Клетки B16 - Основно ръководство за меланомни клетки B16 в онкологичните изследвания

B16 е клетъчна линия за рак на кожата (меланом) от миши произход. Тази клетъчна линия е ефективен in vitro модел за изследване на човешкия рак на кожата. Тя често се използва за изследване на образуването на солидни тумори и метастази от ракови клетки.

Тази статия ще ви помогне да разберете основите на меланомната клетъчна линия В16. По-конкретно, тя ще разгледа следното:

1.общи характеристики и произход на клетъчната линия В16

В този раздел на статията ще бъдат разгледани характерните особености на меланомната клетъчна линия В16. Ще научите отговорите на следните често задавани въпроси. Като например: Какво представлява клетъчната линия В16 за ракови заболявания? Откъде произхождат клетките В16? Какъв е размерът на клетките В16?

Клетъчната линия В16 е създадена през 1954 г. Тези клетки са получени от мишки C57BL/6J, които спонтанно са получили тумор в кожата в лабораториите "Джаксън" в Мейн.
Това са меланин-продуциращи епителни клетки, които имат способността да метастазират в далака, черния дроб и белите дробове.
Клетките на меланома В16 растат като монослоеве и показват епителиална и вретеновидна клетъчна морфология.
Размерът на клетъчната линия B16 е приблизително 15,4 μm.
Съществуват различни подклонове на клетките B16, включително B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 и B16F10. Тези подлинии се различават от изходните клетки B16 и запазват някои специфични характеристики. Например, те се различават по морфология, размер на клетките и други свойства. B16F10 има висока метастатична способност в белия дроб, а B164A5 е най-агресивната клетъчна линия за рак на кожата в сравнение с B16F10, B16-GMCSF и B16FLT3 [1].

3D анимация на растящ рак на кожата в близък план, например злокачествен меланом, който възпалява околната тъкан.

2.информация за култивирането на клетъчна линия B16

Преди да поддържате или култивирате дадена клетъчна линия, може да потърсите ключова информация за времето на удвояване, типа клетки, хранителната среда, условията на култивиране и т.н. Този раздел съдържа цялата необходима информация за култивиране на клетките B16.

Ключови точки за култивиране на клетки B16

Време за удвояване на популацията:	Средното време за удвояване на популацията на клетките B16 се оценява на 24 часа.
Прилепнали или в суспензия:	Клетките B16 са прилепнали и растат на монослоеве.
Плътност на посявката:	Препоръчва се клетките B16 да се засяват при клетъчна плътност от 1 до 2 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2}. Прикрепените клетки B16 се изплакват с 1 x PBS и се дисоциират от повърхността с помощта на разтвор на Accutase. Клетките се центрофугират и клетъчната пелета се ресуспендира в растежната среда. По-късно тези клетки се разпределят в нова колба за растеж.
Растежна среда:	Клетките B16 се култивират в среда EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), съдържаща 10 % фетален говежди серум (FBS). Растежната среда трябва да се обновява 2-3 пъти седмично.
Условия на растеж:	За отглеждането на клетъчната линия B16 се използва овлажнен инкубатор с 5 %_CO2 и температура 37 °C.
Съхранение:	Тези клетки се съхраняват при температура под -150 °C или в парната фаза на течен азот, за да се запази жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:	За замразяване на клетките B16 се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF, като се използва процес на бавно замразяване.
Процес на размразяване:	Замразените клетки B16 се размразяват при 37 °C на водна баня, съдържаща антимикробен агент. Размразените клетки могат да се култивират директно, като се разпределят в колби, съдържащи среда за растеж. Освен това тези клетки могат да се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда, и след това да се култивират в нова среда.
Ниво на биологична безопасност:	Клетъчната линия B16 трябва да се обработва или поддържа в лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Полуконфлуентен слой от меланомни клетки В16 при увеличение 10x и 20x.

3. клетъчна линия B16: Предимства и недостатъци

Подобно на други клетъчни линии, B16 притежава уникална комбинация от предимства и недостатъци. В този раздел са изброени някои важни предимства и недостатъци на тази клетъчна линия за меланом.

Предимства

B16 е първият ефективен миши инструмент, широко използван в изследванията на метастазите, поради предимствата, които предлага. Някои предимства на тази клетъчна линия за рак на кожата са:

Лесна за отглеждане	Клетъчната линия B16 е лесна за култивиране в изследователски лаборатории. Тя се използва широко за изследване на биологията на раковите клетки, сигналните пътища и др.
Бърз растеж	Меланомната клетъчна линия B16 се характеризира с висока степен на пролиферация, което я прави подходяща за изучаване на процесите на клетъчно делене и растеж.
Туморогенност	B16 е туморогенна клетъчна линия с тумороподобни свойства, като инвазия, миграция и пролиферация. Тя е ценна за изучаване на образуването, прогресията и метастазирането на тумори.

Недостатъци

Недостатъците, свързани с клетъчната линия B16, са следните:

Липса на релевантност за човека	Поради това, че B16 е клетъчна линия на миши меланом, тя може да не представя точно биологията на човешкия рак на кожата, което ограничава възможността за пренасяне на резултатите от изследванията.
Хетерогенност	Клетките В16 са хетерогенни, като проявяват различни генетични и фенотипни свойства в рамките на една и съща култура. Това може да повлияе на надеждността и възпроизводимостта на резултатите.

4. приложения на клетки B16

Клетъчната линия В16 се използва широко в изследователски проучвания. Няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия са:

Туморна биология: Тази клетъчна линия на миши рак на кожата е туморогенна и се използва широко за разбиране на туморната биология. Проведени са няколко проучвания за изследване на клетъчните механизми, които стоят зад растежа, пролиферацията и метастазирането на туморните клетки, като са използвани клетки B16. В научно изследване, проведено през 2020 г., са използвани клетки B16 за изследване на ролята на дългата некодираща РНК, LncRNA MEG3, при образуването, растежа и метастазирането на меланома. Това изследване установи, че некодиращата РНК модулира оста miRNA-21/E-Cadherin, за да стимулира тези клетъчни събития [2]. По подобен начин бяха проведени изследвания за проучване на потенциалната роля на сигнализацията Notch1 в индуцираната от тумора имуносупресия с помощта на клетки B16 [3].
Откриване на лекарства: Клетките B16 се използват за валидиране и тестване на потенциалните терапевтични ефекти на кандидатите за лекарства. Проучване оценява антитуморния ефект на неогамбогинова киселина, природно съединение, като използва клетъчна линия B16. Резултатите от изследването разкриват, че това съединение модулира сигналния път PI3K/Akt/mTOR, за да предизвика смърт на раковите клетки [4]. Друго проучване изследва антимеланомния ефект на Ginsenoside Rg3, сапонин, като използва клетъчна линия B16. Изследването предполага, че това природно съединение предизвиква антитуморна активност чрез понижаване на регулацията на пътищата ERK и Akt [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305154

5.научни публикации с участието на клетки B16

Тук са представени някои важни научни публикации, в които е използвана клетъчната линия меланом B16.

LncRNA MEG3 насърчава растежа, метастазирането и образуването на меланом чрез модулиране на оста miR-21/E-cadherin

В тази публикация в списание Cancer Cell International (2020 г.) се предлага, че дългата некодираща РНК MEG3 засилва образуването, растежа и метастазирането на меланомни клетки B16 чрез модулиране на оста miRNA-21/E-Cadherin.

Ново производно на псоралена - МПФК засилва меланогенезата чрез активиране на сигналните пътища на p38 MAPK и PKA в клетките B16

Тази статия е публикувана в International Journal of Molecular Medicine през 2018 г. Това проучване изследва меланогенния ефект и механизмите на псораленовото производно - 4-метил-6-фенил-2H-фуро[3,2-g] хромен-2-он (MPFC) в клетки B16. В проучването се предлага, че това производно насърчава меланогенезата чрез стимулиране на клетъчната сигнализация на PKA и p38 MAPK.

Сигнализирането на Notch1 в меланомни клетки насърчава индуцираната от тумора имуносупресия чрез повишаване на регулацията на TGF-β1

Това изследване е публикувано през 2018 г. в Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Резултатите от изследването показват, че активирането на Notch1 сигнализацията в клетките на B16 може да предотврати противотуморния имунитет чрез повишаване на експресията на гена TGF-β1.

Неогамбоговата киселина индуцира апоптоза на меланомни клетки B16 чрез сигналния път PI3K/Akt/mTOR

Това проучване е проведено от Чунлан Ву и неговите колеги през 2020 г. и е публикувано в списание Acta Biochimica Polonica. В това изследване се посочва, че неогамбогиновата киселина, естествено съединение, може да предизвика смърт на меланомни клетки B16 чрез модулиране на сигналната каскада PI3K/Akt/mTOR.

Комплексът на иридий (III) като мощен противораков агент предизвиква апоптоза и автофагия в клетките B16 чрез инхибиране на пътя AKT/mTOR

Тази научна статия е публикувана в European Journal of Medicinal Chemistry през 2018 г. В това изследване учените изследват противораковата активност на съединение, иридиев (III) комплекс, като използват меланомни клетки B16.

Айлантонът предизвиква спиране на клетъчния цикъл и апоптоза при меланомни клетки B16 и A375

В това проучване се предлага растителна биоактивна субстанция, айлантон, да притежава противораков потенциал, тъй като може да индуцира апоптоза и спиране на клетъчния цикъл в меланомни клетки B16 и A375. Тази статия е публикувана в Biomolecules през 2019 г.

6. ресурси за клетъчна линия B16: Протоколи, видеоклипове и др

Съществуват ограничени ресурси за клетъчната линия B16, обясняващи нейните протоколи за култивиране и трансфекция.

Култивиране на меланомни клетки: Това видео предоставя ценни съвети за култивиране на меланомни клетъчни линии.
Субкултивиране на клетъчна линия: Това видео обяснява общ протокол за субкултивиране на клетъчна линия.
Трансфекция на клетъчна линия B16F10: Това видео обяснява протокола за трансфекция на подлиния от меланомни клетки B16. То може да ви помогне да оптимизирате протокола за трансфекция на клетките B16.

По-долу са изброени някои протоколи за клетъчни култури за клетки B16.

Култивиране на клетки B16: Този уебсайт съдържа цялата необходима информация за култивиране на клетки B16, включително растежни среди, субкултивиране, размразяване и замразяване на клетки.

Референции

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines (Поведение на четири различни подлинии клетки на мишия меланом): C57 BL/6J кожа. Международно списание за експериментална патология, 2015 г. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 насърчава растежа на меланома, метастазирането и образуването на метастази чрез модулиране на оста miR-21/E-cadherin. Cancer cell international, 2020 г. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 сигнализацията в меланомни клетки насърчава индуцираната от тумора имуносупресия чрез upregulation of TGF-β1. Списание за експериментални и клинични изследвания на рака, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogambogic acid induces apoptosis of melanoma B16 cells via the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumor activity of ginsenoside Rg3 in melanoma through downregulation of the ERK and Akt pathways (Антитуморна активност на гинсенозид Rg3 при меланом чрез понижаване на регулацията на пътищата ERK и Akt). International Journal of Oncology, 2019 г. 54(6): p. 2069-2079.