Публикувано: 2023 г. | Последно актуализирано: май 2026 г.

Разбиране на „номера на пасажа“

Понятието „номер на пасаж“ е от основно значение за клетъчната култура и се отнася до броя пъти, през които дадена клетъчна линия е била субкултивирана или прехвърлена в нова среда за растеж след първоначалното й съживяване след криоконсервация или получаване от референтен клетъчен банк. Този показател е от ключово значение за проследяване на родословието и историята на дадена клетъчна култура.

Общ преглед на процеса

В рутинната практика на клетъчната култура, когато клетките достигнат определена плътност, те се прехвърлят в нова среда, за да се поддържа растежът и да се предотврати пренаселеност. Всяко такова прехвърляне се записва като пасаж.
Традиционно, когато получаваме клетъчна линия, например при пасаж 60 от депозитора, ние продължаваме от този номер на пасажа, като го увеличаваме с всеки субкултивиран пасаж. Тази практика, макар и да поддържа историческа нишка, често води до висок брой пасажи още от самото начало. Предвид широкото и често продължаващо десетилетия използване на определени клетъчни линии, като например линията HeLa, създадена през 1951 г., не е възможно да се определи общият брой пасажи от създаването на клетъчната линия.
За да подобрим яснотата и качеството на нашите процеси за клетъчна култура, в началото на 2023 г. преразгледахме този подход. Сега, когато започваме култура от нова епруветка, независимо от броя на пасажите от депозитора, ние нулираме брояча и започваме да броим наново от пасаж едно за всяка произведена партида.

Обосновка

Пасажът е жизненоважна процедура за осигуряване на здравето и полезността на клетъчните култури за научни изследвания. Когато клетките прераснат, те претърпяват контактна инхибиция, което намалява скоростта им на пролиферация, което може да повлияе неблагоприятно на резултатите от експериментите. За да смекчи тези проблеми, Cytion прилага строги контроли върху клетъчните плътности, при които се извършва субкултивиране, като по този начин поддържа нисък брой пасажи по време на производството на своите клетъчни линии. Тази предпазна мярка помага за предотвратяване на неблагоприятните ефекти от прекомерното прехвърляне, като морфологични аномалии, промени в скоростта на растеж и генетична дрейф, които могат да доведат до значителни разлики между клетките и тяхното първоначално състояние. Продължителните периоди на субкултивиране също могат да повишат риска от микробно замърсяване.

Нашето обещание

Ние гарантираме, че клетките, доставяни на изследователите, са възможно най-близки до първоначалния генетичен състав и фенотипни характеристики, което повишава надеждността на експерименталните данни. Освен това, като документира внимателно всеки пасаж, Cytion допринася за проследимостта и възпроизводимостта на изследванията – ангажимент, който отразява високите стандарти на практика в клетъчната култура. Изследователите се насърчават да водят точни записи на номерата на пасажите, както върху съдовете за култивиране, така и в лабораторните си бележници, като справка за състоянието и историята на техните клетъчни култури.

Съвети и често срещани грешки

Спазването на правилния протокол е от съществено значение, но разбирането на често срещаните капани може да бъде също толкова важно. Процедурите за клетъчна култура са чувствителни към малки отклонения в техниката, времето и качеството на реагентите. Следващите съвети отразяват най-добрите практики, препоръчани от научния екип на Cytion въз основа на богат опит в областта на клетъчната култура.

Винаги подгрявайте реагентите до 37 °C преди употреба, за да сведете до минимум термичния шок за клетките.
Работете бързо, но внимателно — сведете до минимум времето, през което клетките прекарват извън инкубатора.
Използвайте сертифицирани, тествани за микоплазма реагенти, за да избегнете замърсяване, което може да компрометира резултатите от експеримента.
Документирайте всяка стъпка, включително номер на пасаж, дата и наблюдения върху морфологията на клетките.
Проверете протокола си с малък пилотен експеримент, преди да преминете към по-голям мащаб, за да избегнете загубата на скъпи реагенти.

Препоръчителни реагенти на Cytion

Cytion предлага гама от валидирани реагенти за клетъчни култури, специално разработени в подкрепа на този протокол. Всички реагенти са тествани за ефективност с често използвани клетъчни линии и се предлагат с пълна документация. Посетете cytion.com/Media-Reagents, за да разгледате пълното портфолио.