DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3
يُعد DMEM:Ham's F12 وسطًا أساسيًّا معترفًا به على نطاق واسع ومستخدمًا بكثرة في زراعة الخلايا لأغراض البحث البيولوجي. وهو يُعد مصدرًا أساسيًّا للمغذيات اللازمة لنمو خطوط خلايا الثدييات المختلفة، لا سيما عند استكماله بمصل الجنين البقري (FBS).
تجمع هذه التركيبة الفريدة بين وسط إيجل المعدل لدولبيكو (DMEM) ووسط هامز F-12 (خليط هامز المغذي F-12) بنسبة دقيقة تبلغ 1:1. كما أن إضافة L-الجلوتامين تعزز تركيبتها بشكل أكبر.
يوفر DMEM، المشتق من وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM)، تركيزًا أعلى من الأحماض الأمينية والفيتامينات مقارنةً بسابقه. في المقابل، يعتمد وسط هام F-12 على وسط هام F-10، مما يوفر مجموعة تكميلية من المكونات الأساسية.
ولدعم النمو الخلوي الأمثل، من الشائع إضافة مصل الدم البقري (FBS) إلى DMEM:Ham’s F-12 بتركيز نموذجي يتراوح بين 5-10%. وتعد هذه الإضافة ضرورية لأن الوسط يفتقر إلى هرمونات النمو والدهون والبروتينات الضرورية لتطور الخلايا.
يحتوي DMEM:Ham’s F12 على نظام عازل لدرجة الحموضة (pH)، وغالبًا ما يُضاف إليه الفينول الأحمر، وهو مؤشر لدرجة الحموضة. تتطلب الخلايا المزروعة في DMEM:Ham’s F12، أو أي وسط يستخدم نظام عازل البيكربونات، بيئة ثاني أكسيد الكربون (CO₂) خاضعة للتحكم بنسبة 5-10% للحفاظ على مستويات درجة الحموضة المناسبة.
مراقبة الجودة
- مُصفى بطريقة معقمة
التخزين ومدة الصلاحية
- يُخزن عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية، بعيدًا عن الضوء.
- بمجرد فتح العبوة، يُخزن عند درجة حرارة 4°C ويُستخدم في غضون 6–8 أسابيع.
شروط الشحن
- درجة حرارة الغرفة
التخزين
- يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين +2 و+8 درجة مئوية في مكان مظلم. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأن ذلك يقلل من جودة المنتج.
- لا تقم بتسخين الوسط إلى ما يزيد عن 37 درجة مئوية ولا تستخدم مصادر حرارة غير خاضعة للرقابة مثل أجهزة الميكروويف.
- إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بسحب الكمية المطلوبة وتسخينها إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.
التركيب
| الفئة | المكونات | التركيز (ملغم/لتر) |
| الأحماض الأمينية | الجليسين | 18.75 |
| L-ألانين | 4.45 | |
| L-أرجينين هيدروكلوريد | 147.50 | |
| L-أسباراجين H₂O | 7.50 | |
| حمض L-الأسبارتيك | 6.65 | |
| L-سيستين HCl H₂O | 17.56 | |
| L-سيستين 2 HCl | 31.29 | |
| حمض L-الجلوتاميك | 7.35 | |
| L-جلوتامين | 365.00 | |
| L-هيستيدين HCl H₂O | 31.48 | |
| L-إيزولوسين | 54.47 | |
| L-ليوسين | 59.05 | |
| L-ليسين هيدروكلوريد | 91.25 | |
| L-ميثيونين | 17.24 | |
| L-فينيل ألانين | 35.48 | |
| L-برولين | 17.25 | |
| L-سيرين | 26.25 | |
| L-ثريونين | 53.45 | |
| L-تريبتوفان | 9.02 | |
| L-تيروزين 2 صوديوم 2 ماء | 55.79 | |
| L-فالين | 52.85 | |
| الفيتامينات | D-بيوتين | 0.0035 |
| كلوريد الكولين | 8.98 | |
| بانتوثينات الكالسيوم D | 2.24 | |
| حمض الفوليك | 2.66 | |
| ميو-إينوزيتول | 12.60 | |
| النيكوتيناميد | 2.02 | |
| بيريدوكسين هيدروكلوريد | 0.031 | |
| بيريدوكسال هيدروكلوريد | 2.00 | |
| الريبوفلافين | 0.219 | |
| ثيامين هيدروكلوريد | 2.17 | |
| فيتامين ب12 | 0.68 | |
| الأملاح غير العضوية | كلوريد الكالسيوم (CaCl₂) مع ماء (2 H₂O) | 154.50 |
| CuSO₄ 5 H₂O | 0.0013 | |
| Fe(NO₃)₃ 9 H₂O | 0.05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61.20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO₃ | 1200.00 | |
| Na₂HPO₄ | 71.02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70.87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0.432 | |
| مكونات أخرى | D-جلوكوز | 3151.00 |
| هيبوكسانثين | 2.40 | |
| هيبيس | 3574.50 | |
| حمض اللينوليك | 0.042 | |
| حمض الليبويك | 0.105 | |
| ملح الصوديوم للفينول الأحمر | 8.63 | |
| البوتريسين 2 هيدروكلوريد | 0.081 | |
| بيروفات الصوديوم | 55,00 | |
| ثيميدين | 0.365 |