سلسلة الخلايا HT-29
HT-29 هو خط خلايا سرطان القولون والمستقيم البشري الذي له مجموعة واسعة من التطبيقات البحثية في مجال السرطان وعلم السموم. على سبيل المثال، هذه الخلايا حساسة للعلاجات الكيميائية القياسية ضد سرطان القولون والمستقيم. بالإضافة إلى ذلك، يعد خط الخلايا HT-29 نموذجًا مختبريًا موصوفًا جيدًا لدراسة استجابة ظهارة الأمعاء للعدوى البكتيرية. تحاكي خلايا HT-29 خصائص الخلايا المعوية الناضجة، أي الخلايا المعوية، وبالتالي فهي مناسبة لدراسات الالتصاق والآليات.
- وسط النمو
- انظر صفحة المنتج
- وقت التضاعف
- انظر صفحة المنتج
- نوع النمو
- ملتصق
- مستوى السلامة البيولوجية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب HT-29
خلايا HT-29: الأصل والمعلومات العامة
قبل استخدام أي سلالة خلوية، يجب أن تكون على دراية بالخصائص العامة وأصل السلالة الخلوية. سيساعدك هذا القسم على معرفة: ما هي خلايا HT-29؟ هل HT-29 سلالة خلوية لسرطان القولون والمستقيم؟ ما هي مورفولوجيا خلايا HT-29؟
ما هو خط الخلايا HT-29؟ HT-29 هو خط خلايا سرطان غدي القولون والمستقيم أنشأه Trempe و Fogh في عام 1964. تم استخلاص الخلايا في الأصل من الورم الأساسي لامرأة قوقازية (44 عامًا) مصابة بسرطان غدي في القولون والمستقيم [1]. منذ إنشائه، تم استخدام هذا الخط الخلوي لدراسة بيولوجيا السرطانات.
شكل خلايا HT-29: تتميز سلالة خلايا HT-29 بشكل عام بمورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية. تنمو الخلايا المتمايزة في طبقات أحادية، وتشكل وصلات خلوية محكمة، وتمتلك حافة فرشاة قمية. إذا نمت هذه الخلايا في وسط ناقص الجلوكوز أو أعطيت محفزات مثل البوتيرات أو الحمض، فإنها تظهر سمات تشبه الخلايا المعوية.
حجم الخلية: يبلغ قطر خط الخلايا السرطانية القولونية المستقيمية HT-29 11 ميكرومتر.
الجينوم والبلويدية: العدد النموذجي للكروموسومات لسلسلة الخلايا HT-29 هو 71. وقد يتراوح بين 68 و72. علاوة على ذلك، فإن العدد المبسط للكروموسومات لخلايا HT-29 هو ثلاثي الصبغيات المفرط، مع وجود المكون 2S بنسبة 2.4٪.
ما هو HT29 MTX؟ HT29 MTX هو خط خلوي مقاوم للميثوتريكسات تم عزله من خط الخلايا الأصلي لسرطان القولون البشري HT-29 عن طريق التكيف مع 10 ميكرومتر من الميثوتريكسات. تظهر هذه الخلايا خصائص الخلايا الكأسية الناضجة المفرزة للمخاط.
معلومات حول زراعة خط الخلايا HT-29
إن معرفة المتطلبات الأساسية لزراعة خط الخلايا يمكن أن يسهل عملك معه. يجب أن تعرف: ما هو زمن التضاعف لخط الخلايا HT-29؟ ما هي كثافة البذر لخلايا HT-29؟ ما هي الوسائط المناسبة لخلايا HT-29؟
زمن التضاعف
متوسط وقت التضاعف لسلسلة الخلايا HT-29 هو 24 ساعة.
الالتصاق/التعليق
HT-29 هو خط خلوي ملتصق.
كثافة البذر
كثافة البذر الموصى بها لخلايا HT-29 هي 3 × 104 خلية/سم². تُغسل الخلايا المزروعة بمحلول PBS 1X وتُفصل بعد الحضانة باستخدام Accutase لمدة 8-10 دقائق. تُضاف وسائط جديدة، وتُطرد الخلايا. يُعاد تعليق حبيبات الخلايا، وتُوزع الخلايا في قوارير جديدة بالكثافة الخلوية الموصى بها.
وسط النمو
يُستخدم وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM) المُضاف إليه 2.5 مليمولار L-جلوتامين و10% FBS من أجل الاستزراع الأمثل لخلايا HT-29. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو
تتطلب خلايا HT-29 حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية وإمداد بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون للنمو.
التخزين
يتم تخزين هذه الخلايا في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل عند درجة حرارة أقل من -195 درجة مئوية.
وسط التجميد وعملية التجميد
وسط التجميد المستخدم لخط الخلايا HT-29 هو CM-1 أو CM-ACF. يتم تجميد الخلايا من خلال عملية تجميد بطيئة تؤدي إلى انخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية وتحمي كفاءة بقاء الخلايا.
عملية الذوبان
يتم إذابة خلايا HT-29 المجمدة في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية. يمكن إعادة تعليق هذه الخلايا وتوزيعها مباشرة في قارورة وسط النمو الطازج. وعلى النقيض من ذلك، يمكن طرد الخلايا المذابة لإزالة عناصر وسيط التجميد، وإعادة تعليقها في وسيط جديد، وزراعتها في قوارير.
مستوى السلامة الحيوية
يُستخدم مستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع خط الخلايا HT-29 والحفاظ عليه.
خلايا HT-29: المزايا والقيود
لكل سلالة خلوية مزايا وعيوب فريدة تميزها عن السلالات الخلوية الأخرى. سيتناول هذا القسم المزايا والقيود الرئيسية المرتبطة بخلايا HT-29.
المزايا
المزايا الرئيسية لخلايا HT-29 هي:
-
سهولة الاستزراع
سلسلة الخلايا HT-29 سهلة التعامل والصيانة، ولا تتطلب متطلبات معقدة للزراعة. وهي تُزرع على نطاق واسع في مختبرات الأبحاث.
-
نموذج مختبري للخلايا المعوية
يمكن لخلايا HT-29 أن تتمايز إلى خلايا معوية ناضجة (خلايا معوية وخلايا منتجة للمخاط) في ظل ظروف استزراع محددة. وتُستخدم كنموذج خلوي لدراسة هضم الطعام والتوافر البيولوجي.
-
كفاءة عالية في نقل الجينات
تتميز خلايا سرطان القولون HT-29 بكفاءة عالية في النقل الجيني، مما يجعلها مناسبة لدراسات التعبير الجيني والتنظيم الجيني. يمكن إجراء تجارب النقل الجيني المؤقتة والمستقرة باستخدام طرق مختلفة.
-
حساسية الأدوية
تتميز خلايا HT-29 بحساسيتها تجاه الأدوية الكيميائية مثل الفلورويوراسيل والأوكساليبلاتين، التي تستخدم عادةً في علاج سرطان القولون. وتُستخدم هذه الخلايا لدراسة مقاومة الأدوية وفحص الأدوية العلاجية المحتملة لسرطان القولون والمستقيم.
القيود
-
التغاير
تُظهر خلايا HT-29، مثل سلالات الخلايا السرطانية الأخرى، عدم تجانس وقد لا تشكل مجموعة خلوية موحدة. يمكن أن يؤثر ذلك على قابلية تكرار النتائج في بعض الاختبارات ويؤدي إلى اختلافات طفيفة في نتائج التجارب.
-
التمايز المحدود
تتمتع خلايا HT-29 بإمكانية تمايز محدودة. فهي لا تتمايز تمامًا إلى خلايا معوية أو خلايا القولون، بل تظهر فقط بعض السمات المميزة. وقد يحد هذا القيد من استخدامها في دراسة العمليات البيولوجية الأكثر تعقيدًا.
خلايا HT-29: التطبيقات
يتم استزراع خط الخلايا HT-29 على نطاق واسع في مختبرات الأبحاث نظرًا لتنوع تطبيقاته. سيغطي هذا القسم عددًا قليلاً فقط من التطبيقات المهمة لخلايا HT-29.
أبحاث السرطان: HT-29 هو خط خلايا سرطان غدي القولون والمستقيم، لذا يُستخدم لدراسة تطور السرطان وتقدمه والآليات الجزيئية الكامنة وراءه. استخدمت دراسة أجريت في عام 2018 خط خلايا HT-29 للتحقيق في الجزيئات الخلوية المسؤولة عن الانتشار. لاحظت هذه الدراسة أن جينات فيمنتين وCXCR4 تنظم ورم الخلايا الخبيث. في حين أن نقل مقلد microRNA-193a-5p يمكن أن يقلل من مستويات mRNA لهذه الجينات ويقلل بنجاح من ورم الخلايا السرطانية [2].
أبحاث علم السموم: يستخدم خط الخلايا HT-29 على نطاق واسع في أبحاث علم السموم. تُستخدم خلايا سرطان القولون والمستقيم هذه لتقييم سمية الأدوية المرشحة المختلفة باستخدام اختبارات مختلفة. على سبيل المثال، استكشفت إحدى الدراسات السمية المحتملة لمستخلص إيثانولي من نبات Syzygium cumini على خط الخلايا HT-29. وأظهرت النتائج تثبيطًا كبيرًا لنمو خلايا HT-29، مما يشير إلى الخصائص المضادة للسرطان الواعدة للمستخلص [3].
علم الأحياء الدقيقة: يمكن استخدام HT-29 كنظام خلايا مضيفة لدراسة التسبب في الأمراض للميكروبات المحتملة، أي البكتيريا والفيروسات. يمكن للباحثين إصابة خلايا HT-29 بالميكروبات لدراسة ضراوتها واستجابة المضيف. استخدمت إحدى الدراسات خلايا HT-29 لاستكشاف الخصائص البروبيوتيكية لبكتيريا حمض اللاكتيك [4]. واستخدمت دراسة أخرى خلايا HT-29 لتقييم فعالية وسلامة علاجات البكتيريا [5].
5. المنشورات البحثية حول خلايا HT-29
سيستعرض هذا القسم بعض المنشورات البارزة حول خلايا HT-29 التي ستساعدك في تصميم دراستك البحثية.
اقترحت هذه الدراسة مستخلص الإيثانول من Syzygium cumini كعامل محتمل لمكافحة سرطان القولون والمستقيم في خط الخلايا HT-29. وقد أدى المستخلص إلى تثبيط نمو الخلايا السرطانية بشكل ملحوظ.
تترادرين يثبط نمو خلايا سرطان القولون HT-29 عبر مسار Bcl-2/Caspase 3/PARP ومرحلة G1/S
اختبرت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Bioscience Reports النشاط المضاد للسرطان لمركب التترادرين على خلايا HT-29. وأظهرت النتائج أن التترادرين يثبط تكاثر الخلايا السرطانية ونموها من خلال تنظيم مسارات إشارات الخلايا.
يثبط microRNA‐193a‐5p هجرة خلايا سرطان القولون البشري HT‐29 عن طريق تثبيط مسار الانتشار
اقترحت هذه الدراسة أن miRNA-193a-5p يمكن أن ينظم ورم خبيث خلايا HT-29 عن طريق تنظيم الجينات المرتبطة بالورم الخبيث.
نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة Nature Scientific Reports في عام 2018. استخدمت هذه الدراسة خط الخلايا السرطانية HT-29 كنموذج خلوي معوي لتقييم فعالية العلاج المقترح بالفيروسات البكتيرية.
في هذه الدراسة، استخدم الباحثون خلايا HT-29 لدراسة الأنشطة البروبيوتيكية لبكتيريا حمض اللاكتيك. ومن المثير للاهتمام أن الدراسة أشارت إلى أن بكتيريا اللاكتوباسيلي تمنع التصاق البكتيريا المسببة للأمراض بخلايا القولون.
خلايا HT-29 الموارد: البروتوكولات والفيديوهات والمزيد
سيغطي هذا القسم بعض الموارد المتاحة عبر الإنترنت حول خلايا HT-29 والتي ستساعد في تعلم بروتوكولات صيانتها وزراعتها وإدخال الجينات إليها.
بروتوكولات زراعة الخلايا
ستوجهك الموارد التالية حول إعادة استزراع خلايا HT-29.
- استزراع خلايا HT-29: سيوفر هذا الرابط معلومات أساسية حول وسط النمو، وإذابة الثلج، وإعادة استزراع خلايا HT-29.
- صيانة مزارع HT-29: تحتوي هذه المقالة على جميع المعلومات المفيدة حول زراعة خلايا HT-29 وصيانتها.
بروتوكولات التحويل الجيني
تتميز سلالة الخلايا HT-29 بكفاءة عالية في التحويل الجيني، وتستخدم بشكل متكرر في دراسات التعبير الجيني. تصف الموارد التالية بروتوكولات التحويل الجيني الممكنة لهذه الخلايا.
- نقل الجينات إلى HT-29: يحتوي رابط الموقع الإلكتروني هذا على البروتوكول التفصيلي لنقل الجينات إلى خلايا HT-29.
- نقل الجينات لسلسلة خلايا HT-29: يصف هذا المستند بروتوكول نقل الجينات لسلسلة خلايا HT-29 باستخدام الحمض النووي البلازميدي.
مقاطع فيديو متعلقة بسلسلة الخلايا HT-29
فيما يلي بعض مقاطع الفيديو حول زراعة خط الخلايا المسببة للأورام هذا وصيانته.
- تمرير الخلايا: يعرض هذا الفيديو بروتوكول تمرير الخلايا لسلالات الخلايا الملتصقة.
- تحويل الخلايا HT-29: سيرشدك هذا الفيديو بشأن طريقة التحويل المستخدمة لخلايا HT-29.
نتوقع أن تكون المعلومات الواردة في هذه المقالة قيّمة وكافية لتتمكن من التعامل مع خط الخلايا HT-29 وصيانته. إذا كنت تخطط لاستخدام خلايا HT-29 في دراستك، فاطلبها منا.
المراجع
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 cell line. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p inhibits migration of human HT‐29 colon cancer cells via suppression of metastasis pathway. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean، و R. Safaralizadeh، تقييم التأثير المضاد للسرطان لمستخلص الإيثانول من Syzygium cumini على خط الخلايا القولونية HT-29. مجلة سرطان الجهاز الهضمي، 2021. 52: ص. 575-581.
- فونسيكا، إتش. سي.، وآخرون، الخصائص البروبيوتيكية للبكتيريا اللبنية وقدرتها على تثبيط التصاق البكتيريا المسببة لأمراض الأمعاء بخلايا Caco-2 و HT-29. البروبيوتيك والبروتينات المضادة للميكروبات، 2021. 13: ص. 102-112.
- شان، ج.، وآخرون، البكتيريا الفاجية أكثر ضراوة تجاه البكتيريا الموجودة في الخلايا البشرية منها في المزرعة البكتيرية؛ رؤى مستمدة من خلايا HT-29. التقارير العلمية، 2018. 8(1): ص. 5091.
