خلايا A431 - تحليل متعمق لخلايا سرطان البشرة في أبحاث الأمراض الجلدية
A431 عبارة عن خط خلايا سرطان البشرة البشري. يُستخدم على نطاق واسع في مجال البحوث الطبية الحيوية، وخاصة في بيولوجيا السرطان وعلم الأورام المناعي ودراسات علم السموم. وبالإضافة إلى ذلك، تُفرط خلايا A431 في إفراز EGFR (مستقبل عامل نمو البشرة)، وبالتالي تُستخدم كنموذج مختبري قيّم لدراسة دورة الخلية ومسارات إشارات الخلايا المرتبطة بالسرطان.
تشرح هذه المقالة أساسيات خط الخلايا السرطانية A431. سوف تتعلم ما يلي:
- خلايا A431: الخصائص العامة والأصل
- خط الخلية A431: معلومات عن الزراعة
- مزايا وعيوب خط خلايا A431 الخلوية
- التطبيقات البحثية لخلايا A431
- المنشورات البحثية التي تحتوي على خلايا A431
- موارد خط الخلايا A431: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
1. خلايا A431: الخصائص العامة والأصل
سيساعدك هذا القسم من المقالة على معرفة المعلومات العامة حول خط الخلايا A431 التي تحتاج إلى معرفتها قبل العمل معه. مثل، ما هو أصل ما هو خط الخلايا A431؟ ما هي خصائص خط الخلايا A431؟ ما هي مورفولوجيا خلايا A431؟ من أين تأتي خلايا A431؟
- تم الحصول على A431، وهو خط خلايا سرطان الجلد البشري، من بشرة مريضة تبلغ من العمر 85 عاماً مصابة بسرطان البشرة [1]. تم تأسيسه من قبل د.ج. جيارد وآخرون، الذين طوروا العديد من خطوط الخلايا الأخرى من الأورام الصلبة.
- تمتلك خلايا A-431 مورفولوجيا طلائية. وهي تتجمع وتشكل مجموعات خلوية.
- خط خلايا سرطان الجلد a431 هو خط خلايا سرطان الجلد مفرط الصبغيات. يبلغ عدد الكروموسومات النمطي لهذا الخط الخلوي 74، والذي يحدث في حوالي 36% من الخلايا. كما توجد الصبغيات الصبغية الأعلى أيضاً في حوالي 1% من مجموعة الخلايا.
2.خط الخلايا A431: معلومات الزراعة
إن معرفة متطلبات وإجراءات زراعة خط الخلية يمكن أن تجعل التعامل معه خاليًا من المتاعب. سيساعدك هذا الجزء من المقالة على معرفة النقاط الأساسية لزراعة خط الخلايا A431. مثل أنك ستعرف، ما هو وقت مضاعفة خلايا A431؟ هل خط الخلايا السرطانية A431 ملتصق؟ ما هو وسيط النمو المستخدم ل A431؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا A431 A431
|
زمن المضاعفة: |
يتراوح زمن تضاعف عدد خلايا A431 من 80 إلى 100 ساعة. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
A431 هو خط خلايا ملتصقة. |
|
كثافة البذر: |
تعتبر كثافة الخلايا 1 ×104 خلية/سم2 مثالية لخط خلايا A431. تستغرق الخلايا ما يقرب من 4 أيام لتكتمل بهذه الكثافة. تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول PBS (1x) ويتم تحضينها بمحلول تمرير أكوتاز. بعد ذلك، تم إعادة تعليق الخلايا في وسط مزرعة وطردها مركزيًا. أُعيد تعليق الخلايا المحصودة مرة أخرى ووزعت في قوارير جديدة للنمو. |
|
وسط النمو: |
يُستخدم وسط DMEM المضاف إليه 10% مصل بقري جنيني و4.5 جم/لتر جلوكوز و1.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم و1.5 جم/لتر NaHCO3 و4 ملي مولار جلوتامين لزراعة خط خلايا A431. يجب استبدال الوسائط كل يومين إلى 3 أيام في الأسبوع. |
|
ظروف النمو: |
تُزرع الخلايا السرطانية A431 في حاضنة مرطبة مزودة بمصدر ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5% عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. |
|
التخزين: |
يمكن تخزين خط الخلية في مجمد كهربائي أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية حيث يساعد في حماية حيوية الخلية. |
|
عملية التجميد والوسيط: |
CM-1 أو CM-ACF هما وسيلتا التجميد الموصى بهما بشدة والمستخدمتان لخلايا A431. يتم تجميد الخلايا باستخدام طريقة التجميد البطيء التي تسمح بانخفاض درجة الحرارة بمقدار درجة واحدة فقط في الدقيقة. |
|
عملية الإذابة: |
يتم إذابة خلايا A431 المجمدة في حمام مائي بدرجة 37 درجة مئوية يحتوي على عامل مضاد للميكروبات لمدة 40 إلى 60 ثانية. عندما لا يتبقى سوى كتلة جليدية صغيرة، تُضاف الخلايا مع وسائط الاستزراع ويتم طردها مركزيًا. يتم إعادة تعليق الخلايا المحصودة وسكبها في قوارير الاستزراع للنمو. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
يوصى بمستوى السلامة البيولوجية الأول للتعامل مع مزارع A431 وصيانتها. |
3.مزايا وعيوب الخط الخلوي A431 الخلوي
يتميز خط الخلايا A431 بخصائص مميزة ويقدم العديد من المزايا والعيوب. وفيما يلي، لخصنا بعضها أدناه.
المزايا
تتمثل المزايا الرئيسية لخط الخلايا السرطانية A431 في:
|
الإفراط في التعبير عن عامل النمو EGFR |
تُفرط خلايا A431 في إفراز مستقبل عامل نمو البشرة (EGFR). وهي بمثابة عنصر تحكم إيجابي لدراسة إشارات عامل النمو EGFR وآثاره في السرطان. كما تُستخدم أيضاً لتقييم علاجات السرطان الجديدة. |
|
التولّد الورمي |
تعتبر خلايا A431 مولدة للأورام ولديها القدرة على تكوين أورام. يمكن استخدامها لتطوير نماذج سرطان الطعم المجهري، وهي أدوات قيّمة لدراسة ديناميكيات نمو الورم وتقييم علاجات السرطان الجديدة. |
العيوب
عيوب خلايا A431 هي:
|
التشوهات الوراثية |
A431 هو خط خلوي سرطاني يضم طفرات وتغييرات جينية قد تميزه عن خصائص الورم الأصلي. |
|
التلوث الميكروبي |
A431 هو عرضة للتلوث الميكروبي، وفي المقام الأول التلوث البكتيري. ومع ذلك، يمكن أن يساعد الحفاظ على ظروف الاستزراع المعقمة القياسية في منع هذا التلوث في مزارع الخلايا A431. |