خلايا NCI-H1299: الآثار البحثية والسريرية المترتبة على خلايا سرطان الرئة NCI-H1299
إنNCI-H1299 هو خط خلايا سرطان الرئة البشري غير صغير الخلايا غير صغير الخلايا غير الخاملة، ويُستخدم على نطاق واسع في أبحاث الأورام المناعية والسرطان واكتشاف الأدوية. علاوة على ذلك، استخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة حساسية الأدوية ومسارات الإشارات الكامنة والآليات الجزيئية المتعلقة بسرطان الرئة. إلى جانب ذلك، تُستخدم هذه الخلايا لدراسة حالات العدوى الفيروسية مثل سارس-كوف-2.
الخصائص العامة لخلايا NCI-H1299 وأصلها
إن أول ما يجب معرفته عن خط الخلية هو أصلها وخصائصها العامة لأنها تساعدك على استنباط استخدامها في بحثك. سيساعدك هذا القسم من المقالة في معرفة بعض المعلومات المهمة حول أصل NCI-H1299 وخصائصه. مثل، ما هي خلايا سرطان الرئة NCI-H1299؟ ما نوع الخلية NCI-H1299؟ ما هو حجم خلايا NCI-H1299؟ ما الفرق بين A549 و NCI-H1299؟
- نشأ الخط الخلوي NCI-H1299 من ورم خبيث في العقدة الليمفاوية في رئة مريض قوقازي ذكر يبلغ من العمر 43 عاماً مصاب بالسرطان.
- تمتلك هذه الخلايا حذفًا جزئيًا متماثل الزيجوت لجين p53؛ وبالتالي فهي لا تعبر عن بروتين p53. ويساهم نقص تعبير بروتين p53 في الميل التكاثري لخلايا سرطان الرئة H1299 من نوع NCI-H1299.
- وبالإضافة إلى بروتين p53، تم الإبلاغ عن وجود طفرة NCI-H1299 KRAS في هذه الخلايا غير الخالدة المسؤولة عن خصائص نموها وتكاثرها وهجرتها وغزوها.
- النمط النووي لخلايا NCI-H1299 شبه ثنائي الصيغة الصبغية.
- تتميز خلايا NCI-H1299 بمورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية.
- هذه الخلايا مفلطحة وسمكها أقل من 5 ميكرومتر.
NCI-H1299 وA549
إن NCI-H1299 و A549 هما خطان خلويان لسرطان الرئة غير صغير الحجم. تعد خلايا NCI-H1299 أكثر عدوانية وحساسية مقارنةً بخلايا A549. كلاهما لديه طفرات متشابهة نسبيًا، مثل KRAS. ومع ذلك، على عكس خلايا NCI-H1299، تعبر خلايا A549 عن جين P53.
زراعة المعلومات
إن الحفاظ على مزرعة خط خلوي ليس بالأمر السهل حتى تعرف جميع المعلومات الأساسية عنه، بما في ذلك: ما هو زمن مضاعفة NCI-H1299؟ ما هي كثافة بذر NCI-H1299؟ ما هي وسائط خلايا NCI-H1299؟ كيف تزرع سلالات خلايا NCI-H1299؟ سيساعدك هذا القسم في معرفة إجابات جميع هذه الأسئلة حول زراعة خلايا NCI-H1299.
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا NCI-H1299
|
وقت المضاعفة: |
يتراوح وقت مضاعفة خلايا NCI-H1299 بين 22-30 ساعة. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
NCI-H1299 هو خط خلوي ملتصق. |
|
نسبة الزراعة الفرعية: |
تُزرع خلايا NCI-H1299 بنسبة موصى بها من 1:3 إلى 1:6. بالنسبة للبذر، تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول PBS 1x وتحضن بمحلول تمرير أكوتاز لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة الحرارة المحيطة. تُضاف الخلايا المنفصلة مع وسائط مزرعة جديدة ويتم طردها مركزيًا. ثم يُعاد تعليق كريات الخلايا ثم تُسكب الخلايا في قوارير جديدة تحتوي على وسط نمو جديد. |
|
وسط النمو: |
RPM1 1640 هو وسط خلية NCI-H1299 المثالي. يُستكمل بمصل بقري جنيني بنسبة 10%، و4500 ملغم/لتر جلوكوز، و2.0 ملغم/لتر جلوتامين، و1 ملغم/لتر بيروفات الصوديوم، و1500 ملغم/لتر NaHCO3، و10 ملغم/لتر HEPES. يجب تجديد الوسائط كل 2 إلى 3 مرات في الأسبوع. |
|
ظروف النمو: |
يتم الحفاظ على مزارع خلايا سرطان الرئة NCI-H1299 في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون. |
|
التخزين: |
يمكن تخزين خط الخلايا NCI-H1299 في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في مجمدات بدرجة حرارة منخفضة للغاية عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية على المدى الطويل. |
|
عملية التجميد والوسيط: |
CM-1 أو CM-ACF هي وسائط تجميد خلايا NCI-H1299. يتم تجميد الخلايا باستخدام عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض درجة الحرارة درجة واحدة فقط في الدقيقة الواحدة لحماية حيوية الخلايا. |
|
عملية الإذابة: |
يتم تقليب خلايا NCI-H1299 المجمدة بسرعة في حمام مائي مسخن مسبقاً عند 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى تتبقى قطعة صغيرة من الثلج. تتم إضافة الخلايا المذابة مع وسائط جديدة ويمكن زراعتها مباشرةً في قوارير جديدة أو طردها مركزيًا. في الحالة الأولى، يجب استبدال الوسائط بعد 24 ساعة من الحضانة. يساعد الطرد المركزي على إزالة عناصر الوسائط المتجمدة. بعد ذلك، يتم إعادة تعليق الخلايا المحصودة في وسط جديد وتوزيعها في القارورة الجديدة للزراعة. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
يلزم وجود مختبر من مستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع مزرعة الخلايا NCI-H1299. |
شراء خط الخلايا NCI-H1299: أدوات بحثية عالية الجودة للتحقيق في بيولوجيا سرطان الرئة
مزايا وعيوب خلايا NCI-H1299
مثل خطوط الخلايا السرطانية البشرية الأخرى، تمتلك خلايا NCI-H1299 أيضًا بعض الخصائص المميزة المرتبطة بإيجابيات وسلبيات محددة. وقد لخصنا فيما يلي بعضًا من أهم هذه الخصائص.
المزايا
المزايا الرئيسية لخط خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا NCI-H1299 هي
-
نموذج سرطان الرئة في المختبر
تم تطوير سلالات خلايا NCI-H1299 من ورم خبيث في العقدة الليمفاوية لسرطان الرئة وبالتالي فهي تمتلك خصائص متشابهة نسبيًا. لذلك، يمكن استخدام هذه الخلايا كنموذج في المختبر لفحص بيولوجيا سرطان الرئة والآليات الخلوية والجزيئية وفحص واختبار العلاجات المحتملة.
-
سهولة الاستزراع
من السهل زراعة خلايا NCI-H1299 والحفاظ عليها في المختبر البحثي. لا توجد متطلبات وإجراءات صعبة لزراعة الخلايا.
-
طفرة NCI-H1299 P53 وطفرة NCI-H1299 KRAS
تفتقر خلايا NCI-H1299 إلى التعبير الجيني p53، مما يسمح للخلايا بالتكاثر بقوة. كما أنها تمتلك طفرة KRAS التي تساهم في نمو الخلايا وتكاثرها وغزوها وهجرتها. وبالنظر إلى ذلك، يستخدم الباحثون خلايا H1299 لدراسة الآليات الجزيئية ذات الصلة بطفرات KRAS وطفرة P53.
العيوب
عيوب خلايا NCI-H1299 هي:
-
خصوصية الأنسجة
نشأت خلايا NCI-H1299 من أنسجة الرئة. ولذلك، فإن قابليته للتطبيق تقتصر في الغالب على أبحاث سرطان الرئة. قد لا تمثل بشكل كامل عدم تجانس أنواع السرطان الأخرى وخصائصها العامة.
التطبيقات البحثية لخلايا NCI-H1299
يُستخدم خط خلايا NCI-H1299 على نطاق واسع في أبحاث سرطان الرئة. ونذكر هنا بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي.
- بيولوجيا السرطان: تُستخدم خلايا NCI-H1299 كأداة بحثية رائعة لدراسة تطور السرطان وتطوره والآليات الخلوية والجزيئية ذات الصلة. تُجهّز هذه الخلايا طفرات معينة، مما يسمح للباحثين باستكشاف سلوكيات الخلايا السرطانية ذات الصلة، ومسارات الإشارات، وملامح التعبير الجيني. وقد استخدمت العديد من الدراسات خط خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا NCI-H1299 لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة. على سبيل المثال، بحثت دراسة أُجريت في عام 2018 في مسار الإشارات المتضمنة في موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الرئة باستخدام خلايا NCI-H1299. ووجد الباحثون أن مسار PI3K/AKT يساهم في تكاثر الخلايا، ويمكن أن يؤدي تثبيطه إلى موت الخلايا السرطانية [1]. وبالمثل، بحث بحث آخر في الآليات التي ينطوي عليها انتقال الخلايا السرطانية من الظهارية إلى الوسيطة (EMT) باستخدام خلايا NCI-H1299. اقترحت هذه الدراسة أن البروتين خارج الخلية SPARC (بروتين حمضي مفرز وغني بالسيستين) يساهم في التحول الظهاري إلى الوسيمي (EMT) والهجرة من NCI-H1299، وبالتالي يعزز نشوء الورم في الخلايا - يعمل بروتين SPARC كوسيط لإشارات TGF-β1 [2].
- اكتشاف الأدوية وفحصها: يُستخدم خط خلايا سرطان الرئة البشري NCI-H1299 على نطاق واسع لتقييم سمية الأدوية المحتملة وفعاليتها. بالإضافة إلى ذلك، يستخدمه الباحثون للتحقق من آلية عمل الأدوية المضادة للأورام. كما استخدمت الدراسات هذه الخلايا لتحديد الأهداف المحتملة للأدوية وآليات المقاومة. فعلى سبيل المثال، بحثت الأبحاث التي أجراها شياو-يون شين وزملاؤه في الإمكانات المضادة للسرطان للمركب الطبيعي بروسين د (BD). كشفت النتائج أن مركب البروسين دال يعيق بشكل كبير تكاثر خلايا NCI-H1299 وغزوها وهجرتها. لذلك، يمكن اعتباره علاجًا مساعدًا محتملاً لعلاج سرطان الرئة غير صغير الخلايا [3]. وبالمثل، قامت دراسة بتقييم التأثيرات السامة للخلايا للزانثوهومول بمفرده وبالاقتران مع دواء سيسبلاتين للعلاج الكيميائي على خلايا سرطان الرئة NCI-H1299 [4].
المنشورات البحثية التي تضم خلايا NCI-H1299
فيما يلي بعض المنشورات البحثية الهامة والأكثر استشهاداً بها حول خط خلايا سرطان الرئة NCI-H1299
نُشرت هذه المقالة في مجلة علم السموم البشرية والتجريبية (2021). اقترحت الدراسة أن الإندول-3-كاربينول يحث على موت الخلايا المبرمج في H1299 عن طريق رفع مستويات أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS).
نُشر هذا البحث في عام 2018 في مجلة علم وظائف الأعضاء الخلوية والكيمياء الحيوية. كشفت نتائج البحث أن تركيبة حمض الكافيين والباكليتاكسيل تمارس تأثيرًا تآزريًا مضادًا للسرطان في خط خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا H1299.
نُشرت هذه المقالة البحثية في تقارير الطب الجزيئي (2018). قامت الدراسة بتقييم التأثير المضاد للورم لـ توبيموسيد-1، وهو مركب صابونين ثلاثي التريبينويد، والآليات الكامنة وراءه في خط خلايا NCI-H1299.
يحفز البريستميرين موت الخلايا المبرمج ويمنع التكاثر والهجرة في خلايا سرطان الرئة H1299
اقترحت هذه المقالة المنشورة في مجلة السرطان (2020) أن Pristimerin، وهو مركب طبيعي يثبط تكاثر خلايا NCI-H1299 وهجرتها.
آلية عمل جين VIPR1 المنظم لخلايا سرطان الرئة الغدي البشري H1299
استكشفت هذه الدراسة في مجلة Medical Oncology (2019) التأثيرات المحتملة للإفراط في التعبير عن جين VIPR1 على خط خلايا سرطان الرئة الغدي NCI-H1299.
مصادر خط خلايا NCI-H1299: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد عبر الإنترنت التي تعرض خلايا NCI-H1299.
- نقل خلايا NCI-H1299: يشرح هذا الفيديو بروتوكول بروتوكول نقل العدوى العابر لخط خلايا NCI-H1299.
- الزراعة الفرعية لخط خلايا ملتصقة: سيساعدك هذا الفيديو على تعلم إجراء الزراعة الفرعية العامة لخط الخلايا الملتصقة.
يحتوي الرابط التالي على معلومات عن زراعة الخلايا لخلايا NCI-H1299.
- خط خلايا NCI-H1299: يمكن أن يساعدك هذا الرابط في معرفة بروتوكول تمرير الخلايا NCI-H1299 ونقلها.
الأسئلة المتداولة حول خط الخلايا NCI-H1299
المراجع
- Gu, J., et al.، دراسة حول موت الخلايا المبرمج المستحث بغاز ثنائي الفينيل متعدد الكلور EGCG في خلايا سرطان الرئة عن طريق تثبيط مسار إشارات PI3K/Akt. Eur. Rev. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): p. 4557-4563.
- Sun, W., et al., SPARC يعمل كوسيط لـ TGF-β1 في تعزيز الانتقال من الظهارة إلى الوسيطة في خلايا سرطان الرئة A549 و H1299. العوامل البيولوجية، 2018. 44(5): p. 453-464.
- شين، X.-Y.، وآخرون، دراسة حول آلية البروسين د في علاج خلايا سرطان الرئة غير صغيرة الخلايا H1299. المجلة العالمية للطب الصيني التقليدي، 2020. 6(4): p. 500.
- لونغ، ب. وآخرون، التأثيرات السامة للخلايا للزانثوهومول ودمجه مع سيسبلاتين على خلايا سرطان الرئة النقيلي البشري H1299. مجلة التقدم في الطب والأبحاث الطبية، 2019. 30(9): p. 1-15.