Среда за клетъчна култура

Култивираните клетки изискват щателен контрол на околната среда за успешен растеж и поддръжка. Цялостният подход включва осигуряване на стерилност, осигуряване на хранителни вещества, стабилност на рН и контрол на температурата.

Стерилни условия и доставка на хранителни вещества

За да се предотврати замърсяването и да се осигури жизнеспособността на клетките, стерилната среда е от решаващо значение. Обикновено това се постига чрез асептични техники и специализирано оборудване, като например аспиратори с ламинарен поток. Хранителните вещества се доставят чрез среди за култивиране, които съдържат смес от основни съставки, включително:

  • Неорганични соли: Жизненоважни за поддържане на осмотичния баланс и осигуряване на необходимите йони за клетъчните дейности.
  • Въглехидрати: Служат като източници на енергия; глюкозата е най-често използваната захар.
  • Аминокиселини: градивните елементи на протеините; някои от тях са от съществено значение и не могат да се синтезират от клетките.
  • Витамини: Действат като кофактори за ензимни реакции; витамините от група В са от съществено значение за клетъчния метаболизъм.
  • Мастни киселини и липиди: Основни компоненти за целостта и функцията на клетъчната мембрана.
  • Протеини и пептиди: В безсерумните среди те заместват растежните фактори и свързващите протеини, които обикновено се доставят от серума.
  • Серум: Често се включва като източник на растежни фактори, въпреки че безсерумните алтернативи стават все по-популярни, за да се намалят променливостта и рисковете от замърсяване.
  • pH и температурна стабилност: Клетките обикновено се нуждаят от рН в диапазона 7,2-7,4 за оптимален растеж. Това се регулира от буферни системи, които могат да бъдат на базата на СО2/бикарбонат или да се постигнат по химичен път с помощта на агенти като HEPES. Температурата се поддържа около 37 °C, за да се имитират физиологични условия.

Варианти и оптимизация на средата

С течение на годините са разработени различни базови среди, които отговарят на изискванията на специфични клетъчни типове:

  • Балансирани солни разтвори: Формират основата на по-сложни медийни формулировки.
  • Базови среди, като например минимална есенциална среда (МЕМ), се използват за първични култури и диплоидни клетки.
  • Сложни среди: Подобно на RPMI 1640, те са подходящи за по-широк спектър от клетки на бозайници.
  • Среди без серум: Те са пригодени за специфични приложения, като намаляват риска от замърсяване с компоненти от животински произход.

Подготовка на средите и контрол на качеството

Медиите могат да се приготвят на място от основните съставки или да се закупят като готови разтвори. Контролът на качеството включва гарантиране на отсъствието на замърсители и правилната концентрация на съставките. За възстановяването на прахообразни среди е необходима висококачествена вода, а готовите среди трябва да се стерилизират, обикновено чрез филтриране.

Употреба на серума и съображения за безопасност

Използването на серум, особено на фетален говежди серум (FBS), е често срещано поради богатото му съдържание на растежни фактори. Въпреки това, поради опасения от заболявания като СЕГ, се следват строги протоколи за тестване и снабдяване, за да се гарантира безопасността.

Регулаторни насоки и тенденции

Нормативната уредба ръководи използването на материали от животински произход в културите, като подчертава значението на снабдяването и тестването. Тенденцията за премахване на такива материали, когато това е възможно, се отразява в разработването на алтернативи на среди без серум и без животни.

В заключение, средите за клетъчни култури играят основна роля в растежа и поддържането на клетките in vitro. Всеки компонент е внимателно подбран и оптимизиран, за да имитира средата in vivo, като осигурява на клетките условия за растеж, оцеляване и функционалност.

DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) е много гъвкава и широко използвана основна среда, предназначена за поддържане на растежа на разнообразни клетки от бозайници в биологичните изследвания. Тя служи като идеална среда за култивиране на първични фибробласти, неврони, глиални клетки, HUVEC, гладкомускулни клетки, както и на популярни клетъчни линии като HeLa, 293, Cos-7 и PC-12.
Това, което отличава DMEM от другите среди, е неговият уникален състав. Тя съдържа впечатляващо четирикратно увеличение на концентрацията на аминокиселини и витамини в сравнение с оригиналната Eagle's Minimal Essential Medium. Първоначално разработена с ниско съдържание на глюкоза (1 g/L) и натриев пируват, DMEM често се използва с по-високи нива на глюкоза, със или без натриев пируват. Забележително е, че DMEM не съдържа протеини, липиди или растежни фактори, което налага добавянето им. За да се постигне оптимален растеж, често срещан подход е DMEM да се допълни с 10 % фетален говежди серум (FBS). Освен това DMEM използва буферна система от натриев бикарбонат, която изисква 5-10% CO2 среда за поддържане на физиологично pH.
Модифицираната среда Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) е високо ценена сред определените среди за клетъчни и тъканни култури, като задоволява нуждите от растеж на различни фенотипи адхезивни клетки. Тя превъзхожда оригиналната среда на Игъл, разработена през 50-те години на миналия век за култивиране на пилешки клетки, чрез подобрената допълнителна формулировка, известна като модификация на Дюлбеко. Тази модификация значително повишава съдържанието на избрани аминокиселини и витамини до четири пъти в сравнение с оригиналната среда.
В областта на клетъчните култури DMEM играе жизненоважна роля като среда за растеж на различни типове клетки, включително първични клетки, стволови клетки и трансформирани клетки. Изследователите също така използват модифицираната версия на DMEM за широк спектър от изследователски приложения, като откриване на лекарства, тъканно инженерство и изследване на клетъчните сигнални пътища.

Контрол на качеството

Стерилно филтриран


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитени от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.


Състав



Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Аминокиселини
Глицин
30.00



L-аргинин HCl
84.00



L-цистин 2 HCl
62.57



L-глутамин
584.00



L-хистидин HClH2O
42.00



L-изолевцин
105.00



L-Leucine
105.00



L-лизин HCl
146.00



L-метионин
30.00



L-фенилаланин
66.00



L-серин
42.00



L-Threonine
95.00



L-триптофан
16.00



L-тирозин 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Витамини
Холин хлорид
4.00



D-калциев пантотенат
4.00



Фолиева киселина
4.00



мио-Инозитол
7.20



Никотинамид
4.00



Пиридоксал HCl
4.00



Рибофлавин
0.40



Тиамин HCl
4.00


Неорганични соли
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Други компоненти
D-глюкоза
4500.00



Фенолно червено натриева сол
15.90



Натриев пируват
110.00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Една от най-широко използваните синтетични среди за клетъчни култури е Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Разработена от Хари Игъл, тази среда е въведена за първи път през 1959 г. и оттогава се е превърнала в популярен избор за различни видове клетки, отглеждани в монослоеве и адхезивни клетъчни линии.
Какво се съдържа в ЕМЕМ?
EMEM е модифицирана версия на минималната основна среда на Eagle, съдържаща балансиран солен разтвор на Earle, неесенциални аминокиселини, L-глутамин, натриев пируват и натриев бикарбонат. Важно е да се отбележи, че това ниво на натриев бикарбонат е предназначено за употреба при 5% CO2 във въздуха. За да се запази ефективността ѝ, се препоръчва средата да се съхранява на тъмно при температура от 2°C до 8°C, когато не се използва.
За какво се използва ЕМЕМ?
Минималната есенциална среда на Eagle (EMEM) е среда за клетъчни култури, която може да поддържа клетки в тъканни култури. Средата съдържа по-високи концентрации на аминокиселини, което позволява по-точно доближаване до протеиновия състав на култивираните клетки на бозайници. EMEM може да се използва за култивиране на различни клетки, включително фибробласти, клетки от клетъчна линия на човешки рак на черния дроб (HepG2) и клетки от астроцити, получени от човешки фетален мозъчен прогенитор (PDA). Обикновено се използва в присъствието на фетален говежди серум (FBS), телешки или конски серум.
По какво се различава ЕМЕМ от другите среди за клетъчни култури?
Въпреки че ЕМЕМ и модифицираната среда на Dulbecco's Eagle's medium (DMEM) имат някои сходства, те също така се различават. И в двете среди липсват протеини и те съдържат аминокиселини, соли, глюкоза и витамини, необходими за осигуряване на енергия на клетките и за поддържането им в тъканна култура. Съставът на DMEM обаче е модифициран така, че да съдържа до четири пъти повече витамини и аминокиселини и от два до четири пъти повече глюкоза, отколкото EMEM. Струва си да се отбележи, че ЕМЕМ също се различава от оригиналната формулировка на МЕМ.


Контрол на качеството

Стерилно филтриран


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитена от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.



Състав



Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Аминокиселини
L-аргинин HCl
126.00


L-цистин 2 HCl
31.30


L-глутамин
292.00


L-Histidine HClH2O
42.00


L-изолевцин
52.00


L-Leucine
52.00


L-лизин HCl
72.50


L-метионин
15.00


L-фенилаланин
32.00


L-треонин
48.00


L-триптофан
10.00


L-тирозин 2 Na 2H2O
51.90


L-Valine
46.00


Витамини
Холин хлорид
1.00


Витамини
D-калциев пантотенат
1.00


Фолиева киселина
1.00


мио-Инозитол
2.00


Никотинамид
1.00


Пиридоксал HCl
1.00


Рибофлавин
0.10


Тиамин HCl
1.00


Неорганични соли
CaCl2 2H2O
265.00


Неорганични соли
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Други компоненти
D-глюкоза
1000.00


Други компоненти
Фенолно червено натриева сол
11.00

25,00 €*
Среда Ham's F12, w: 1,0 mM стабилен глутамин, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,176 g/L NaHCO3
Средата Ham's F-12, известна също като Ham's F-12 Nutrient Mix, е широко използвана основна среда, предназначена специално за клетъчни култури. Тя е широко използвана за безсерумно, едноклетъчно напластяване на клетки от яйчници на китайски хамстер (CHO), белодробни клетки и миши L клетки. Освен това Ham's F-12 е предпочитана среда за анализ на клонова токсичност (CTA).
Едно от нейните забележителни предимства е способността да поддържа клетъчния растеж без необходимост от добавяне на серум. По този начин се елиминират потенциалните смущения, причинени от серумните компоненти, като се осигуряват последователни и надеждни експериментални резултати. Като осигурява среда за култивиране без серум, средата Ham's F-12 предлага на изследователите по-голям контрол върху техните изследвания.
Друга ключова характеристика на средата Ham's F-12 е нейната пригодност за нанасяне на едноклетъчни култури. Това я прави отличен избор за различни клетъчни линии, включително CHO клетки, белодробни клетки и миши L клетки. Оптимизираният състав на хранителните вещества в средата улеснява ефективното прикрепване и растеж на отделните клетки, като позволява създаването на хомогенни клетъчни култури с подобрена възпроизводимост.
Освен това средата Ham's F-12 е призната за предпочитана среда за анализ на клонова токсичност (CTA). Този тест играе решаваща роля при оценката на цитотоксичните ефекти на веществата върху клетките. Като използват средата Ham's F-12 в CTA, изследователите могат точно да оценят въздействието на различни съединения или третирания върху отделни клетки, предоставяйки ценна информация за токсикологичните профили.
Контрол на качеството

pH = 7,2 +/
- 0,02 при 20-25°C.
Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии.

Поддръжка

Съхранявайте в хладилник на тъмно при температура от +2°C до +8°C. Замразяването и затоплянето до +37°С намаляват до минимум качеството на продукта.
Не нагрявайте средата до повече от 37°С и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (напр. микровълнови уреди).
Ако трябва да се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го загрейте на стайна температура.
Срокът на годност на всяка среда, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство.

Състав




Компоненти
mg/L


Неорганични соли
Калциев хлорид x 2H2O
44,00



Меден(II) сулфат x 5H2O
0,00



Железен (II) сулфат x 7H2O
0,83



Магнезиев хлорид x 6H2O
122,00



Калиев хлорид
223,65



Натриев хлорид
7599,00



ди-натриев хидрогенфосфатбезводен
142,04



Цинков сулфат x 7H2O
0,86


Други компоненти
D(+)-глюкоза, безводна
1801,60



Хипоксантин
4,08



Линолова киселина
0,08



DL-α-липоева киселина
0,21



Фенол червено
1,20



Путресцин x 2HCl
0,16



Натриев пируват
110,00



Тимидин
0,73



NaHCO3
1176,00


Аминокиселини
L-аланин
8,91



L-аргинин x HCl
210,70



L-аспарагин x H2O
15,01



L-аспарагинова киселина
13,31



L-цистеин x HCl x H2O
35,12



L-аланил-L-глутамин
217,30



L-глутаминова киселина
14,71



Глицин
7,51



L-хистидин х HCl х H2O
20,96



L-изолевцин
3,94



L-Leucine
13,12



L-лизин x HCl
36,54



L-метионин
4,48



L-фенилаланин
4,96



L-пролин
34,53



L-серин
10,51



L-треонин
11,91



L-триптофан
2,04



L-тирозин
5,44



L-Valine
11,71


Витамини
D(+)-Биотин
0,01



D-калциев пантотенат
0,24



Холин хлорид
13,96



Фолиева киселина
1,32



мио-инозитол
18,02



Никотинамид
0,04



Пиридоксин x HCl
0,06



Рибофлавин
0,04



Тиамин x HCl
0,34



Витамин В12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM: Ham's F12 е широко призната и широко използвана базова среда за клетъчни култури за биологични изследвания. Тя служи като основен източник на хранителни вещества за растежа на различни клетъчни линии от бозайници, особено когато е допълнена с фетален говежди серум (FBS).

Тази уникална формула съчетава модифицирана среда на Дюлбеко (DMEM) и Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) в точно съотношение 1:1. Добавянето на L-глутамин допълнително подобрява нейния състав.

DMEM, получена от Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), предлага повишена концентрация на аминокиселини и витамини в сравнение с предшественика си. За разлика от нея, Ham's F-12 се основава на средата Ham's F-10, като осигурява допълнителен набор от основни компоненти.

За да се поддържа оптимален клетъчен растеж, обичайната практика е DMEM:Ham's F12 да се допълва с FBS с типична концентрация от 5-10 %. Тази добавка е необходима, тъй като в средата липсват хормони на растежа, липиди и протеини, които са от решаващо значение за клетъчното развитие.

DMEM:Ham's F12 включва pH буферна система и често се допълва с фенолово червено, индикатор за pH. Култивирането на клетки в DMEM:Ham's F12 или всяка друга среда, използваща бикарбонатна буферна система, изисква контролирана среда от 5-10 % CO2, за да се поддържат подходящи нива на рН.


Контрол на качеството

Стерилно филтриран


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитени от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.


Състав



Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Аминокиселини
Глицин
18.75


L-аланин
4.45


L-аргинин HCl
147.50


L-аспарагин H₂O
7.50


L-аспарагинова киселина
6.65


L-цистеин HCl H₂O
17.56


L-цистин 2 HCl
31.29


L-глутаминова киселина
7.35


L-глутамин
365.00


L-Histidine HCl H₂O
31.48


L-изолевцин
54.47


L-Leucine
59.05


L-лизин HCl
91.25


L-метионин
17.24


L-фенилаланин
35.48


L-пролин
17.25


L-серин
26.25


L-треонин
53.45


L-триптофан
9.02


L-тирозин динатриева сол
48.10


L-валин
52.85


Витамини
D-биотин
0.0035


Холин хлорид
8.98


D-калциев пантотенат
2.24


Фолиева киселина
2.66


мио-инозитол
12.60


Никотинамид
2.02


Пиридоксин HCl
0.031


Пиридоксал HCl
2.00


Рибофлавин
0.219


Тиамин HCl
2.17


Витамин В12
0.68


Неорганични соли
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Други компоненти
D-глюкоза
3151.00


Хипоксантин
2.40


HEPES
3574.50


Линолова киселина
0.042


Липоева киселина
0.105


Фенол червено натриева сол
8.63


Путресцин 2 HCl
0.081


Натриев пируват
55.00


Тимидин
0.365

25,00 €*
Среда Ham's F12K, w: 2,0 mM L-Glutamine, w: 2,0 mM Sodium pyruvate, w: 2,5 g/L NaHCO3
Представяме ви средата Ham's F-12K (Kaighn's), специализирана модификация на средата Ham's F-12, създадена да отговаря на уникалните изисквания на биологичните изследвания. Тази усъвършенствана среда предлага ясни предимства, като подобрява култивирането на първични човешки хепатоцити, както и на чернодробни клетки от плъхове и пилета, особено в условия на намалено съдържание на серум.

Средата Ham's F-12K (Kaighn's) е внимателно формулирана, за да оптимизира условията за клетъчно култивиране. Тя се отличава с обогатен състав, осигуряващ повишени нива на основни компоненти като аминокиселини и натриев пируват, както и допълнителни елементи, включително путресцин, тимидин, хипоксантин и цинк. Тези добавки дават възможност на изследователите да допълват средата с минимално количество серум или определени компоненти за специфични клетъчни типове, което улеснява прецизните експериментални условия.

Забележително е, че средата Ham's F-12K (Kaighn's) не съдържа протеини или растежни фактори. Следователно често е необходимо добавяне на растежни фактори и фетален говежди серум (FBS), което позволява на изследователите да адаптират средата към изискванията на техните специфични клетъчни линии. За оптимална ефективност концентрацията на FBS трябва да бъде внимателно оптимизирана за всяка клетъчна линия, като се гарантира оптимален растеж и функционалност.

За поддържане на физиологично рН в средата Ham's F-12K (Kaighn's) се използва буферна система от натриев бикарбонат (2,5 g/L), което налага контролирана среда от 5-10 % CO2 по време на култивирането. Това гарантира, че рН на средата остава в идеалния диапазон за клетъчен растеж и жизнеспособност
Контрол на качеството

pH = 7,2 +/
- 0,02 при 20-25°C.
Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии.

Поддръжка

Съхранявайте в хладилник на тъмно при температура от +2°C до +8°C. Замразяването, както и затоплянето до +37°C намаляват до минимум качеството на продукта.
Не нагрявайте средата до повече от 37°C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (напр. микровълнови уреди).
Ако трябва да се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го загрейте на стайна температура.
Срокът на годност на всяка среда, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство.

Състав




Компоненти
mg/L


Неорганични соли
Калциев хлорид x 2H2O
135,24



Меден(II) сулфат x 5H2O
0,00



Железен (II) сулфат x 7H2O
0,83



Магнезиев хлорид x 6H2O
105,72



Магнезиев сулфат x 7H2O
394,49



Калиев хлорид
283,29



Калиев дихидрогенфосфат
58,52



Натриев хлорид
7597,20



натриев хидрогенфосфатбезводен
115,02



Цинков сулфат x 7H2O
0,14


Други компоненти
D(+)-глюкоза, безводна
1260,00



Хипоксантин
4,08



DL-α-липоева киселина
0,21



Червен фенол
3,00



Путресцин x 2HCl
0,32



Натриев пируват
220,00



NaHCO3
2500,00



Тимидин
0,73


Аминокиселини
L-аланин
17,82



L-аргинин х HCl
421,40



L-аспарагин x H2O
30,02



L-аспарагинова киселина
26,62



L-цистеин x HCl x H2O
70,24



L-глутамин
292,20



L-глутаминова киселина
29,42



Глицин
15,01



L-хистидин х HCl х H2O
41,92



L-изолевцин
7,87



L-Leucine
26,24



L-лизин x HCl
73,04



L-метионин
8,95



L-фенилаланин
9,91



L-пролин
69,06



L-серин
21,02



L-треонин
23,82



L-триптофан
4,08



L-тирозин
10,87



L-Valine
23,42


Витамини
D(+)-Биотин
0,07



D-калциев пантотенат
0,48



Холин хлорид
13,96



Фолиева киселина
1,32



мио-инозитол
18,02



Никотинамид
0,04



Пиридоксин x HCl
0,06



Рибофлавин
0,04



Тиамин x HCl
0,34



Витамин В12
1,36

108,00 €*
Среда McCoys 5A (модифицирана), w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium е силно препоръчителна и специализирана среда, предназначена да улесни растежа и репликацията на вируси в първични клетъчни култури. Тя е спечелила значително признание за изключителната си ефективност в различни биологични изследователски приложения. Едно от най-известните приложения на McCoy's 5A Medium е използването му в култивирането на клетъчни линии от човешки колоректален карцином. По-специално, тя е била използвана в проучването на G-протеин-свързан рецептор, съдържащ богати на левцин повторения (LGR5), и неговата роля в метастазирането на колоректалния карцином. Тази среда е била ефективно използвана в култивирането на няколко клетъчни линии на колоректален карцином, включително HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b и TENN, което позволява на изследователите да се задълбочат в механизмите, лежащи в основата на метастазирането на колоректалния карцином. В допълнение към приложението си в изследванията на рака, средата McCoy's 5A се е доказала като незаменима в изследването на остеобластите. Изследователи, изучаващи йонната реактивност на хидроксиапатита с калциев дефицит в стандартни среди за клетъчна култура, са използвали тази среда за култивиране на остеобласти. Това приложение е улеснило по-доброто разбиране на взаимодействията между остеобластите и хидроксиапатита с калциев дефицит, допринасяйки за напредъка в областта на изследванията на костите. Средата McCoy's 5A е внимателно формулирана чрез модифициране на аминокиселините, съдържащи се в Basal Medium Eagle, за да осигури оптимална подкрепа за туморните клетки на черния дроб. Тази обогатена формула я прави подходяща за широка гама от установени клетъчни линии, както и за първични клетки, което допълнително повишава нейната гъвкавост и приложимост в различни изследователски условия. McCoy's 5A Medium разширява своите биохимични и физиологични ефекти отвъд туморните клетки на черния дроб. Тя е била успешно използвана за подпомагане на растежа в първични култури на костен мозък, кожа, венци, бъбреци, омент, надбъбречни жлези, бели дробове, далак, ембриони на плъхове и други видове клетки. Този широк спектър от приложения доказва широката полезност на McCoy's 5A Medium за подпомагане на растежа и поддържането на различни видове клетки за всеобхватни биологични изследвания. Формула Тази среда McCoy's 5A (модифицирана) съдържа 3,0 g/L глюкоза, стабилен глутамин, 2,0 mM натриев пируват и 2,2 g/L NaHCO3. Контрол на качеството pH = 7,2 +/
- 0,02 при 20-25 °C.  Всяка партида е тествана за стерилност и отсъствие на микоплазма и бактерии. Съхранение Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно място. Замразяването и затоплянето до +37°C намаляват качеството на продукта.  Не загрявайте средата до повече от 37°C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови уреди).  Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура. Срокът на годност за всички среди, с изключение на основната среда, е 6 до 8 седмици от датата на отваряне. Състав Съставки mg/L Неорганични солиКалциев хлорид x 2H2O132,00 Магнезиев сулфат97,67 Калиев хлорид400 Натриев хлорид6460 Динатриев хидроген фосфат (безводен)504 Други компонентиD(+)-глюкоза (безводен)3 000 Глутатион (редуциран)0 Месен пептон600 Фенол червена натриева сол11 АминокиселиниL-аланин13 L-аргинин x HCl42,14 L-аспарагин x H2O45,03 L-аспарагинова киселина19,97 L-цистеин x HCl x H2O31,75 L-глутамин (стабилен)219,15 L-глутаминова киселина22 Глицин7 L-хистидин x HCl x H2O20,96 L-хидроксипролин19,67 L-изолевцин39,3 L-левцин39,36 L-лизин x HCl36,54 L-метионин14,92 L-фенилаланин16,52 L-пролин17,27 L-серин26,28 L-треонин17,87 L-триптофан3,06 L-тирозин динатриева сол26,10 L-валин17,57 Витаминиp-Аминобензоена киселина1 Аскорбинова киселина0,56 D(+)-Биотин0,20 D-калциев пантотенат0,20 Холин хлорид5 Фолиева киселина10 Мио-инозитол36 Никотинамид0 Никотинова киселина0,5 Пиридоксал HCl0,5 Пиридоксин HCl0,50 Рибофлавин0,20 Тиамин HCl0 Витамин В122

30,00 €*
IMDM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 3,024 g/L NaHCO3
Модифицираната среда на Искове (IMDM) е сложна и обогатена среда за растеж на клетъчни култури. IMDM е модификация на DMEM, съдържаща селен, и има допълнителни аминокиселини, витамини и неорганични соли в сравнение с DMEM. В нея липсва желязо и се изисква допълване с фетален говежди серум (FBS). IMDM използва буферна система от натриев бикарбонат и изисква среда от 5-10 % CO2 за поддържане на физиологично рН.
IMDM е подходящ за бързо пролифериращи клетъчни култури с висока плътност, включително Jurkat, COS-7 и макрофаги. Различните модификации на IMDM, налични за редица приложения за клетъчни култури, могат да бъдат намерени с помощта на инструмента за избор на среди. Течните среди осигуряват основни хранителни вещества за всички приложения за клетъчни култури. Всяка от нашите висококачествени среди за клетъчни култури се произвежда в съответствие с първоначално публикуваната формула или модификации, необходими за постоянното функциониране и стабилност на средата за култура.
IMDM срещу DMEM
IMDM съдържа калиев нитрат вместо железен нитрат и HEPES и натриев пируват. Допълнителните компоненти в IMDM я правят по-подходяща за специализирани клетъчни типове и специфични приложения, отколкото DMEM.
IMDM срещу RPMI
IMDM и RPMI имат различни формули, които могат да бъдат от значение за стимулирането с PMA/йономицин. Една от съществените разлики е концентрацията на Ca2+. Докато RPMI съдържа 0,42 mM Ca2+, IMDM съдържа 1,49 mM.
Контрол на качеството

pH = 7,2 +/
- 0,02 при 20-25°C.
Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии.

Поддръжка

Съхранявайте в хладилник на тъмно при температура от +2°C до +8°C. Замразяването и затоплянето до +37°С намаляват до минимум качеството на продукта.
Не нагрявайте средата до повече от 37°С и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (напр. микровълнови уреди).
Ако трябва да се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го загрейте на стайна температура.
Срокът на годност на всяка среда, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство.
Състав




Компоненти
mg/L


Неорганични соли
Калциев хлорид x 2 H2O
219,00



Калиев хлорид
330,00



Калиев нитрат
0.076



Магнезиев сулфат, безводен
97,73



Натриев хлорид
4,505.00



Натриев дихидрогенфосфат, безводен
109,00



Натриев селенит
0,02


Други компоненти
D(+)-глюкоза, безводна
4,500.00



HEPES
5,958.00



Натриев пируват
110,00



Фенол червено
15,00


Аминокиселини
L-аланин
25,00



L-аргинин x HCl
84,00



L-аспарагин x H2O
25,00



L-аспарагинова киселина
30,00



L-цистин х 2HCl
91,24



L-глутамин
584,00



L-глутаминова киселина
75,00



Глицин
30,00



L-хистидин x HCl x H2O
42,00



L-изолевцин
104,80



L-Leucine
104,80



L-лизин x HCl
146,20



L-метионин
30,00



L-фенилаланин
66,00



L-пролин
40,00



L-серин
42,00



L-треонин
95,20



L-триптофан
16,00



L-тирозин x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Витамини
D(+)-Биотин
0.013



D-калциев пантотенат
4,00



Холин хлорид
4,00



Фолиева киселина
4,00



мио-инозитол
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3
Средата RPMI 1640, известна също като среда RPMI, е многофункционална среда за клетъчни култури, широко използвана в биологичните изследвания за култивиране на различни клетки от бозайници. Разработена от Джордж Е. Мур, Робърт Е. Гернер и Х. Адисън Франклин през 1966 г. в известния Комплексен център за ракови заболявания в Розуел Парк, тази среда получава името си от произхода си в Мемориалния институт в Розуел Парк (RPMI).
Първоначално създадена за поддържане на растежа на човешки левкемични клетки в суспензионни и монослойни култури, средата RPMI 1640 еволюира чрез модификации от изследователи и търговски доставчици, за да стане подходяща за разнообразни клетки на бозайници. Тя е изключително съвместима с клетъчни линии като HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, астроцити и карциноми.
Средата RPMI 1640 се отличава от другите среди за клетъчни култури поради уникалния си състав. Тя съдържа значително количество фосфати, аминокиселини и витамини. По-специално, тя включва биотин, витамин В12 и PABA, които отсъстват в Eagle's Minimal Essential Medium или Dulbecco's Modified Eagle Medium. Освен това средата RPMI 1640 показва значително повишени концентрации на витамините инозитол и холин. Тя обаче не съдържа протеини, липиди или растежни фактори. Поради това обикновено се налага добавяне на 10% фетален говежди серум (FBS), за да се осигурят оптимални условия за клетъчен растеж.
Буферната система на средата RPMI 1640 разчита на натриев бикарбонат и изисква 5-10% CO2 среда, за да се поддържа физиологично подходящо pH. Включването на редуциращия агент глутатион допълнително отличава тази среда от останалите.
Контрол на качеството

Стерилно филтрирани


Съхранение и срок на годност

Съхранявайте при температура от +2°C до +8°C, защитена от светлина.
След отваряне съхранявайте при 4°C и използвайте в рамките на 6-8 седмици.


Условия за транспортиране

Температура на околната среда


Поддръжка

Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Избягвайте замразяването и честото затопляне до +37°C, тъй като това намалява качеството на продукта.
Не нагрявайте средата над 37°C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови уреди.
Ако трябва да се използва само част от средата, отстранете необходимото количество и го загрейте до стайна температура преди употреба.



Състав




Категория
Компоненти
Концентрация (mg/L)


Аминокиселини
Глицин
10.00



L-аланил-L-глутамин
434.40



L-аргинин
200.00



L-аспарагинH2O
56.82



L-аспарагинова киселина
20.00



L-цистин 2HCl
65.20



L-глутаминова киселина
20.00



L-Histidine HClH2O
20.27



L-хидрокси-L-пролин
20.00



L-изолевцин
50.00



L-Leucine
50.00



L-лизин HCl
40.00



L-метионин
15.00



L-фенилаланин
15.00



L-пролин
20.00



L-серин
30.00



L-Threonine
20.00



L-триптофан
5.00



L-тирозин 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Витамини
р-аминобензоена киселина
1.00



D-биотин
0.20



Холин хлорид
3.00



D-калциев пантотенат
0.25



Фолиева киселина
1.00



мио-Инозитол
35.00



Никотинамид
1.00



Пиридоксин HCl
1.00



Рибофлавин
0.20



Тиамин HCl
1.00



Витамин В12
0.005


Неорганични соли
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Други компоненти
D-глюкоза
2000.00



L-глутатион, редуциран
1.00



Фенол червено натриева сол
5.30

25,00 €*

Установихме, че се намирате в друга държава или използвате друг език на браузъра, различен от избрания в момента. Искате ли да приемете предложените настройки?

Затвори