وسط زراعة الخلايا

DMEM (وسط النسر المعدل Dulbecco's Modified Eagle Medium) هو وسط قاعدي متعدد الاستخدامات ومستخدم على نطاق واسع مصمم لدعم نمو مجموعة متنوعة من خلايا الثدييات في الأبحاث البيولوجية. ويُستخدم كوسيط مثالي لزراعة الخلايا الليفية الأولية والخلايا العصبية والخلايا الدبقية وخلايا الخلايا الدبقية وخلايا الخلايا الجذعية المتشعبة وخلايا العضلات الملساء بالإضافة إلى خطوط الخلايا الشائعة مثل HeLa و293 وCos-7 وPC-12.
ما يميز DMEM عن الوسائط الأخرى هو تركيبته الفريدة. فهو يحتوي على زيادة مذهلة بمقدار أربعة أضعاف في تركيز الأحماض الأمينية والفيتامينات مقارنةً بوسيط النسر الأساسي الأدنى الأصلي. تم تطوير DMEM في البداية باستخدام جلوكوز منخفض (1 جم/لتر) وبيروفات الصوديوم، وكثيراً ما يستخدم DMEM بمستويات جلوكوز أعلى، إما مع أو بدون بيروفات الصوديوم. وتجدر الإشارة إلى أن DMEM لا يحتوي على بروتينات أو دهون أو عوامل نمو، مما يستلزم استخدام مكملات. ولتحقيق النمو الأمثل، يتمثل أحد الأساليب الشائعة في تكميل DMEM بمصل بقري جنيني (FBS) بنسبة 10%. بالإضافة إلى ذلك، يستخدم DMEM نظام مخزن بيكربونات الصوديوم العازل الذي يتطلب بيئة من 5-10% من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على درجة الحموضة الفسيولوجية.
يُعتبر وسط النسر المعدل (DMEM) من بين الوسائط المحددة لزراعة الخلايا والأنسجة، حيث يلبي احتياجات النمو لمختلف الأنماط الظاهرية للخلايا الملتصقة. وهو يتفوق على وسط النسر الأصلي، الذي تم تطويره في الخمسينيات من القرن الماضي لزراعة خلايا الدجاج، من خلال التركيبة التكميلية المحسنة المعروفة باسم تعديل ديلبيكو. ويؤدي هذا التعديل إلى رفع محتوى أحماض أمينية وفيتامينات مختارة إلى أربعة أضعاف مقارنةً بالوسط الأصلي.
في مجال زراعة الخلايا، يؤدي وسط DMEM دورًا حيويًا كوسيط نمو لأنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك الخلايا الأولية والخلايا الجذعية والخلايا المتحولة. كما يستخدم الباحثون النسخة المعدلة من وسط DMEM في مجموعة واسعة من التطبيقات البحثية، مثل اكتشاف الأدوية وهندسة الأنسجة ودراسة مسارات إشارات الخلايا.

مراقبة الجودة

مصفاة معقمة ومعقمة


التخزين ومدة الصلاحية

يُحفظ في درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية، مع حمايته من الضوء.
بمجرد فتحه، يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويستخدم خلال 6-8 أسابيع.


ظروف الشحن

درجة الحرارة المحيطة


الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأنه يقلل من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.


التركيب



الفئة
المكونات
التركيز (ملغم/لتر)


الأحماض الأمينية
الجلايسين
30.00



إل-أرجينين حمض الهيدروكلوريك
84.00



إل-سيستين 2 حمض الهيدروكلوريك
62.57



ل-جلوتامين
584.00



إل-هيستيدين H2OH2O
42.00



ل-إيسولوسين
105.00



ل-ليوسين
105.00



إل-ليسين حمض الهيدروكلوريك
146.00



ل-ميثيونين
30.00



ل-فينيل ألانين
66.00



ل-سيرين
42.00



ل-ثريونين
95.00



ل-تريبتوفان
16.00



ل-تيروزين 2 صوديوم 2H2O
103.79



ل-فالين
94.00


فيتامينات
كلوريد الكولين
4.00



د-بانتوثينات الكالسيوم
4.00



حمض الفوليك
4.00



ميو-إينوزيتول
7.20



نيكوتيناميد النيكوتيناميد
4.00



البيريدوكسال حمض الهيدروكلوريك
4.00



ريبوفلافين
0.40



ثيامين حمض الهيدروكلوريك
4.00


أملاح غير عضوية
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 3 9 H2O
0.10



كلوريد الكالسيوم
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



كلوريد الصوديوم
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 NaH2PO4 2H2O
141.73


مكونات أخرى
د-الجلوكوز
4500.00



ملح الصوديوم الفينول الأحمر الفينول
15.90



بيروفات الصوديوم
110.00

تُعد «الوسط الأساسي الأدنى لإيجل» (EMEM) أحد أكثر الأوساط الأساسية استخدامًا لزراعة مجموعة واسعة من خلايا الثدييات، ولا سيما سلالات الخلايا الملتصقة. وقد طور هذه التركيبة الكلاسيكية في الأصل هاري إيجل، وهي تحتوي على الأحماض الأمينية الأساسية والفيتامينات والأملاح غير العضوية اللازمة لدعم نمو كل من الخلايا الأولية وسلالات الخلايا المستقرة في ظل ظروف الاستزراع القياسية.

هذه التركيبة السائلة الجاهزة للاستخدام والمفلترة بشكل معقم مكملة بمحلول Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)، و2 مليمولار L-glutamine، وD-glucose (1.0 جم/لتر)، و2.2 جم/لتر من بيكربونات الصوديوم (NaHCO3)، مما يجعلها مناسبة للاستخدام في جو حاضنة يتم التحكم في نسبة ثاني أكسيد الكربون فيه (عادةً 5٪ CO2). يعمل الفينول الأحمر المضمن كمؤشر لدرجة الحموضة، مما يتيح مراقبة بصرية مريحة لحالة الوسط أثناء زراعة الخلايا.

الميزات الرئيسية

تركيبة إيجلز MEM الكلاسيكية مع محلول إيرل المالح المتوازن (EBSS)
يحتوي على 2 مليمولار من L-الجلوتامين – جاهز للاستخدام الفوري
2.2 جم/لتر من بيكربونات الصوديوم – معادل للحضانة بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون
مع D-جلوكوز (1.0 جم/لتر) كمصدر أساسي للكربون
مع الفينول الأحمر كمؤشر لدرجة الحموضة
بدون HEPES وبدون بيروفات الصوديوم
وسط سائل مصفى معقم، جاهز للاستخدام
درجة الحموضة 7.0 – 7.6


التطبيقات النموذجية
يدعم EMEM زراعة مجموعة واسعة من سلالات الخلايا الثديية، بما في ذلك HeLa و HEK 293 و Vero و MRC-5 و L-929 و BHK-21 والعديد من الخلايا الأولية. تشمل التطبيقات الشائعة ما يلي:

الصيانة الروتينية وتوسيع خطوط الخلايا الملتصقة
عمليات تكاثر الفيروسات وإنتاج اللقاحات
تطبيقات السمية الخلوية والاختبارات الحيوية
دراسات التحويل الجيني والتعبير البروتيني
الأبحاث الأساسية في بيولوجيا الخلايا والبيولوجيا الجزيئية

من أجل نمو الخلايا الأمثل، يُضاف إلى EMEM عادةً 5-10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS) و، اعتمادًا على خط الخلايا، أحماض أمينية غير أساسية (NEAA) ومضادات حيوية مثل البنسلين/الستربتومايسين.

التعامل والتخزين
قم بتخزين الزجاجة غير المفتوحة في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية، بعيدًا عن الضوء. بعد الفتح، استخدم المنتج في ظروف معقمة. يتعرض L-Glutamine في المحلول للتحلل التدريجي – نوصي باستخدام الوسط في غضون 4 أسابيع من الفتح للحصول على أفضل أداء، أو استكماله بـ L-glutamine طازج قبل الاستخدام إذا تم تخزينه لفترات أطول. اترك الوسط يسخن إلى 37 درجة مئوية قبل إضافته إلى الخلايا.

الجودة
يتم تصنيعه وفقًا لمعايير جودة صارمة. يتم اختبار كل دفعة للتأكد من تعقيمها ومستوى الحموضة والأسمولية ومستويات السموم الداخلية لضمان أداء متسق في تطبيقات زراعة الخلايا.

مواصفات المنتج



المواصفات
التفاصيل



نوع المنتجMEM
فئة المنتجوسائط زراعة الخلايا
الشكلسائل
معقمنعم
الحجم500 مل
L-جلوتامينيحتوي على L-جلوتامين (2 مليمولار)
الجلوكوزيحتوي على الجلوكوز (1.0 غ/لتر)
بيكربونات الصوديوممع NaHCO3 (2.2 غ/لتر)
HEPESبدون هيبس
بيروفات الصوديومبدون بيروفات الصوديوم
الفينول الأحمرمع أحمر الفينول
محلول ملحيمحلول ملح إيرل المتوازن (EBSS)
الرقم الهيدروجيني7.0 – 7.6
محتوى الإندوتوكسينغير محدد
التخزين+2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية



التركيبة (التركيب لكل لتر)



المكون
التركيز (ملغم/لتر)




أملاح غير عضوية


كلوريد الكالسيوم · 2H2O265.00
كبريتات المغنيسيوم97.72
كلوريد البوتاسيوم400.00
كلوريد الصوديوم6,800.00
ثنائي هيدروجين فوسفات الصوديوم، لا مائي122.00
بيكربونات الصوديوم (NaHCO3)2,200.00


الأحماض الأمينية

L-أرجينين · HCl126.00
L-سيستين · 2HCl31.30
L-جلوتامين292.00
L-هيستيدين · HCl · H2O42.00
L-إيزولوسين52.00
L-ليوسين52.00
L-ليسين · HCl72.50
L-ميثيونين15.00
L-فينيل ألانين32.00
L-ثريونين48.00
L-تريبتوفان10.00
L-تيروزين · 2Na · 2H2O51.90
L-فالين46.00


فيتامينات

بانتوثينات الكالسيوم D1.00
كلوريد الكولين1.00
حمض الفوليك1.00
ميو-إينوزيتول2.00
نيكوتيناميد1.00
بيريدوكسال · هيدروكلوريد1.00
الريبوفلافين0.10
الثيامين · HCl1.00


مكونات أخرى

D(+)-جلوكوز1,000.00
الفينول الأحمر10.00

وسيط هام F-12، والمعروف أيضًا باسم مزيج مغذيات هام F-12، هو وسيط قاعدي واسع الاستخدام مصمم خصيصًا لزراعة الخلايا. وقد استُخدم على نطاق واسع في الطلاء الخالي من المصل والخالي من المصل لخلايا مبيض الهامستر الصيني (CHO) وخلايا الرئة وخلايا الفأر L. بالإضافة إلى ذلك، يُعد هام F-12 هو الوسيط المفضل لفحص السمية النسيلية (CTA).
ومن مزاياه البارزة القدرة على دعم نمو الخلايا دون الحاجة إلى مكملات المصل. وهذا يزيل التداخل المحتمل الناجم عن مكونات المصل، مما يضمن نتائج تجريبية متسقة وموثوقة. ومن خلال توفير بيئة مزرعة خالية من المصل، يوفر وسيط هام F-12 للباحثين تحكمًا أكبر في تحقيقاتهم.
ومن السمات الرئيسية الأخرى لمتوسط هام F-12 هي ملاءمته لطلاء الخلية الواحدة. وهذا يجعله خيارًا ممتازًا لمجموعة متنوعة من خطوط الخلايا، بما في ذلك خلايا CHO وخلايا الرئة وخلايا الفأر L. وتسهل تركيبة المغذيات المحسّنة للوسيط من الارتباط والنمو الفعال للخلايا المنفردة، مما يتيح إنشاء مزارع خلايا متجانسة مع تحسين قابلية التكرار.
وعلاوة على ذلك، اكتسب وسيط هام F-12 اعترافاً بأنه الوسيط المفضل لفحص السمية النسيلية (CTA). يلعب هذا الفحص دورًا حاسمًا في تقييم التأثيرات السامة للخلايا للمواد على الخلايا. ومن خلال استخدام وسيط هام F-12 في اختبار السمية النسيلية (CTA)، يمكن للباحثين تقييم تأثير مختلف المركبات أو العلاجات على الخلايا الفردية بدقة، مما يوفر رؤى قيمة حول السميات.
مراقبة الجودة

الأس الهيدروجيني = 7.2 +/
- 0.02 عند درجة حرارة 20-25 درجة مئوية.
تم اختبار كل دفعة للتأكد من العقم وغياب الميكوبلازما والبكتيريا.

الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. يقلل التجميد والتسخين حتى +37 درجة مئوية من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف).
إذا كنت تريد استخدام جزء فقط من الوسيط، أخرج هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة.
مدة الصلاحية لأي وسيط باستثناء الوسيط الأساسي هي 8 أسابيع من تاريخ التصنيع.

التركيب




المكونات
ملغم/لتر


الأملاح غير العضوية
كلوريد الكالسيوم × 2H2O
44,00



كبريتات النحاس(II) × 5H2O
0,00



كبريتات الحديد (II) x 7H2O
0,83



كلوريد المغنيسيوم x 6H2O
122,00



كلوريد البوتاسيوم
223,65



كلوريد الصوديوم
7599,00



فوسفات هيدروجين ثنائي الصوديوملا مائي
142,04



كبريتات الزنك × 7H2O 7H2O
0,86


مكونات أخرى
د(+)
- جلوكوز لا مائي
1801,60



هايبوكسانثين
4,08



حمض اللينوليك
0,08



حمض الليبويك DL-α-Lipoic
0,21



الفينول الأحمر
1,20



بوتريسين × 2HCl
0,16



بيروفات الصوديوم
110,00



ثيميدين
0,73



NaHCO3
1176,00


الأحماض الأمينية
ل-ألانين
8,91



إل-أرجينين × حمض الهيدروكلوريك
210,70



إل-أسباراجين × H2O
15,01



ل-حمض الأسبارتيك
13,31



إل-سيستين × حمض الهيدروكلوريك × H2O
35,12



ل-ألانيل-أل-جلوتامين
217,30



حمض ل-جلوتاميك-إل-جلوتاميك
14,71



جلايسين
7,51



ل-هيستيدين × حمض الهيستيدين × حمض الهيدروكلوريك × H2O
20,96



ل-إيسولوسين
3,94



ل-لوسين
13,12



ل-ليسين × حمض الهيدروكلوريك
36,54



ل-ميثيونين
4,48



ل-فينيل ألانين
4,96



ل-برولين
34,53



ل-سيرين
10,51



ل-ثريونين
11,91



ل-تريبتوفان
2,04



ل-تيروزين
5,44



ل-فالين
11,71


فيتامينات
د(+)-بيوتين
0,01



د-كالسيوم بانتوثينات الكالسيوم
0,24



كلوريد الكولين
13,96



حمض الفوليك
1,32



ميو إينوزيتول
18,02



نيكوتيناميد النيكوتيناميد
0,04



البيريدوكسين x حمض الهيدروكلوريك
0,06



ريبوفلافين
0,04



ثيامين × حمض الهيدروكلوريك
0,34



فيتامين B12
1,36

يُعد DMEM:Ham's F12 وسطًا أساسيًا معترفًا به على نطاق واسع ومستخدمًا بكثرة في زراعة الخلايا لأغراض البحث البيولوجي. وهو بمثابة مصدر أساسي للمغذيات اللازمة لنمو مختلف سلالات الخلايا الثديية، لا سيما عند استكماله بمصل الأبقار الجنينية (FBS).

تجمع هذه التركيبة الفريدة بين وسط إيجل المعدل من دولبيكو (DMEM) و Ham's F-12 (خليط المغذيات F-12 من هام) بنسبة دقيقة تبلغ 1:1. كما أن إضافة L-glutamine تعزز تركيبته بشكل أكبر.

يوفر DMEM، المشتق من وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM)، تركيزًا أعلى من الأحماض الأمينية والفيتامينات مقارنة بسابقه. في المقابل، يعتمد Ham's F-12 على وسط Ham's F-10، مما يوفر مجموعة تكميلية من المكونات الأساسية.

لدعم النمو الخلوي الأمثل، من الشائع إضافة FBS إلى DMEM:Ham's F12 بتركيز نموذجي يتراوح بين 5 و10٪. هذه الإضافة ضرورية لأن الوسط يفتقر إلى هرمونات النمو والدهون والبروتينات الضرورية لتطور الخلايا.

يحتوي DMEM:Ham's F12 على نظام عازل للأس الهيدروجيني وغالبًا ما يتم استكماله بالفينول الأحمر، وهو مؤشر للأس الهيدروجيني. تتطلب الخلايا المزروعة في DMEM:Ham's F12، أو أي وسط يستخدم نظام عازل البيكربونات، بيئة CO2 خاضعة للتحكم بنسبة 5-10٪ للحفاظ على مستويات الأس الهيدروجيني المناسبة. 


مراقبة الجودة

مفلتر معقم


التخزين ومدة الصلاحية

يُخزن في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية، بعيدًا عن الضوء.
بمجرد فتح العبوة، يُخزن عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ويُستخدم في غضون 6-8 أسابيع.


شروط الشحن

درجة الحرارة المحيطة


التخزين

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية في مكان مظلم. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأن ذلك يقلل من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسط إلى ما يزيد عن 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير خاضعة للرقابة مثل أجهزة الميكروويف.
إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بإزالة الكمية المطلوبة وقم بتسخينها إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.


التركيب



الفئة
المكونات
التركيز (ملغم/لتر)


الأحماض الأمينية
الجليسين
18.75


L-ألانين
4.45


L-أرجينين HCl
147.50


L-أسباراجين H₂O
7.50


حمض L-الأسبارتيك
6.65


L-سيستين HCl H₂O
17.56


L-سيستين 2 HCl
31.29


حمض L-الجلوتاميك
7.35


L-جلوتامين
365.00


L-هيستيدين HCl H₂O
31.48


L-إيزولوسين
54.47


L-ليوسين
59.05


L-ليسين HCl
91.25


L-ميثيونين
17.24


L-فينيل ألانين
35.48


L-برولين
17.25


L-سيرين
26.25


L-ثريونين
53.45


L-تريبتوفان
9.02


L-تيروزين 2 Na 2 H2O
55.79


L-فالين
52.85


الفيتامينات
D-بيوتين
0.0035


كلوريد الكولين
8.98


بانتوثينات الكالسيوم D
2.24


حمض الفوليك
2.66


ميو-إينوزيتول
12.60


نيكوتيناميد
2.02


بيريدوكسين هيدروكلوريد
0.031


بيريدوكسال هيدروكلوريد
2.00


الريبوفلافين
0.219


ثيامين هيدروكلوريد
2.17


فيتامين ب12
0.68



أملاح غير عضوية
كلوريد الكالسيوم 2 ماء
154.50


CuSO4 5 H2O
0.0013


Fe(NO3)3 9 H2O
0.05


FeSO4 7 H2O
0.417


KCl
311.80


MgCl2 6 H2O
61.20


MgSO4 7 H2O
100.00


NaCl
6996.00


NaHCO3
1200.00


Na2HPO4
71.02


NaH2PO4 2 H2O
70.87


ZnSO4 7 H2O
0.432



مكونات أخرى
D-جلوكوز
3151.00


هيبوكسانثين
2.40


HEPES
3574.50


حمض اللينوليك
0.042


حمض الليبويك
0.105


ملح الصوديوم الأحمر الفينولي
8.63


البوتريسين 2 HCl
0.081


بيروفات الصوديوم
55.00


ثيميدين
0.365

نقدم لكم وسيط هام F-12K (Kaighn's)، وهو تعديل متخصص لوسط هام F-12 المصمم لتلبية المتطلبات الفريدة للأبحاث البيولوجية. يوفر هذا الوسيط المتطور مزايا مميزة، ويعزز زراعة الخلايا الكبدية البشرية الأولية، وكذلك خلايا كبد الفئران والدجاج، خاصةً في ظروف المصل المخفض.

صُمم وسط هام F-12K (Kaighn's) بعناية لتحسين ظروف زراعة الخلايا. وهو يتميز بتركيبة غنية توفر مستويات مرتفعة من المكونات الأساسية مثل الأحماض الأمينية وبيروفات الصوديوم، بالإضافة إلى عناصر إضافية تشمل البوتريسين والثيميدين والهايبروكسانثين والزنك. تُمكِّن هذه الإضافات الباحثين من استكمال الوسط بالحد الأدنى من المصل أو المكونات المحددة لأنواع معينة من الخلايا، مما يسهل الظروف التجريبية الدقيقة.

والجدير بالذكر أن وسط هام F-12K (Kaighn's) لا يحتوي على بروتينات أو عوامل نمو. وبالتالي، غالباً ما تكون المكملات بعوامل النمو ومصل البقر الجنيني (FBS) ضرورية، مما يسمح للباحثين بتكييف الوسط مع متطلبات خطوط الخلايا الخاصة بهم. ولتحقيق الأداء الأمثل، يجب تحسين تركيز FBS بعناية لكل خط خلوي لضمان النمو والوظائف المثلى.

وللحفاظ على الأس الهيدروجيني الفسيولوجي، يستخدم وسط هام F-12K (Kaighn's) نظام مخزن بيكربونات الصوديوم (2.5 جم/لتر)، مما يستلزم التحكم في بيئة من 5-10% من ثاني أكسيد الكربون أثناء الزراعة. ويضمن ذلك بقاء الأس الهيدروجيني للوسط ضمن النطاق المثالي لنمو الخلايا وحيويتها
مراقبة الجودة

الأس الهيدروجيني = 7.2 +/
- 0.02 عند درجة حرارة 20-25 درجة مئوية.
تم اختبار كل دفعة للتأكد من العقم وغياب الميكوبلازما والبكتيريا.

الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. يقلل التجميد وكذلك التسخين حتى +37 درجة مئوية من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف).
إذا كنت تريد استخدام جزء فقط من الوسيط، أخرج هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة.
مدة الصلاحية لأي وسيط باستثناء الوسيط الأساسي هي 8 أسابيع من تاريخ التصنيع.

التركيب




المكونات
ملغم/لتر


الأملاح غير العضوية
كلوريد الكالسيوم x 2H2O
135,24



كبريتات النحاس(II) × 5H2O
0,00



كبريتات الحديد (II) x 7H2O
0,83



كلوريد المغنيسيوم x 6H2O
105,72



كبريتات المغنيسيوم × 7H2O
394,49



كلوريد البوتاسيوم
283,29



فوسفات ثنائي هيدروجين البوتاسيوم
58,52



كلوريد الصوديوم
7597,20



فوسفات ثنائي هيدروجين الصوديوملا مائي
115,02



كبريتات الزنك × 7H2O 7H2O
0,14


مكونات أخرى
د(+)
- جلوكوز لا مائي
1260,00



هايبوكسانثين
4,08



حمض الليبويك DL-α-Lipoic
0,21



الفينول الأحمر
3,00



بوتريسين × 2HCl
0,32



بيروفات الصوديوم
220,00



NaHCO3
2500,00



ثيميدين
0,73


الأحماض الأمينية
ل-ألانين
17,82



ل-أرجينين × حمض الهيدروكلوريك
421,40



إل-أسباراجين × H2O
30,02



ل-حمض الأسبارتيك
26,62



إل-سيستين × حمض الهيدروكلوريك × H2O
70,24



ل-جلوتامين
292,20



حمض ل-جلوتاميك
29,42



جلايسين
15,01



ل-هيستيدين × حمض الهيستيدين × حمض الهيدروكلوريك × H2O
41,92



ل-إيسولوسين
7,87



ل-لوسين
26,24



ل
- ليسين × حمض الهيدروكلوريك
73,04



ل-ميثيونين
8,95



ل-فينيل ألانين
9,91



ل-برولين
69,06



ل-سيرين
21,02



ل-ثريونين
23,82



ل-تريبتوفان
4,08



ل-تيروزين
10,87



ل-فالين
23,42


فيتامينات
د(+)-بيوتين
0,07



د-كالسيوم بانتوثينات الكالسيوم
0,48



كلوريد الكولين
13,96



حمض الفوليك
1,32



ميو إينوزيتول
18,02



نيكوتيناميد النيكوتيناميد
0,04



البيريدوكسين x حمض الهيدروكلوريك
0,06



ريبوفلافين
0,04



ثيامين × حمض الهيدروكلوريك
0,34



فيتامين B12
1,36

يعد McCoy's 5A Medium وسطًا موصى به للغاية ومتخصصًا مصممًا لتسهيل نمو وتكاثر الفيروسات في مزارع الخلايا الأولية. وقد اكتسب شهرة كبيرة لأدائه الاستثنائي في مختلف تطبيقات الأبحاث البيولوجية. أحد التطبيقات البارزة لوسط McCoy's 5A Medium هو استخدامه في زراعة خطوط خلايا سرطان القولون البشري. على وجه التحديد، تم استخدامه في دراسة مستقبلات G-protein-coupled receptor (LGR5) الغنية بالليوسين ودورها في ورم خبيث سرطان القولون. وقد استخدمت هذه الوسيلة بشكل فعال في زراعة العديد من سلالات خلايا سرطان القولون، بما في ذلك HCT116 و RKO و FET و CBS و HCT116b و TENN، مما مكن الباحثين من التعمق في الآليات الكامنة وراء ورم خبيث سرطان القولون. بالإضافة إلى تطبيقه في أبحاث السرطان، أثبتت وسط McCoy's 5A أنه لا غنى عنه في دراسة الخلايا العظمية. استخدم الباحثون الذين يدرسون تفاعل أيونات الهيدروكسيباتيت الناقص الكالسيوم في وسائط زراعة الخلايا القياسية هذا الوسط لزراعة الخلايا العظمية. ساعد هذا التطبيق على فهم التفاعلات بين الخلايا العظمية والهيدروكسيباتيت الناقص الكالسيوم بشكل أفضل، مما ساهم في إحراز تقدم في مجال أبحاث العظام. تمت صياغة وسط ماكوي 5A بدقة عن طريق تعديل الأحماض الأمينية الموجودة في وسط إيجل الأساسي لتوفير الدعم الأمثل لخلايا أورام الكبد. هذه الصيغة المخصبة تجعله مناسبًا لمجموعة متنوعة من سلالات الخلايا المعمول بها، وكذلك الخلايا الأولية، مما يعزز من تنوعه وقابليته للتطبيق في مختلف بيئات البحث. يمتد تأثير وسط ماكوي 5A البيوكيميائي والفسيولوجي إلى ما وراء خلايا أورام الكبد. وقد تم استخدامه بنجاح لدعم النمو في المزارع الأولية لنخاع العظام والجلد واللثة والكلى والغشاء البطني والغدة الكظرية والرئة والطحال وأجنة الفئران وأنواع أخرى من الخلايا. تشهد هذه المجموعة الواسعة من التطبيقات على الفائدة الكبيرة لوسط ماكوي 5A في دعم نمو وصيانة أنواع مختلفة من الخلايا من أجل إجراء أبحاث بيولوجية شاملة. التركيب يحتوي وسط ماكوي 5A (المعدل) على 3.0 جم/لتر من الجلوكوز، والجلوتامين المستقر، و 2.0 مليمول من بيروفات الصوديوم، و 2.2 جم/لتر من NaHCO3. مراقبة الجودة الرقم الهيدروجيني = 7.2 +/
- 0.02 عند 20-25 درجة مئوية.  تم اختبار كل دفعة للتأكد من تعقيمها وخلوها من الميكوبلازما والبكتيريا. الصيانة يحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية في مكان مظلم. يؤدي التجميد والتسخين إلى +37 درجة مئوية إلى تقليل جودة المنتج.  لا تسخن الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية ولا تستخدم مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف).  إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بإزالة هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة. مدة الصلاحية لأي وسط باستثناء الوسط الأساسي هي من 6 إلى 8 أسابيع من تاريخ الفتح. التركيب المكونات مليغرام/لتر أملاح غير عضويةكلوريد الكالسيوم × 2H2O132 كبريتات المغنيسيوم97 كلوريد البوتاسيوم400 كلوريد الصوديوم6,460 هيدروجين فوسفات الصوديوم (لا مائي)504 مكونات أخرىD(+)-جلوكوز (لا مائي)3,000 الجلوتاثيون (مخفض)0 بيبتون اللحم600 ملح الصوديوم الأحمر الفينولي11 الأحماض الأمينيةL-ألانين13 L-أرجينين × HCl42.14 L-أسباراجين × H2O45 حمض L-أسبارتيك19.9 L-سيستين × HCl × H2O31.7 L-جلوتامين (مستقر)219.1 حمض L-جلوتاميك22 جلايسين7 L-هيستيدين × HCl × H2O20.9 L-هيدروكسيبرولين19.6 L-إيسولوسين39 L-لوسين39.36 L-ليسين × HCl36.54 L-ميثيونين14.9 L-فينيل ألانين16.5 L-برولين17.27 L-سيرين26.28 L-ثريونين17.87 L-تريبتوفان3 ملح ثنائي الصوديوم L-تيروزين26.10 L-فالين17.5 فيتاميناتحمض p-أمينوبنزويك1 حمض الأسكوربيك0 D(+)-بيوتين0 D-بانتوثينات الكالسيوم0 كلوريد الكولين5 حمض الفوليك10 ميو-إينوزيتول36 نيكوتيناميد0 حمض النيكوتينيك0 بيريدوكسال هيدروكلوريد0 بيريدوكسين هيدروكلوريد0.5 ريبوفلافين0 ثيامين هيدروكلوريد0 فيتامين ب122

وسط دولبيكو المعدل (IMDM) من Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) هو وسط نمو معقد ومخصب لزراعة الخلايا. ويُعد IMDM تعديلاً لوسط دولبيكو المعدل الذي يحتوي على السيلينيوم ويحتوي على أحماض أمينية وفيتامينات وأملاح غير عضوية إضافية مقارنةً بوسط دولبيكو المعدل. يفتقر إلى الحديد ويتطلب مكملات مع مصل البقر الجنيني (FBS). يستخدم IMDM نظام بيكربونات الصوديوم العازلة ويتطلب بيئة تحتوي على 5-10% من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على درجة الحموضة الفسيولوجية.
ويُعد IMDM مناسباً تماماً لمزارع الخلايا عالية الكثافة وسريعة التكاثر، بما في ذلك خلايا Jurkat وCOS-7 والخلايا البلعمية الكبيرة. يمكن العثور على التعديلات المختلفة ل IMDM المتاحة لمجموعة من تطبيقات مزارع الخلايا باستخدام أداة اختيار الوسائط. توفر الوسائط السائلة العناصر الغذائية الأساسية لجميع تطبيقات زراعة الخلايا. يتم تصنيع كل وسيط من وسائط زراعة الخلايا عالية الجودة لدينا وفقًا للصيغة المنشورة في البداية أو التعديلات اللازمة للأداء المتسق والاستقرار لوسط المزرعة.
IMDM مقابل DMEM
يحتوي IMDM على نترات البوتاسيوم بدلاً من نترات الحديديك و HEPES وبيروفات الصوديوم. إن المكونات الإضافية في IMDM تجعله أكثر ملاءمة لأنواع خلايا متخصصة وتطبيقات محددة من DMEM.
IMDM مقابل RPMI
يحتوي كل من IMDM وRPMI على تركيبات مختلفة قد تكون ذات صلة بتحفيز PMA/ionomycin. يتمثل أحد الاختلافات المهمة في تركيز Ca2+. فبينما يحتوي RPMI على 0.42 ملي مولار من Ca2+، يحتوي IMDM على 1.49 ملي مولار.
مراقبة الجودة

الأس الهيدروجيني = 7.2 +/
- 0.02 عند درجة حرارة 20-25 درجة مئوية.
تم اختبار كل دفعة للتأكد من العقم وغياب الميكوبلازما والبكتيريا.

الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية في الظلام. يقلل التجميد والتسخين حتى +37 درجة مئوية من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف).
إذا كنت تريد استخدام جزء فقط من الوسيط، أخرج هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة.
مدة الصلاحية لأي وسيط باستثناء الوسيط الأساسي هي 8 أسابيع من تاريخ التصنيع.
التركيب




المكونات
ملغم/لتر


الأملاح غير العضوية
كلوريد الكالسيوم × 2 H2O
219,00



كلوريد البوتاسيوم
330,00



نترات البوتاسيوم
0.076



كبريتات المغنيسيوم اللامائية
97,73



كلوريد الصوديوم
4,505.00



فوسفات ثنائي هيدروجين الصوديوم اللامائية
109,00



سيلينيت الصوديوم
0,02


مكونات أخرى
د(+)-جلوكوز ثنائي هيدروجين الصوديوم اللامائي
4,500.00



هيبيس
5,958.00



بيروفات الصوديوم
110,00



الفينول الأحمر
15,00


الأحماض الأمينية
ل-ألانين
25,00



ل-أرجينين × حمض الهيدروكلوريك
84,00



إل-أسباراجين × H2O
25,00



ل-حمض الأسبارتيك
30,00



إل-سيستين × 2HCl
91,24



ل-جلوتامين
584,00



إل-غلوتاميك أسيد
75,00



جلايسين
30,00



ل-هيستيدين × حمض الهيستيدين × حمض الهيدروكلوريك × H2O
42,00



ل-إيسولوسين
104,80



ل-لوسين
104,80



ل-ليسين × حمض الهيدروكلوريك
146,20



ل-ميثيونين
30,00



ل-فينيل ألانين
66,00



ل-برولين
40,00



ل-سيرين
42,00



ل-ثريونين
95,20



ل-تريبتوفان
16,00



إل-تيروزين × 2Na
104,20



ل-فالين
93,60


فيتامينات
د(+)-بيوتين
0.013



د-كالسيوم بانتوثينات الكالسيوم
4,00



كلوريد الكولين
4,00



حمض الفوليك
4,00



ميو-إينوزيتول
7,20

وسط RPMI 1640، المعروف أيضاً باسم وسط RPMI، هو وسط زراعة خلايا متعدد الاستخدامات يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية لزراعة خلايا الثدييات المختلفة. تم تطوير هذا الوسط من قبل جورج إي مور وروبرت إي جيرنر وإتش أديسون فرانكلين في عام 1966 في مركز روزويل بارك الشامل الشهير للسرطان، وقد استمد هذا الوسط اسمه من أصله في معهد روزويل بارك التذكاري (RPMI).
تم تصميمه في البداية لدعم نمو خلايا سرطان الدم البشري في كل من مزارع المعلقات والطبقات الأحادية الطبقة، وقد تطور هذا الوسيط RPMI 1640 من خلال التعديلات التي أجراها الباحثون والموردون التجاريون ليصبح مناسباً لمجموعة متنوعة من خلايا الثدييات. وهو متوافق بشكل استثنائي مع خطوط الخلايا مثل HeLa وJurkat وMCF-7 وPC12 وPC12 وBBC والخلايا النجمية والخلايا السرطانية.
يتميز RPMI 1640 Medium عن وسائط زراعة الخلايا الأخرى بسبب تركيبته الفريدة. فهو يحتوي على كمية كبيرة من الفوسفات والأحماض الأمينية والفيتامينات. والجدير بالذكر أنه يحتوي على البيوتين وفيتامين B12 وPABA، وهي غير موجودة في وسط النسر الأساسي الأدنى أو وسط النسر المعدل في ديلبيكو. علاوة على ذلك، يُظهر وسط RPMI 1640 تركيزات مرتفعة بشكل ملحوظ من فيتامينات الإينوزيتول والكولين. ومع ذلك، فإنه لا يحتوي على بروتينات أو دهون أو عوامل نمو. وبالتالي، يلزم عادةً إضافة 10% من مصل البقر الجنيني (FBS) لتوفير الظروف المثلى لنمو الخلايا.
يعتمد نظام التخزين المؤقت في RPMI 1640 Medium على بيكربونات الصوديوم ويتطلب بيئة من 5-10% من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على درجة حموضة مناسبة من الناحية الفسيولوجية. كما أن تضمين عامل الاختزال الجلوتاثيون يميز هذا الوسط عن غيره.
مراقبة الجودة

معقمة ومفلترة


التخزين ومدة الصلاحية

يُحفظ في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية، مع حمايته من الضوء.
بمجرد فتحه، يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية ويستخدم خلال 6-8 أسابيع.


ظروف الشحن

درجة الحرارة المحيطة


الصيانة

يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة +2 درجة مئوية إلى +8 درجات مئوية في الظلام. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأنه يقلل من جودة المنتج.
لا تقم بتسخين الوسيط أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير منضبطة مثل أجهزة الميكروويف.
في حالة استخدام جزء فقط من الوسيط، يجب إزالة الكمية المطلوبة وتسخينه إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.



التركيب




الفئة
المكونات
التركيز (ملغم/لتر)


الأحماض الأمينية
الجلايسين
10.00



إل-ألانيل-إل-جلوتامين
434.40



ل-أرجينين
200.00



ل-أل-أسباراجين H2O
56.82



ل-حمض الأسبارتيك
20.00



إل-سيستين 2HCl
65.20



ل-حمض الجلوتاميك
20.00



ل-هيستيدين حمض الهيستيدين H2O
20.27



ل-هيدروكسي-ل-برولين
20.00



إل-إيسولوسين
50.00



ل-لوسين
50.00



إل-ليسين حمض الهيدروكلوريك
40.00



ل-ميثيونين
15.00



ل-فينيل ألانين
15.00



ل-برولين
20.00



ل-سيرين
30.00



ل-ثريونين
20.00



ل-تريبتوفان
5.00



إل-تيروزين 2Na 2H2O
28.83



ل-فالين
20.00


فيتامينات
ب-حمض أمينو بنزويك
1.00



د-بيوتين
0.20



كلوريد الكولين
3.00



د-كالسيوم البانتوثينات
0.25



حمض الفوليك
1.00



ميو إينوزيتول
35.00



نيكوتيناميد النيكوتيناميد
1.00



البيريدوكسين حمض الهيدروكلوريك
1.00



ريبوفلافين
0.20



ثيامين حمض الهيدروكلوريك
1.00



فيتامين B12
0.005


أملاح غير عضوية
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



كلوريد الكالسيوم
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



كلوريد الصوديوم
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


مكونات أخرى
د-الجلوكوز
2000.00



ل-جلوتاثيون مختزل
1.00



ملح الصوديوم الفينول الأحمر الفينول
5.30