קו התאים BEWO
BeWo הוא קו תאים שמקורו בקוריוקרצינומה אנושית, הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. הוא משמש כמודל מעבדה חשוב לחקר התהליך המורכב של התפתחות השליה וסינציטיזציה של טרופובלסטים אנושיים. חוקרים משתמשים בתאים אלה גם כדי לחקור את התנהגות תאי הטרופובלסט, ייצור הורמונים והעברת חומרים דרך השליה. בנוסף, לתאי BeWo יש גם יישומים במחקרים בתחום הטוקסיקולוגיה, זיהומים והעברת מחלות.
מאמר זה כולל ידע בסיסי אודות תאי BeWo שעשוי לסייע לכם בעבודה איתם במחקר שלכם. הוא יכלול:
- מאפיינים כלליים ומקור תאי BeWo
- קו תאי BeWo: מידע על גידול
- יתרונות וחסרונות של קו תאי BeWo
- יישומים מחקריים של תאי BeWo
- פרסומים מחקריים העוסקים בתאי BeWo
- משאבים עבור קו תאי BeWo: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
מאפיינים כלליים ומקור תאי BeWo
ידע מוקדם על מקור קו התאים ומאפייניו הכלליים הוא חיוני לשימוש בו במחקר שלכם. חלק זה של המאמר בוחן את מקור קו התאים BeWo, את מאפייניו הייחודיים ועוד. כאן תלמדו: מהו קו התאים BeWo של כוריוקרצינומה? מהו סינציטיאליזציה של BeWo? מהיכן מגיעים תאי BeWo? מהי המורפולוגיה של תאי BeWo? מהו הפלואידיות של BeWo?
- קו התאים השלייתי BeWo מקורו בקוריוקרצינומה ממאירה של שליה עוברית זכרית משנת 1968 [1]. לפיכך, הוא משמש מודל יקר ערך למחקר על השליה.
- תאי BeWo מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל.
- תאי BeWo קטנים יחסית, בגודל שבין 20 ל-30 מיקרומטר [2].
- תאי BeWo מציגים קריוטיפ יציב. מספר השורות הגזעיות שלהם הוא היפו-טטרפלואידי. מספר הכרומוזומים המודאלי של תאי BeWo הוא 86. הוא עשוי לנוע בין 71 ל-178.
- תאי BeWo מייצרים מספר הורמונים, כגון סומטוממוטרופין כוריוני אנושי, גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG) והורמונים סטרואידים.
- תאי BeWo מבטאים סמנים מולקולריים, כולל CK 7, E-cadherin ו-VE-cadherin.
תת-קו B30
B30 הוא תת-קו של תאי BeWo. הוא משמש לחקר ספיגת והובלת חומרים מזינים. זאת בשל צמיחתם הנמרצת על ממברנות נקבוביות.
BeWo ו-JEG-3
קווי התאים BeWo ו-JEG-3 נגזרים מחוריוקרצינומות ומשמשים במחקר על השליה. תאי BeWo מייצרים הורמונים ברמות נמוכות יותר מאשר JEG-3, כגון גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG) ואסטרדיול.
קו התאים BeWo: מידע על גידול
תחזוקת תרבית תאים עשויה להיות מאתגרת, אלא אם כן ידועים הפרטים המרכזיים. כגון: מהו זמן הכפלה של תאי BeWo? מהו מצע הגידול של תאי BeWo? כיצד מגדלים את קו התאים BeWo? וכיצד מקפיאים תאי BeWo?
נקודות מרכזיות לגידול תאי BeWo
זמן הכפלה:
זמן הכפלת האוכלוסייה של תאי BeWo הוא כ-30 שעות.
תאים דבקים או בתמיסה:
BeWo הוא קו תאים דבק.
צפיפות זריעה:
צפיפות הזריעה המומלצת לתאי BeWo היא 1 x 10⁴ תאים/סמ"ר. לצורך הזריעה, מסירים את התווך הישן מהתאים, ושוטפים את התאים ב-1x PBS. לאחר מכן, מוסיפים Accutase (תמיסת העברה), והתאים עוברים אינקובציה למשך 8 עד 10 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, מוסיפים את התאים שהתנתקו לתמיסת התרבית ומבצעים צנטריפוגה. התאים שנאספו מושעים מחדש ומועברים לצלחת חדשה.
מדיום גידול:
לגידול תאי BeWo משתמשים במדיום F12K של Ham המכיל 10% FBS, 2.0 mM L-גלוטמין, 2.0 mM פירובט נתרן ו-2.5 g/L NaHCO3. יש להחליף את מדיום תאי ה-BeWo 2 עד 3 פעמים בשבוע.
תנאי גידול:
תאי BeWo מוחזקים באינקובטור לח, המכוון לטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ועם אספקת CO₂ של 5%.
אחסון:
תאי BeWo קפואים מאוחסנים בטמפרטורה הנמוכה מ-150°C- במקפיא חשמלי לטמפרטורות נמוכות במיוחד או בשלב האדים של חנקן נוזלי.
תהליך ההקפאה והמדיום:
מומלץ להקפיא תאי BeWo במדיום הקפאה מסוג CM-1 או CM-ACF. התאים מוקפאים בשיטת הקפאה איטית. שיטה זו מאפשרת ירידה של 1 מעלות בלבד בטמפרטורה לדקה, ובכך מונעת מהתאים לחוות הלם ומגנה על חיוניותם.
תהליך ההפשרה:
תאים קפואים מופשרים על ידי טבילתם באמבט מים בטמפרטורה קבועה מראש של 37°C למשך 40 עד 60 שניות, עד שנותר גוש קרח קטן. לאחר מכן, מוסיפים מצע גידול טרי, והתאים עוברים צנטריפוגה כדי להסיר את מרכיבי חומר ההקפאה. משקע התאים שנאסף מועבר לתמיסה מחודשת ומועבר לצלחת תרבית לצורך גידול.
רמת בטיחות ביולוגית:
יש צורך במעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1 לטיפול בתחזוקת תרבויות תאי BeWo.
פורסם: 2023 | נבדק לאחרונה: מאי 2026
יתרונות וחסרונות של קו התאים BeWo
לתאי BeWo מאפיינים ייחודיים, והם מגיעים עם יתרונות וחסרונות ספציפיים. בסעיף זה נבחן כמה מהבולטים שבהם.
יתרונות
היתרונות העיקריים של קו התאים BeWo של כוריוקרצינומה הם:
-
מודל תאי שליה במבחנה
תאי BeWo מספקים מודל במבחנה לחקר התנהגות תאי הטרופובלסט והסינציאליזציה של השליה, תוך שחזור תהליכים שקשה לצפות בהם in vivo.
-
ייצור הורמונים
תאי BeWo מפרישים הורמונים, כגון hCG ולקטוגן שליה, מה שהופך אותם בעלי ערך רב למחקרים בתחום ויסות הורמונלי ולמחקר בביולוגיה של הרבייה.
חסרונות
החסרונות של תאי הטרופובלסט BeWo הם:
-
קו תאים סרטני
תאי BeWo נגזרו מקוריוקרצינומה, שהיא גידול שליה. מקור זה עשוי שלא לייצג באופן מלא את תפקודם הנורמלי של תאי השליה.
יישומים מחקריים של תאי BeWo
קו התאים BeWo נמצא בשימוש נרחב במחקר על השליה. להלן מספר יישומים ספציפיים של קו תאים זה:
- מחקר הקשור לשליה ולהריון: תאי BeWo הם מרכזיים במחקר הקשור לשליה ולהריון. לדוגמה, חוקרים משתמשים בתאים אלה כדי לחקור את העברת חומרים, כולל תרופות, חומרים מזינים ורעלנים, דרך מחסום השליה. בנוסף, הם חוקרים גם את ייצורם וויסותם של הורמונים, כולל גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG), לקטוגן שליה והורמונים סטרואידים. זה חשוב להבנת השינויים ההורמונליים במהלך ההריון. מחקר שנערך בשנת 2018 בחן את ההשפעה של מעכבי בעירה מברומים (BFRs) על פעילות הסולפטוטראנספראז בקו התאים הטרופובלסטי האנושי (BeWo). אנזים זה מעורב בוויסות הרמות התאיות של הורמון בלוטת התריס [3].
- מחקר בנושא זיהומים ומחלות: תאי BeWo משמשים גם לבחינת האינטראקציה בין פתוגנים לתאי השליה. מחקר זה חשוב להבנת מחלות העלולות לעבור מהאם לעובר ולפיתוח אסטרטגיות להגנה על בריאות העובר. יתר על כן, קו תאים זה מסייע לחוקרים לחקור סיבוכים המתעוררים במהלך ההריון, כגון רעלת הריון. לדוגמה, מחקר שנערך על ידי מיכלנה ברלובסקה בשנת 2023 השתמש במודל תאי הטרופובלסט BeWo ומצא כי הן Chromogranin A (CgA) וגם הפפטיד הנגזר ממנו, קטסטטין (CST), עשויים למלא תפקידים בתהליך המורכב של התפתחות רעלת הריון (PE) [4]. בהמשך, מחקר אחר בחן את הפוטנציאל האנטי-סרטני של טריכוסנטין באמצעות קו התאים של כוריוקרצינומה BeWo. המחקר גם השקיע מאמץ נוסף בגילוי סמנים ביולוגיים על ידי ביצוע ניתוח פרוטאומי השוואתי לפני ואחרי הניסוי [5].
5. פרסומים מחקריים העוסקים בתאי BeWo
להלן מספר פרסומים מחקריים משמעותיים העוסקים בתאי הטרופובלסט BeWo.
אותות AMPK מווסתים מיטופאגיה וייצור ATP במיטוכונדריה בקו תאי טרופובלסט אנושי BeWo
מחקר זה, שפורסם ב-Frontiers in Bioscience-Landmark (2022), הציע כי איתות AMPK מפעיל מיטופאגיה בתאי טרופובלסט BeWo באמצעות מסלולי מיטופאגיה המווסתים על ידי FUNDC1 ו-PRKN. כתוצאה מכך, מיטופאגיה מסייעת בשמירה על ייצור ה-ATP ועל פוטנציאל הממברנה המיטוכונדריאלית.
אתילפרבן גורם למוות תאי אפופטוטי בתאי BeWo של שליה אנושית באמצעות מסלול Caspase-3
מאמר זה פורסם בכתב העת Animal Cells and Systems (2020). המחקר הציע כי אתילפרבן מתווך את האפופטוזיס של תאי BeWo באמצעות ויסות מסלול הקספאז 3.
מחקר זה, שפורסם בכתב העת Drug Metabolism and Disposition (2023), השתמש בקווי תאים של השליה, כולל BeWo, JAR, JEG-3 ו-HTR-8/SVneo, כדי לחקור את הצטברות החומרים הזרים והסטרואידים בתאים.
מאמר מחקר זה, שפורסם בכתב העת International Journal of Molecular Medicine (2020), הציע כי אפלין, הליגנד של קולטן APJ, מקדם את התרבות תאי BeWo באמצעות מסלולי איתות APJ ו-ERK1/2, stat3 ו-AMPK. לפיכך, ייתכן שמדובר באדיפוקין חיוני המווסת את התפתחות השליה.
תרופות נוגדות פרכוסים וחומרים מזינים לעובר: השפעות על מובילי כולין בקו תאים של שליה אנושית
מחקר זה, שפורסם בכתב העת Epilepsia (2021), בחן את ההשפעות של חומרים מזינים לעובר ותרופות נוגדות פרכוסים על מובילי כולין בקו תאים טרופובלסטיים שמקורם בבני אדם, BeWo.
משאבים עבור קו התאים BeWo: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
להלן כמה משאבים מקוונים הזמינים בנושא תאי BeWo:
- טרנספקציה במבחנה: סרטון זה יסייע לכם ללמוד את פרוטוקול הטרנספקציה של DNA פלסמיד במבחנה עבור תאים דבקים.
הקישור הבא מכיל מידע על תרבית תאים עבור תאי BeWo:
- תאי BeWo: אתר זה מכיל מידע חיוני על תרבית תאים בקו התאים BeWo. מידע זה כולל פרטים על מצעי תאים ותנאי תרבית. כמו כן, הוא כולל פרוטוקולים לתרבית משנה ולטיפול בתרבויות שהוקפאו ובתאים מתרבים.
מקורות
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., מאפיינים של תאי טרופובלסט בתרבית ארוכת טווח. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: עמ' 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: עמ' 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha, ו-A. Sakowicz, ירידה ברמת החלבון CST שמקורו ב-CgA בקווי תאי טרופובלסט HTR-8/SVneo ו-BeWo הנגרמת על ידי סביבה של רעלת הריון. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): עמ' 7124.
- Hu, Y., et al., ניתוח פרוטאומי השוואתי של תוספת התרופה טריכוסנטין לקו התאים BeWo. Molecules, 2022. 27(5): עמ' 1603.