תאי WEHI-164

‏395.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 400438

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים WEHI-164 הוקם במקור מפיברוסרקומה שהתפתחה בעכבר BALB/c לאחר הזרקות תת-עוריות של 3-מתילכולנטרין. קו תאים זה נגזר מרקמה מזנכמלית ומפגין מאפיינים האופייניים לתאים דמויי פיברובלסטים. WEHI-164 מהווה כלי חיוני במחקר הסרטן, ומספק תובנות במיוחד בתחומי אימונולוגיית הגידולים והמנגנונים התאיים של אפופטוזיס. תאי WEHI-164 מוערכים במיוחד במחקר בשל תגובתם לאפופטוזיס המושרה על ידי ציטוקינים, מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר האינטראקציה בין ציטוקינים לתאי סרטן. רגישות זו לציטוקינים כמו גורם נמק הגידול (TNF) ו-TRAIL (ליגנד המושרה אפופטוזיס הקשור ל-TNF) ממקמת את קו התאים WEHI-164 כמשאב שימושי לחקר מסלולי איתות המתווכים מוות תאי ולסינון טיפולים פוטנציאליים נגד סרטן שיכולים להשפיע על מסלולים אלה. בנוסף, תכונותיו הדומות לפיברובלסטים של קו התאים מאפשרות מחקרים על מורפולוגיית התאים, מאפייני הצמיחה והמיקרו-סביבה של הגידול, ומספקות הבנה מקיפה יותר של הדינמיקה של הגידול והאינטראקציות בתוך המטריצה התאית. למרות השימוש הנרחב בו במחקר, קו התאים WEHI-164 מציג מספר חריגות כרומוזומליות, תופעה שכיחה בתאים שעברו שינוי על ידי קרצינוגנזה כימית. חוסר היציבות הגנטית הזו חיונית למחקרים המתמקדים בהבנת האופן שבו וריאציות גנטיות יכולות להשפיע על התקדמות הסרטן ועל התגובה לטיפולים. השימוש המתמשך ב-WEHI-164 במגוון מסגרות מחקר מדגיש את התועלת שלו בקידום הידע על ביולוגיה של הסרטן ובפיתוח גישות טיפוליות חדשות.
אורגניזם	עכבר
מחלה	פיברוסרקומה
מילים נרדפות	WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

זן/תת-זן	BALB/c
מורפולוגיה	דמוי פיברובלסט
סוג התא	פיברובלסט
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	WEHI-164 (מספר קטלוגי Cytion 400438)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_2251

Tumorigenic	כן, בעכברי Balb/c

תרבית ביניים	RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
צפיפות זריעה	1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
התאוששות לאחר הפשרה	לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-5 x 10⁴ תאים/סמ"^ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 48 שעות לפחות.
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.