Отидете на началната страница

Клетки B16-F10 – изследване на клетъчната линия на меланом B16-F10 в проучванията върху метастазите

Клетките B16-F10 представляват клетъчна линия на меланом, получена от мишка C57BL/6J. Те се използват широко в изследванията на рака на кожата. Изследователите използват тези клетки за изучаване на развитието и прогресията на тумора, както и на терапевтичните интервенции. Тази статия ще обхване основните аспекти на меланомните клетки B16-F10. По-конкретно, тя ще включва:

📋 Клетъчна линия B16-F10 — кратки факти
Среда за растеж
Клетките B16-F10 се култивират в среда DMEM. Средата се допълва с 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L глюкоза и 1,0 mM натриев пируват за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Време за удвояване
Времето за удвояване на клетките B16-F10 е приблизително 20,1 часа. То може да варира от 17 до 21 часа, в зависимост от условията на култивиране.
Тип растеж
B16-F10 е адхезивна клетъчна линия. Клетките растат бързо и образуват монослоеве.
Ниво на биологична безопасност
BSL-1
  1. Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10
  2. Информация за култивирането на клетки B16-F10
  3. Клетки B16-F10: Предимства и недостатъци
  4. Приложения за научни изследвания на клетките B16-F10
  5. Публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10
  6. Ресурси за клетъчната линия B16-F10: протоколи, видеоклипове и др.

Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10

В тази секция ще получите информация за произхода и отличителните характеристики на туморните клетки на меланома B16F10. Тя ще ви помогне да използвате клетъчната линия ефективно в изследователската си работа. Основно ще научите: Какви са клетките B16-F10? От какво произхожда B16F10? Каква е морфологията на клетъчната линия B16F12? Какъв е размерът на клетката B16F10?

  • B16-F10 е субклон на туморната клетъчна линия B16, получена от кожна тъкан на мишки C57BL/6J. В настоящия документ меланомните клетки B16F10 са разработени след интравенозно инжектиране на линията B16 в имунокомпрометирани или сингенни мишки. Тези клетки бяха подбрани заради потенциала им да образуват метастазирали белодробни колонии in vivo и след това бяха установени след десет цикъла на образуване на белодробни колонии in vitro [1]. Тя е разработена от Fidler и колеги през 1976 г.
  • Клетъчните линии B16-F10 имат епителиоподобен и вретенообразен вид.
  • Приблизителният размер на клетките B16-F10 е 15,4 ± 1,4 μm [2].

Клетки B16-F1 и B16-F10

Клетките B16-F1 и B16-F10 са получени от родителската клетъчна линия B16. И двете произхождат от една и съща линия и притежават почти сходни характеристики. Основната разлика обаче е в тяхната способност за метастазиране. Клетките B16-F10 имат висок, докато B16-F1 имат нисък метастатичен потенциал [3].

Силно увеличен напречен разрез на тумор от злокачествен меланом под микроскоп.

Информация за култивирането на клетки B16-F10

Преди да започнете работа с клетъчна линия и да я култивирате, трябва да знаете нейното време за удвояване, средата за растеж, условията и протоколите за клетъчна култура. В тази секция ще обсъдим: Какво е времето за удвояване на клетките B16-F10? Как се култивират клетките B16-F10? Каква е средата за култивиране на клетките B16-F10? Какви условия за култивиране се препоръчват за клетки B16-F10?

Ключови моменти при култивирането на клетки B16-F10

Време за удвояване:

Времето за удвояване на клетките B16-F10 е приблизително 20,1 часа. То може да варира от 17 до 21 часа, в зависимост от условията на култивиране.

Прилепващи или в суспензия:

B16-F10 е адхезивна клетъчна линия. Клетките растат бързо и образуват монослоеве.

Съотношение на разделяне:

Клетките B16-F10 се субкултивират при съотношение на разделяне от 1:2 до 1:4. Клетките се промиват с фосфатен буферен разтвор (1x) и след това се инкубират с разтвор за пасажиране Accutase в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. Клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира отново и клетките се разпределят в нова колба, съдържаща свежа културална среда, съгласно съотношението на разделяне.

Среда за растеж:

Клетките B16-F10 се култивират в среда DMEM. Средата се допълва с 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L глюкоза и 1,0 mM натриев пируват за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.

Условия за растеж:

Клетките B16-F10 се отглеждат в овлажнен инкубатор при 37 °C с 5% CO2.

Съхранение:

Замразените клетки се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер с ултраниска температура или във фазата на пари на течен азот, за да се поддържа жизнеспособността на клетките.

Процес на замразяване и среда:

Клетките B16-F10 се замразяват в среда CM-1 или CM-ACF за съхранение. За целта се препоръчва бавен процес на замразяване, при който температурата спада само с 1 °C на минута, за да се предотврати шок за клетките.

Процес на размразяване:

Замразените клетки B16-F10 се размразяват в предварително настроена водна баня при 37 °C за 40 до 60 секунди. След това клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Събраните клетки се ресуспендират в среда за растеж и се изсипват в колби за култивиране.

Ниво на биологична безопасност:

За работа с клетъчната линия B16-F10 и нейното поддържане е необходима лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

B16 f10 cells

Полуконфлуентни клетки B16-F10 при 20-кратно и 10-кратно увеличение.

Клетки B16-F10: Предимства и недостатъци

Подобно на други клетъчни линии, B16-F10 също има някои предимства и недостатъци. В тази секция се обсъждат някои значими плюсове и минуси на тази клетъчна линия на кожен меланом.

Предимства

Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Предимствата на клетките B16-F10 са:

Метастатичен потенциал

Клетките B16F10 от кожен меланом проявяват висок метастатичен потенциал, което ги прави ценни за изучаване на раковите метастази и основните механизми.

In vitro туморен модел

Клетките B16-F10 служат като in vitro модел за изучаване на прогресията и растежа на рака, като помагат на изследователите да разберат клетъчните и молекулярните механизми, които стоят в основата на рака.

 

Недостатъци

Недостатъците, свързани с клетъчната линия B16-F10, са:

Клетъчна линия, получена от мишки

B16-F10 е клетъчна линия, получена от мишки, което ограничава приложимостта ѝ в изследвания, специфични за човека. Резултатите от изследванията с тези клетки не винаги могат да бъдат пренесени към човешката биология.

 

Приложения на клетките B16-F10 в научните изследвания

Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Тук се обсъждат няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия.

  • Изследвания в областта на рака: Клетъчната линия B16-F10 е ценен модел за изучаване на процесите в раковите клетки, включително пролиферация, инвазия, миграция и клетъчна смърт или апоптоза. Освен това тя помага на изследователите да получат по-добро разбиране за молекулярните механизми и пътища, които управляват тези клетъчни процеси. Проучване, проведено през 2018 г., изследва ролята на CCR5 (C-C хемокинов рецептор тип 5) в прехода на меланомните клетки от епителни към мезенхимни клетки и в метастазирането. Резултатите показаха, че дефицитът на CCR5 ограничава растежа на тумора и метастазите, докато високата експресия води до засилен растеж и метастази на B16-F10 клетки. По-нататъшни изследвания съобщават, че CCR5 регулира експресията на TGFβ1, който регулира PI3K/AKT/GSK3β сигнализацията, за да стимулира епителиално-мезенхимния преход и клетъчната миграция [4].
  • Тестване и разработване на лекарства: Туморните клетки на меланома B16F10 са силно агресивни и поради това са подходящи за тестване на потенциални антитуморни лекарства и лечения. Изследователите използват тези клетки и оценяват ефекта на различни съединения върху клетъчния растеж, пролиферацията и метастазирането, подпомагайки разработването на лекарства. Проучване, проведено през 2018 г. от Валентина Нани и колеги, изследва терапевтичните ефекти на хидроалкохолния екстракт от цветове на Spartium junceum. Проучването показа, че екстрактът от цветовете е ефективен при индуциране на стареене в клетките B16-F10, което води до потискане на клетъчния растеж и меланогенезата, като по този начин може да прояви потенциални противоракови свойства [5].

5. Публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10

Ето някои значими научни публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10 на меланома:

Антимеланогенен ефект на етанолния екстракт от Sorghum bicolor върху IBMX-индуцираната меланогенеза в меланомни клетки B16/F10

Това проучване беше публикувано в списанието Nutrients (2020). В него се предлага, че етанолният екстракт от Sorghum bicolor има антимеланогенен ефект върху клетките на кожния меланом B16F10.

Калцитриолът инхибира пролиферацията и потенциално индуцира апоптоза в клетки B16–F10

Изследването, публикувано в Medical Science Monitor Basic Research (2022), предлага, че лекарството калцитриол оказва антитуморен ефект върху B16-F10 меланомни клетки чрез инхибиране на пролиферацията и индуциране на апоптоза.

Прооксидативният ефект на кардолите е свързан с тяхната цитотоксична активност срещу миши меланомни клетки B16–F10

Тази статия е публикувана в Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Резултатите разкриват, че кардолите, резорцинолови липиди, проявяват силна цитотоксичност върху клетъчната линия B16-F10.

Екстрактът от екзокарпа на Гинко билоба инхибира метастазите на меланома B16-F10, включващи сигналния път PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

Проучването, публикувано в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), изследва антиметастатичния потенциал на екстракта от екзокарпа на Гинко билоба, използвайки клетки B16-F10.

Тимохинонът индуцира апоптоза в меланомните клетки B16-F10 чрез инхибиране на p-STAT3 и инхибира растежа на тумора при миши интрацеребрален меланом …

Това проучване в World Neurosurgery (2018) предлага, че тимохинонът може да бъде ефективна терапия срещу интрацеребрални метастатични лезии, тъй като потиска растежа на B16-F10 клетките и индуцира апоптоза. 

Ресурси за клетъчната линия B16-F10: протоколи, видеоклипове и др.

Ендотелните клетки B16F10 се използват широко в изследванията на рака на кожата. Ето някои онлайн ресурси, обясняващи протоколите за култивиране и трансфекция:

Следният линк съдържа протокола за клетъчна култура за B16-F10 клетки:

  • Субкултивиране на B16-F10: Този уебсайт съдържа полезна информация за туморните клетки на меланом B16F10. Той включва среди за растеж, време за удвояване, условия за култивиране и протокол за субкултивиране на клетки, както и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.

Източници

  1. Poste, G., et al., Сравнение на метастатичните свойства на клони на меланом B16, изолирани от култивирани клетъчни линии, подкожни тумори и индивидуални белодробни метастази. Cancer Research, 1982. 42(7): стр. 2770-2778.
  2. Nakamura, M., D. Ono и S. Sugita, Механофенотипиране на варианти на B16 меланомни клетки за оценка на ефикасността на лечението с (-)-епигалокатехин галат, използвайки конусовидно микрофлуидно устройство. Micromachines, 2019. 10(3): стр. 207.
  3. Данчу, С. и др., Поведение на четири различни подлинии на миши меланомни клетки B16: кожа на C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): стр. 73-80.
  4. Liu, J., et al., Високата експресия на CCR5 в меланома усилва епителиално-мезенхимния преход и метастазите чрез TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): стр. 481-493.
  5. Nanni, V., et al., Хидроалкохолният екстракт от цветовете на Spartium junceum L. инхибира растежа и меланогенезата в B16-F10 клетки чрез индуциране на стареене. Phytomedicine, 2018. 46: стр. 1-10.

 

Установихме, че се намирате в друга държава или използвате друг език на браузъра, различен от избрания в момента. Искате ли да приемете предложените настройки?

Затвори