Клетки AGS – Изследване на клетките AGS от стомашен аденокарцином в онкологичните проучвания
AGS клетките представляват клетъчна линия от човешки стомашен аденокарцином, която се използва широко в биомедицинските изследвания. По-специално, тя се използва за изучаване на биологията на рака на стомаха, включително растежа, развитието, прогресията и терапевтичните интервенции на тумора. Освен това, тя се използва за изследване на взаимодействията между гостоприемника и патогена.
- Среда за растеж
- За култивиране на AGS клетки се използва среда DMEM, съдържаща 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 4,5 g/L глюкоза, 1,5 g/L NaHCO3 и 1,0 mM натриев пируват. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване на AGS клетките варира между 24 и 48 часа.
- Тип растеж
- AGS клетките са адхезивни. Те растат в монослоеве.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-2
- Налични от
- Cytion — Поръчайте AGS
- Общи характеристики и произход на AGS клетките
- Информация за култивирането на клетъчната линия AGS
- Клетъчна линия AGS: предимства и ограничения
- Приложения на AGS клетките
- 5. Научни публикации за клетъчната линия AGS
- Ресурси за клетъчната линия AGS: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Общи характеристики и произход на AGS клетките
Преди да започнете да работите с клетъчна линия, е необходимо да знаете нейния произход и общите й характеристики. В тази секция ще бъдат разгледани следните въпроси: Какви са AGS клетките? Какъв е произходът на AGS клетките? Каква е морфологията на раковата клетъчна линия AGS?
- Клетъчната линия AGS е получена от стомашна тъкан на 54-годишна жена от кавказки произход с гастричен аденокарцином. Тя е изолирана през 1979 г. [1].
- AGS клетките имат епителиална морфология.
- Стомашните епителни AGS клетки са хипердиплоидни. Модалният брой хромозоми за AGS клетките е 49, което се среща в почти 60% от клетките. Полиплоидия се среща също в приблизително 3,6% от клетките.
Информация за култивирането на клетъчната линия AGS
За правилното боравене и управление на клетъчна линия трябва да познавате основните концепции за култивирането ѝ. По-конкретно, трябва да научите: Какво е времето за удвояване на AGS клетките? Каква е средата за AGS клетките? Как се извършва субкултивирането на AGS клетките? Кои среди за замразяване се използват за стомашни епителни AGS клетки?
Ключови моменти при култивирането на AGS клетки
Време за удвояване:
Времето за удвояване на AGS клетките варира между 24 и 48 часа.
Адхезивни или в суспензия:
AGS клетките са адхезивни. Те растат в монослоеве.
Плътност на засяване:
AGS клетките се засяват при клетъчна плътност от 1 x 104 клетки/cm2. При тази плътност клетките образуват конфлуентен монослой за 3 до 5 дни. След отстраняване на старата среда, клетките се изплакват с 1 x PBS и се инкубират с разтворител Accutase. Отделените клетки се ресуспендират в културална среда и се центрофугират. Клетъчният пелетен се ресуспендира отново и след преброяване на AGS клетките, те се разпределят в нова колба за растеж.
Среда за растеж:
За култивиране на AGS клетки се използва DMEM среда, съдържаща 10% FBS, 4 mM L-глутамин, 4,5 g/L глюкоза, 1,5 g/L NaHCO3 и 1,0 mM натриев пируват. Средата трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:
AGS клетките се съхраняват в овлажнен инкубатор (при температура 37 °C) с 5% CO2.
Съхранение:
Замразените AGS клетки се съхраняват в електрически фризери при температура под -150 °C или в парофазата на течен азот за по-дълъг период от време.
Процес на замразяване и среда:
За замразяването на AGS клетки се използва среда CM-1 или CM-ACF. Замразяването на клетките се извършва чрез бавен процес на замразяване, който позволява понижение на температурата само с 1°C на минута и предпазва жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:
Замразените стомашни епителни клетки се разбъркват бързо във водна баня при 37 °C в продължение на 40 до 60 секунди. Размразените клетки се ресуспендират в свежа културална среда и се изсипват в нови колби за отглеждане. След 24-часова инкубация средата се подменя, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване. В противен случай размразените клетки се центрофугират и елементите на средата за замразяване се отстраняват. След това събраните клетки се ресуспендират отново и се разпределят в колбата, съдържаща културалната среда.
Ниво на биологична безопасност:
За култивирането на AGS клетки са необходими лабораторни условия с ниво на биологична безопасност 2.
Клетъчна линия AGS: предимства и ограничения
В тази част от статията ще бъдат разгледани някои от основните предимства и ограничения, свързани с AGS клетките.
Предимства
Основните предимства на стомашните епителни AGS клетки са:
Лесни за култивиране
Клетъчната линия AGS на стомашен карцином се поддържа лесно в лабораториите за клетъчни култури. Тя няма сложни и специфични изисквания за култивиране. Освен това, тя показва добри характеристики на растеж, което я прави идеален избор за изучаване на биологията на рака на стомаха.
Значение за рака на стомаха
AGS клетките са получени от човешки стомашен аденокарцином, което ги прави широко използвани за изучаване на биологията на стомашния карцином и терапевтичните интервенции.
Ограничения
Ограничението, свързано с клетъчната линия AGS, е:
Клетъчен модел in vitro
AGS клетките се култивират в лаборатории за биомедицински изследвания при изкуствени условия. Поради това е възможно те да не възпроизвеждат напълно микросредата на рака на стомаха in vivo, както и други клетъчни и молекулярни взаимодействия.
Приложения на AGS клетките
Клетките AGS се използват специално за изучаване на биологията на рака на стомаха. Те имат много други обещаващи приложения в биомедицинската област. Някои от интересните приложения на клетките AGS в научните изследвания са:
- Изследване на рака на стомаха: Клетките AGS са отличен изследователски инструмент за проучване на клетъчните и молекулярните механизми, лежащи в основата на растежа, метастазирането и инвазията на рака на стомаха. Изследователите също така използват стомашни епителни клетки AGS за изучаване на различни клетъчни процеси, генетични мутации и сигнални пътища в развитието на рака на стомаха. Проучване, публикувано в Oncology Reports (2019), установи, че микроРНК-183-5p.1 стимулира пролиферацията, миграцията и инвазията на туморните клетки чрез инхибиране на сигналната каскада Bcl 2/P53. Освен това, той също така потиска експресията на гена TPM1, за да упражни тези ефекти. По този начин както микроРНК, така и TPM1 се предлагат като ефективни молекулни мишени за разработване на целеви терапии срещу рак на стомаха [2].
- Скрининг на лекарства: Клетките AGS се използват често за скрининг на нови и ефективни лекарства срещу рак на стомаха. Изследователите оценяват цитотоксичността и ефикасността на потенциални лекарства, използвайки клетъчната линия AGS. Проведени са и проучвания за идентифициране на нови молекулни мишени и разработване на нови целеви терапии за борба с карциномите на стомаха. Изследване, проведено през 2021 г., използва AGS клетки на рак на стомаха и проучи терапевтичния ефект на лекарството паклитаксел. Резултатите показаха, че паклитаксел предизвиква митотична катастрофа, неразделна част от механизма на апоптозата или клетъчната смърт в AGS клетките. Освен това, той също така стимулира автофагията в клетките на рак на стомаха [3].
- Взаимодействия между гостоприемник и патоген: Клетъчната линия AGS се използва и за изследване на взаимодействията между гостоприемник и патоген. Това помага на изследователите да разберат клетъчните механизми и реакции, свързани с инфекцията. Например, проучване, проведено през 2020 г., установи, че малки некодиращи РНК, присъстващи във везикулите на външната мембрана на Helicobacter pylori, намаляват секрецията на интерлевкин 8 в човешки AGS клетки [4].
5. Научни публикации за клетъчната линия AGS
В тази част от статията ще бъдат разгледани няколко интересни и най-цитирани научни публикации, посветени на AGS клетките.
Това проучване, публикувано в Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), предлага, че салидрозидът, естествено съединение, индуцира защитна автофагия и клетъчна смърт в епителните AGS клетки на стомаха чрез модулиране на сигналния път PI3K/AKT/mTOR.
Това проучване беше публикувано в Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). То изследва синергичния противораков ефект на полизахарида от астрагал и лекарството апатиниб в AGS клетки. Резултатите от проучването разкриха, че астрагалът усилва антитуморните ефекти на апатиниб чрез потискане на AKT сигнализацията.
Това проучване, публикувано в списанието „Journal of Ethnopharmacology“ (2018 г.), предлага, че куркузедоалидът, естествено съединение от растението Curcuma zedoaria Roscoe, допринася за неговия цитотоксичен потенциал срещу AGS клетки.
Тази публикация в Gene (2018) предлага, че регулацията на FOXA1 потиска пролиферацията на AGS клетките на стомашен аденокарцином, както и епителиално-мезенхимния преход (EMT) и инвазията.
Тази научна статия беше публикувана в International Journal of Medical Microbiology през 2020 г. В това проучване бяха използвани AGS клетки за изследване на взаимодействията между гостоприемник и патоген. Резултатите показаха, че Helicobacter pylori съдържа некодираща РНК във везикулите на външната си мембрана, която влияе върху нивата на IL-8 в AGS клетките.
Ресурси за клетъчната линия AGS: протоколи, видеоклипове и др.
По-долу са представени няколко ресурса, посветени на AGS клетките.
- Протокол за трансфекция на AGS клетки: Това видео е постъпково ръководство за изучаване на протокола за трансфекция на стомашни епителни AGS клетки.
Следният линк съдържа протокола за култивиране на AGS клетки.
- Протокол за култивиране на AGS клетки: Този уебсайт съдържа полезна информация за среди за AGS клетки и протоколи за култивиране на клетки. Накратко, той предоставя протокол за субкултивиране на стомашни епителни AGS клетки и работа с пролифериращи и криоконсервирани AGS култури.
- Субкултивиране на AGS клетки: Този сайт обяснява подробно процедурата за субкултивиране на AGS клетки.
Източници
- Phuc, B.H., et al., Сравнителна геномика на два виетнамски щама Helicobacter pylori, CHC155 от пациент с рак на стомаха извън кардията и VN1291 от пациент с язва на дванадесетопръстника. Scientific Reports, 2023. 13(1): стр. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1 насърчава миграцията и инвазията на AGS клетки при рак на стомаха, като се насочва към TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): стр. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., Ефектът на паклитаксел върху апоптозата, автофагията и митотичната катастрофа в AGS клетки. Scientific Reports, 2021. 11(1): стр. 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNA, опаковани от везикули на външната мембрана на Helicobacter pylori, отслабват секрецията на IL-8 в човешки клетки. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): стр. 151356.