Клетки BEAS-2B - Клетки BEAS-2B в изследванията на респираторни заболявания: Изчерпателно ръководство

BEAS-2B е имортализирана и нетуморогенна човешка белодробна епителна клетъчна линия. Тя е широко използван in vitro модел за изследване на реакцията на белодробните клетки към различни канцерогени и токсиканти. Освен това тя е ценен изследователски инструмент за изучаване на различни респираторни инфекции и заболявания, като COVID-19 и белодробни карциноми.

В тази статия ще обсъдим почти всички аспекти на белодробната клетъчна линия BEAS-2B, включително нейния произход, информация за клетъчните култури, предимства, недостатъци и приложения в научните изследвания. По-специално, ще разгледаме:

  1. Произход и общи характеристики на клетките BEAS-2B
  2. Клетъчна линия BEAS-2B: Информация за култивирането
  3. Предимства и недостатъци на клетъчната линия BEAS-2B
  4. Приложения на клетъчната линия BEAS-2B в научните изследвания
  5. BEAS-2B клетки: Изследователски публикации
  6. Протоколи за клетъчно култивиране

1. Произход и общи характеристики на клетките BEAS-2B

Първото нещо, което се търси в една клетъчна линия, е нейният произход и общи характеристики. Тук ще се запознаете с основните характеристики и произхода на човешките бронхиални епителни клетки BEAS-2B. Ще проучите: Какво представлява белодробната клетъчна линия BEAS-2B? Какъв тип клетки са Beas 2B? Какъв е произходът на клетките BEAS-2B?

  • BEAS-2B, клетъчна линия на бронхиален епител, е разработена от неракова човешка белодробна тъкан през 1988 г. от групата на Къртис К. Харис [1].
  • Клетките BEAS-2B притежават епителиална морфология.

HBEpC срещу BEAS-2B

HBEpC са първични човешки бронхиални епителни клетки. Подобно на BEAS-2B, те са нормални човешки бронхиални епителни клетки. Въпреки това те имат ограничена продължителност на живота в сравнение с имортализираните BEAS-2B. И двете клетъчни линии могат да се използват за изследване на белодробната биология, токсикологията и моделирането на заболявания.

Макроизображения на тъкан от човешки бронхиоли при 200-кратно увеличение на светъл фон. Изследване на анатомията на човека в биологичната лаборатория.

2.клетъчна линия BEAS-2B: Информация за култивиране

Информацията за култивиране от клетъчна линия може да улесни работата ви с нея. В този раздел на статията ще научите всички основни положения за култивиране на клетъчната линия BEAS-2B за бял дроб. По-специално, ще знаем: Какво е времето за удвояване на BEAS-2B? Какво представлява средата BEAS-2B? Адхезивна ли е клетъчната линия BEAS-2B? Как се култивират клетките BEAS-2B?

Ключови моменти при култивирането на клетките BEAS-2B

Време за удвояване:

Времето за удвояване на BEAS-2B популацията е приблизително 26 часа.

Прилепнали или в суспензия:

BEAS-2B е епителиално подобна адхезивна клетъчна линия.

Клетъчна плътност:

Препоръчителната клетъчна плътност за клетъчната линия BEAS-2B е от 1 до 2 ×104 клетки/cm2. Адхезивните клетки BEAS-2B се изплакват с фосфатен буферен физиологичен разтвор и се инкубират с Accutase при стайна температура за няколко минути. След като клетките се дисоциират, се добавя свежа среда и клетките се събират чрез центрофугиране. Събраните клетки се ресуспендират внимателно и се изсипват в нова колба за растеж.

Растежна среда:

За култивирането на белодробната клетъчна линия BEAS-2B се използва среда BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), съдържаща 10 % фетален говежди серум. Средата трябва да се подменя на всеки 2 до 3 дни.

Условия на растеж:

Културата BEAS-2B се поддържа при 37 °C в овлажнен инкубатор с непрекъснато подаване на 5 % CO2.

Съхранение:

Замразените флакони с BEAS-2B клетки могат да се съхраняват в парната фаза на течен азот или в електрически фризер при температура под -150 °C.

Процес на замразяване и среда:

За замразяване на белодробната клетъчна линия BEAS-2B се използват среди за замразяване CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват, като се допуска понижаване на температурата само с 1 °C в минута, за да се защити жизнеспособността на клетките. Този тип метод се нарича бавно замразяване.

Процес на размразяване:

Замразените или криоконсервирани култури BEAS-2B се размразяват на водна баня с температура 37 °C, съдържаща антимикробен агент, за 40 до 60 секунди. След това клетките се добавят към средата и могат да се култивират директно в нови колби или да се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. След това събраните клетки се ресуспендират и се култивират. В първия случай замразяващата среда се отстранява след 24 часа.

Ниво на биологична безопасност:

За работа с култури от BEAS-2B се изискват лаборатории от ниво на биологична безопасност 1.

Клетки BEAS-2B, растящи заедно в адхерентни клъстери при 20x и 10x увеличение.

3.предимства и недостатъци на клетките BEAS-2B

Подобно на други клетъчни линии, клетките BEAS-2B също са свързани с някои плюсове и минуси. Някои от тях са разгледани по-долу.

Предимства

Предимствата на клетъчната линия BEAS-2B включват:

Имортализирана клетъчна линия

BEAS-2B човешка бронхиална епителна клетъчна линия е имортализирана. Следователно тя продължава да расте, без да навлиза в стареене. Тази клетъчна характеристика на BEAS-2B елиминира необходимостта от многократно извличане на първични човешки белодробни епителни клетки с по-кратък живот.

Лесни за култивиране

Културите BEAS-2B се поддържат лесно. Клетките растат и се размножават без усилие при стандартни условия на култивиране. Не са необходими суетни или сложни изисквания за култивиране на клетките.

Човешки произход

Клетъчната линия BEAS-2B има човешки произход и значение. По този начин тя е идеален in vitro модел за изследване на реакциите, поведението и процесите на човешките епителни клетки на дихателните пътища.

Недостатъци

Недостатъците, свързани с белодробната клетъчна линия BEAS-2B, са следните:

Трансформирани човешки белодробни епителни клетки

Клетките BEAS-2B са трансформирани с вируса Ad12-SV40 2B, което може да промени поведението и реакциите им в сравнение с оригиналните бронхиални епителни клетки, получени от човешка белодробна тъкан.

4.приложения на клетъчната линия BEAS-2B в научните изследвания

Клетъчната линия BEAS-2B предлага няколко приложения в биомедицинските изследвания. Някои често срещани приложения на BEAS-2B клетките са:

  • Токсикология: Клетките BEAS-2B често се използват за изследване на генотоксичността и цитотоксичността на различни токсини, замърсители на околната среда и химикали. Изследователите използват тази бронхиална епителна клетъчна линия, за да оценят вредното въздействие на тези вещества върху здравето на белите дробове. Освен това те изучават и основните молекулярни механизми. Така например в проучване, проведено през 2021 г., се оценява токсичността на металния кадмий в клетъчната линия BEAS-2B. Резултатите от изследването разкриват, че кадмият предизвиква клетъчна смърт и митохондриално увреждане в белодробната клетъчна линия BEAS-2B чрез модулиране на сигналния път MAPK [2]. В друго изследване е използвана клетъчната линия BEAS-2B за оценка на токсичността на наночастици от цинков оксид при оксидативен стрес [3].
  • Моделиране на респираторни заболявания: Клетъчната линия BEAS-2B е чудесен изследователски инструмент и in vitro модел за изучаване на респираторни заболявания като хронична обструктивна белодробна болест (ХОББ), астма, рак на белия дроб и вирусни инфекции като SARS-CoV-2. Изследователите са склонни да предизвикват свързани с болестта състояния в клетъчната линия BEAS-2B и да изучават основните клетъчни и молекулярни механизми. Това помага да се идентифицират потенциални цели за лекарства и да се разработят персонализирани терапии. Изследванията, проведени през 2022 г., използват клетъчната линия BEAS-2B и изучават ролята на естрогена и неговите рецептори при инфекция с SARS-CoV-2. Резултатите разкриват, че по-високата експресия на естрогенния рецептор GPER1 намалява вирусния товар на BEAS-2B SARS-CoV-2. Следователно той може да участва във вирусната инфекция или репликацията на SARS-CoV-2 [4].

5.bEAS-2B клетки: Научни публикации

По-долу са представени някои интересни и най-цитирани научни изследвания, в които участват клетки BEAS-2B.

Токсичност на графена при нормални човешки белодробни клетки (BEAS-2B)

Това проучване е публикувано през 2011 г. в Journal of Biomedical Nanotechnology. В изследването се предлага графитният оксид да предизвиква апоптоза и цитотоксичност в нормална бронхиална епителна клетъчна линия (BEAS-2B).

Нарингенинът оказва цитопротективен ефект срещу индуцираната от паракват токсичност в човешки бронхиални епителни клетки BEAS-2B чрез активиране на NRF2

Тази научна статия е публикувана в Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Това проучване изследва терапевтичния потенциал на нарингенина, флавоноид, в клетъчната линия BEAS-2B. Резултатите показват, че нарингенинът предпазва белодробните клетки BEAS-2B от токсичност, предизвикана от паракват, или от оксидативно увреждане.

Покрития от аморфен силициев диоксид върху магнитни наночастици повишават стабилността и намаляват токсичността за in vitro клетките BEAS-2B

Това проучване е публикувано в Inhalation Toxicology (2011 г.). В него изследователите оценяват токсичния ефект на магнитни наночастици с покрития от аморфен силициев диоксид при клетъчната линия BEAS-2B in vitro.

Урзодезоксихолева киселина подобрява клетъчната миграция, забавена от SARS-CoV-2 шиповия протеин в човешки бронхиални епителни клетки BEAS-2B

В тази статия в Biomedicine & Pharmacotherapy (2022 г.) се предлага, че урсодезоксихоловата киселина може да възпрепятства ненормалната миграция на епителните клетки на дихателните пътища и да предотврати увреждането, причинено от взаимодействието на SARS-CoV-2 spike protein и ACE-2. По този начин тя може да помогне за възстановяването на епителния базален слой.

Влияние на радон върху апоптозата, предизвикана от miR-34a, в човешки бронхиални епителни клетки BEAS-2B

Това проучване е публикувано през 2019 г. в Journal of Toxicology and Environmental Health. Резултатите от изследването гласят, че хроничното облъчване с радон може да насърчи канцерогенезата в човешки бронхиални епителни клетки (BEAS-2B) чрез активиране на микроРНК-34а.

6.протоколи за клетъчни култури

Протоколът за клетъчно култивиране на клетките BEAS-2B е посочен тук.

  • Подкултивиране на BEAS-2B: Този документ ще ви помогне да научите повече за хранителните среди и процедурите за субкултивиране на BEAS-2B.
  • Клетъчна линия BEAS-2B: Този уебсайт съдържа цялата основна информация, която ви е необходима, за да започнете работа с клетъчната линия BEAS-2B, включително нейните среди и протоколи за работа с пролифериращи и криоконсервирани култури.

Препратки

  1. Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells (Човешки белодробни епителни клетки BEAS-2B проявяват характеристики на мезенхимни стволови клетки). PLoS One, 2020 г. 15(1): p. e0227174.
  2. Cao, X., et al., Cadmium induced BEAS-2B cells apoptosis and mitochondria damage via MAPK signaling pathway (Кадмий предизвиква апоптоза и увреждане на митохондриите чрез MAPK сигнален път). Chemosphere, 2021 г. 263: p. 128346.
  3. Heng, B.C., et al., Toxicity of zinc oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Food and Chemical Toxicology, 2010 г. 48(6): p. 1762-1766.
  4. Costa, A.J., et al., Свръхекспресия на естрогенния рецептор GPER1 и третиране с G1 намалява SARS-CoV-2 инфекцията в бронхиални клетки BEAS-2B. Молекулярна и клетъчна ендокринология, 2022 г. 558: p. 111775.

Установихме, че се намирате в друга държава или използвате друг език на браузъра, различен от избрания в момента. Искате ли да приемете предложените настройки?

Затвори