خط خلايا HT-29
HT-29 هو خط خلايا سرطان القولون والمستقيم البشري مع مجموعة واسعة من تطبيقات أبحاث السرطان والسموم. على سبيل المثال، هذه الخلايا حساسة للعلاجات الكيميائية القياسية ضد سرطان القولون والمستقيم. بالإضافة إلى ذلك، يُعد خط خلايا HT-29 نموذجاً موصوفاً جيداً في المختبر لدراسة استجابة الظهارة المعوية للعدوى البكتيرية. تحاكي خلايا HT-29 خصائص الخلايا المعوية الناضجة، أي الخلايا المعوية، وبالتالي فهي مناسبة لدراسات الارتباط والدراسات الميكانيكية.
ستغطي هذه المقالة جميع جوانب خط خلايا HT-29 التي تحتاج إلى معرفتها قبل التعامل معها. وستشمل بشكل أساسي ما يلي:
- خلايا HT-29 المنشأ والمعلومات العامة
- معلومات عن زراعة خلايا خط خلايا HT-29
- خلايا HT-29: المزايا والقيود
- خلايا HT-29: التطبيقات
- منشورات بحثية عن خلايا HT-29
- مصادر خلايا HT-29: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
1. خلايا HT-29 الأصل والمعلومات العامة
قبل استخدام أي خط خلوي، يجب أن تعرف الخصائص العامة وأصل خط الخلية. سيساعدك هذا القسم على معرفة ذلك: ما هي خلايا HT-29؟ هل HT-29 خط خلوي لسرطان القولون والمستقيم؟ ما هي مورفولوجيا خلايا HT-29؟
ما هو خط خلايا HT-29؟ HT-29 هو سلالة خلايا سرطان القولون والمستقيم الغدية HT-29 التي أنشأها تريمب وفوغ عام 1964. تم اشتقاق الخلايا في الأصل من الورم الأولي لأنثى قوقازية (44 عامًا) مصابة بسرطان القولون والمستقيم الغدي [1]. ومنذ إنشائه، تم استخدام هذا الخط الخلوي لدراسة بيولوجيا السرطانات.
مورفولوجيا خلايا HT-29: يحتوي خط خلايا HT-29 بشكل عام على مورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية. تنمو الخلايا المتمايزة في طبقات أحادية، وتشكل تقاطعات ضيقة بين الخلايا والخلية، وتمتلك حدود فرشاة قميّة. إذا نمت هذه الخلايا في وسط ناقص الجلوكوز أو تم إعطاؤها محفزات مثل الزبدات أو الحمض، فإنها تظهر سمات شبيهة بالخلايا المعوية.
حجم الخلية: يبلغ قطر خط خلايا سرطان القولون والمستقيم HT-29 11 ميكرومتر.
الجينوم والصبغي: العدد النموذجي للكروموسومات لخط خلايا HT-29 هو 71. وقد يتراوح بين 68-72. وعلاوة على ذلك، فإن عدد الكروموسومات المبسطة لخلايا HT-29 هو مفرط الصبغيات الثلاثية، حيث يحدث مكون 2S بمعدل 2.4%.
ما هو HT29 MTX؟ HT29 MTX هو خط خلوي مقاوم للميثوتريكسات تم عزله من خط خلايا سرطان القولون البشري الأصلي HT-29 عن طريق التكيف مع 10 ميكرومتر ميثوتريكسات. تتميز هذه الخلايا بخصائص الخلايا الكأسية المخاطية الناضجة التي تفرز المخاط.
2. معلومات المزرعة الخلوية لخط الخلايا HT-29
إن معرفة المتطلبات الأساسية لمزرعة خط الخلية يمكن أن تجعل عملك معه سهلاً. يجب أن تعرف: ما هو زمن مضاعفة خط خلايا HT-29؟ ما هي كثافة بذر خلايا HT-29؟ ما هي الوسائط لخلايا HT-29؟
|
زمن المضاعفة |
متوسط زمن المضاعفة لخط خلايا HT-29 هو 24 ساعة. |
|
ملتصقة/معلقة |
HT-29 هو خط خلوي ملتصق. |
|
كثافة البذر |
كثافة البذر الموصى بها لخلايا HT-29 هي 3 ×104 خلايا/سم2. يتم غسل الخلايا المزروعة ب 1 X PBS وفصلها بعد تحضينها باستخدام أكوتاز لمدة 8-10 دقائق. تتم إضافة وسائط جديدة، ويتم طرد الخلايا مركزيًا. يُعاد تعليق كريات الخلايا، ويتم توزيع الخلايا في قوارير جديدة بكثافة الخلايا الموصى بها. |
|
وسط النمو |
يُستخدم وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM) المضاف إليه 2.5 مللي مولار جلوتامين و10% من جزيئات البوتاسيوم الأميني (FBS) لزراعة خلايا HT-29 على النحو الأمثل. يجب استبدال الوسط من 2 إلى 3 مرات في الأسبوع. |
|
ظروف النمو |
تحتاج خلايا HT-29 إلى حاضنة رطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية وإمداد بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون للنمو. |
|
التخزين |
يتم تخزين هذه الخلايا في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل عند درجة حرارة أقل من -195 درجة مئوية. |
|
وسط التجميد والعملية |
وسط التجميد المستخدم لخط خلايا HT-29 هو CM-1 أو CM-ACF. يتم تجميد الخلايا عن طريق عملية تجميد بطيئة تتسبب في انخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية وتحمي بكفاءة قابلية الخلايا للحياة. |
|
عملية الإذابة |
يتم إذابة خلايا HT-29 المجمدة في حمام مائي على درجة حرارة 37 درجة مئوية. يمكن إعادة تعليق هذه الخلايا وصرفها مباشرةً في قارورة وسط النمو الطازج. وعلى العكس من ذلك، يمكن طرد الخلايا المذابة بالطرد المركزي لإزالة عناصر وسط التجميد وإعادة تعليقها في وسط طازج وزراعتها في قوارير. |
|
مستوى السلامة البيولوجية |
يُستخدم مستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع خط خلايا HT-29 وصيانتها. |
3. خلايا HT-29: المزايا والقيود
لكل خط خلوي مزايا وعيوب فريدة تميزه عن غيره من خطوط الخلايا الأخرى. سيغطي هذا القسم المزايا والقيود الرئيسية المرتبطة بخلايا HT-29.
المزايا
المزايا الرئيسية لخلايا HT-29 هي
-
سهولة الاستزراع
من السهل التعامل مع خط خلايا HT-29 وصيانتها، مع عدم وجود متطلبات معقدة لزراعتها. تتم زراعته على نطاق واسع في المختبرات البحثية.
-
في النموذج المختبري للخلايا المعوية
يمكن لخلايا HT-29 أن تتمايز إلى خلايا معوية ناضجة (خلايا معوية وخلايا منتجة للمخاط) في ظل ظروف زراعة محددة. وتُستخدم كنموذج خلوي لدراسة هضم الطعام والتوافر البيولوجي.
-
كفاءة نقل عالية
توفر خلايا سرطان القولون HT-29 كفاءة عالية في نقل العدوى مما يجعلها مناسبة لدراسات التعبير الجيني والتنظيم الجيني. يمكن إجراء كل من تجارب التطهير العابر والمستقر باستخدام طرق مختلفة.
-
الحساسية الدوائية
خلايا HT-29 حساسة لأدوية العلاج الكيميائي مثل فلورويوراسيل وأوكساليبلاتين التي يشيع استخدامها في علاج سرطان القولون. وتُستخدم لدراسة مقاومة الأدوية وفحص الأدوية العلاجية المحتملة لسرطان القولون والمستقيم.
القيود
-
عدم التجانس
تُظهر خلايا HT-29، مثلها مثل سلالات الخلايا السرطانية الأخرى، عدم التجانس وقد لا تشكل مجموعة خلايا موحدة. يمكن أن يؤثر ذلك على إمكانية تكرار النتائج في بعض الفحوصات ويؤدي إلى اختلافات طفيفة في النتائج التجريبية.
-
التمايز المحدود
تتمتع خلايا HT-29 بإمكانية تمايز محدودة. فهي لا تتمايز بشكل كامل إلى خلايا معوية أو خلايا القولون ولكنها لا تظهر سوى بعض السمات المميزة. قد يحد هذا القيد من استخدامها في دراسة العمليات البيولوجية الأكثر تعقيداً.
4. خلايا HT-29: التطبيقات
يُزرع خط خلايا HT-29 على نطاق واسع في المختبرات البحثية بسبب مجموعة واسعة من التطبيقات. سيغطي هذا القسم فقط بعض التطبيقات المهمة لخلايا HT-29.
أبحاث السرطان: HT-29 هو سلالة خلايا سرطان القولون والمستقيم الغدية (HT-29)، لذلك يُستخدم لدراسة تطور السرطان وتطوره والآليات الجزيئية الكامنة وراءه. استخدمت دراسة أجريت في عام 2018 خط خلية HT-29 لدراسة جزيئات الخلية المسؤولة عن الورم الخبيث. لاحظت هذه الدراسة أن جينات الفيمينتين وجينات CXCR4 تنظم انتشار الخلايا. بينما يمكن أن يؤدي نقل محاكي microRNA-193a-5p microRNA-193a-5p إلى تقليل مستويات الحمض النووي الريبي المرسال لهذه الجينات وتقليل ورم خبيث الخلايا السرطانية بنجاح [2].
أبحاث علم السموم: يُستخدم خط خلية HT-29 على نطاق واسع في أبحاث علم السموم. تُستخدم خلايا سرطان القولون والمستقيم هذه لتقييم سمية مختلف الأدوية المرشحة باستخدام فحوصات مختلفة. على سبيل المثال، استكشفت دراسة إمكانات سمية مستخلص نبات سيزيجيوم كوميني الإيثانولي على خط خلايا HT-29. أظهرت النتائج تثبيطًا كبيرًا لنمو خلايا HT-29، مما يشير إلى الخصائص الواعدة المضادة للسرطان للمستخلص [3].
علم الأحياء المجهرية: يمكن استخدام HT-29 كنظام خلية مضيفة للتحقق من إمراض الميكروبات المحتملة، أي البكتيريا والفيروسات. يمكن للباحثين إصابة خلايا HT-29 بالميكروبات للتحقق من مدى فوعيتها واستجابة المضيف لها. استخدمت هذه الدراسة خلايا HT-29 لاستكشاف الخصائص البروبيوتيكية لبكتيريا حمض اللاكتيك [4]. واستخدمت دراسة أخرى خلايا HT-29 لتقييم فعالية وسلامة علاجات العاثيات [5].
5. منشورات بحثية عن خلايا HT-29
يسلط هذا القسم الضوء على بعض المنشورات البارزة حول خلايا HT-29 التي ستساعدك في إعداد دراستك البحثية.
اقترحت هذه الدراسة مستخلص سيزيغيوم كوميني الإيثانولي كعامل محتمل مضاد للسرطان ضد خط خلايا سرطان القولون والمستقيم HT-29. قام المستخلص بقمع نمو الخلايا السرطانية بشكل ملحوظ.
يثبط التيتراندرين نمو خلايا سرطان القولون HT-29 عبر مسار Bcl-2/Caspase 3/PARP ومسار G1/S
اختبر هذا المنشور في تقارير العلوم البيولوجية النشاط المضاد للسرطان لمركب تيترادرادرين على خلايا HT-29. وكشفت النتائج أن التيتراندرين يثبط تكاثر الخلايا السرطانية ونموها عن طريق تنظيم مسارات إشارات الخلايا.
يثبط الرنا الميكروي 193a-5p هجرة خلايا سرطان القولون البشرية HT-29 عن طريق قمع مسار الورم الخبيث
اقترحت هذه الدراسة أن miRNA-193a-5p يمكن أن ينظم ورم خبيث خلية HT-29 عن طريق تنظيم الجينات المرتبطة بالورم الخبيث.
نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة Nature Scientific Reports عام 2018. استخدمت هذه الدراسة خط الخلايا السرطانية HT-29 كنموذج خلوي معوي لتقييم فعالية العلاج المقترح للعاثيات البكتيرية.
في هذه الدراسة، استخدم الباحثون خلايا HT-29 لدراسة أنشطة البروبيوتيك لبكتيريا حمض اللاكتيك. ومن المثير للاهتمام، أشارت الدراسة إلى أن بكتيريا العصيات اللبنية تمنع التصاق البكتيريا المسببة للأمراض بخلايا القولون.
6. مصادر خلايا HT-29: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
سيغطي هذا القسم بعض الموارد المتاحة على الإنترنت حول خلايا HT-29 التي ستساعد في تعلم بروتوكولات صيانتها وزراعتها ونقلها.
بروتوكولات زراعة الخلايا
سترشدك المصادر التالية حول الزراعة الفرعية لخلايا HT-29.
- زراعة خلايا HT-29: سيوفر هذا الرابط المعرفة الأساسية حول وسط النمو، والذوبان، والزراعة الفرعية لخلايا HT-29.
- الحفاظ على مزارع HT-29: تحتوي هذه المقالة على جميع المعلومات المفيدة حول زراعة خلايا HT-29 وصيانتها.
بروتوكولات نقل العدوى
يتمتع خط خلايا HT-29 بكفاءة كبيرة في نقل العدوى، وكثيراً ما يستخدم في دراسات التعبير الجيني. تصف المصادر التالية بروتوكولات نقل العدوى الممكنة لهذه الخلايا.
- نقل عدوى HT-29: يحتوي رابط هذا الموقع الإلكتروني على البروتوكول المفصل لنقل العدوى لخلايا HT-29.
- نقل عدوى خط خلايا HT-29: يصف هذا المستند بروتوكول نقل العدوى لخط خلايا HT-29 باستخدام الحمض النووي البلازميدي.
فيديوهات متعلقة بخط خلايا HT-29
فيما يلي بعض مقاطع الفيديو حول زراعة خط الخلايا الورمية هذا وصيانته.
- تمرير الخلايا يعرض هذا الفيديو بروتوكول تمرير الخلايا لخطوط الخلايا الملتصقة.
- نقل خلايا HT-29: سيرشدك هذا الفيديو فيما يتعلق بطريقة نقل العدوى المستخدمة لخلايا HT-29.
نتوقع أن تكون المعلومات الواردة في هذه المقالة قيمة وكافية بالنسبة لك للتعامل مع خط خلايا HT-29 وصيانتها. إذا كنت تخطط لاستخدام خلايا HT-29 في دراستك، اطلب منا.
المراجع
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 cell line. تأثير المواد الحيوية الغذائية على الصحة: في المختبر ونماذج خارج الجسم الحي، 2015: ص 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA-193a-5p يثبط هجرة خلايا سرطان القولون البشرية HT-29 عبر قمع مسار ورم خبيث. مجلة الكيمياء الحيوية الخلوية، 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, تقييم التأثير المضاد للسرطان لمستخلص الإيثانولي الإيثانولي من سيزيغيوم كوميني على خط خلايا القولون والمستقيم HT-29. مجلة سرطان الجهاز الهضمي، 2021. 52: p. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., خصائص البروبيوتيك للعصيات اللبنية وقدرتها على تثبيط التصاق البكتيريا المعوية الممرضة بخلايا Caco-2 وHT-29. البروبيوتيك والبروتينات المضادة للميكروبات، 2021. 13: p. 102-112.
- Shan, J., et al.، العاثيات أكثر ضراوة على البكتيريا في الخلايا البشرية مما هي عليه في المستنبت البكتيري؛ رؤى من خلايا HT-29. التقارير العلمية، 2018. 8(1): p. 5091.
