Клетъчна линия A375 - ръководство за изследване на меланома

A375 е човешка клетъчна линия за меланом, широко използвана в токсикологията и имуноонкологичните изследвания. Изследователите използват тази клетъчна линия за изучаване на биологията на рака и сигналните пътища, за тестване или скрининг на потенциални противоракови средства и за разработване на нови и ефективни терапии.

Произход и общи характеристики на клетките A375

Познаването на произхода и общите характеристики на дадена клетъчна линия може да ви помогне да планирате използването ѝ в изследванията. В този раздел на статията ще бъдат разгледани произходът и характеристиките на клетъчната линия A375. Например, какво представлява клетъчната линия A375? Какви са характеристиките на клетъчната линия A375? Откъде идват клетките A375? Каква е морфологията на меланомните клетки A375? Какъв е размерът на клетките A375?

Клетъчната линия A375 за рак на кожата произхожда от експлантна култура на солиден тумор на 54-годишна жена със злокачествен меланом [1].
Клетките на A375 имат епителиална морфология.
Размерът на клетките A375 е сравнително по-малък в сравнение с други клетъчни линии. Приблизителният им диаметър е 12 µm.
Меланомните клетки A375 са хипотриплоидни. Модалният хромозомен номер за тази клетъчна линия е 62. Обикновено всяка клетка има девет маркерни хромозоми и по едно копие от нормалните хромозоми N2, N6 и N22.

Лекарят изследва образуванията по кожата на възрастен човек за рак на кожата.

A375 клетки: Информация за клетъчната култура

Клетъчните култури A375 са лесни за поддържане. Те не се нуждаят от особени изисквания към клетъчните култури. Този раздел ще ви помогне да научите необходимата информация за клетъчните култури. Например какво е времето за удвояване на A375. Каква е средата за клетъчната линия A375? Каква е гъстотата на засяване на A375? Адхезивни ли са меланомните клетки A375?

Ключови моменти при култивирането на клетките A375

Време за удвояване на популацията:	Времето за удвояване на популацията на A375 е 20 часа.
Прилепнали или в суспензия:	A375 е адхезивна човешка меланомна клетъчна линия.
Гъстота на засяване:	^{клетъчна}плътност: 1 x¹⁰⁴ клетки/cm2 е идеална за клетъчни култури от A375. Адхезивните клетки се изплакват с 1 x фосфатен буферен физиологичен разтвор (PBS) и се инкубират с разтвор за пасиране (Accutase). След това клетките се добавят към хранителната среда и се центрофугират. Събраните клетки се ресуспендират в хранителна среда и се разпределят в нови колби за растеж.
Среда за растеж:	DMEM се препоръчва като идеална среда за A375, когато е допълнена с 10% фетален говежди серум (FBS), 4,5 g/L глюкоза, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-глутамин и 1,0 mM натриев пируват. Средата за A375 трябва да се подновява 2-3 дни седмично.
Условия за растеж:	Меланомните клетки A375 се отглеждат в овлажнен инкубатор (37°C) с 5 % CO2.
Съхранение:	Замразените клетки A375 трябва да се съхраняват под -150°С в парната фаза на течен азот или в електрически фризер.
Процес на замразяване и среда:	За замразяване на клетъчната линия A375 се използват среди CM-1 или CM-ACF. За защита на жизнеспособността на клетките е избран бавен процес на замразяване, който позволява постепенно намаляване на температурата с 1 °C.
Процес на размразяване:	Замразеният флакон с меланомни клетки A375 се разбърква бързо на водна баня за 40 до 60 секунди, докато остане само малка ледена бучка. Клетките се добавят с прясна среда и се центрофугират, за да се отстранят елементите на замразяващата среда. Получената клетъчна пелета отново се ресуспендира и се изсипва в нови колби.
Ниво на биологична безопасност:	Културите A375 се обработват и поддържат в лабораторни условия на ниво на биологична безопасност 1.

Конфлуентен слой от адхерентни клетки A375 при 20x увеличение.

Предимства и ограничения на клетъчната линия A375

Подобно на други клетъчни линии, меланомната клетъчна линия A375 е свързана с уникална комбинация от предимства и ограничения, което я прави ценен инструмент за изследване на меланомния рак. В този раздел са изброени само няколко важни предимства и недостатъци на клетъчната линия A375.

Предимства

По-долу са посочени значителните предимства на клетките A375:

Модел на меланомен тумор: Клетъчната линия A375 е получена от злокачествен меланомен тумор, като по този начин служи като безценен туморен модел за изследване на биологията на меланома и терапевтичните интервенции. Тези клетки притежават меланомни свойства, като например висока степен на пролиферация и инвазивност.
Туморогенност: Клетките A375 са силно туморогенни, което означава, че могат да образуват тумори. Съобщава се, че клетките A375 образуват агресивни амеланотични меланоми при швейцарски мишки NIH, третирани с антитимоцитен серум (имуносупресивен агент).
Добре характеризирани: A375 е генетично добре характеризирана клетъчна линия. Тя притежава специфични генетични мутации като меланома. Мутациите на A375 включват промяна на гена A375 BRAF, което я прави чувствителна към специфични за BRAF инхибитори. Този генетичен профил превръща клетките A375 в чудесен инструмент за изследване на рака за изучаване на основните молекулярни пътища и целеви терапии.

Ограничения

Ограниченията, свързани с клетките A375, са:

Ограничения при in vitro: A375 е ин витро модел на тумор. Въпреки че имитира характеристиките на меланома, той не може да представи напълно сложността на меланомните тумори. Поради това трябва да се внимава, когато резултатите от in vitro се обобщават за клинични проучвания.

Закупете вашите клетки A375 сега

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300110

Изследователски приложения на клетъчната линия A375

Клетъчната линия A375 има широко приложение в изследванията на рака. Ето някои от най-често срещаните области, в които се използват клетките A375.

Изследване на рака: Клетките A375 намират широко приложение в изследванията на меланома. Изследователите използват тези клетки, за да изследват биологията на рака на кожата, процесите и основните механизми на клетъчна сигнализация, включително клетъчна пролиферация, миграция и инвазия. Това може също така да помогне на изследователите да идентифицират нови молекулярни терапевтични цели. В проучване, проведено от Лин Жу и колегите му през 2019 г., са използвани силно агресивни меланомни клетки A375 и е установена ролята на микроРНК-3662 за растежа и инвазията на меланомните клетки A375. Резултатите от изследването гласят, че микроРНК-3662 е насочена към гена ZEB1 и регулира растежа на меланомните клетки in vitro и in vivo в туморен модел A375 [2]. По подобен начин изследване, проведено през 2018 г., установява, че пътищата PI3K/AKT и MAPK/ERK участват в пролиферацията и метастазирането на клетъчната линия A375 [3].
Откриване и изпитване на лекарства: Клетъчната линия A375 е полезен in vitro туморен модел за изпитване и скрининг на потенциални противоракови средства. Изследователите оценяват токсичността и ефикасността на нови химиотерапевтични лекарства, съединения и други терапии, като използват тези меланомни клетки A375. Например, в едно проучване са изследвани противораковите свойства на микро- и нановъзли, получени от грейпфрут, върху човешки меланомни ракови клетки A375. Резултатите разкриват, че микро- и нановъзлите предизвикват спиране на клетъчния цикъл и апоптоза и възпрепятстват генната експресия при клетъчната пролиферация, миграция и инвазия [4].

Клетки A375: Публикации

Тук са споменати някои значими научни публикации, в които се разглеждат клетки A375.

Витамин D и неговите нискокалорични аналози модулират противораковите свойства на цисплатин и дакарбазин в човешка меланомна клетъчна линия A375

Това проучване е публикувано в Journal of Oncology през 2019 г. В проучването се предлага, че съвместното лечение с витамин D и аналози подобрява противораковата активност на цисплатин и дакарбазин в меланомни клетки A375.

In vitro оценка на антимеланомното действие (клетъчна линия A375) на гел и екстракти от цели листа от избрани видове алое

Това изследване е публикувано в Journal of Herbal Medicine през 2022 г. В това проучване са изследвани антимеланомните ефекти на гела от алое вера при меланомни клетки A375.

Член на семейството на фермитина 2 насърчава прогресията на меланома чрез засилване на свързването на р-α-Пикс с Rac1 за активиране на MAPK пътя

В това проучване в Oncogene (2021 г.) се предлага, че членът на фермитиновото семейство 2 (FERMT2 или kindlin-2) насърчава прогресията на меланома чрез активиране на MAPK чрез свързване с p-α-Pix и Rac1.

FARP1 улеснява клетъчната пролиферация чрез модулиране на MAPK сигналния път при кожен меланом

Това проучване в The American Journal of Dermatopathology (2019 г.) предлага, че FARP1 може да улесни развитието и прогресията на кожния меланом. По този начин той може да бъде полезна терапевтична цел.

Цитотоксичен и апоптотичен потенциал на екстракти от Phyllodium elegans върху човешки ракови клетъчни линии

Тази научна статия е публикувана в Bioengineered (2019). В това проучване е изследвана цитотоксичната и апоптотичната активност на растителен екстракт от Phyllodium elegans върху човешки карциномни клетъчни линии, включително A375.

Ресурси за клетъчна линия A375: Протоколи, видеоклипове и др

По-долу са изброени няколко онлайн ресурса, включващи клетки A375.

Трансфекция на клетки A375: Този видео урок ще ви помогне да научите стъпка по стъпка трансфекцията на клетки A375.
Култивиране на клетки: Това видео съдържа много полезна информация за култивирането на клетъчни линии.

Протоколите за клетъчно култивиране на клетки A375 са изброени тук.

Клетъчна линия A375: Този линк съдържа полезна информация за култивирането и поддържането на клетъчна линия A375, включително среди за A375 и работа със замразени и пролифериращи култури A375.

Често задавани въпроси (ЧЗВ) за клетките A375

Препратки

Avram, S., et al., Стандартизация на модели на човешки меланом A375 върху хориоалантоидна мембрана на пилешки ембрион и Balb/c nude мишки. Oncol Rep, 2017 г. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 targets ZEB1 and attenuates the invasion of the highly aggressive melanoma cell line A375 (МикроРНК-3662 е насочена към ZEB1 и отслабва инвазията на високоагресивната меланомна клетъчна линия A375). Cancer Manag Res, 2019 г. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via suppressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways. Life sciences, 2018 г. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.