Клетки BEAS-2B – Клетки BEAS-2B в изследванията на респираторните заболявания: изчерпателен наръчник
BEAS-2B е безсмъртна и нетуморогенна клетъчна линия от човешки белодробен епител. Тя е широко използван in vitro модел за изучаване на реакцията на белодробните клетки към различни канцерогени и токсични вещества. Освен това, тя е ценен изследователски инструмент за изучаване на различни респираторни инфекции и заболявания, като COVID-19 и белодробни карциноми.
- Среда за растеж
- За култивиране на белодробната клетъчна линия BEAS-2B се използва среда BEGM (среда за растеж на бронхиални епителни клетки), съдържаща 10% фетално телешко серум. Средата трябва да се сменя на всеки 2 до 3 дни.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на популацията на BEAS-2B е приблизително 26 часа.
- Тип растеж
- BEAS-2B е епителиоподобна адхезивна клетъчна линия.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Налична от
- Cytion — Поръчайте BEAS-2B
В тази статия ще обсъдим почти всички аспекти на белодробната клетъчна линия BEAS-2B, включително нейния произход, информация за клетъчната култура, предимства, недостатъци и приложения в научните изследвания. По-конкретно, ще разгледаме:
- Произход и общи характеристики на клетките BEAS-2B
- Клетъчна линия BEAS-2B: Информация за култивирането
- Предимства и недостатъци на клетките BEAS-2B
- Приложения на клетъчната линия BEAS-2B в научните изследвания
- Клетки BEAS-2B: Научни публикации
- Протоколи за клетъчна култура
1. Произход и общи характеристики на клетките BEAS-2B
Първото нещо, което търсите в една клетъчна линия, е нейният произход и общите й характеристики. Тук ще научите основните характеристики и произхода на човешките бронхиални епителни клетки BEAS-2B. Ще изучавате: Какво представлява клетъчната линия BEAS-2B? Какъв тип клетки са Beas 2B? Какъв е произходът на клетките BEAS-2B?
- BEAS-2B, клетъчната линия на бронхиалния епител, е разработена от неракова човешка белодробна тъкан през 1988 г. от групата на Къртис С. Харис [1].
- Клетките BEAS-2B притежават епителиоподобна морфология.
HBEpC срещу BEAS-2B
HBEpC са първични човешки бронхиални епителни клетки. Подобно на BEAS-2B, те са нормални човешки бронхиални епителни клетки. Въпреки това, те имат ограничен живот в сравнение с безсмъртните BEAS-2B. И двете клетъчни линии могат да се използват за изучаване на белодробната биология, токсикологията и моделирането на заболявания.
Клетъчна линия BEAS-2B: Информация за култивиране
Информацията за култивиране на клетъчна линия може да улесни работата ви с нея. В тази част от статията ще научите всички основни неща за култивирането на белодробната клетъчна линия BEAS-2B. По-конкретно ще разберем: Какво е времето за удвояване на BEAS-2B? Какво представлява средата за BEAS-2B? Клетъчната линия BEAS-2B е ли адхезивна? Как се култивират клетките BEAS-2B?
Ключови моменти при култивирането на клетки BEAS-2B
Време за удвояване:
Времето за удвояване на популацията на BEAS-2B е приблизително 26 часа.
Адхезивна или в суспензия:
BEAS-2B е епителиоподобна адхезивна клетъчна линия.
Клетъчна плътност:
Препоръчителната клетъчна плътност за клетъчната линия BEAS-2B е 1 до 2 × 104 клетки/cm2. Адхезивните клетки BEAS-2B се изплакват с фосфатен буферен разтвор и се инкубират с Accutase при стайна температура за няколко минути. След като клетките се дисоциират, се добавя свежа среда и клетките се събират чрез центрофугиране. Събраните клетки се ресуспендират внимателно и се изсипват в нова колба за растеж.
Среда за растеж:
За култивиране на белодробната клетъчна линия BEAS-2B се използва среда BEGM (среда за растеж на бронхиални епителни клетки), съдържаща 10% фетално телешко серум. Средата трябва да се сменя на всеки 2 до 3 дни.
Условия за отглеждане:
Културата BEAS-2B се поддържа при 37 °C в овлажнен инкубатор с непрекъснато подаване на 5% CO2.
Съхранение:
Замразените епруветки с BEAS-2B клетки могат да се съхраняват във фазата на пари на течен азот или в електрически фризер при температура под -150 °C.
Процес на замразяване и среда:
За замразяването на белодробната клетъчна линия BEAS-2B се използват замразяващи среди CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват, като се допуска понижение на температурата само с 1 °C на минута, за да се защити жизнеспособността на клетките. Този тип метод се нарича бавно замразяване.
Процес на размразяване:
Замразените или криоконсервирани култури BEAS-2B се размразяват във водна баня при 37 °C, съдържаща антимикробен агент, за 40 до 60 секунди. След това към клетките се добавя среда и те могат да се култивират директно в нови колби или да се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. След това събраните клетки се ресуспендират и култивират. В първия случай средата за замразяване се отстранява след 24 часа.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с култури BEAS-2B са необходими лаборатории с ниво на биологична безопасност 1.
Предимства и недостатъци на клетките BEAS-2B
Подобно на други клетъчни линии, клетките BEAS-2B също имат своите предимства и недостатъци. Някои от тях са разгледани по-долу.
Предимства
Предимствата на клетъчната линия BEAS-2B включват:
Имунизирана клетъчна линия
Клетъчната линия BEAS-2B от човешки бронхиален епител е безсмъртна. Поради това тя продължава да расте, без да навлиза в стадия на стареене. Тази характеристика на клетките BEAS-2B елиминира необходимостта от повтарящо се извличане на първични човешки белодробни епителни клетки с по-кратък жизнен цикъл.
Лесна за култивиране
Културите BEAS-2B се поддържат лесно. Клетките растат и се размножават безпроблемно при стандартни условия на култивиране. Няма специфични или сложни изисквания за култивиране на клетките.
Човешки произход
Клетъчната линия BEAS-2B е от човешки произход и има клинична приложимост. По този начин тя представлява идеален in vitro модел за изучаване на реакциите, поведението и процесите на епителните клетки на човешките дихателни пътища.
Недостатъци
Недостатъците, свързани с белодробната клетъчна линия BEAS-2B, са:
Трансформирани човешки белодробни епителни клетки
Клетките BEAS-2B са трансформирани с вируса Ad12-SV40 2B, което може да промени тяхното поведение и реакции в сравнение с оригиналните бронхиални епителни клетки, получени от човешка белодробна тъкан.
Приложения на клетъчната линия BEAS-2B в научните изследвания
Клетъчната линия BEAS-2B предлага няколко приложения в биомедицинските изследвания. Някои често срещани приложения на клетките BEAS-2B са:
- Токсикология: Клетките BEAS-2B често се използват за изследване на генотоксичността и цитотоксичността на различни токсини, замърсители на околната среда и химикали. Изследователите използват тази бронхиална епителна клетъчна линия, за да оценят вредните ефекти на тези вещества върху здравето на белите дробове. Освен това, те изучават и основните молекулярни механизми. Например, проучване, проведено през 2021 г., оцени токсичността на кадмиевия метал в клетъчната линия BEAS-2B. Резултатите от изследването разкриха, че кадмият предизвиква клетъчна смърт и увреждане на митохондриите в белодробната клетъчна линия BEAS-2B чрез модулиране на MAPK сигналния път [2]. Друго проучване използва клетъчната линия BEAS-2B за оценка на токсичността на наночастици от цинков оксид при оксидативен стрес [3].
- Моделиране на респираторни заболявания: Клетъчната линия BEAS-2B е отличен изследователски инструмент и in vitro модел за изучаване на респираторни заболявания като хронична обструктивна белодробна болест (ХОББ), астма, рак на белия дроб и вирусни инфекции като SARS-CoV-2. Изследователите обикновено предизвикват състояния, свързани с болестта, в клетъчната линия BEAS-2B и изучават основните клетъчни и молекулярни механизми. Това помага за идентифициране на потенциални лекарствени мишени и разработване на персонализирани терапии. Изследване, проведено през 2022 г., използва клетъчната линия BEAS-2B и проучи ролята на естрогена и неговите рецептори при инфекция с SARS-CoV-2. Резултатите показаха, че по-високата експресия на естрогенния рецептор GPER1 намалява вирусната натовареност на BEAS-2B SARS-CoV-2. Следователно той може да участва във вирусната инфекция или репликацията на SARS-CoV-2 [4].
5. Клетки BEAS-2B: Научни публикации
По-долу са представени някои интересни и най-цитирани научни изследвания, в които се използват BEAS-2B клетки.
Токсичност на графена в нормални човешки белодробни клетки (BEAS-2B)
Това проучване беше публикувано през 2011 г. в списанието „Journal of Biomedical Nanotechnology“. Изследването предполага, че графитният оксид предизвиква апоптоза и цитотоксичност в нормалната бронхиална епителна клетъчна линия (BEAS-2B).
Тази научна статия беше публикувана в списанието „Journal of Microbiology and Biotechnology“ (2014 г.). Това проучване изследва терапевтичния потенциал на нарингенина, флавоноид, в клетъчната линия BEAS-2B. Резултатите показват, че нарингенинът предпазва белодробните клетки BEAS-2B от токсичност, предизвикана от паракуат, или от оксидативно увреждане.
Това проучване беше публикувано в списанието „Inhalation Toxicology“ (2011 г.). В него изследователите оцениха токсичния ефект на магнитни наночастици с аморфни силициеви покрития в клетъчната линия BEAS-2B in vitro.
В тази статия в Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) се предлага, че урсодеоксихолиевата киселина може да възпрепятства анормалната миграция на епителните клетки на дихателните пътища и да предотврати увреждането, причинено от взаимодействието между спайк протеина на SARS-CoV-2 и ACE-2. По този начин тя може да спомогне за възстановяването на базалния епителен слой.
Ефекти на радона върху индуцираната от miR-34a апоптоза в човешки бронхиални епителни клетки BEAS-2B
Това проучване е публикувано през 2019 г. в списанието „Journal of Toxicology and Environmental Health“. Резултатите от изследването сочат, че хроничното излагане на радон може да способства за канцерогенезата в човешките бронхиални епителни клетки (BEAS-2B) чрез активиране на микроРНК-34a.
Протоколи за клетъчна култура
Протоколът за клетъчна култура за BEAS-2B клетки е описан тук.
- Субкултивиране на BEAS-2B: Този документ ще ви помогне да научите повече за средите за BEAS-2B и процедурите за субкултивиране.
- Клетъчна линия BEAS-2B: Този уебсайт съдържа цялата основна информация, необходима за започване на работа с клетъчната линия BEAS-2B, включително нейните среди и протоколи за работа с пролифериращи и криоконсервирани култури.
Източници
- Han, X., et al., Човешките белодробни епителни BEAS-2B клетки проявяват характеристики на мезенхимни стволови клетки. PLoS One, 2020. 15(1): стр. e0227174.
- Cao, X., et al., Кадмият предизвиква апоптоза на BEAS-2B клетки и увреждане на митохондриите чрез MAPK сигналния път. Chemosphere, 2021. 263: стр. 128346.
- Heng, B.C., et al., Токсичността на наночастиците от цинков оксид (ZnO) върху човешките бронхиални епителни клетки (BEAS-2B) се усилва от оксидативния стрес. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): стр. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Свръхекспресията на естрогенния рецептор GPER1 и лечението с G1 намаляват инфекцията с SARS-CoV-2 в бронхиалните клетки BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: стр. 111775.