Клетки B16-F10 – изследване на клетъчната линия на меланом B16-F10 в проучванията върху метастазите
Клетките B16-F10 представляват клетъчна линия на меланом, получена от мишка C57BL/6J. Те се използват широко в изследванията на рака на кожата. Изследователите използват тези клетки за изучаване на развитието и прогресията на тумора, както и на терапевтичните интервенции. Тази статия ще обхване основните аспекти на меланомните клетки B16-F10. По-конкретно, тя ще включва:
- Среда за растеж
- Клетките B16-F10 се култивират в среда DMEM. Средата се допълва с 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L глюкоза и 1,0 mM натриев пируват за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на клетките B16-F10 е приблизително 20,1 часа. То може да варира от 17 до 21 часа, в зависимост от условията на култивиране.
- Тип растеж
- B16-F10 е адхезивна клетъчна линия. Клетките растат бързо и образуват монослоеве.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Налично от
- Cytion — Поръчайте B16-F10
- Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10
- Информация за култивирането на клетки B16-F10
- Клетки B16-F10: Предимства и недостатъци
- Приложения за научни изследвания на клетките B16-F10
- Публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10
- Ресурси за клетъчната линия B16-F10: протоколи, видеоклипове и др.
- Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10
- Информация за култивирането на клетки B16-F10
- Клетки B16-F10: предимства и недостатъци
- Приложения на клетките B16-F10 в научните изследвания
- 5. Публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10
- Ресурси за клетъчната линия B16-F10: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Произход и общи характеристики на клетъчната линия B16-F10
В тази секция ще получите информация за произхода и отличителните характеристики на туморните клетки на меланома B16F10. Тя ще ви помогне да използвате клетъчната линия ефективно в изследователската си работа. Основно ще научите: Какви са клетките B16-F10? От какво произхожда B16F10? Каква е морфологията на клетъчната линия B16F12? Какъв е размерът на клетката B16F10?
- B16-F10 е субклон на туморната клетъчна линия B16, получена от кожна тъкан на мишки C57BL/6J. В настоящия документ меланомните клетки B16F10 са разработени след интравенозно инжектиране на линията B16 в имунокомпрометирани или сингенни мишки. Тези клетки бяха подбрани заради потенциала им да образуват метастазирали белодробни колонии in vivo и след това бяха установени след десет цикъла на образуване на белодробни колонии in vitro [1]. Тя е разработена от Fidler и колеги през 1976 г.
- Клетъчните линии B16-F10 имат епителиоподобен и вретенообразен вид.
- Приблизителният размер на клетките B16-F10 е 15,4 ± 1,4 μm [2].
Клетки B16-F1 и B16-F10
Клетките B16-F1 и B16-F10 са получени от родителската клетъчна линия B16. И двете произхождат от една и съща линия и притежават почти сходни характеристики. Основната разлика обаче е в тяхната способност за метастазиране. Клетките B16-F10 имат висок, докато B16-F1 имат нисък метастатичен потенциал [3].
Информация за култивирането на клетки B16-F10
Преди да започнете работа с клетъчна линия и да я култивирате, трябва да знаете нейното време за удвояване, средата за растеж, условията и протоколите за клетъчна култура. В тази секция ще обсъдим: Какво е времето за удвояване на клетките B16-F10? Как се култивират клетките B16-F10? Каква е средата за култивиране на клетките B16-F10? Какви условия за култивиране се препоръчват за клетки B16-F10?
Ключови моменти при култивирането на клетки B16-F10
Време за удвояване:
Времето за удвояване на клетките B16-F10 е приблизително 20,1 часа. То може да варира от 17 до 21 часа, в зависимост от условията на култивиране.
Прилепващи или в суспензия:
B16-F10 е адхезивна клетъчна линия. Клетките растат бързо и образуват монослоеве.
Съотношение на разделяне:
Клетките B16-F10 се субкултивират при съотношение на разделяне от 1:2 до 1:4. Клетките се промиват с фосфатен буферен разтвор (1x) и след това се инкубират с разтвор за пасажиране Accutase в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. Клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира отново и клетките се разпределят в нова колба, съдържаща свежа културална среда, съгласно съотношението на разделяне.
Среда за растеж:
Клетките B16-F10 се култивират в среда DMEM. Средата се допълва с 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L глюкоза и 1,0 mM натриев пируват за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за растеж:
Клетките B16-F10 се отглеждат в овлажнен инкубатор при 37 °C с 5% CO2.
Съхранение:
Замразените клетки се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер с ултраниска температура или във фазата на пари на течен азот, за да се поддържа жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:
Клетките B16-F10 се замразяват в среда CM-1 или CM-ACF за съхранение. За целта се препоръчва бавен процес на замразяване, при който температурата спада само с 1 °C на минута, за да се предотврати шок за клетките.
Процес на размразяване:
Замразените клетки B16-F10 се размразяват в предварително настроена водна баня при 37 °C за 40 до 60 секунди. След това клетките се добавят към свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. Събраните клетки се ресуспендират в среда за растеж и се изсипват в колби за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с клетъчната линия B16-F10 и нейното поддържане е необходима лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.
Клетки B16-F10: Предимства и недостатъци
Подобно на други клетъчни линии, B16-F10 също има някои предимства и недостатъци. В тази секция се обсъждат някои значими плюсове и минуси на тази клетъчна линия на кожен меланом.
Предимства
Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Предимствата на клетките B16-F10 са:
Метастатичен потенциал
Клетките B16F10 от кожен меланом проявяват висок метастатичен потенциал, което ги прави ценни за изучаване на раковите метастази и основните механизми.
In vitro туморен модел
Клетките B16-F10 служат като in vitro модел за изучаване на прогресията и растежа на рака, като помагат на изследователите да разберат клетъчните и молекулярните механизми, които стоят в основата на рака.
Недостатъци
Недостатъците, свързани с клетъчната линия B16-F10, са:
Клетъчна линия, получена от мишки
B16-F10 е клетъчна линия, получена от мишки, което ограничава приложимостта ѝ в изследвания, специфични за човека. Резултатите от изследванията с тези клетки не винаги могат да бъдат пренесени към човешката биология.
Приложения на клетките B16-F10 в научните изследвания
Клетъчната линия B16-F10 се използва широко в изследванията на рака. Тук се обсъждат няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия.
- Изследвания в областта на рака: Клетъчната линия B16-F10 е ценен модел за изучаване на процесите в раковите клетки, включително пролиферация, инвазия, миграция и клетъчна смърт или апоптоза. Освен това тя помага на изследователите да получат по-добро разбиране за молекулярните механизми и пътища, които управляват тези клетъчни процеси. Проучване, проведено през 2018 г., изследва ролята на CCR5 (C-C хемокинов рецептор тип 5) в прехода на меланомните клетки от епителни към мезенхимни клетки и в метастазирането. Резултатите показаха, че дефицитът на CCR5 ограничава растежа на тумора и метастазите, докато високата експресия води до засилен растеж и метастази на B16-F10 клетки. По-нататъшни изследвания съобщават, че CCR5 регулира експресията на TGFβ1, който регулира PI3K/AKT/GSK3β сигнализацията, за да стимулира епителиално-мезенхимния преход и клетъчната миграция [4].
- Тестване и разработване на лекарства: Туморните клетки на меланома B16F10 са силно агресивни и поради това са подходящи за тестване на потенциални антитуморни лекарства и лечения. Изследователите използват тези клетки и оценяват ефекта на различни съединения върху клетъчния растеж, пролиферацията и метастазирането, подпомагайки разработването на лекарства. Проучване, проведено през 2018 г. от Валентина Нани и колеги, изследва терапевтичните ефекти на хидроалкохолния екстракт от цветове на Spartium junceum. Проучването показа, че екстрактът от цветовете е ефективен при индуциране на стареене в клетките B16-F10, което води до потискане на клетъчния растеж и меланогенезата, като по този начин може да прояви потенциални противоракови свойства [5].
5. Публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10
Ето някои значими научни публикации, посветени на клетъчната линия B16-F10 на меланома:
Това проучване беше публикувано в списанието Nutrients (2020). В него се предлага, че етанолният екстракт от Sorghum bicolor има антимеланогенен ефект върху клетките на кожния меланом B16F10.
Калцитриолът инхибира пролиферацията и потенциално индуцира апоптоза в клетки B16–F10
Изследването, публикувано в Medical Science Monitor Basic Research (2022), предлага, че лекарството калцитриол оказва антитуморен ефект върху B16-F10 меланомни клетки чрез инхибиране на пролиферацията и индуциране на апоптоза.
Тази статия е публикувана в Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Резултатите разкриват, че кардолите, резорцинолови липиди, проявяват силна цитотоксичност върху клетъчната линия B16-F10.
Проучването, публикувано в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018), изследва антиметастатичния потенциал на екстракта от екзокарпа на Гинко билоба, използвайки клетки B16-F10.
Това проучване в World Neurosurgery (2018) предлага, че тимохинонът може да бъде ефективна терапия срещу интрацеребрални метастатични лезии, тъй като потиска растежа на B16-F10 клетките и индуцира апоптоза.
Ресурси за клетъчната линия B16-F10: протоколи, видеоклипове и др.
Ендотелните клетки B16F10 се използват широко в изследванията на рака на кожата. Ето някои онлайн ресурси, обясняващи протоколите за култивиране и трансфекция:
- Трансфекция на меланомни клетки B16F10: Този видео урок може да ви помогне да научите протокола за трансфекция на клетки B16-F10.
- Трансфекция на B16-F10: Този документ обяснява протокола за in vitro ДНК трансфекция на B16F10 клетки от кожен меланом.
Следният линк съдържа протокола за клетъчна култура за B16-F10 клетки:
- Субкултивиране на B16-F10: Този уебсайт съдържа полезна информация за туморните клетки на меланом B16F10. Той включва среди за растеж, време за удвояване, условия за култивиране и протокол за субкултивиране на клетки, както и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.
Източници
- Poste, G., et al., Сравнение на метастатичните свойства на клони на меланом B16, изолирани от култивирани клетъчни линии, подкожни тумори и индивидуални белодробни метастази. Cancer Research, 1982. 42(7): стр. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono и S. Sugita, Механофенотипиране на варианти на B16 меланомни клетки за оценка на ефикасността на лечението с (-)-епигалокатехин галат, използвайки конусовидно микрофлуидно устройство. Micromachines, 2019. 10(3): стр. 207.
- Данчу, С. и др., Поведение на четири различни подлинии на миши меланомни клетки B16: кожа на C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): стр. 73-80.
- Liu, J., et al., Високата експресия на CCR5 в меланома усилва епителиално-мезенхимния преход и метастазите чрез TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): стр. 481-493.
- Nanni, V., et al., Хидроалкохолният екстракт от цветовете на Spartium junceum L. инхибира растежа и меланогенезата в B16-F10 клетки чрез индуциране на стареене. Phytomedicine, 2018. 46: стр. 1-10.