Клетки B16 – Основно ръководство за меланомните клетки B16 в онкологичните изследвания

B16 е клетъчна линия на рак на кожата (меланом) от миши произход. Тази клетъчна линия е ефективен in vitro модел за изучаване на раковите заболявания на кожата при човека. Тя често се използва за изследване на образуването на солидни тумори и метастазите на раковите клетки.

📋 Клетъчна линия B16 — кратки факти

Среда за растеж: Клетките B16 се култивират в среда EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), съдържаща 10 % фетално телешко серум (FBS). Средата за растеж трябва да се подменя 2-3 пъти седмично.
Време за удвояване: Средното време за удвояване на популацията на B16 клетките се оценява на 24 часа.
Тип растеж: Клетките B16 са адхезивни и растат в монослоеве.
Ниво на биологична безопасност: BSL-1
Налични от: Cytion — Поръчайте B16

Тази статия ще ви помогне да разберете основите на клетъчната линия на меланом B16. По-конкретно, тя ще разгледа следното:

📋 Съдържание

Общи характеристики и произход на клетъчната линия B16
Информация за култивирането на клетъчната линия B16
Клетъчна линия B16: Предимства и недостатъци
Приложения на клетките B16
5. Научни публикации, посветени на клетките B16
Ресурси за клетъчната линия B16: протоколи, видеоклипове и др.
Често задавани въпроси

Общи характеристики и произход на клетъчната линия B16

В тази част от статията ще бъдат разгледани характерните особености на клетъчната линия B16 за меланом. Ще получите отговори на следните често задавани въпроси. Например: Какво представлява клетъчната линия B16 за рак? Откъде произхождат клетките B16? Какъв е размерът на клетките B16?

Клетъчната линия B16 е създадена през 1954 г. Тези клетки са получени от мишки C57BL/6J, които спонтанно са развили тумор на кожата в лабораториите „Джаксън“ в щата Мейн.
Това са епителни клетки, произвеждащи меланин, които имат способността да метастазират в далака, черния дроб и белите дробове.
Меланомните клетки B16 растат като монослоеве и проявяват епителиоподобна и вретенообразна клетъчна морфология.
Размерът на клетъчната линия B16 е приблизително 15,4 μm.
Има различни субклони на B16 клетки, включително B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 и B16F10. Тези сублинии се различават от родителските B16 клетки и запазват някои специфични характеристики. Например, те притежават разлика в морфологията, размера на клетките и други свойства. B16F10 има висока способност за метастазиране в белия дроб, а B164A5 е най-агресивната клетъчна линия на рак на кожата в сравнение с B16F10, B16-GMCSF и B16FLT3 [1].

3D анимация на близък план на развиващ се рак на кожата, като например злокачествен меланом, който предизвиква възпаление на околната тъкан.

Информация за култивирането на клетъчната линия B16

Преди да започнете поддържането или култивирането на клетъчна линия, може да ви е необходима ключова информация за времето за удвояване, типа клетки, средата за растеж, условията за култивиране и др. Тук, в тази секция, ще намерите цялата необходима информация за култивирането на B16 клетки.

Ключови моменти при култивирането на B16 клетки

Време за удвояване на популацията:: Средното време за удвояване на популацията за клетки B16 се оценява на 24 часа.
Прилепнали или в суспензия:: Клетките B16 са адхезивни и растат в монослоеве.
Плътност на засяване:: Препоръчва се B16 клетките да се засяват при плътност от 1 до 2 x 10⁴ клетки/cm². Прилепналите B16 клетки се изплакват с 1 x PBS и се отделят от повърхността с помощта на разтвор Accutase. Клетките се центрофугират, а клетъчният пелетен остатък се ресуспендира в средата за растеж. По-късно тези клетки се прехвърлят в нова колба за растеж.
Среда за растеж:: Клетките B16 се култивират в среда EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), съдържаща 10 % фетално телешко серум (FBS). Средата за растеж трябва да се подменя 2-3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:: За отглеждане на клетъчната линия B16 се използва овлажнен инкубатор с 5 % CO₂ и температура 37 °C.
Съхранение:: Тези клетки се съхраняват при температура под -150 °C или във фазата на пари на течен азот, за да се защити жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:: За замразяването на клетките B16 се използва среда за замразяване CM-1 или CM-ACF чрез процес на бавно замразяване.
Процес на размразяване:: Замразените B16 клетки се размразяват при 37 °C във водна баня, съдържаща антимикробен агент. Размразените клетки могат да се култивират директно, като се разпределят в колби, съдържащи среда за растеж. Освен това, тези клетки могат да се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване, и след това да се култивират в нова среда.
Ниво на биологична безопасност:: Клетъчната линия B16 трябва да се обработва или поддържа в лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

B16 cells

Полуконфлуентен слой от меланомни клетки B16 при 10-кратно и 20-кратно увеличение.

Клетъчна линия B16: Предимства и недостатъци

Подобно на другите клетъчни линии, B16 притежава уникална комбинация от предимства и недостатъци. В тази секция са изброени някои значими плюсове и минуси на тази клетъчна линия на меланом.

Предимства

B16 е първият ефективен миши инструмент, широко използван в изследванията на метастазите, благодарение на предимствата, които предлага. Някои от предимствата на тази клетъчна линия на рак на кожата са:

Лесна за отглеждане: Клетъчната линия B16 е лесна за култивиране в изследователски лаборатории. Тя се използва широко за изучаване на биологията на раковите клетки, сигналните пътища и др.
Бърз растеж: Клетъчната линия на меланом B16 показва висока степен на пролиферация, което я прави подходяща за изучаване на процесите на клетъчно делене и растеж.
Туморогенност: B16 е туморогенна клетъчна линия с тумороподобни свойства като инвазия, миграция и пролиферация. Тя е ценна за изучаване на образуването, прогресията и метастазирането на тумори.

Недостатъци

Недостатъците, свързани с клетъчната линия B16, са:

Липса на релевантност за човека: Тъй като B16 е клетъчна линия от миши меланом, тя може да не отразява точно биологията на рака на кожата при човека, което ограничава приложимостта на резултатите от изследванията.
Хетерогенност: Клетките B16 са хетерогенни и проявяват разнообразни генетични и фенотипни свойства в рамките на една и съща култура. Това може да повлияе на надеждността и възпроизводимостта на резултатите.

Приложения на B16 клетки

Клетъчната линия B16 се използва широко в научни изследвания. Няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия са:

Биология на туморите: Тази миши клетъчна линия на рак на кожата е туморогенна и се използва широко за разбиране на биологията на туморите. Проведени са няколко проучвания за изследване на клетъчните механизми, стоящи зад растежа, пролиферацията и метастазирането на туморните клетки, като са използвани B16 клетки. Изследване, проведено през 2020 г., използва B16 клетки за проучване на ролята на дългите некодиращи РНК, LncRNA MEG3, в образуването, растежа и метастазирането на меланома. Това проучване установи, че некодиращата РНК модулира оста miRNA-21/E-Cadherin, за да стимулира тези клетъчни събития [2]. По същия начин беше проведено проучване за изследване на потенциалната роля на Notch1 сигнализацията в тумор-индуцираната имуносупресия, като се използват B16 клетки [3].
Откриване на лекарства: Клетките B16 се използват за валидиране и тестване на потенциалните терапевтични ефекти на кандидат-лекарства. Едно проучване оцени антитуморния ефект на неогамбогиновата киселина, естествено съединение, като използва клетъчна линия B16. Резултатите от проучването разкриха, че това съединение модулира сигналния път PI3K/Akt/mTOR, за да предизвика смъртта на раковите клетки [4]. Друго проучване изследва антимеланомния ефект на гинзенозид Rg3, сапонин, като използва клетъчната линия B16. Изследването предполага, че това естествено съединение предизвиква антитуморна активност чрез потискане на ERK и Akt пътищата [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305154

5. Научни публикации, посветени на клетките B16

Ето някои значими научни публикации, посветени на клетъчната линия B16 на меланома.

LncRNA MEG3 стимулира растежа, метастазирането и образуването на меланом чрез модулиране на оста miR-21/E-кадхерин

Тази публикация в списанието Cancer Cell International (2020) предлага, че дългият некодиращ РНК MEG3 усилва образуването, растежа и метастазирането на меланомните клетки B16 чрез модулиране на оста miRNA-21/E-Cadherin.

Ново производно на псорален – MPFC, усилва меланогенезата чрез активиране на сигналните пътища p38 MAPK и PKA в B16 клетки

Тази статия беше публикувана в International Journal of Molecular Medicine през 2018 г. Това проучване изследва меланогенния ефект и механизмите на действие на производното на псорален – 4-метил-6-фенил-2H-фуро[3,2-g]хромен-2-он (MPFC) в B16 клетки. Проучването предполага, че това производно стимулира меланогенезата чрез стимулиране на PKA и p38 MAPK клетъчния сигналинг.

Notch1 сигнализацията в меланомните клетки стимулира тумор-индуцираната имуносупресия чрез регулация на TGF-β1

Това изследване беше публикувано през 2018 г. в списанието „Journal of Experimental & Clinical Cancer Research“. Резултатите от проучването предполагат, че активирането на Notch1 сигнализацията в B16 клетки може да попречи на противотуморния имунитет чрез повишаване на експресията на гена TGF-β1.

Неогамбогиновата киселина индуцира апоптоза на меланомни B16 клетки чрез PI3K/Akt/mTOR сигналния път

Това проучване е проведено от Chunlan Wu и неговите колеги през 2020 г. и е публикувано в списанието „Acta Biochimica Polonica“. То посочва, че неогамбогиновата киселина, естествено съединение, може да предизвика смъртта на B16 меланомни клетки чрез модулиране на PI3K/Akt/mTOR сигналната каскада.

Комплекс на иридий (III) като мощен противораков агент индуцира апоптоза и автофагия в B16 клетки чрез инхибиране на AKT/mTOR пътя

Тази научна статия беше публикувана в European Journal of Medicinal Chemistry през 2018 г. В това проучване изследователите изследваха противораковата активност на съединението, комплекс на иридий (III), като използваха меланомни клетки B16.

Айлантон предизвиква спиране на клетъчния цикъл и апоптоза в меланомни клетки B16 и A375

Това проучване предложи, че растителният биоактивен компонент айлантон притежава противораков потенциал, тъй като може да предизвика апоптоза и спиране на клетъчния цикъл в меланомни клетки B16 и A375. Тази статия беше публикувана в списанието „Biomolecules“ през 2019 г.

Ресурси за клетъчната линия B16: протоколи, видеоклипове и др.

Ресурсите за клетъчната линия B16, обясняващи протоколите за култивиране и трансфекция, са ограничени.

Култивиране на меланомни клетки: Това видео предоставя ценни съвети за култивирането на меланомни клетъчни линии.
Субкултивиране на клетъчна линия: Това видео обяснява общ протокол за субкултивиране на клетъчна линия.
Трансфекция на клетъчна линия B16F10: Това видео обяснява протокола за трансфекция на подлиния от меланомни клетки B16. То може да ви помогне да оптимизирате протокола за трансфекция на клетки B16.

По-долу са представени някои протоколи за клетъчна култура за B16 клетки.

Култивиране на B16 клетки: Този уебсайт съдържа цялата необходима информация за култивирането на B16 клетки, включително среди за растеж, субкултивиране, размразяване и замразяване на клетки.

Източници

Danciu, C., et al., Поведение на четири различни подлинии на миши меланомни клетки B 16: кожа на C57 BL/6J. Международно списание за експериментална патология, 2015. 96(2): стр. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 насърчава растежа, метастазирането и образуването на меланом чрез модулиране на оста miR-21/E-кадхерин. Cancer cell international, 2020. 20: стр. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 сигнализацията в меланомните клетки стимулира тумор-индуцираната имуносупресия чрез регулация на TGF-β1. Списание за експериментални и клинични изследвания на рака, 2018. 37(1): стр. 1-13.
Wu, C., et al., Неогамбогиновата киселина индуцира апоптоза на меланомни B16 клетки чрез PI3K/Akt/mTOR сигналния път. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): стр. 197-202.
Meng, L., et al., Антитуморна активност на гинзенозид Rg3 при меланом чрез потискане на ERK и Akt пътищата. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): стр. 2069-2079.