Клетки HL-60: Основни елементи в изследванията на острата миелоидна левкемия
HL-60 е безсмъртна клетъчна линия от човешка левкемия. Тя се използва широко за изучаване на биологията на рака и за проучване на ефикасността на лекарствата срещу рак. Освен това, тя може да се използва и за разбиране на различните клетъчни и молекулярни механизми, участващи в пролиферацията и диференциацията на левкемичните клетки.
- Среда за растеж
- Вижте страницата на продукта
- Време за удвояване
- Вижте страницата на продукта
- Тип растеж
- Прилепващ
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Наличен от
- Cytion — Поръчайте HL-60
- Клетъчна линия HL-60: Произход и обща информация
- Информация за клетъчната култура HL-60
- Клетки HL-60: Предимства и недостатъци
- Приложения на клетъчната линия HL-60 в научните изследвания: от рака до имунологията и отвъд
- Клетъчна линия HL-60 за вашите научни изследвания
- Клетки HL-60: Научни публикации
- Ресурси за клетъчната линия HL-60: протоколи, видеоклипове и др.
- Клетъчна линия HL-60: Важни често задавани въпроси за изследователи
- Източници
- Често задавани въпроси
Клетъчна линия HL-60: Произход и обща информация
Клетъчната линия HL-60 служи като ключов модел в хематологичните изследвания, като предлага задълбочени познания за същността и лечението на острата промиелоцитна левкемия. Тази публикация в блога разглежда произхода и отличителните характеристики на клетъчната линия HL-60, като хвърля светлина върху нейната ключова роля в медицинските изследвания и терапевтичните разработки.
HL-60 е създадена за първи път от левкемични клетки на 36-годишна жена от кавказки произход, диагностицирана с остра промиелоцитна левкемия. Тази пионерска работа беше проведена от С.Дж. Колинс и неговия екип, отбелязвайки значителен пробив, тъй като HL-60 беше първата клетъчна линия на миелоидна левкемия, която беше успешно изолирана и култивирана в суспензия. Това постижение улесни многобройни възможности за изследвания в изучаването на левкемията и други свързани заболявания. По отношение на физическите характеристики, HL-60 клетките проявяват лимфобластна морфология и са известни с това, че растат в суспензия, като изглеждат с кръгла форма. Размерът на тези клетки варира, като диаметърът им варира от 9 до 25 μm, което отразява тяхната хетерогенност. На геномно ниво клетъчната линия HL-60 е предимно псевдодиплоидна, с модален брой хромозоми 43. Интересно е, че малък процент (6,2%) от клетките демонстрират 2S компонент, което добавя още едно ниво на сложност към тяхната генетична структура [1].
Разбирането на тези фундаментални аспекти на HL-60 клетките не само подобрява знанията ни за левкемията на клетъчно ниво, но и подкрепя текущите изследователски усилия за откриване на нови методи на лечение. В следващите раздели ще разгледаме как уникалните свойства на клетъчната линия HL-60 са допринесли за значителни напредъци в медицинските изследвания.
Информация за култивирането на клетки HL-60
Култивирането на HL-60 клетки е просто и лесно. В тази секция ще се запознаете с основни понятия като: Какъв е времето за удвояване на клетъчната линия HL-60? HL-60 е адхезивна или суспензионна култура? Каква е плътността на засяване на клетъчната линия HL-60? Каква среда се използва за растежа на HL-60?
Време за удвояване:
Времето за удвояване на HL-60 клетките е приблизително 36 до 48 часа.
Адхезивна или суспензионна:
Клетките HL-60 растат като суспензионни култури.
Плътност на засяване:
Тези клетки се засяват с плътност 1 x 106 клетки/мл при субкултивиране и 2 x 105 клетки/мл при започване на нова култура.
Среда за растеж:
За култивиране на HL-60 клетки се използва среда за растеж RPMI 1640, към която са добавени 10 % FBS и 2,5 mM L-глутамин. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:
HL-60 клетките се отглеждат в овлажнен инкубатор при температура 37 °C и 5 % CO2.
Съхранение:
HL-60 клетките се съхраняват при температура под -150 °C или във фазата на пари на течен азот, за да се запази максимален брой жизнеспособни клетки.
Среда и процес на замразяване:
За замразяването на HL-60 клетки се използват замразяващи среди CM-1 или CM-ACF. За замразяването на HL-60 клетки се предпочита методът на бавно замразяване.
Процес на размразяване:
Замразената епруветка с HL-60 клетки се разбърква бързо във водна баня, настроена на температура 37 °C. След това клетките се центрофугират, за да се отстрани средата за замразяване. Добавя се нова културална среда и клетките се ресуспендират, за да се прехвърлят в колба за отглеждане.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с култури HL-60 се препоръчва ниво на биологична безопасност 1.
Клетки HL-60: Предимства и недостатъци
Преди да започнете работа с която и да е клетъчна линия, може би ще искате да се запознаете с нейните предимства и недостатъци. В тази част от статията ще разгледаме няколко плюса и минуса при използването на HL-60 клетки.
Предимства
Някои от основните предимства на клетъчната линия HL-60 са:
- Универсалност: HL-60 клетките имат способността да се диференцират в множество клетъчни типове, включително моноцити, макрофаги и гранулоцити, при подходящи условия на растеж. Това ги прави полезни за изучаване на клетъчната диференциация и други клетъчни процеси.
- Лесни за култивиране: HL-60 клетките са лесни за отглеждане и поддържане в суспензионни култури, което ги прави удобен инструмент за изучаване на множество клетъчни процеси.
- Ин витро модел на левкемия: Тези клетки са получени от пациент с остра миелоидна левкемия и следователно имат генетични и молекулярни характеристики, сходни с тези на заболяването.
Недостатъци
Недостатъците на клетъчната линия HL-60 са:
- Ограничен потенциал за диференциация: HL-60 могат да се диференцират в някои миелоидни линии в отговор на стимули, но потенциалът им за диференциация е ограничен в сравнение с първичните клетки.
Приложения на клетъчната линия HL-60 в научните изследвания: от рака до имунологията и отвъд
Клетъчната линия HL-60, получена от пациент с остра промиелоцитна левкемия, се превърна в крайъгълен камък в медицинските изследвания благодарение на своята универсалност и лесното си култивиране. Тези култури, изискващи минимална поддръжка, са от ключово значение в безброй научни приложения, и ние се стремим да разгледаме някои от най-значимите от тях, включвайки широк спектър от ключови думи за изследване, за да предоставим изчерпателен преглед.
Изследвания в областта на рака
В областта на онкологията клетъчната линия HL-60 е била от ключово значение за разкриването на сложните механизми на сигнализиране на раковите клетки, за задълбочаване на разбирането ни за експресията на онкогени и за ускоряване на откриването на нови терапевтични мишени. Тази клетъчна линия е част от панела от левкемични клетъчни линии, използван за скрининг на нови химиотерапевтични средства. Един ярък пример е използването на HL-60 клетки за установяване на антилевкемичните свойства на съединения, извлечени от морски организми, което разкрива както антипролиферативни, така и проапоптотични ефекти [2]. Освен това, клетъчната линия е улеснила изследването на ключови сигнални пътища като JAK/STAT и тяхното влияние върху пролиферацията на левкемичните клетки, наред с оценката на терапевтичния потенциал на биоактивни съединения като тимохинон [3].
Имунология
Клетките HL-60 представляват стабилна in vitro система за изследване на различни имунни реакции, включително сложния процес на хемотаксиса и регулацията на експресията на ключови имунни медиатори. Тези клетки могат да се диференцират в миелоидни клетки, подобни на макрофаги и неутрофили, като служат като универсален модел за изследване на възпалителни пътища. Например, макрофагоподобни клетки, произхождащи от HL-60, бяха използвани за проучване на противовъзпалителния потенциал на фитохимикали от род Brassica [4]. В друго проучване диференциацията на HL-60 клетки в неутрофилоподобни клетки позволи на изследователите да идентифицират гени, които са от ключово значение за клетъчната диференциация и свързаните с нея имунни функции [5].
Откриване на лекарства
Способностите за миелоидна диференциация на HL-60 са били използвани и при откриването на лекарства, по-специално при идентифицирането на кандидати, които потенциално биха могли да модулират пътя на диференциация, което е от решаващо значение при лечението на левкемия. Това се илюстрира от проучвания, които са използвали клетъчната линия HL-60 за оценка на противораковия потенциал на природни продукти [6].
Освен това клетъчната линия HL-60 се използва за изучаване на различни аспекти на биологията на миелоидните клетъчни линии, като например разбиране на това как лечението с агенти като ретиноева киселина може да доведе до моноцитна диференциация или как тези клетки имитират първичните неутрофили при генерирането на екстрацелуларни капани. Използването на модела за изясняване на молекулярните събития при хематологични злокачествени заболявания се разширява допълнително чрез приложението му в проучвания на панели от мутирали клетки, особено в контекста на анализа на p53 хотспотове при левкемия.
За тези, които изследват клетъчната механика, времето за удвояване на HL-60 и тяхната реакция към електропорация в микрофлуидни канали, клетъчната линия предлага надеждна платформа за изследване.
Клетъчна линия HL-60 за вашите научни изследвания
Клетки HL-60: Научни публикации
Налице са няколко научни изследвания върху HL-60 клетки. Тук сме изброили някои забележителни примери:
В тази научна статия се предлага антитуморен ефект на съединението Stigmast-5-en-3-ol върху левкемични клетки HL-60 и ракови клетки на гърдата MCF7.
Това проучване описва ролята на JAK/STAT сигнализацията в пролиферацията на HL-60 клетки. Освен това изследователите проучват терапевтичния потенциал на съединението тимохинон, използвайки тази клетъчна линия на левкемия. Съединението инхибира клетъчната пролиферация и индуцира клетъчна смърт чрез възстановяване на експресията на негативните регулатори на JAK/STAT каскадата.
Това проучване използва HL-60 клетки за получаване на макрофагоподобен клетъчен модел при изследване на противовъзпалителната активност на растителните съединения от Brassica.
Това проучване, публикувано в списанието International Immunopharmacology, разработи имитация на неутрофилни клетки от клетъчната линия HL-60 чрез използване на диметилсулфоксид. Проучването наблюдава, че генът ERK участва в диференциацията на тези клетки.
Тази научна статия изследва противораковия потенциал на растителните полифенолни съединения, а именно галова киселина и елагова киселина, върху чувствителни към лекарства и резистентни левкемични клетки HL-60.
Клетъчна линия HL-60 Ресурси: протоколи, видеоклипове и др.
Налице са множество онлайн образователни ресурси за клетъчната линия HL-60. В тази секция ще бъдат представени няколко ресурса, описващи култивирането и трансфекцията на тази клетъчна линия.
Протоколи за клетъчна култура
Ресурсите, описващи методите за култивиране на HL-60 клетки, са:
- Размножаване на HL-60: Този документ предоставя информация за субкултивирането на HL-60 клетки.
- Клетъчна линия HL-60: Този уебсайт съдържа основна информация за HL-60 клетките и протоколите, включително култивиране, замразяване и размразяване на клетки.
Протоколи за трансфекция
Ето някои ресурси, описващи методите за трансфекция, избрани за HL-60 клетки.
- Трансфекция на HL-60 клетки: Този линк съдържа подробна процедура за трансфекция на HL-60 левкемични клетки.
- Временна трансфекция на HL-60 клетки: Този документ съдържа полезна информация за клетъчната линия и дава подробен протокол за временна трансфекция на HL-60 клетки.
Видеоклипове, свързани с клетъчната линия HL-60
Видео ресурсите за HL-60 клетки са много ограничени.
- Пасиране на HL-60 клетки: Това видео обяснява протокола за субкултивиране на HL-60 клетки.
Надяваме се тази статия да ви предостави основна информация за култивирането и поддържането на клетъчната линия HL-60. Освен това, тя може да обогати знанията ви за предимствата на използването на тези левкемични клетки в научните изследвания. Ако планирате да използвате тази клетъчна линия, поръчайте я от нас.
Клетъчна линия HL-60: Основни често задавани въпроси за изследователи
Клетъчната линия HL-60 е клетъчна линия от промиелоцитна левкемия, получена от пациент с остра промиелоцитна левкемия. Тази клетъчна линия се използва широко в научните изследвания за проучване на диференциацията на миелоидните клетки и експресията на онкогени.
Ретиноевата киселина предизвиква диференциация в клетъчната линия HL-60, като стимулира клетките да узреят в клетки, подобни на гранулоцити. Този процес е от решаващо значение за изучаването на механизмите, лежащи в основата на миелоидната диференциация.
Серумът е ключов компонент на средата за култивиране на хемопоетични клетки, като осигурява важни растежни фактори и хранителни вещества, необходими за размножаването и поддържането на HL-60 клетките в култура.
Да, клетъчната линия HL-60 е способна на хемотаксис, т.е. движение на клетките в отговор на химически стимули. Това я прави подходяща за тестове за хемотаксис и за изследване на клетъчната миграция.
Клетъчната линия HL60, която проявява експресия на клетъчни онкогени, служи като моделна система за изследване на регулацията на експресията на онкогени и тяхната роля в развитието на левкемията.
Клетъчната линия HL-60 е от неоценима полза в изследванията в областта на клетъчната биология, особено при проучването на клетъчния цикъл, процесите на клетъчна диференциация и молекулярните събития, водещи до левкемия.
Панелите от левкемични клетъчни линии позволяват провеждането на сравнителни изследвания на различни левкемични клетъчни линии, включително на тяхната генетична структура, мутационните профили, реакцията към лекарства и молекулярните пътища, участващи в левкемогенезата, като например MAPK пътя.
Сертификатите за анализ и произход обикновено могат да бъдат изтеглени или поискани от доставчика или хранилището, предоставящо клетъчната линия HL-60, като по този начин се гарантира, че изследователите получават автентични и свободни от замърсители клетки за своите изследвания.
Клетъчната линия HL-60 може да бъде диференцирана, за да придобие характеристики, сходни с тези на първичните неутрофили, включително способността да образува екстрацелуларни капани, което позволява на изследователите да я използват като заместващ модел за изучаване на поведението и функциите на неутрофилите.
Клетките HL-60 се използват като in vitro модел за изследване на острата промиелоцитна левкемия, биологията на миелоидните клетъчни линии и въздействието на различни съединения върху диференциацията и пролиферацията. Те се използват също така в експерименти, проучващи клетъчни реакции като хемотаксис, експресия на онкогени и влиянието на мутациите върху клетъчните процеси.
Съкращението „HL-60“ означава „Human Leukemia 60“ (Човешка левкемия 60). То обозначава 60-ата клетъчна линия, създадена от пациенти с левкемия към момента на нейното разработване. „HL“ обозначава фокуса върху човешки левкемични клетки.
Времето за удвояване на клетките HL-60 е приблизително 36 до 48 часа при оптимални условия на растеж. Това обаче може да варира в зависимост от условията на култивиране и броя на пасажите на клетките.
Когато клетките HL-60 се третират с форбол 12-миристат 13-ацетат (PMA), те обикновено се диференцират в клетъчен тип, наподобяващ макрофагите или моноцитите. Тази диференциация е част от изследването на пътищата на моноцитна диференциация и от разбирането на механизмите на диференциацията на миелоидните клетки.
Източници
- Fleck, R., S. Romero-Steiner и M. Nahm, Използване на клетъчна линия HL-60 за измерване на опсоничната способност на пневмококковите антитела. Клинична и ваксинална имунология, 2005. 12(1): стр. 19-27.
- Fernando, I.S. и др., Апоптотични и антипролиферативни ефекти на Stigmast-5-en-3-ol от Dendronephthya gigantea върху човешки левкемични HL-60 и човешки ракови клетки на гърдата MCF-7. Токсикология in vitro, 2018. 52: стр. 297-305.
- Almajali, B., et al., Тимохинон потиска клетъчната пролиферация и усилва апоптозата на левкемични клетки HL60 чрез реекспресия на JAK/STAT негативни регулатори. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): стр. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Анализ на противовъзпалителния потенциал на биоактивните съединения на Brassica в модел на човешки макрофагоподобни клетки, получени от HL-60 клетки. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: стр. 112804.
- Wang, D., et al., ERK участва в диференциацията и функцията на индуцирани от диметилсулфоксид HL-60 клетки, подобни на неутрофили, които имитират възпалителни неутрофили. International Immunopharmacology, 2020. 84: стр. 106510.
- Нуньес-Санчес, М.А. и др., Антилевкемична активност на биоактивни съединения, извлечени от Brassica, в миелоидни левкемични клетки HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): стр. 13400.