Клетъчна линия KG-1
КлеткитеKG-1 представляват клетъчна линия за левкемия, получена от човека, която се използва широко в биомедицинските изследвания. Те предлагат разнообразни приложения в имунологията, рака и токсикологичните изследвания. Изследователите използват тези клетки за изучаване на механизмите на заболяванията и за тестване на потенциални терапии. Тази статия ще предостави изчерпателна информация за клетъчната линия KG-1, която може да ви помогне в работата ви. По-специално в нея ще бъдат разгледани:
- Общи характеристики и произход на клетъчната линия KG-1
- Информация за култивирането на клетъчната линия KG-1
- Клетъчна линия KG-1: Предимства и ограничения
- Приложения на KG-1 клетки в научните изследвания
- Публикации за KG-1 клетки
- Ресурси за клетъчната линия KG-1: Протоколи, видеоклипове и др
1. Общи характеристики и произход на клетъчната линия KG-1
Произходът и общите характеристики на дадена клетъчна линия помагат на изследователя да реши дали да я използва в работата си. Можете да проучите тази информация, преди да започнете работа с нея. Този раздел от статията е посветен на произхода и характеристиките на макрофагите KG-1. Тук ще научите: Какво представляват клетките KG-1? Какво представлява клетъчната линия KG-1a? Какъв е произходът на клетъчната линия KG-1? Каква е морфологията на KG-1?
- KG-1 е лимфобластна клетъчна линия, получена от аспират на костен мозък на мъж от европеидна раса (59 години) с остра миелогенна левкемия. Тя е създадена от Koeffler и Golde през 1978 г. Тези клетки са предимно в промиелоцитен или миелобластен стадий на зреене [1].
- Клетките KG-1 притежават лимфобластна морфология.
- Кариотипът на клетъчната линия KG-1 показва псевдодиплоиден модален брой хромозоми.
KG-1 и KG-1a
KG-1a е подлиния на родителските клетки KG-1. Тя е създадена след 35 пасажа на клетъчната линия KG1. Тя е по-слабо диференцирана в сравнение с клетъчната линия KG-1. Освен това тази подлиния е цитохимично, морфологично и функционално по-малко зряла в сравнение с родителската клетъчна линия (KG-1).
2. Информация за култивирането на клетъчната линия KG-1
В този раздел на статията ще бъде разгледана цялата задължителна информация за култивирането на KG-1 клетъчна линия, която може да улесни работата ви. Тук ще научите: Какво е времето за удвояване на клетъчната линия KG 1? Какви са условията за култивиране на макрофаги от KG-1? Как се култивират клетките KG-1?
Ключови моменти при култивирането на клетките KG-1
|
Време на удвояване: |
Времето за удвояване на KG-1 е приблизително 45 часа. То обаче може да варира в зависимост от условията на култивиране. |
|
Прилепнали или в суспензия: |
Клетките KG-1 растат в суспензия. |
|
Клетъчна плътност: |
Оптималната клетъчна плътност за клетъчната линия KG1 е от 1 до 3 x105 клетки/ml. За субкултивиране клетъчната суспензия се прехвърля в стерилна епруветка и се центрофугира. След това събраните клетки се добавят с прясна среда и внимателно се ресуспендират. След това клетките се разпределят в нови колби и се култивират при оптимална клетъчна плътност. Клетките могат да се разделят, когато достигнат максимална клетъчна плътност от 1 - 2 x106 клетки/ml. |
|
Растежна среда: |
За култивиране на клетките KG-1 се използва IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), съдържаща 10 % FBS, 4,5 g/L глюкоза, 4 mM L-глутамин, 1,0 mM натриев пируват и 3,0 g/L NaHCO3. Средата трябва да се подменя след три дни. |
|
Условия за растеж: |
Клетъчната линия KG1 AML се култивира в овлажнен инкубатор при температура 37 °C и 5 % CO2. |
|
Съхранение: |
Замразените клетки се съхраняват в парната фаза на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури, за да се защити жизнеспособността на клетките. |
|
Процес на замразяване и среда: |
CM-1 или CM-ACF са подходящи за замразяване на клетки KG-1. Клетките се замразяват чрез бавен процес на замразяване, за да се предпазят от шок. Този метод позволява постепенно понижаване на температурата с 1 °C в минута. |
|
Процес на размразяване: |
Клетките се размразяват на предварително затоплена водна баня при 37 °C, докато остане малка бучка лед. Размразените клетки се добавят към свежата среда и се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Клетъчната пелета се ресуспендира внимателно и се изсипва в нови колби, съдържащи среда за растеж. |
|
Ниво на биологична безопасност: |
Лабораторията с ниво на биологична безопасност 1 е от съществено значение за поддържането на клетъчни култури KG-1. |
3. KG-1 клетъчна линия: Предимства и ограничения
Подобно на други клетъчни линии, клетъчната линия за миелоидна левкемия KG-1 също е свързана с много предимства и ограничения. В този раздел ще се запознаем с някои от тях, които могат да бъдат от решаващо значение при вземането на решение за използването ѝ във вашето изследване.
Предимства
Основните предимства на клетките KG-1 са:
-
Лесно култивиране
Клетките KG-1 се култивират лесно в изследователските лаборатории, като не се нуждаят от сложни изисквания за клетъчно култивиране. Лесното им поддържане и условия на растеж осигуряват достъп до широк спектър от изследователи с основни съоръжения за клетъчни култури.
-
Модел на остра миелоидна левкемия (ОМЛ)
Получена от пациент от мъжки пол с остра миелоидна левкемия (ОМЛ), клетъчната линия KG-1 AML служи като ценен инструмент за изследване на биологията на ОМЛ и провеждане на изследвания на потенциални терапевтични средства, предлагайки информация за основните механизми и стратегии за лечение на това заболяване.
ограничения
Ограниченията, свързани с клетъчната линия KG1, са следните:
-
Ин витро модел
Клетките KG-1 са ценен in vitro модел за изследвания на АМЛ; важно е обаче да се отбележи, че те може да не възпроизвеждат напълно сложността на заболяването in vivo, служейки като опростен клетъчен модел, който може да не обхваща всички аспекти на биологията на АМЛ.
4. Приложения на клетките KG-1 в научните изследвания
KG-1 предлага няколко обещаващи приложения в биомедицинските изследвания. Някои от важните изследователски приложения на макрофагите KG1 включват:
- Изследване на рака: Клетките KG-1 са получени от пациент с остра миелоидна левкемия и поради това се считат за ценен изследователски инструмент за проучване на биологията на AML. Изследователите използват тези клетки, за да проучат клетъчните и молекулярните механизми, определящи развитието, растежа и резистентността към лекарства при AML. Това включва също така идентифициране и откриване на нови биомаркери, генетични мутации и сигнални пътища, свързани с АМЛ. Като например проучване, проведено през 2019 г., изследва, че дългата некодираща РНК linc00239 улеснява резистентността към доксорубицин и злокачественото поведение в клетките на острата миелоидна левкемия KG-1. По-нататъшно проучване разкрива, че lncRNA активира PI3K/Akt/mTOR сигнализацията, за да упражни тези ефекти в клетките на AML [2].
- Токсикология: Клетъчната линия KG1 се използва широко в токсикологичните изследвания. Изследователите тестват токсичността и ефикасността на потенциални терапевтични агенти, включително химиотерапевтични лекарства и целеви терапии върху клетките на KG1 миелоидна левкемия, за да идентифицират обещаващи кандидати за лекарства за бъдещи предклинични и клинични оценки. Изследванията, проведени през 2018 г., анализират токсичността на нанонизоми, съдържащи доксорубицин, върху клетъчната линия KG1 AML. Проучването предлага, че нанониозомата е подходящ носител за доставка на лекарство, тъй като повишава ефективността на лечението [3]. В друго изследване учените проучват терапевтичните ефекти на чай от коприва, приготвен от листата на растението Urtica dioica. Проучването разкрива, че този воден екстракт от листата на растението оказва антитуморно действие при клетки на остра миелоидна левкемия, KG-1 и U937 [4].
5. Публикации за клетките KG-1
В този раздел на статията са изброени няколко интересни научни публикации за клетките KG-1.
Тази статия е публикувана в Journal of Cellular Physiology (2019 г.). В изследването се предлага, че съединението кверцетин сенсибилизира клетъчната линия KG1 AML срещу лиганда, индуциращ апоптоза, свързан с TNF (TRAIL), и може да повиши ефекта на цитотоксичността, предизвикана от TRAIL, в клетките.
KLF8 засилва растежа на клетките на остра миелоидна левкемия и гликолизата чрез пътя AKT/mTOR
В тази статия в Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022 г.) се предлага понижаването на krüppel-like transcription factor 8 да потиска пролиферацията на клетките на AML и гликолизата, като насърчава апоптозата чрез регулиране на сигналния път AKT/mTOR.
Ефекти на сорафениб и арсенов триоксид върху клетъчни линии U937 и KG-1: Апоптоза или автофагия?
Това проучване в Cell Journal (Yakhteh) (2020) изследва потенциалните ефекти на арсеновия триоксид и сорафениб върху клетките U937 и KG-1.
Това проучване, публикувано в Medical Oncology (2020), оценява OXPHOS и гликолизата като терапевтични цели в клетъчната линия на AML, KG-1.
В тази публикация за проектиране, разработване и терапия на лекарства от 2020 г. се предлага съединенията на куркумин и талидомид да оказват синергично апоптотично действие в клетките KG-1 чрез намаляване на експресията на STAT3 и Bcl-xL.
6. Ресурси за клетъчната линия KG-1: Протоколи, видеоклипове и др
По-долу са изброени няколко налични онлайн ресурса за клетките KG-1.
- Субкултивиране на суспензионни клетки: Това видео описва протокола за субкултивиране на суспензионни клетъчни култури като KG-1.
Следната връзка съдържа протокола за клетъчната култура KG-1:
- KG-1 клетъчна линия: Този уебсайт съдържа основна информация за клетъчната линия KG-1. Той включва информация за средите на клетъчната линия и протоколи за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.
Препратки
- Pelliccia, F., V. Ubertini, and N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to use cell lines in research (Значението на молекулярно-цитогенетичния анализ преди използването на клетъчни линии в изследванията): Случаят с клетъчната линия за левкемия KG-1a. Oncol Lett, 2012 г. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Long non-codingRNA linc00239 promotes malignant behaviors and chemoresistance against doxorubicin partially via activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway in acute myeloid leukaemia cells ( ДълганекодиращаРНК linc00239 насърчава злокачественото поведение и химиорезистентността към доксорубицин частично чрез активиране на пътя PI3K/Akt/mTOR в клетки на остра миелоидна левкемия). Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Preparation and study of nano-niosomes containing doxorubicin and evaluation of its toxicity on acute myeloblastic leukemia cell line KG-1 (Приготвяне и изследване на нанонизоми, съдържащи доксорубицин, и оценка на токсичността им върху клетъчна линия на остра миелобластна левкемия KG-1 ). Payavard Salamat, 2018 г. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Nettle tea inhibits growth of acute myeloid leukemia cells in vitro by promoting apoptosis (Чай от коприва инхибира растежа на клетки на остра миелоидна левкемия in vitro чрез насърчаване на апоптозата ). Nutrients, 2020 г. 12(9): p. 2629.