Клетки HK-2 - изследване на бъбречната функция и патология с клетки HK-2 в бъбречните изследвания

HK-2 е имортализирана човешка бъбречна епителна клетъчна линия, която често се използва в токсикологичните изследвания. Изследователите оценяват въздействието на токсините от околната среда върху тези бъбречни клетки. Освен това те използват HK-2 клетки и за изследване на бъбречни заболявания и техните основни механизми.

В тази статия ще бъде обяснена почти цялата съществена информация за клетките HK-2, включително техните общи характеристики, условия за култивиране на клетки, приложения в изследванията и много други. Ще научите следното:

HK-2 клетки: Произход и общи характеристики
Клетъчна линия HK-2: Информация за култивирането
Предимства и ограничения на HK-2 клетките
Приложения на клетъчната линия HK-2 в научните изследвания
HK-2 клетки: Изследователски публикации
Ресурси за клетъчната линия HK-2: Протоколи, видеоклипове и др

1.hK-2 клетки: Произход и общи характеристики

Произходът и общите характеристики на дадена клетъчна линия са задължителни за правилното боравене, поддържане и използване на клетъчната линия. В този раздел на статията ще бъде разгледано следното: Какво представляват клетките HK-2 в човешкия бъбрек 2? Каква е ролята на HK2? Какво представляват клетките HK2? Какъв е произходът на клетъчната линия HK-2? Какви са размерът и морфологията на клетките HK-2?

Клетките на човешкия бъбрек 2 (HK-2) са вид проксимални тубулни клетки, произхождащи от нормалната бъбречна тъкан на възрастен европеец. Клетъчната линия HK-2 е създадена чрез трансфектиране на бъбречни клетки с рекомбинантен ретровирус, съдържащ гените E6/E7 на човешки папиломен вирус 16. Този експеримент доведе до обезсмъртяване и създаване на непрекъснато растяща епителна клетъчна линия HK-2 на бъбрека.
Клетките HK-2 имат епителна морфология.
Размерът на HK-2 клетките варира между 17,4 и 18,6 µm в диаметър. Средният диаметър е 18,2 µm [1].

Здрави човешки бъбречни клетки под микроскоп.

2.клетъчна линия HK-2: Информация за култивиране

Информацията за култивирането на клетъчната линия на човешкия бъбрек 2 може значително да ви помогне преди работа с нея. В този раздел на статията е посочена задължителна информация за култивирането на HK-2 клетъчна линия. Ще научите: Прилепват ли клетките на HK-2? Какво е времето за удвояване на клетките HK-2? Каква среда се използва за култивиране на HK-2 клетки?

Ключови моменти при култивирането на HK-2 клетки

Време за удвояване на популацията:	Времето за удвояване на HK-2 клетките варира между 47,3 ч и 61,7 ч.
Прилепнали или в суспензия:	Клетъчната линия HK-2 е адхезивна.
Съотношение на субкултивиране:	Клетките HK-2 се субкултивират в съотношение от 1:2 до 1:4. Адхезивните HK-2 клетки се промиват с 1 x PBS и се инкубират при стайна температура за 8 до 10 минути след добавяне на разтвор на Accutase. Културната среда се добавя към дисоциираните клетки и се центрофугира. Събраните клетки се ресуспендират внимателно и се изсипват в нови колби за култивиране.
Растежна среда:	Кератиноцитната клетъчна среда, съдържаща 10 % фетален говежди серум, 0,05 mg/ml екстракт от говежда хипофиза (BPE) и 5 ng/ml епидермален растежен фактор (EGF), е идеалната среда за HK-2 клетки. Средата трябва да се подменя на всеки 2 до 3 дни седмично.
Условия за растеж:	Културите на клетъчната линия на човешкия бъбрек 2 се съхраняват в овлажнен инкубатор с 5 % CO2 при 37 °C.
Съхранение:	Замразените клетки се съхраняват в парната фаза на течен азот или при температура под -150 °C във фризер за ултраниски температури.
Процес на замразяване и среда:	CM-1 или CM-ACF са идеални за замразяване на HK-2 клетки. Накратко, избира се метод на бавно замразяване, който позволява спад на температурата само с 1 градус по Целзий в минута и предпазва клетките от всякакъв шок.
Процес на размразяване:	Замразените клетки се размразяват на водна баня при температура 37 градуса по Целзий. Тези клетки се добавят към прясна хранителна среда и се ресуспендират. След това клетките се прехвърлят в нова колба, съдържаща хранителна среда. След 24 часа средата се заменя, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда.
Ниво на биологична безопасност:	Клетъчните култури HK-2 се поддържат в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.

Клетки HK-2, растящи в островчетата, при увеличение 10x и 20x.

3.предимства и ограничения на клетките HK-2

HK-2 е широко използвана линия от епителни клетки на човешкия проксимален тубул. Подобно на други клетъчни линии, тя също е свързана с някои предимства и ограничения. В този раздел ще бъдат разгледани някои основни предимства и недостатъци на клетъчната линия на човешкия бъбрек 2.

Предимства

Основните предимства на клетъчната линия HK-2 включват:

Добре характеризирана	Клетъчната линия HK-2 е подробно характеризирана по отношение на своята морфология, размер и геном. Върху тези нормални бъбречни клетки са проведени многобройни научни изследвания.
Имортализирани	HK-2 е непрекъсната клетъчна линия с удължен живот, което позволява размножаването ѝ през няколко пасажа. Тази характеристика осигурява непрекъснато снабдяване с клетки за лабораторни експерименти.
Епителни характеристики на проксималните тубули	Клетките HK-2 показват добре диференциран фенотип, характерен за клетките на проксималните тубули (PTC), открити в човешкия бъбрек. Тази уникална характеристика прави HK-2 клетките ценен in vitro модел за изучаване на бъбречната физиология, клетъчните процеси и отговорите към различни стимули.

Ограничения

Ето някои ограничения на клетъчната линия HK-2:

Ин витро модел

HK-2 служи като in vitro модел на нормални бъбречни клетки, по-специално проявяващи характеристиките на епителните клетки на проксималните тубули. Въпреки това тя не може да възпроизведе напълно сложността на човешката бъбречна тъкан и микросредата, открита in vivo.

4.приложения на клетъчната линия HK-2 в научните изследвания

Клетъчната линия HK-2 има многобройни приложения в токсикологичните изследвания. Тук сме разгледали някои специфични и значими приложения на тази човешка проксимална тубулна клетъчна линия в научните изследвания.

Бъбречна физиология : Клетките HK-2 обикновено се използват за изследване на нормалната бъбречна физиология и функции. Изследователите използват тези проксимални тубулни епителни клетки, за да изследват йонните канали, транспортните процеси и други клетъчни механизми, регулиращи хомеостазата на бъбреците. Така например изследователите проучват ролята на каналите на преходния рецепторен потенциал 6 (TRPC6) в (+)-Конокарпан (CNCP), неолигнан, индуциран от клетъчна смърт в бъбречни епителни клетки HK-2 [2].
Бъбречни заболявания: Клетъчната линия на човешкия бъбрек 2 се използва за изследване на различни бъбречни заболявания, т.е. остро бъбречно увреждане и диабетна нефропатия, както и на лежащите в основата им клетъчни и молекулярни механизми. Така например изследванията установяват, че нивата на метилиране на протеина клото са свързани с бъбречното увреждане. Намаляването на метилирането на промотора на гена клото може да повиши неговата експресия и да облекчи бъбречното увреждане, предизвикано при модели на диабетни db/db мишки и третирани с висока глюкоза HK-2 клетки [3].
Токсикологични изследвания: Клетките HK-2 са чудесен изследователски инструмент за оценка на потенциалните ефекти на различни лекарства, химикали и замърсители на околната среда. Изследванията могат да помогнат на изследователите да оценят безопасността на лекарствата и страничните ефекти върху бъбречните клетки. Като например проучване, публикувано през 2022 г., оценява потенциалните ефекти на полизахариди и воден екстракт от естествената билка Polygonatumkingianum (PK) върху индуцираната от уран нефротоксичност в HK-2 клетки. Те установяват, че PK оказва защитно действие и предотвратява отравянето с уран в бъбречните клетки [4].

650,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305021

5.hK-2 клетки: Научни публикации

По-долу са представени някои интересни научни публикации, в които се разглеждат бъбречни епителни клетки HK-2.

CircHIPK3 облекчава токсичността на високата глюкоза за човешките бъбречни тубулни епителни клетки HK-2 чрез регулиране на miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

В това проучване в Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) се предлага, че циркулярната РНК HIPK3 може да намали инхибирането на пролиферацията на HK-2 клетките, причинено от токсичността на високата глюкоза. Освен това тя може да инхибира клетъчната смърт чрез регулиране на каскадата miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Диференциран механизъм на токсичност на златни наночастици в HK-2 бъбречни проксимални тубулни клетки и 786-0 карциномни клетки

В тази научна публикация в Nanomedicine (2020) се оценяват различните механизми на токсичност на златни наночастици (AuNPs) в 786-0 ракови клетки и HK-2 епителни клетки на проксимални тубули.

Индуцираната от висока глюкоза токсичност в клетките HK-2 може да бъде намалена чрез инхибиране на miRNA-320c

Тази статия е публикувана в Renal Failure (2022). В констатациите се посочва, че микроРНК-320c може да намали индуцираната от висока глюкоза токсичност в бъбречни клетки (HK-2) чрез насочване към PTEN и инхибиране на PI3K/AKT сигнализацията.

Екзозомите, получени от мезенхимни стволови клетки, отслабват епително-мезенхимния преход на клетките HK-2

В това проучване в Tissue Engineering Part A (2022) се предлага екзозомите, получени от мезенхимни стволови клетки, да предотвратяват епително-мезенхимния преход на HK-2 бъбречни клетки.

LncRNA TapSAKI насърчава възпалителното увреждане в HK-2 клетки и уринното увреждане на бъбреците, предизвикано от сепсис

В статия в Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) се посочва, че lncRNA TapSAKI засилва отговора на HK-2 на възпалението и клетъчната смърт чрез регулиране на сигналния път microRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

6.ресурси за клетъчната линия HK-2: Протоколи, видеоклипове и др

HK-2 е известна клетъчна линия. Тук са представени някои ресурси, описващи протокола за култивиране на HK-2 клетки.

Клетъчна култура HK-2: Този уебсайт е обогатен с информация за клетъчната култура HK-2. Като например предоставя рецепта за клетъчна среда на HK-2, протокол за пасажиране и протокол за работа и поддържане на пролиферативни и криоконсервирани култури.
Пасиране на клетки: Това видео ще ви помогне да научите общ протокол за разделяне или пасиране на адхезивни клетъчни линии.

Препратки

Handl, J., et al., The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds (Ефектът на многократното пасиране върху чувствителността на човешки проксимални тубулни клетки HK-2 към токсични съединения ). Физиологични изследвания, 2020 г. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., Activation of TRPC6 channels contributes to (+)-conocarpan-induced apoptotic cell death in HK-2 cells (Активирането на TRPC6 каналите допринася за апоптотичната клетъчна смърт, предизвикана от (+)-конокарпан в HK-2 клетките ). Food and Chemical Toxicology, 2019 г. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., EGCG attenuates renal damage via reversing klotho hypermethylation in diabetic db/db mice and HK-2 cells (EGCG отслабва увреждането на бъбреците чрез обръщане на хиперметилирането на клото при диабетни db/db мишки и HK-2 клетки). Оксидативна медицина и клетъчно дълголетие, 2020. 2020.
Li, W., et al., Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells (Защитни ефекти на полизахариди и воден екстракт от Polygonatum kingianum върху уран-индуцирана токсичност в човешки бъбречни клетки (HK-2) ). International Journal of Biological Macromolecules, 2022 г. 202: p. 68-79.