Клетки DLD-1: Приложения и прозрения за DLD-1 клетките в изследванията на колоректалния рак

DLD-1 е човешка клетъчна линия за колоректален карцином, която често се използва при изследвания на рака. Тя е ценен инструмент за изследване на различни аспекти на рака на дебелото черво, включително развитието на тумора, прогресията, основните молекулярни механизми и отговора към терапевтични средства. По този начин DLD-1 е изключителен фактор за разбиране на заболяването и разработване на потенциални стратегии за лечение.

В тази статия ще намерите важна информация за клетъчната линия DLD-1, която трябва да знаете, преди да работите с нея. Тя ще включва:

Общи характеристики и произход на клетките DLD-1
Информация за култивирането на клетъчната линия DLD-1
Клетъчна линия DLD-1: Предимства и ограничения
Изследователски приложения на клетъчната линия DLD-1
Научни публикации за DLD-1 клетки
Ресурси за клетъчна линия DLD-1: Протоколи, видеоклипове и др

1. Общи характеристики и произход на DLD-1 клетки

Преди да започне работа с клетъчна линия, първото съображение на изследователя е нейният произход и общи характеристики. Този раздел от статията представлява подробно въведение в клетъчната линия DLD-1. В нея ще бъдат разгледани следните често задавани въпроси: Какво представляват клетките DLD-1? Какво представлява клетъчната линия DLD-1 за рак? Какви са мутациите на клетъчната линия DLD-1? Какъв е размерът на DLD-1 клетката? Каква е морфологията на DLD-1 клетките?

DLD-1, клетъчна линия за рак на дебелото черво, произхожда от дебелото черво на 67-годишен пациент с колоректален аденокарцином. Тя е изолирана от Д.Л. Декстър и колегите му през 1977-1979 г. Тази клетъчна линия има същия произход като клетъчните линии HCT-8, HCT-15 и HRT-18.
Подобно на колоректалния рак, клетките DLD-1 притежават фенотип на микросателитна нестабилност [1].
Мутациите в DLD-1 включват KRAS, P53, BRAF, BRCA1 и BRCA2. Поради статуса на DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 и DLD-1 KRAS мутация, тези клетки се считат за идеални за изследвания на рака.
Тези клетки притежават епителиална морфология.
Размерът на клетъчната линия DLD-1 е приблизително 15 µm.
Човешката клетъчна линия за колоректален рак DLD-1 притежава псевдодиплоиден кариотип. Около 86 % от клетките притежават модален хромозомен номер 46. Въпреки това полиплоидността може да съществува и при 17,1 % от клетъчната популация.

3D визуализация на компютърна томография или компютърна томография на дебелото черво, показана на екрана, за диагностициране на рак на дебелото черво, рак на дебелото черво и колоректален рак.

2.информация за култивирането на клетъчната линия DLD-1

Преди да култивирате която и да е клетъчна линия, трябва да знаете основните изисквания за нейното култивиране. В този раздел са посочени важните моменти, които трябва да научите, преди да започнете работа с клетъчната линия DLD-1. Това включва: Какво е времето за удвояване на DLD-1? Каква е култивационната среда за DLD-1? Каква е гъстотата на засяване на клетките DLD-1? Как се култивират клетки DLD-1?

Ключови моменти при култивирането на DLD-1 клетки

Време на удвояване:	Времето за удвояване на DLD-1 е приблизително 15 часа.
Прилепнали или в суспензия:	DLD-1 е адхезивна клетъчна линия на човешки рак на дебелото черво. Клетките растат в монослоеве.
Плътност на посявката:	Клетките DLD-1 се посяват с плътност от 1 до 2 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2}. Адхезивните клетки се промиват с 1x фосфатен буферен разтвор (PBS) и се инкубират с разтвор за пасиране (Accutase) при стайна температура. След инкубация от 8 до 10 минути отделените клетки се добавят към хранителната среда и се центрофугират. След това клетъчната пелета внимателно се ресуспендира и клетките се преливат в нови съдове за култивиране, съдържащи хранителна среда.
Растежна среда:	За култивиране на DLD-1 клетки се използва RPMI 1640 с добавки към средата, включващи 10% фетален говежди серум FBS, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3. Средата трябва да се подменя 2-3 пъти седмично.
Условия за растеж:	Културите DLD-1 се поддържат в овлажнен инкубатор с температура 37 °C и 5 % CO2.
Съхранение:	Клетките DLD-1 се съхраняват в парната фаза на течен азот или в електрически фризер за ултраниски температури (при температура под -150 °C).
Процес на замразяване и среда:	За замразяването на клетките DLD-1 може да се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF. Винаги се препоръчва бавен процес на замразяване, позволяващ постепенно понижаване на температурата с 1 °C, като по този начин се предотвратява шок за клетките и се защитава тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:	Замразените клетки се размразяват на водна баня, предварително настроена на температура 37 °C, за 40 до 60 секунди, докато остане малка ледена бучка. След това клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират. Тази стъпка е необходима, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда от клетките. Събраните клетки се ресуспендират в среда за растеж и се разпределят в колбата за растеж.
Ниво на биологична безопасност:	Клетъчната линия DLD-1 се поддържа в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.

Клетките DLD-1 се наблюдават при 10-кратно и 20-кратно увеличение, което разкрива характерната им епителна морфология.

3.клетъчна линия DLD-1: Предимства и ограничения

В този раздел на статията ще разгледаме предимствата и ограниченията на клетъчната линия за рак на дебелото черво DLD-1.

Предимства

Основните предимства на клетъчната линия DLD-1 са:

Модел на колоректален рак

Клетките DLD-1 притежават мутации, които често се срещат при пациенти с колоректален рак, като DLD-1 KRAS мутация, DLD-1 BRCA и DLD-1 BRCA2. Това ги прави клинично подходящ клетъчен модел за изучаване на това заболяване.

Туморогенна клетъчна линия

Клетките DLD-1 са туморогенни. Те могат да предизвикат тумори при инжектиране в голи мишки. Поради това изследователите използват тези клетки за разработване на ксенографт модели на тумори, които помагат за изследване на образуването, развитието и прогресията на туморите in vivo.

Ограничения

Ограниченията, свързани с клетките DLD-1, са следните:

Хетерогенност

Клетъчните популации на DLD-1 рак на дебелото черво проявяват генетична и фенотипна хетерогенност. Това може да повлияе на обобщаването на резултатите от изследванията.

4.изследователски приложения на клетъчната линия DLD-1

Клетъчната линия DLD-1 предлага редица приложения в изследванията на рака. В този раздел са разгледани някои важни приложения.

Изследване на рака: Клетките DLD-1 служат като ценен in vitro модел за разбиране на молекулярните механизми, лежащи в основата на растежа, развитието и прогресията на колоректалния рак. Освен това те се използват за изучаване на генната експресия, сигналните пътища и влиянието на специфични генетични мутации върху поведението на раковите клетки. В изследванията, проведени през 2022 г., се наблюдава, че сигналната каскада PI3K/Akt/YAP регулира миграцията и инвазията на клетъчната линия на колоректалния рак DLD-1 [2].
Разработване на лекарства: Изследователите използват клетъчната линия DLD-1, за да тестват ефективността на противоракови лекарства и да оценят потенциала им за лечение на рак на дебелото черво. Това подпомага разработването на лекарства и ефективната борба със заболяването. В проучване, проведено през 2022 г., е използвана клетъчната линия за рак DLD-1 и е изследвана противораковата активност на силициеви фталоцианини - химически синтезирани съединения. Резултатите от изследването показват, че тези съединения са мощни противоракови агенти [3]. Интересно е, че в друго изследване е установен противораковият потенциал на протеин P8, получен от пробиотик, като са използвани клетки DLD-1 [4].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300220

5.научни публикации за клетки DLD-1

В този раздел ще бъдат представени няколко интересни и често цитирани публикации, в които е използвана клетъчната линия DLD-1 за карцином на дебелото черво.

Флавоноидният гликозид диосмин индуцира апоптоза и спиране на клетъчния цикъл в клетъчната линия DLD-1 на човешкия рак на дебелото черво

Тази публикация е в списанието Journal of Biologically Active Products from Nature (2022 г.). Проучването установява, че диосминът, флавоноид, предизвиква клетъчна смърт в клетките DLD-1 и също така причинява спиране на клетъчния цикъл; по този начин той може да бъде потенциално противораково средство.

Бромелаинът ефективно потиска Kras-мутантния колоректален рак чрез стимулиране на фероптозата

В това проучване в Animal Cells and Systems (2018 г.) се предлага ензимът бромелаин да потиска мутацията KRAS в DLD-1 и да оказва мощно цитотоксично действие.

Бергаптенът предизвиква G1 арест и проапоптотична каскада в клетките на колоректалния рак, като се свързва с оста p53/p21/PTEN

Тази научна статия е публикувана през 2019 г. в списание "Environmental Toxicology". В проучването са изследвани антитуморните ефекти на естествено съединение, Bergapten, като е използвана клетъчна линия на коректен рак DLD-1.

Екологосъобразно производство на композит от нанокуркумин/наножелезен оксид: Повишена противоракова активност in vitro срещу клетъчни линии DLD-1

Това проучване в Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) установява, че нанокомпозитите куркумин/железен оксид са високо ефективни срещу клетките на колоректален рак DLD-1.

Епибрасинолид активира AKT, за да задейства автофагия с полиаминов метаболизъм в клетъчни линии на рак на дебелото черво SW480 и DLD-1

Тази научна статия е публикувана през 2020 г. в Turkish Journal of Biology. В изследването се предлага, че природният продукт, епибрасинолид, медииран от активирането на AKT в клетките DLD-1, стимулира автофагия, свързана с полиамините.

6.ресурси за клетъчната линия DLD-1: Протоколи, видеоклипове и др

По-долу са изброени няколко ресурса за DLD-1 клетки:

DLD-1 трансфекция: Този видео урок е изчерпателно ръководство за протокола за in vitro трансфекция на DLD-1.
DLD-1 клетки: Този научен документ описва накратко изискванията за култивиране на DLD-1 клетки, включително среди и условия за култивиране. Освен това тя може да ви помогне да научите протокола за трансфекция, използван за DLD-1 клетки.

Следващите връзки съдържат протокола за култивиране на DLD-1, клетки от рак на дебелото черво, получени от човека.

Клетъчна линия DLD-1: Този уебсайт предоставя основна информация за клетъчната линия DLD-1. Той ще ви помогне да научите различни протоколи за култивиране на DLD-1 клетки, включително субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролифериращи култури.

Препратки

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotic genes as new targets for single and combinatorial treatments with resveratrol and curcumin in colorectal cancer (Гаврилас, Л.И. и др. , Проапоптотични гени като нови цели за единично и комбинирано лечение с ресвератрол и куркумин при колоректален рак). Food & function, 2019 г. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP signaling promotes migration and invasion ofDLD-1colorectal cancer cells (Сигнализацията PI3K/Akt/YAP подпомага миграцията и инвазиятана клетките на колоректалния рак DLD-1). Oncology Letters, 2022 г. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1) (Противоракова активност на нови силициеви фталоцианини срещу клетъчна линия на колоректален аденокарцином (DLD-1) ). New Journal of Chemistry, 2022 г. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1 (Противоракова роля на пробиотично-произведен протеин P8 в клетъчна линия на колоректален рак DLD-1 ). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.