קו התאים RAW 264.7 במחקר מקרופאגים ואימונולוגיה
קו התאים RAW 264.7 משמש כמודל in vitro אמין למקרופאגים של עכברים, המהווה בסיס חיוני בתחום המחקר האימונולוגי. תאים אלה, שמקורם בעכבר זכר מסוג BALB/c, עברו טרנספורמציה על ידי נגיף הלוקמיה של עכברים מסוג Abelson, וכתוצאה מכך נוצר קו תאים הדומה למקרופאגים. בזכות היציבות התפקודית שלהם ויכולתם המולדת לבצע הן פגוציטוזה והן פינוציטוזה, תאי RAW 264.7 חיוניים לחקר האינטראקציות בין המאכסן לפתוגן, מה שהופך אותם לאבן יסוד במאמצי המחקר האימונולוגי [1,2].
- מדיום גידול
- ראו דף המוצר
- זמן הכפלה
- ראה דף המוצר
- סוג גידול
- נדבק
- רמת בטיחות ביולוגית
- BSL-1
- זמין מ
- Cytion — הזמנת RAW 264.7
מאפיינים מורפולוגיים והתנהגות גידול
בבדיקה, תאי RAW 264.7 מפגינים צמיחה חצי-דבקה עם נטייה ליצור הן תאים דבקים בצורת ציר והן תאים חיים צפים כדוריים, בקוטר תאי הנע בין 10 ל-20 מיקרומטר. אופי פולימורפי זה ויכולת ההסתגלות לתנאי התרבית הופכים את תאי RAW 264.7 לכלי רב-תכליתי למניפולציה ולתצפית ניסיונית.
תפקוד חיסוני והצגת אנטיגנים
כתאי הצגת אנטיגנים, תאי RAW 264.7 ממלאים תפקיד קריטי במערכת החיסון. תפקודם חורג מזיהוי פשוט של פתוגנים וכולל עיבוד והצגת אנטיגנים לתאי T, ובכך הם מתזמרים תגובה חיסונית מקיפה. דינמיקה זו מאפשרת הבנה מעמיקה יותר של האופן שבו מערכת החיסון מזהה ומנטרלת גורמים זרים.
קיטוב מקרופאגים: הפרדיגמה של M0, M1 ו-M2
תאי RAW 264.7, במצבם הבסיסי כמקרופאגים מסוג M0, בעלי יכולת יוצאת דופן להתפצל לפנוטיפ M1 הפרו-דלקתי או לפנוטיפ M2 האנטי-דלקתי. יכולת קיטוב זו מספקת לחוקרים מודל לחקר ההשפעות של ציטוקינים שונים וגורמים סביבתיים על תפקוד המקרופאגים ועל התגובות החיסוניות [3,4].
אוסטאוקלסטוגנזה ושינוי מבנה העצם
למרות שאינם אוסטאוקלסטים בעצמם, תאי RAW 264.7 מילאו תפקיד מכריע בחקר האוסטאוקלסטוגנזה — תהליך היווצרות האוסטאוקלסטים. תאים אלה מאפשרים לחקור את ביטוי הגנים האוסטאוקלסטיים ואת תגובתם להפעלת קולטנים. למחקר זה יש השלכות מרחיקות לכת על הבנת הפתופיזיולוגיה של מצבים כגון אוסטאופורוזיס, שבהם שיפוץ עצם לא מבוקר הוא מאפיין בולט.
מידע על תרבית תאים מסוג RAW 264.7
לפני שתתחילו בניסויים, עליכם להבין כמה פרטים בסיסיים על קו תאים עוצמתי זה. האם אתם יודעים מהו זמן הכפלה של תאי RAW 264.7? מהי צפיפות הזריעה של תאים אלה, והאם הם דבקים? יתר על כן, מהן תנאי הגידול האופטימליים עבור RAW 264.7? המשיכו לקרוא כדי לגלות את כל התשובות הדרושות לכם לעבודה עם קו תאים מדהים זה!
מידע על תרבית תאים
קו התאים RAW 264.7
זמן הכפלת האוכלוסייה
11 עד 30 שעות
נדבקים או בתמיסה
בעיקר צמודות, עם אוכלוסיות תאים מסוימות בתמיסה
צפיפות זריעה
4 x 10^4 תאים/סמ"ר
מצע גידול מומלץ
RPMI 1640 בתוספת 10% סרום עגלי ו-L-גלוטמין (2.5 mM)
תנאי גידול אופטימליים
אינקובטור לח עם 5% CO₂ וטמפרטורה של 37°C
החלפת מצע
2 עד 3 פעמים בשבוע
אחסון
שלב אדי של חנקן נוזלי
CM-1 או CM-ACF
תהליך ההקפאה
הקפאה איטית
תהליך ההפשרה
ערבוב מהיר באמבט מים בטמפרטורה של 37°C
רמת בטיחות ביולוגית
מומלץ להשתמש במעבדה ברמת BSL-2

מקרופאגים מסוג RAW 264.7 של עכברים ברמות צפיפות שונות.
יתרונות וחסרונות של תאי RAW 264.7
יתרונות
- גידול קל: קו התאים RAW 264.7 קל לגידול ולתחזוקה במעבדה ללא דרישות מסובכות.
- מאופיינת היטב: RAW 264.7 היא שורת תאים המאופיינת היטב, כלומר יש לה תכונות פנוטיפיות ותפקודיות יציבות.
- מודל מקרופאגים במבחנה: מכיוון שתאי RAW 264.7 הם מקרופאגים, הם מפגינים תפקודים חיוניים האופייניים למקרופאגים, כגון פאגוציטוזה ופינוציטוזה. לפיכך, הם משמשים לעתים קרובות כמודל מקרופאגים במבחנה.
- התמיינות לאוסטאוקלסטים: ניתן להמיין תאי RAW 264.7 לאוסטאוקלסטים באמצעות גורמים מולקולריים ספציפיים. תאים מובחנים אלה מסוגלים לבצע שיפוץ עצם, בדומה לאוסטאוקלסטים.
חסרונות
- ייצוג לקוי של מקרופאגים ראשוניים: כקו תאים שעבר טרנספורמציה, RAW 264.7 עשוי שלא לייצג במדויק את המאפיינים של מקרופאגים ראשוניים, וייתכנו הבדלים מסוימים בביטוי גנים, בפנוטיפ ובתפקוד.
- מגבלות בסינון תרופות: תאי RAW 264.7 עשויים שלא להתאים לכל סוגי בדיקות סינון התרופות, ותגובותיהם לחלק מהתרופות עשויות להיות שונות מאלה של מקרופאגים ראשוניים.
- הידבקות חזקה של התאים: תאי RAW 264.7 נדבקים בחוזקה למשטח צלחת התרבית, ולעיתים קשה להפרידם ממנה.
יישומים של תאי RAW 264.7 בחיקוי מקרופאגים ובמחקרים אימונולוגיים
מודלים של תגובות חיסוניות תאיות
קו התאים RAW 264.7, המשקף את הפונקציונליות של מקרופאגים אותנטיים, מהווה מודל מרכזי לחקר התגובות התאיות לפתוגנים ולגירויים חיסוניים. מחקר שהדגיש היבט זה העריך את ההשפעות האימונומודולטוריות והנוגדות חמצון של חיידקי חומצה לקטית שהומתו בחום על תאים אלה, וסיפק ממצאים משמעותיים בתחום ויסות מערכת החיסון [5 ].
בהשלמה לכך, מחקר שנערך בשנת 2019 הבהיר את ההשפעה החיסונית של חשיפת תאי RAW 264.7 לפוליסכרידים מהצמח Polygonatum sibiricum. המחקר הגיע למסקנה שתרכובות אלו מעוררות תגובה חיסונית באמצעות הפעלת מסלולי איתות NF-κB/MAPK, ובכך מספקות הבנה מולקולרית מעמיקה [6].
חקר האוסטאוקלסטוגנזה
תאי RAW 264.7, המשמשים כמודל חלופי למחקרים על התמיינות אוסטאוקלסטים, תורמים להבנת התנהגות האוסטאוקלסטים ומסלולי ההתמיינות שלהם. מחקרים אלה מרחיבים את הידע שלנו על מנגנוני ספיגת העצם ועל הפתוגנזה של אוסטאופורוזיס. לעתים קרובות נעשה שימוש בטכניקות הדמיה מתקדמות כדי לעקוב אחר שינויים תאיים ולנתח את חילוף החומרים של ההם בתוך תאים אלה.
השגת תובנות מולקולריות על אוסטאוקלסטוגנזה
למרות תפקידם העיקרי כמודל למקרופאגים, תאי RAW 264.7 משמשים גם למחקר על אוסטאוקלסטוגנזה במבחנה. על ידי גרימת מאפיינים דמויי אוסטאוקלסטים בתאים אלה, החוקרים זוכים לתובנות על תהליך ההתמיינות ועל התנהגותם של תאי האוסטאוקלסטים בשלב מוקדם, אם כי חשוב ביותר לקחת בחשבון את המאפיינים המובנים של קו התאים ואת מקורו במחקרים אלה.
סינון פעילות ביולוגית של תוצרים טבעיים
סינון לפעילות ביולוגית במוצרים טבעיים הוא יישום נוסף שבו תאי RAW 264.7 מצטיינים. לדוגמה, השימוש בהם במחקר קוריאני שבחן את התכונות החיסוניות של תערובת צמחי מרפא הדגים את יעילות קו התאים בזיהוי תרכובות ביו-אקטיביות בחומרים טבעיים [7 ].
הובילו את המחקר שלכם עם תאי ה-RAW 264.7 שלנו
פרסומים מחקריים המשתמשים בתאי RAW 264.7
קיימים פרסומים מחקריים רבים בנושא קו תאי מקרופאג'ים של עכבר RAW 264.7:
- פוליסכרידים מ-Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute מעוררים תגובה חיסונית בקו התאים RAW264.7 באמצעות מסלול NF-κB/MAPK: מחקר זה הציע כי פוליסכרידים המופקים מצמח ה-Polygonatum sibiricum יכולים לעורר תגובה חיסונית בקו התאים המקרופאגיים של עכברים RAW 264.7 באמצעות ויסות שרשרת האיתותים של NF-κB/MAPK.
- השפעות אימונומודולטוריות של תמצית Tinospora crispa והמרכיבים העיקריים שלה על תפקודי המערכת החיסונית של מקרופאגים מסוג RAW 264.7: מאמר זה, שפורסם בכתב העת International Immunopharmacology, מתאר כי לתמצית הצמח Tinospora crispa ולמרכיביו העיקריים יש השפעה אימונומודולטורית ומעוררת חיסון על קו התאים המקרופאגיים RAW 264.7.
- חיידקי חומצה לקטית שהומתו בחום מעכבים את ייצור תחמוצת החנקן באמצעות סינתאז תחמוצת החנקן הניתן לגירוי וציקלו-אוקסיגנז-2 בתאי RAW 264.7: מחקר זה הציע כי חיידקי חומצה לקטית שהומתו בחום עשויים לשמש בייצור מוצרים פרוביוטיים, שכן הם בעלי תכונות מווסתות חיסון ונוגדות חמצון. החוקרים השתמשו בתאי RAW 264.7 כדי לחקור פעילויות ביולוגיות אלו.
- השפעת תרכובת צמחית על שיפור התגובה החיסונית במקרופאגים מסוג RAW 264.7: מחקר זה השתמש בתאי RAW 264.7 כדי לחקור את ההשפעה המגרה את המערכת החיסונית של תרכובת צמחית בשם KM1608. המחקר הצביע על KM1608 כסוכן פוטנציאלי לשיפור התגובה החיסונית.
- בדיקה של צמחים המשמשים ברפואה המסורתית הקולומביאנית חשפה את הפוטנציאל האנטי-דלקתי של גביעי Physalis angulata: מאמר זה, שפורסם ב-Saudi Journal of Biological Sciences, חקר את הפוטנציאל האנטי-דלקתי של 10 צמחים קולומביאניים מסורתיים נפוצים באמצעות תאי RAW 264.7 שעברו גירוי באמצעות LPS.
תאי RAW 264.7: משאבים, פרוטוקולים, סרטונים ועוד
תאי RAW 264.7 משמשים לעתים קרובות במחקרי טרנספקציה. המשאבים הבאים מסבירים שיטות טרנספקציה שונות המשמשות לקו התאים RAW 264.7.
- טרנספקציה של תאי RAW 264.7: אתר זה מספק פרוטוקול לטרנספקציה של מקרופאגים מסוג RAW 264.7 באמצעות ריאגנט ליפופקטמין.
- פרוטוקול טרנספקציה: מאמר זה, שפורסם בכתב עת, מתאר פרוטוקול מפורט לטרנספקציה של תאי RAW 264.7.
- שיטת טרנספקציה יעילה לתאי RAW 264.7: מסמך זה מתאר גישה מעשית נוספת לטרנספקציה באמצעות תאי RAW 264.7.
סרטונים הקשורים לקו התאים RAW 264.7
- גידול תאי RAW 264.7: סרטון זה מסביר את פרוטוקול העברת התאים של תאי RAW 264.7.
- שיטת טרנספקציה: סרטון זה עוסק בטרנספקציה של תאי RAW 264.7 באמצעות גן מדווח.
שאלות נפוצות חיוניות על קו התאים RAW 264.7: תובנות בנוגע למחקר על חיקוי מקרופאגים והיווצרות אוסטאוקלסטים
קו התאים RAW 264.7 נגזר ממיימת של גידול שנגרם על ידי נגיף לוקמיה עכברי Abelson (A-MuLV) בעכבר זכר מסוג BALB/c.
תאי RAW 264.7 משמשים כמודל למקרופאגים בשל יכולתם לבצע תפקודים מרכזיים כגון פגוציטוזה ופינוציטוזה, המעידים על תגובות חיסוניות מולדות.
כן, אמנם תאי RAW 264.7 אינם אוסטאוקלסטים, אך ניתן להשתמש בהם כדי לחקור את תהליך האוסטאוקלסטוגנזה ואת הביטוי הגנטי האוסטאוקלסטוגני, מה שתורם להבנתנו את בריאות העצמות ומחלות כמו אוסטאופורוזיס.
תאי RAW 264.7 מגיבים לגירויים מיקרוביאליים על ידי חיקוי תגובות מקרופאגים, מה שהופך אותם לאידיאליים לחקר האינטראקציות בין הפתוגן למאכסן והתגובות התאיות למערכות ביולוגיות שונות.
ייצור ציטוקינים בתאי RAW 264.7 הוא חיוני להבנת תהליך הדלקת ומסלולי האיתות התאיים המעורבים בתגובות חיסוניות, כגון מסלולי NF-κB/MAPK.
לא, תאי RAW 264.7 אינם תאים ראשוניים; הם קו תאים מוּנָצָח. תאים ראשוניים הם תאים שנלקחו ישירות מרקמה חיה ויש להם אורך חיים מוגבל בתרבית.
תאי RAW 264.7 מתורבתים במדיום ספציפי התומך בצמיחתם ומוחזקים בתנאי טמפרטורה ואטמוספירה מבוקרים, כדי להבטיח את יציבותם התפקודית לשימוש ניסיוני.
תאי RAW 264.7, במצבם הבסיסי (M0), יכולים להיות מקוטבים כך שיפגינו תכונות פרו-דלקתיות דמויות M1 או תכונות אנטי-דלקתיות דמויות M2, בהתאם לגירויים אליהם הם נחשפים בתרבית.
כן, תאי RAW 264.7 משמשים לעתים קרובות להערכת הפעילות הביולוגית של מוצרים טבעיים, כולל תרכובות שמקורן בצמחים, לצורך בחינת השפעותיהם הפוטנציאליות על מערכת החיסון או השפעותיהם הטיפוליות.
סמנים אופייניים כוללים F4/80 ו-CD11b, המשמשים בדרך כלל לאישור הפנוטיפ הדומה למקרופאג של תאי RAW 264.7, לצד סמנים תפקודיים כגון פוספטאז חומצי עמיד ופעילות פגוציטית.
ביבליוגרפיה
- Taciak, B., et al., הערכת היציבות הפנוטיפית והתפקודית של קו התאים RAW 264.7 באמצעות מעברים סדרתיים. PloS one, 2018. 13(6): עמ' e0198943.
- Wang, S., et al., מקרופאגים דלקתיים מפריעים להתבגרות ולמינרליזציה של אוסטאוציטים באמצעות ויסות מסלול האיתות Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1): עמ' 102.
- אורחוב, א.נ., ואח', התמיינות מונוציטים וקיטוב מקרופאגים. Vessel Plus, 2019. 3: עמ' 10.
- חביפוב, א' ואח', קיטוב מקרופאגים מסוג RAW 264.7 על ידי תאי סרטן הלבלב – מודל לחקר מקרופאגים המקדמים גידולים. Anticancer Research, 2019. 39(6): עמ' 2871-2882.
- קאנג, C.-H., ואח', חיידקי חומצה לקטית שהומתו בחום מעכבים ייצור תחמוצת חנקן באמצעות סינתאז תחמוצת חנקן הניתן להפעלה וציקלווקסיגנז-2 בתאי RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): עמ' 1530-1538.
- Zhang, J., et al., פוליסכרידים מ-Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute מעוררים תגובה חיסונית בקו התאים RAW264.7 באמצעות מסלול NF-κB/MAPK. RSC advances, 2019. 9(31): עמ' 17988-17994.
- Trinh, T.A., et al., השפעת תרכובת צמחי מרפא על שיפור התגובה החיסונית במקרופאגים מסוג RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): עמ' 424.