на засяване	Препоръчителната плътност на посяване за клетките HT-29 е 3 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2}. Отгледаните клетки се промиват с 1 X PBS и се отделят след инкубация с Accutase за 8-10 минути. Добавя се свежа среда и клетките се центрофугират. Клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се разпределят в нови колби при препоръчителна клетъчна плътност.
Растежна среда	За оптимално култивиране на клетките HT-29 се използва минимално необходимата среда на Eagle (EMEM), допълнена с 2,5 mM L-глутамин и 10 % FBS. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж	Клетките HT-29 изискват хумифициран инкубатор с температура 37 °C и 5 %_CO2 за растеж.
Съхранение	Тези клетки се съхраняват в парната фаза на течен азот при температура под -195°C.
Среда и процес на замразяване	Средата за замразяване, използвана за клетъчната линия HT-29, е CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез бавен процес на замразяване, който води до понижаване на температурата с 1 °C и ефективно защитава жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване	Замразените клетки HT-29 се размразяват на водна баня при температура 37 °C. Тези клетки могат да се ресуспендират и директно да се разпределят в колбата с прясна хранителна среда. За разлика от това, размразените клетки могат да се центрофугират, за да се отстранят елементите на замразяващата среда, да се ресуспендират в свежа среда и да се култивират в колби.
Ниво на биобезопасност	За работа и поддържане на клетъчната линия HT-29 се използва ниво на биологична безопасност 1.

Клетките HT-29 под 10x и 20x увеличение.

3. HT-29 клетки: Предимства и ограничения

Всяка клетъчна линия има уникални предимства и недостатъци, които я отличават от други клетъчни линии. В този раздел ще бъдат разгледани основните предимства и ограничения, свързани с клетките HT-29.

Предимства

Основните предимства на клетките HT-29 са:

Лесни за култивиране
Клетъчната линия HT-29 е лесна за обработка и поддържане, без сложни изисквания за култивиране. Тя се култивира широко в изследователските лаборатории.
Ин витро модел на чревни клетки
Клетките HT-29 могат да се диференцират в зрели чревни клетки (ентероцити и клетки, произвеждащи слуз) при специфични условия на култивиране. Те се използват като клетъчен модел за изследване на храносмилането и бионаличността на храната.
Висока ефективност на трансфекцията
Клетките HT-29 от рак на дебелото черво предлагат висока ефективност на трансфекция, което ги прави подходящи за изследвания на генната експресия и регулация. С помощта на различни методи могат да се провеждат експерименти за преходно и стабилно трансфектиране.
Чувствителност към лекарства
Клетките HT-29 са чувствителни към химиотерапевтични лекарства, като флуороурацил и оксалиплатин, които обикновено се използват при лечението на рак на дебелото черво. Те се използват за изучаване на лекарствената резистентност и за скрининг на потенциални терапевтични лекарства за колоректален карцином.

Ограничения

Хетерогенност
Клетките HT-29, подобно на други ракови клетъчни линии, проявяват хетерогенност и може да не образуват еднородна клетъчна популация. Това може да повлияе на възпроизводимостта на резултатите при определени тестове и да доведе до незначителни разлики в експерименталните резултати.
Ограничена диференциация
Клетките HT-29 имат ограничен потенциал за диференциация. Те не се диференцират напълно в клетки на червата или дебелото черво, а проявяват само няколко характерни особености. Това ограничение може да ограничи използването им за изследване на по-сложни биологични процеси.

4. клетки HT-29: Приложения

Клетъчната линия HT-29 се култивира широко в изследователските лаборатории поради широкия спектър от приложения. В този раздел ще бъдат разгледани само няколко важни приложения на HT-29 клетките.

Изследване на рака: HT-29 е клетъчна линия за колоректален аденокарцином, поради което се използва за изследване на прогресията на рака, развитието му и основните молекулярни механизми. В проучване, проведено през 2018 г., клетъчната линия HT-29 е използвана за изследване на клетъчните молекули, отговорни за метастазите. При това проучване се наблюдава, че гените vimentin и CXCR4 регулират клетъчното метастазиране. Като се има предвид, че трансфектирането на мимик на микроРНК-193a-5p може да намали нивата на мРНК на тези гени и успешно да намали метастазирането на раковите клетки [2].

Токсикологични изследвания: Клетъчната линия HT-29 се използва широко в токсикологичните изследвания. Тези клетки от колоректален карцином се използват за оценка на токсичността на различни кандидат-лекарства с помощта на различни тестове. В едно проучване например е изследван токсичният потенциал на етанолов екстракт от растението Syzygium cumini върху клетъчната линия HT-29. Резултатите показват значително потискане на растежа на клетките HT-29, което показва обещаващите противоракови свойства на екстракта [3].

Микробиология: HT-29 може да се използва като система от клетки-гостоприемници за изследване на патогенезата на потенциални микроби, т.е. бактерии и вируси. Изследователите могат да инфектират клетките HT-29 с микроби, за да изследват тяхната вирулентност и отговора на гостоприемника. В такова проучване са използвани клетки HT-29 за изследване на пробиотичните свойства на млечнокиселите бактерии [4]. В друго проучване са използвани клетки HT-29 за оценка на ефикасността и безопасността на лечение с бактериофаги [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300215

5. Научни публикации за клетките HT-29

Този раздел ще ви запознае с някои забележителни публикации за клетките HT-29, които ще ви помогнат да разработите вашето научно изследване.

Оценка на противораковия ефект на етанолов екстракт от Syzygium cumini върху колоректална клетъчна линия HT-29

Това проучване предлага етанолов екстракт от Syzygium cumini като потенциално противораково средство срещу клетъчната линия HT-29 на колоректален рак. Екстрактът значително потиска растежа на раковите клетки.

Тетрандринът потиска растежа на клетките на HT-29 карцином на дебелото черво чрез Bcl-2/Caspase 3/PARP пътя и G1/S фазата

В тази публикация в Bioscience Reports е тествана противораковата активност на съединението Тетрадрин върху клетките HT-29. Резултатите разкриват, че тетрадринът инхибира пролиферацията и растежа на раковите клетки чрез регулиране на клетъчните сигнални пътища.

микроРНК-193а-5р инхибира миграцията на човешки клетки от рак на дебелото черво HT-29 чрез потискане на пътя на метастазите

Това проучване предлага, че miRNA-193a-5p може потенциално да регулира метастазирането на клетките HT-29 чрез регулиране на гените, свързани с метастазирането.

Бактериофагите са по-вирулентни за бактериите с човешки клетки, отколкото в бактериална култура; прозрения от клетките HT-29

Тази статия е публикувана в Nature Scientific Reports през 2018 г. В това проучване е използвана туморна клетъчна линия HT-29 като чревен клетъчен модел за оценка на ефикасността на предложеното лечение с бактериофаги.

Пробиотични свойства на лактобацили и способността им да инхибират адхезията на ентеропатогенни бактерии към клетки Caco-2 и HT-29

В това проучване изследователите използват HT-29 клетки, за да изследват пробиотичните активности на млечнокиселите бактерии. Интересното е, че проучването показва, че лактобацилите предотвратяват адхезията на патогенните бактерии към клетките на дебелото черво.

6. Клетки HT-29 Ресурси: Протоколи, видеоклипове и др

В този раздел ще бъдат разгледани някои налични онлайн ресурси за клетките HT-29, които ще ви помогнат да научите протоколите за тяхното поддържане, култивиране и трансфекция.

Протоколи за култивиране на клетки

Следните ресурси ще ви насочат към субкултивирането на HT-29 клетки.

Култивиране на HT-29 клетки: Този линк ще ви даде основни познания за растежната среда, размразяването и субкултивирането на HT-29 клетки.
Поддържане на култури HT-29: Тази статия съдържа цялата полезна информация за култивирането и поддържането на HT-29 клетки.

Протоколи за трансфекция

Клетъчната линия HT-29 има голяма ефективност на трансфекция и често се използва при изследвания на генната експресия. Следните ресурси описват възможните протоколи за трансфекция за тези клетки.

Трансфектиране на HT-29: Тази връзка към уебсайта съдържа подробен протокол за трансфекция на клетки HT-29.
Трансфекция на клетъчна линия HT-29: Този документ описва протокола за трансфекция на клетъчната линия HT-29 с плазмидна ДНК.

Видеоклипове, свързани с клетъчна линия HT-29

Ето няколко видеоклипа, свързани с култивирането и поддържането на тази туморогенна клетъчна линия.

Пасиране на клетки: Това видео показва протокола за пасиране на клетки за адхезивни клетъчни линии.
Трансфектиране на клетки HT-29: Това видео ще ви насочи към метода за трансфекция, използван за клетките HT-29.

Очакваме, че информацията в тази статия е ценна и достатъчна, за да се справите с обработката и поддържането на клетъчни линии HT-29. Ако възнамерявате да използвате HT-29 клетки във вашето изследване, поръчайте от нас.

Препратки

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles и I. Recio, клетъчна линия HT29. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models (Въздействието на хранителните биоактивни вещества върху здравето: in vitro и ex vivo модели), 2015 г.: стр. 113-124.
Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p инхибира миграцията на човешки HT-29 клетки на рак на дебелото черво чрез потискане на пътя на метастазите. Списание за клетъчна биохимия, 2019 г. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line (Оценка на противораковия ефект на етанолов екстракт от Syzygium cumini върху колоректална клетъчна линия HT-29 ). Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al., Пробиотични свойства на лактобацили и способността им да инхибират адхезията на ентеропатогенни бактерии към клетките Caco-2 и HT-29. Пробиотици и антимикробни протеини, 2021 г. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al., Bacteriophages are more virulent to bacteria with human cells than they are in bacterial culture; insights from HT-29 cells (Бактериофагите са по-вирулентни към бактерии с човешки клетки, отколкото в бактериална култура; прозрения от клетките HT-29 ). Научни доклади, 2018 г. 8(1): p. 5091.