Клетки B16-F10 - Изследване на клетъчната линия B16-F10 за меланома при изследване на метастази

КлеткитеB16-F10 представляват меланомна клетъчна линия, получена от мишка C57BL/6J. Те се използват широко в изследванията на рака на кожата. Изследователите използват тези клетки за изучаване на развитието и прогресията на туморите и на терапевтичните интервенции. В тази статия ще бъдат разгледани основните аспекти на меланомните клетки B16-F10. По-специално, тя ще включва:

Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10
Информация за култивирането на клетките B16-F10
Клетки B16-F10: Предимства и недостатъци
Изследователски приложения на клетките B16-F10
Публикации с участието на клетъчна линия B16-F10
Ресурси за клетъчна линия B16-F10: Протоколи, видеоклипове и др

1. Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10

Този раздел ще ви даде представа за произхода и отличителните характеристики на меланомните туморни клетки B16F10. Той ще ви помогне да използвате ефективно клетъчната линия в изследователската си работа. Основно ще научите: Какво представляват клетките B16-F10? От какво произлизат B16F10? Каква е морфологията на клетъчната линия B16F12? Какъв е размерът на клетките B16F10?

B16-F10 е подклон на туморната клетъчна линия B16, получена от кожна тъкан на мишки C57BL/6J. Тук меланомните клетки B16F10 са разработени след интравенозно инжектиране на линията B16 в имунокомпрометирани или сингенни мишки. Тези клетки бяха подбрани за потенциала им да образуват колонии от метастази в белия дроб in vivo и след това бяха установени след десет цикъла на образуване на колонии в белия дроб in vitro [1]. Тя е разработена от Фидлер и колегите му през 1976 г.
Клетъчните линии B16-F10 имат епителиален и вретеновиден вид.
Приблизителният размер на клетките B16-F10 е 15,4 ± 1,4 μm [2].

Клетки B16-F1 и B16-F10

Клетките B16-F1 и B16-F10 са получени от изходната клетъчна линия B16. И двете произхождат от една и съща и притежават почти сходни характеристики. Основната разлика обаче е тяхната метастатична способност. Клетките B16-F10 имат висок, а B16-F1 - нисък метастатичен потенциал [3].

Силно увеличен напречен разрез на тумор от малигнен меланом под микроскоп.

2.информация за култивиране на клетки B16-F10

Преди да работите с дадена клетъчна линия и да я култивирате, трябва да знаете за нейното време на удвояване, хранителните среди, условията и протоколите за клетъчно култивиране. В този раздел ще бъдат разгледани: Какво е времето за удвояване на клетките b16-f10? Как се култивират клетки B16F10? Каква е хранителната среда за клетките B16-F10? Какви условия за култивиране се препоръчват за клетките B16-F10?

Основни точки за култивиране на клетки B16-F10

Време за удвояване:	Времето за удвояване на клетките B16-F10 е приблизително 20,1 часа. То може да варира от 17 до 21 часа в зависимост от условията на култивиране.
Прилепнали или в суспензия:	B16-F10 е адхезивна клетъчна линия. Клетките растат бързо и образуват монослоеве.
Съотношение на разделяне:	Клетките B16-F10 се субкултивират в съотношение 1:2 до 1:4. Клетките се промиват с физиологичен разтвор с фосфатен буфер (1x) и след това се инкубират с разтвор за пасиране Accutase за 8 до 10 минути при стайна температура. Клетките се добавят с прясна среда и се центрофугират. Събраната клетъчна пелета отново се ресуспендира и клетките се разпределят в нова колба, съдържаща прясна хранителна среда, според съотношението на разделяне.
Растежна среда:	Клетките B16-F10 се култивират в среда DMEM. Средата е допълнена с 10 % FBS, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L глюкоза и 1,0 mM натриев пируват за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:	Клетките B16-F10 се отглеждат в овлажнен инкубатор при 37 °C с 5 % CO2.
Съхранение:	Замразените клетки се съхраняват под -150 °C в електрически фризер за свръхниски температури или в парната фаза на течен азот, за да се запази жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:	Клетките B16-F10 се замразяват в среда CM-1 или CM-ACF за съхранение. За тази цел се препоръчва бавен процес на замразяване, който позволява намаляване на температурата само с 1 °C в минута, за да се предотврати шокът за клетките.
Процес на размразяване:	Замразените клетки B16-F10 се размразяват на предварително настроена водна баня с температура 37 °C за 40 до 60 секунди. След това клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Събраните клетки се ресуспендират в среда за растеж и се изсипват в колби за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:	За работа с клетъчната линия B16-F10 и нейното поддържане се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Полуконфлуентни клетки B16-F10 при 20x и 10x увеличение.

3.b16-F10 клетки: Предимства и недостатъци

Подобно на други клетъчни линии, B16-F10 също има някои предимства и недостатъци. В този раздел са разгледани някои важни предимства и недостатъци на тази клетъчна линия за меланом на кожата.

Предимства

Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Предимствата на клетките B16-F10 са:

Метастатичен потенциал	Клетките на меланома на кожата B16F10 проявяват висок метастатичен потенциал, което ги прави ценни за изучаване на метастазите на рака и основните механизми.
Модел на тумор in vitro	Клетките B16-F10 служат като ин витро модел за изследване на прогресията и растежа на рака, като помагат на изследователите да разберат клетъчните и молекулярните механизми, определящи рака.

Недостатъци

Недостатъците, свързани с клетъчната линия B16-F10, са:

Клетъчна линия, получена от мишка

B16-F10 е клетъчна линия, получена от мишка, което ограничава нейната приложимост за специфични за човека изследвания. Резултатите от изследванията, проведени с тези клетки, невинаги могат да се отнесат към човешката биология.

4.изследователски приложения на клетките B16-F10

Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Тук са разгледани няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия.

Изследване на рака: Клетъчната линия B16-F10 е ценен модел за изследване на процесите в раковите клетки, включително пролиферация, инвазия, миграция и клетъчна смърт или апоптоза. Освен това тя помага на изследователите да придобият представа за молекулярните механизми и пътища, управляващи тези клетъчни процеси. Проучване, проведено през 2018 г., изследва ролята на CCR5 (C-C хемокинов рецептор тип пет) в прехода на меланомните клетки от епителни към мезенхимни клетки и метастазирането. Резултатите разкриват, че дефицитът на CCR5 ограничава растежа и метастазирането на тумора, докато високата експресия води до засилен растеж и метастазиране на клетките B16-F10. По-нататъшни изследвания съобщават, че CCR5 регулира експресията на TGFβ1, който регулира PI3K/AKT/GSK3β сигнализацията, за да насърчи прехода от епителен към мезенхимен тип и клетъчната миграция [4].
Изпитване и разработване на лекарства: Туморните клетки на меланома B16F10 са силно агресивни и поради това са подходящи за тестване на потенциални противотуморни лекарства и лечения. Изследователите използват тези клетки и оценяват ефекта на различни съединения върху клетъчния растеж, пролиферацията и метастазите, което подпомага разработването на лекарства. Проучване, проведено през 2018 г. от Валентина Нани и колегите ѝ, изследва терапевтичните ефекти на хидроалкохолен екстракт от цветове на Spartium junceum . В проучването се предлага, че екстрактът от цветовете е ефективен при индуцирането на сенесценция в клетките B16-F10, което води до потискане на клетъчния растеж и меланогенезата, като по този начин може да упражнява потенциални противоракови дейности [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 305157

5.публикации с участието на клетъчна линия B16-F10

Ето някои важни научни публикации, в които е включена клетъчната линия за меланом B16-F10:

Антимеланогенен ефект на етанолов екстракт от Sorghum bicolor върху индуцираната от IBMX меланогенеза в меланомни клетки B16/F10

Това проучване е публикувано в Nutrients (2020). В него се предлага етаноловият екстракт от Sorghum bicolor да има антимеланогенен ефект при меланомни клетки на кожата B16F10.

Калцитриолът потиска пролиферацията и потенциално индуцира апоптоза в клетките B16-F10

Изследването, публикувано в Medical Science Monitor Basic Research (2022), предлага лекарството калцитриол да оказва антитуморен ефект при меланомни клетки B16-F10, като инхибира пролиферацията и индуцира апоптоза.

Прооксидативният ефект на кардолите участва в цитотоксичната им активност срещу миши меланомни клетки B16-F10

Тази статия е публикувана в Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Констатациите разкриват, че кардолите, резорцинолови липиди, оказват интензивна цитотоксичност върху клетъчната линия B16-F10.

Екстрактът от екзокарпа на гинко билоба инхибира метастазирането на меланома B16-F10 с участието на сигналния път PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

В проучването, публикувано в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), е изследван антиметастатичният потенциал на екстракта от екзокарп на Гинко билоба с помощта на клетки B16-F10.

Тимохинонът индуцира апоптоза в меланомни клетки B16-F10 чрез инхибиране на p-STAT3 и инхибира туморния растеж при миши интрацеребрален меланом ..

Това изследване в World Neurosurgery (2018) предлага тимохинонът да бъде ефективна терапия срещу интрацеребрални метастатични лезии, тъй като потиска растежа на клетките B16-F10 и индуцира апоптоза.

6.ресурси за клетъчна линия B16-F10: Протоколи, видеоклипове и др

Ендотелните клетки B16F10 се използват широко в изследванията на рака на кожата. Ето някои онлайн ресурси, които обясняват протоколите за култивиране и трансфекция:

B16F10 меланомни клетки трансфекция: Този видео урок може да ви помогне да научите протокола за трансфекция на клетки B16-F10.
B16-F10 трансфекция: Този документ ще обясни протокола за ДНК трансфекция in vitro за меланомни клетки B16F10 на кожата.

Следната връзка съдържа протокола за клетъчно култивиране на клетки B16-F10:

B16-F10 субкултивиране: Този уебсайт съдържа полезна информация за туморните клетки на меланома B16F10. Тя включва среди за растеж, време за удвояване, условия за култивиране и протокол за субкултивиране на клетките, както и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.

Препратки

Poste, G., et al., Сравнение на метастатичните свойства на меланомни клонове B16, изолирани от култивирани клетъчни линии, подкожни тумори и отделни белодробни метастази. Cancer Research, 1982 г. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device (Механично фенотипизиране на варианти на меланомни клетки B16 за оценка на ефективността на лечението с (-)-епигалокатехин галат с помощта на конусно микрофлуидно устройство). Микромашини, 2019 г. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al., Поведение на четири различни подлинии клетки на мишия меланом B16: C57BL/6J кожа. Int J Exp Pathol, 2015 г. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1 (Високата експресия на CCR5 при меланома засилва епително-мезенхимния преход и метастазирането чрез TGFβ1 ). The Journal of Pathology, 2019 г. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al., Hydroalcoholic extract of Spartium junceum L. flowers inhibits growth and melanogenesis in B16-F10 cells by inducing senescence. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.