Клетки DU-145 – изчерпателен наръчник за изследователи

DU-145 е клетъчна линия от човешки простатен карцином, широко използвана в биомедицинските изследвания. Тези клетки служат като безценен модел за изучаване на биологията на рака на простатата, тестване на лекарства и разработване на нови лекарства. Освен това изследователите използват клетки DU-145 и за изследване на молекулярните механизми, лежащи в основата на развитието, растежа и прогресията на рака на простатата.

📋 Клетъчна линия DU-145 — кратки факти

Среда за растеж: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) с добавки към средата, а именно 10% фетално телешко серум (FBS), 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3 и EBSS. Средата се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Време за удвояване: Времето за удвояване на DU-145 варира между 30 и 40 часа.
Тип растеж: DU-145 е адхезивна клетъчна линия.
Ниво на биологична безопасност: BSL-1
Наличен от: Cytion — Поръчайте DU-145

📋 Съдържание

Обща информация и произход на клетъчната линия DU-145
Култивиране на DU-145 клетки
Клетъчна линия DU-145: Предимства и ограничения
Изследователски приложения на клетки DU-145
5. Научни публикации, посветени на клетките DU-145
Ресурси за клетъчната линия DU-145: протоколи, видеоклипове и др.
Често задавани въпроси

Обща информация и произход на клетъчната линия DU-145

Преди да започнете да работите с клетъчна линия, е важно да разберете нейните основни характеристики и произход. В тази секция ще получите изчерпателна информация за характеристиките и произхода на клетъчната линия DU-145. Ще научите: Какви са раковите клетки DU145? Каква е морфологията на клетките DU145? Каква е разликата между PC-3 и DU145?

DU-145, клетъчна линия от човешки рак на простатата, е получена от мозъка на мъж от кавказката раса (на 69 години) с метастатичен карцином на простатата. Тези клетки са депозирани за първи път от К.Р. Стоун и колеги през 1978 г.
Подобно на раковите клетки на простатата PC-3, DU-145 също експресира андрогенни рецептори. Когато обаче тези клетки бъдат подложени на лечение с андрогенни лиганди, те не проявяват никаква активност на гени, отговарящи на андрогенните рецептори, поради което се считат за андрогенно-независими клетки.
Клетките DU-145 притежават епителна морфология.
Клетките DU-145 са хипотриплоидни и имат модален брой хромозоми 64. Те проявяват няколко маркерни хромозоми, като del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) и del (9) (p11).

PC-3 срещу DU145

И двете клетъчни линии на рак на простатата са независими от андрогенния рецептор. Те се различават по отношение на туморогенния си и метастатичен потенциал. Когато се инжектира в имунокомпрометирана мишка, клетъчната линия PC-3 образува силно метастатичен аденокарцином от IV степен. За разлика от нея, клетъчната линия DU-145 развива рак на простатата с умерен метастатичен потенциал [1].

Нарушаване на микрофиламентите в човешките ракови клетки на простатата PC-3.

Отглеждане на клетки DU-145

Клетъчната линия DU-145 се използва широко в изследователските лаборатории за рак на простатата. Трябва да научите следните ключови моменти, за да улесните лесното и ефективното й култивиране. Тази секция ще включва информация за средата DU145, времето за удвояване, условията за клетъчна култура и протоколите.

Ключови моменти при култивирането на DU-145 клетки

Време за удвояване на популацията:: Времето за удвояване на DU-145 варира между 30 и 40 часа.
Прилепващи или в суспензия:: DU-145 е адхезивна клетъчна линия.
Плътност на засяване:: Клетките DU-145 се засяват при препоръчителна клетъчна плътност от 2 x 10⁴клетки/cm². При тази плътност клетките образуват конфлуентен монослой за почти 4 дни. За засяване клетките се промиват с 1 x фосфатен буферен разтвор и се инкубират с разтвор за пасажиране, Accutase. След 8 до 10 минути инкубация при стайна температура към клетките се добавя свежа културална среда и се центрофугират. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира внимателно и клетките се изсипват в нови културални колби за растеж.
Среда за растеж:: EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) с добавки към средата, т.е. 10% фетално телешко серум (FBS), 2 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3 и EBSS. Средата се подновява 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:: Културите DU-145 се съхраняват в овлажнен инкубатор при 37 °C с 5% CO2.
Съхранение:: Клетките DU-145 се съхраняват във фазата на пари на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер, за да се поддържа жизнеспособността на клетките за по-дълъг период.
Процес на замразяване и среда:: За DU-145 клетки от рак на простатата се препоръчват замразяващи среди CM-1 или CM-ACF. За замразяване на клетките се избира метод на бавно замразяване, при който температурата спада постепенно с 1 °C. Това предпазва клетките от шок и спомага за поддържане на тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:: Замразените епруветки с DU-145 клетки се размразяват бързо във водна баня при 37 °C за 40 до 60 секунди. След това към клетките се добавя културална среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Извлечените клетки се ресуспендират в среда за растеж и се изсипват в колба за отглеждане. Възстановяването след замразяване отнема почти 24 часа.
Ниво на биологична безопасност:: За култивирането на клетъчната линия DU145, независима от андрогенния рецептор, са необходими условия на ниво 1 на биологична безопасност.

Du145 cells

Клетки от рак на простатата DU-145 при 10-кратно и 20-кратно увеличение.

Клетъчна линия DU-145: Предимства и ограничения

Подобно на други клетъчни линии, клетъчната линия DU-145 за рак на простатата има своите предимства и недостатъци. Тези характеристики могат да ви помогнат да решите дали да я използвате във вашите изследвания. Основните предимства и недостатъци на клетките DU-145 са посочени по-долу.

Предимства

Предимствата на клетките DU-145 са:

Туморогенност: DU-145 е агресивна туморогенна клетъчна линия на рак на простатата с умерен метастатичен потенциал. Използва се за разработване на ксенографтен модел DU145 при имунокомпрометирани мишки за изучаване на биологията, развитието и растежа на рака на простатата in vitro и in vivo.
Независимост от андрогенния рецептор: Клетките на простатния рак DU-145 са независими от андрогенните рецептори. Те не разчитат на андрогени за растежа си и не показват реакция на клетъчно и молекулярно ниво при лечение с андрогени. Идеални за изследване на механизмите на хормонално независимия простатен рак.

Ограничения

Ограниченията на клетъчната линия DU-145 са:

Модел in vitro: DU-145 е in vitro клетъчен модел на метастатичен карцином на простатата, така че може да не отразява напълно сложността на първичните тумори на простатата. Освен това, той може да не обхваща всички видове и подвидове рак на простатата поради специфични характеристики като независимостта от андрогенните рецептори.

Приложения за изследвания на DU-145 клетки

Клетъчната линия DU-145 за рак на простатата има широк спектър от приложения в научните изследвания. Тук са изброени няколко обещаващи приложения.

Биология на рака на простатата: DU-145 е подходящ модел за изучаване на биологията на рака на простатата. Изследователите използват тези клетки, за да изследват молекулярните механизми, които водят до развитието, прогресията и метастазирането на рака. Освен това се проучват и генетичните промени, които обикновено се свързват с рака на простатата. Изследване, проведено през 2021 г., проучи клетките DU-145 с цел идентифициране на потенциални биомаркери за ефективни диагностични и терапевтични приложения. Проучването предложи актин гама 1 (ACTG1) като потенциален биомаркер за рак на простатата, тъй като той стимулира пролиферацията на раковите клетки и регулира метастазирането чрез активиране на MAPK/ERK пътя [2].
Скрининг и разработване на лекарства: Клетките на рак на простатата DU-145 се използват широко за тестване на цитотоксичността и ефикасността на потенциални лекарства срещу рак. Това помага на изследователите да идентифицират нови лекарства, да разберат лекарствената резистентност и основните молекулярни механизми. Проучване, проведено през 2022 г., изследва цитотоксичния ефект на смолиста смес, прополис или пчелен лепило, в клетъчните линии на рак на простатата PC-3 и DU-145. Проучването показа инхибиторни ефекти върху растежа на тази естествена субстанция и в двете клетъчни линии и предложи нейния противораков потенциал [3]. През 2019 г. беше проведено друго проучване, което изследваше антипролиферативните ефекти на естественото съединение бетаин в клетките на рак на простатата DU-145. Изследването показа, че бетаинът проявява антипролиферативна активност чрез повишаване на клетъчната смърт, медиирана от оксидативен стрес, и възпаление в клетките DU-145 [4].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300168

5. Научни публикации, посветени на клетките DU-145

По-долу са представени някои научни публикации относно клетъчната линия DU-145.

Концентрационно-зависими ефекти на цинковия сулфат върху клетъчната линия DU-145 на човешки простатен рак: оксидативни, апоптотични, възпалителни и морфологични анализи

Това проучване, публикувано в списанието „Biological Trace Element Research“ през 2020 г., предлага, че цинковият сулфат (ZnSo₄) оказва антипролиферативни ефекти върху клетките DU-145 чрез индуциране на апоптоза, морфологични промени, оксидативно увреждане и възпаление.

Селективна цитотоксична и антиметастатична активност в клетките на рак на простатата DU-145, индуцирана от екстракт от кората на Annona muricata L. и фитохимикал, анонацин

Тази научна статия е публикувана в списанието „BMC Complementary Medicine and Therapies“ през 2020 г. Това проучване изследва цитотоксичния и антиметастатичния потенциал на екстракт от кората на растението Annona muricata L. и неговия биоактивен компонент анонацин в клетъчната линия DU-145.

LncRNA LOXL1‐AS1/miR‐let‐7a‐5p/EGFR-свързаният път регулира резистентността към доксорубицин на DU‐145 клетките на рак на простатата

Тази публикация в IUBMB Life (2019) предлага, че взаимодействието на дългия некодиращ РНК LOXL1-AS1 с miR-let-7a-5p и EGFR пътя регулира резистентността към доксорубицин в DU-145 клетките на рак на простатата.

Намаляването на експресията на DDR1 индуцира апоптоза и инхибира EMT чрез фосфорилиране на Pyk2/MKK7 в клетъчните линии DU-145 и Lncap-FGC на рак на простатата

Тази статия в Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) посочва, че понижената експресия на гена Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) причинява смърт на DU-145 клетки и инхибира епителиално-мезенхимния преход (EMT) чрез активиране на Pyk2/MKK7 пътя.

Кастицин инхибира миграцията и инвазията на клетките на човешкия простатен рак DU 145 чрез сигналните пътища Ras/Akt/NF-κB

Това проучване, публикувано в Journal of Food Biochemistry (2019), предлага, че кастицинът, полиметоксифлавон, инхибира миграцията и инвазията на DU-145 клетки чрез регулиране на Ras/Akt/NF‐κB сигнализацията.

Ресурси за клетъчната линия DU-145: протоколи, видеоклипове и др.

Налице са много онлайн ресурси за клетъчната линия DU-145 на рак на простатата. В тази секция ще бъдат споменати няколко ресурса, обясняващи работата, поддържането и протокола за трансфекция на тези клетки:

Трансфекция на DU-145: Това видеоуроци е постъпково ръководство за изучаване на протокола за трансфекция на DU-145 клетки.

Протоколът за клетъчна култура DU-145 е споменат тук.

Субкултивиране на DU-145: Този линк ще ви помогне да научите протокола за субкултивиране на DU-145 клетки.
Клетки DU-145: Този уебсайт съдържа много полезна информация за клетъчната линия DU-145, включително среда DU145, протокол за субкултивиране и работа с пролиферативни и криоконсервирани култури.

Източници

Lima, A.R., et al., Разграничаване между екзометаболома на нормални и ракови клетки на човешката простата чрез GC-MS. Научни доклади, 2018. 8(1): стр. 5539.
Xiao, L., et al., Потискането на експресията на ACTG1 индуцира епително-мезенхимна трансформация при рак на простатата чрез MAPK/ERK сигналния път. ДНК и клетъчна биология, 2021. 40(11): стр. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Противоракови ефекти на екстракти от прополис, получени чрез метода на студена сепарация, върху клетъчните линии на рак на простатата PC-3 и DU-145. Molecules, 2022. 27(23): стр. 8245.
Kar, F., et al., Бетаинът потиска клетъчната пролиферация чрез увеличаване на апоптозата, медиирана от оксидативен стрес, и възпалението в клетъчната линия DU-145 на човешки рак на простатата. Клетъчен стрес и шаперони, 2019. 24: стр. 871-881.