HK EGFP-H2B 细胞
一般信息
| 说明 | HK EGFP-H2B 细胞系是一种转基因的 Hela Kyoto 细胞系,主要用于研究染色质动力学和核过程。该细胞系表达由增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和组蛋白 H2B 组成的融合蛋白。将 EGFP 与 H2B 蛋白融合后,可在荧光显微镜下实时观察活细胞中的染色质,为了解细胞核的空间和时间组织提供宝贵的信息。 EGFP-H2B 融合技术有助于细胞生物学的多种应用,包括细胞周期进展、有丝分裂和基因表达调控的研究。通过观察荧光模式,研究人员可以识别和分析细胞周期的各个阶段、染色体分离以及细胞核内的结构变化。该细胞系来源于成人人类细胞,确保与人类生物学相关,可用于基础生物学研究和应用药物研究。 此外,HK EGFP-H2B 细胞系还是表观遗传学研究的重要工具。直接观察组蛋白行为的能力有助于了解基因表达和沉默的表观遗传机制,以及各种表观遗传修饰剂的作用。该细胞系在活细胞成像实验中的强大应用使其成为需要动态细胞分析的详细研究中不可或缺的工具。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 子宫颈 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | HeLa Kyoto H2B-EGFP、HeLa Kyoto H2B EGFP、HeLa-H2B-GFP |
特点
| 年龄 | 30年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 非洲裔美国人 |
| 形态学 | 具有镶嵌石形状的上皮样细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
监管数据
| 引用 | HK EGFP-H2B(Cytion 目录号 300673) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_1D63 |
| 存款人 | 艾伦伯格实验室(EMBL) |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该HeLa京都细胞系含有EGFP-H2B构建体,可实现染色质结构的实时可视化。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | EGFP-H2B:位置/基因:1...589 / Pcmv, 613...1329 / EGFP, 1387...1764 / H2B, 3001...3795 / KanR/NeoR |
|---|---|
| 产品 | CMV 促进因子、组蛋白 H2B、新霉素、磷酸转移酶 |
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '68:02:01
B*: '15:03:01
C*: '12:03:01
DRB1*: '01:02:01
DQA1*: '01:01:02
DQB1*: '05:01:01
DPB1*: '01:01:01
E: '01:03:02
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