DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3
يُعد DMEM:Ham's F12 وسطًا أساسيًا معترفًا به على نطاق واسع ومستخدمًا بكثرة في زراعة الخلايا لأغراض البحث البيولوجي. وهو بمثابة مصدر أساسي للمغذيات اللازمة لنمو مختلف سلالات الخلايا الثديية، لا سيما عند استكماله بمصل الأبقار الجنينية (FBS).
تجمع هذه التركيبة الفريدة بين وسط إيجل المعدل من دولبيكو (DMEM) و Ham's F-12 (خليط المغذيات F-12 من هام) بنسبة دقيقة تبلغ 1:1. كما أن إضافة L-glutamine تعزز تركيبته بشكل أكبر.
يوفر DMEM، المشتق من وسط إيجل الأساسي الأدنى (EMEM)، تركيزًا أعلى من الأحماض الأمينية والفيتامينات مقارنة بسابقه. في المقابل، يعتمد Ham's F-12 على وسط Ham's F-10، مما يوفر مجموعة تكميلية من المكونات الأساسية.
لدعم النمو الخلوي الأمثل، من الشائع إضافة FBS إلى DMEM:Ham's F12 بتركيز نموذجي يتراوح بين 5 و10٪. هذه الإضافة ضرورية لأن الوسط يفتقر إلى هرمونات النمو والدهون والبروتينات الضرورية لتطور الخلايا.
يحتوي DMEM:Ham's F12 على نظام عازل للأس الهيدروجيني وغالبًا ما يتم استكماله بالفينول الأحمر، وهو مؤشر للأس الهيدروجيني. تتطلب الخلايا المزروعة في DMEM:Ham's F12، أو أي وسط يستخدم نظام عازل البيكربونات، بيئة CO2 خاضعة للتحكم بنسبة 5-10٪ للحفاظ على مستويات الأس الهيدروجيني المناسبة.
مراقبة الجودة
- مفلتر معقم
التخزين ومدة الصلاحية
- يُخزن في درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية، بعيدًا عن الضوء.
- بمجرد فتح العبوة، يُخزن عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ويُستخدم في غضون 6-8 أسابيع.
شروط الشحن
- درجة الحرارة المحيطة
التخزين
- يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجات مئوية في مكان مظلم. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأن ذلك يقلل من جودة المنتج.
- لا تقم بتسخين الوسط إلى ما يزيد عن 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير خاضعة للرقابة مثل أجهزة الميكروويف.
- إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بإزالة الكمية المطلوبة وقم بتسخينها إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.
التركيب
| الفئة | المكونات | التركيز (ملغم/لتر) |
| الأحماض الأمينية | الجليسين | 18.75 |
| L-ألانين | 4.45 | |
| L-أرجينين HCl | 147.50 | |
| L-أسباراجين H₂O | 7.50 | |
| حمض L-الأسبارتيك | 6.65 | |
| L-سيستين HCl H₂O | 17.56 | |
| L-سيستين 2 HCl | 31.29 | |
| حمض L-الجلوتاميك | 7.35 | |
| L-جلوتامين | 365.00 | |
| L-هيستيدين HCl H₂O | 31.48 | |
| L-إيزولوسين | 54.47 | |
| L-ليوسين | 59.05 | |
| L-ليسين HCl | 91.25 | |
| L-ميثيونين | 17.24 | |
| L-فينيل ألانين | 35.48 | |
| L-برولين | 17.25 | |
| L-سيرين | 26.25 | |
| L-ثريونين | 53.45 | |
| L-تريبتوفان | 9.02 | |
| L-تيروزين 2 Na 2 H2O | 55.79 | |
| L-فالين | 52.85 | |
| الفيتامينات | D-بيوتين | 0.0035 |
| كلوريد الكولين | 8.98 | |
| بانتوثينات الكالسيوم D | 2.24 | |
| حمض الفوليك | 2.66 | |
| ميو-إينوزيتول | 12.60 | |
| نيكوتيناميد | 2.02 | |
| بيريدوكسين هيدروكلوريد | 0.031 | |
| بيريدوكسال هيدروكلوريد | 2.00 | |
| الريبوفلافين | 0.219 | |
| ثيامين هيدروكلوريد | 2.17 | |
| فيتامين ب12 | 0.68 | |
| أملاح غير عضوية | كلوريد الكالسيوم 2 ماء | 154.50 |
| CuSO4 5 H2O | 0.0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0.05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0.417 | |
| KCl | 311.80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61.20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100.00 | |
| NaCl | 6996.00 | |
| NaHCO3 | 1200.00 | |
| Na2HPO4 | 71.02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70.87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0.432 | |
| مكونات أخرى | D-جلوكوز | 3151.00 |
| هيبوكسانثين | 2.40 | |
| HEPES | 3574.50 | |
| حمض اللينوليك | 0.042 | |
| حمض الليبويك | 0.105 | |
| ملح الصوديوم الأحمر الفينولي | 8.63 | |
| البوتريسين 2 HCl | 0.081 | |
| بيروفات الصوديوم | 55.00 | |
| ثيميدين | 0.365 |