Células B16-F10: análisis de la línea celular de melanoma B16-F10 en la investigación sobre la metástasis
Las células B16-F10 constituyen una línea celular de melanoma derivada del ratón C57BL/6J. Se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer de piel. Los investigadores utilizan estas células para estudiar el desarrollo y la progresión de los tumores, así como las intervenciones terapéuticas. Este artículo abordará los aspectos fundamentales de las células de melanoma B16-F10. En particular, incluirá:
- Medio de cultivo
- Las células B16-F10 se cultivan en medio DMEM. El medio se suplementa con un 10 % de suero fetal bovino (FBS), 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃, 4,5 g/L de glucosa y 1,0 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo. El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana.
- Tiempo de duplicación
- El tiempo de duplicación de las células B16-F10 es de aproximadamente 20,1 horas. Puede oscilar entre 17 y 21 horas, dependiendo de las condiciones de cultivo.
- Tipo de crecimiento
- B16-F10 es una línea celular adherente. Las células crecen rápidamente y forman monocapas.
- Nivel de bioseguridad
- BSL-1
- Disponible en
- Cytion — Solicitar B16-F10
- Origen y características generales de la línea celular B16-F10
- Información sobre el cultivo de las células B16-F10
- Células B16-F10: ventajas y desventajas
- Aplicaciones de investigación de las células B16-F10
- Publicaciones sobre la línea celular B16-F10
- Recursos para la línea celular B16-F10: protocolos, videos y más
- Origen y características generales de la línea celular B16-F10
- Información sobre el cultivo de las células B16-F10
- Células B16-F10: ventajas y desventajas
- Aplicaciones de investigación de las células B16-F10
- 5. Publicaciones sobre la línea celular B16-F10
- Recursos para la línea celular B16-F10: protocolos, videos y más
- Preguntas frecuentes
Origen y características generales de la línea celular B16-F10
Esta sección le brindará información sobre el origen y las características distintivas de las células tumorales de melanoma B16-F10. Le ayudará a utilizar la línea celular de manera eficiente en su trabajo de investigación. Principalmente, aprenderá: ¿Qué son las células B16-F10? ¿De dónde se deriva la línea celular B16-F10? ¿Cuál es la morfología de la línea celular B16-F10? ¿Cuál es el tamaño de la célula B16-F10?
- La B16-F10 es un subclon de la línea celular tumoral B16 derivada del tejido cutáneo de ratones C57BL/6J. En este caso, las células de melanoma B16F10 se desarrollaron tras inyectar por vía intravenosa la línea B16 en ratones inmunodeprimidos o singénicos. Estas células fueron seleccionadas por su potencial para formar colonias metastásicas en el pulmón in vivo y luego se establecieron tras diez ciclos de formación de colonias pulmonares in vitro [1]. Fue desarrollada por Fidler y sus colegas en 1976.
- Las líneas celulares B16-F10 tienen un aspecto similar al epitelial y una forma fusiforme.
- El tamaño aproximado de las células B16-F10 es de 15,4 ± 1,4 μm [2].
Células B16-F1 y B16-F10
Las células B16-F1 y B16-F10 se derivaron de la línea celular madre B16. Ambas tienen el mismo origen y poseen características casi similares. Sin embargo, la principal diferencia radica en su capacidad metastásica. Las células B16-F10 tienen un alto potencial metastático, mientras que las B16-F1 tienen un potencial metastático bajo [3].
Información sobre el cultivo de células B16-F10
Antes de manipular y cultivar una línea celular, es necesario conocer su tiempo de duplicación, los medios de cultivo, las condiciones y los protocolos de cultivo celular. En esta sección se abordarán los siguientes temas: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células B16-F10? ¿Cómo se cultivan las células B16-F10? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células B16-F10? ¿Qué condiciones de cultivo se recomiendan para las células B16-F10?
Puntos clave para el cultivo de células B16-F10
Tiempo de duplicación:
El tiempo de duplicación de las células B16-F10 es de aproximadamente 20,1 horas. Puede variar entre 17 y 21 horas, dependiendo de las condiciones de cultivo.
Adherentes o en suspensión:
La B16-F10 es una línea celular adherente. Las células crecen rápidamente y forman monocapas.
Proporción de división:
Las células B16-F10 se subcultivan con una relación de división de 1:2 a 1:4. Las células se lavan con solución salina tamponada con fosfato (1x) y luego se incuban con solución de pasaje Accutase durante 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. Se agrega medio fresco a las células y se centrifugan. El sedimento celular obtenido se resuspende nuevamente y las células se distribuyen en un nuevo frasco que contiene medio de cultivo fresco de acuerdo con la proporción de división.
Medio de crecimiento:
Las células B16-F10 se cultivan en medio DMEM. El medio se suplementa con 10 % de suero fetal bovino (FBS), 4 mM de L-glutamina, 1,5 g/L de NaHCO₃, 4,5 g/L de glucosa y 1,0 mM de piruvato de sodio para un crecimiento celular óptimo. El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:
Las células B16-F10 se cultivan en una incubadora humidificada a 37 °C con un suministro de 5 % de CO₂.
Almacenamiento:
Las células congeladas se almacenan a temperaturas inferiores a -150 °C en un congelador eléctrico de temperatura ultrabaja o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para mantener la viabilidad celular.
Proceso de congelación y medio:
Las células B16-F10 se congelan en medios CM-1 o CM-ACF para su almacenamiento. Para ello, se recomienda un proceso de congelación lenta que permita solo una disminución de 1 °C en la temperatura por minuto, a fin de evitar cualquier choque térmico en las células.
Proceso de descongelación:
Las células B16-F10 congeladas se descongelan en un baño de agua preajustado a 37 °C durante 40 a 60 segundos. A continuación, las células se agregan a un medio fresco y se centrifugan para eliminar los componentes del medio de congelación. Las células recolectadas se resuspenden en un medio de crecimiento y se vierten en frascos para su cultivo.
Nivel de bioseguridad:
Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manejar y mantener la línea celular B16-F10.
Células B16-F10: ventajas y desventajas
Al igual que otras líneas celulares, la B16-F10 también presenta algunas ventajas y desventajas. En esta sección se analizan algunos de los pros y contras más importantes de esta línea celular de melanoma cutáneo.
Ventajas
La línea celular B16-F10 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer. Las ventajas de las células B16-F10 son:
Potencial metastásico
Las células B16-F10 de melanoma cutáneo presentan un alto potencial metastásico, lo que las hace valiosas para estudiar la metástasis del cáncer y los mecanismos subyacentes.
Modelo tumoral in vitro
Las células B16-F10 sirven como modelo in vitro para estudiar la progresión y el crecimiento del cáncer, lo que ayuda a los investigadores a comprender los mecanismos celulares y moleculares que impulsan el cáncer.
Desventajas
Las desventajas asociadas a la línea celular B16-F10 son:
Línea celular derivada de ratón
La B16-F10 es una línea celular derivada de ratón, lo que limita su aplicabilidad a estudios específicos en humanos. Es posible que los hallazgos de investigación obtenidos a partir de estas células no siempre se puedan trasladar fielmente a la biología humana.
Aplicaciones de investigación de las células B16-F10
La línea celular B16-F10 se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer. A continuación se analizan algunas aplicaciones prometedoras de esta línea celular.
- Investigación del cáncer: La línea celular B16-F10 es un modelo valioso para estudiar los procesos de las células cancerosas, incluyendo la proliferación, la invasión, la migración y la muerte celular o apoptosis. Además, ayuda a los investigadores a comprender mejor los mecanismos moleculares y las vías que impulsan estos procesos celulares. Un estudio realizado en 2018 exploró el papel del CCR5 (receptor de quimiocinas C-C tipo cinco) en la transición epitelial a mesenquimal y la metástasis de las células de melanoma. Los hallazgos revelaron que la deficiencia de CCR5 restringe el crecimiento tumoral y la metástasis, mientras que una alta expresión conduce a un mayor crecimiento y metástasis de las células B16-F10. Investigaciones posteriores indicaron que el CCR5 regula la expresión de TGFβ1, el cual a su vez regula la señalización PI3K/AKT/GSK3β para promover la transición epitelial a mesenquimal y la migración celular [4].
- Pruebas y desarrollo de fármacos: Las células tumorales de melanoma B16F10 son altamente agresivas y, por lo tanto, adecuadas para probar posibles fármacos y tratamientos antitumorales. Los investigadores utilizan estas células y evalúan el efecto de diferentes compuestos sobre el crecimiento celular, la proliferación y la metástasis, lo que contribuye al desarrollo de fármacos. Un estudio realizado en 2018 por Valentina Nanni y sus colegas investigó los efectos terapéuticos del extracto hidroalcohólico de las flores de Spartium junceum. El estudio sugirió que el extracto de flores era eficaz para inducir la senescencia en las células B16-F10, lo que conduce a la supresión del crecimiento celular y la melanogénesis; por lo tanto, puede ejercer posibles actividades anticancerígenas [5].
5. Publicaciones en las que aparece la línea celular B16-F10
A continuación se presentan algunas publicaciones de investigación relevantes que utilizan la línea celular de melanoma B16-F10:
Este estudio se publicó en Nutrients (2020). En él se propone que el extracto etanólico de Sorghum bicolor tiene un efecto antimelanogénico en las células de melanoma cutáneo B16-F10.
El calcitriol inhibe la proliferación y podría inducir la apoptosis en las células B16-F10
La investigación publicada en Medical Science Monitor Basic Research (2022) propuso que el fármaco calcitriol ejerce efectos antitumorales en las células de melanoma B16-F10 al inhibir la proliferación e inducir la apoptosis.
Este artículo se publicó en *Biochemical and Biophysical Research Communications* (2022). Los hallazgos revelaron que los cardoles, lípidos resorcinólicos, ejercen una intensa citotoxicidad sobre la línea celular B16-F10.
El estudio publicado en Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) exploró el potencial antimetastático del extracto del exocarpio de Ginkgo biloba utilizando células B16-F10.
Esta investigación publicada en *World Neurosurgery* (2018) propuso que la timoquinona puede ser una terapia eficaz contra las lesiones metastásicas intracerebrales, ya que suprime el crecimiento de las células B16-F10 e induce la apoptosis.
Recursos para la línea celular B16-F10: protocolos, videos y más
Las células endoteliales B16F10 se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer de piel. A continuación, se presentan algunos recursos en línea que explican sus protocolos de cultivo y transfección:
- Transfección de células de melanoma B16-F10: Este tutorial en video puede ayudarte a aprender el protocolo de transfección para las células B16-F10.
- Transfección de B16-F10: Este documento explica el protocolo de transfección de ADN in vitro para las células B16F10 de melanoma cutáneo.
El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo celular para las células B16-F10:
- Subcultivo de B16-F10: Este sitio web contiene información útil sobre las células tumorales de melanoma B16-F10. Incluye medios de crecimiento, tiempo de duplicación, condiciones de cultivo y protocolo para el subcultivo de células, así como el manejo de cultivos criopreservados y proliferativos.
Referencias
- Poste, G., et al., Comparación de las propiedades metastásicas de clones de melanoma B16 aislados de líneas celulares cultivadas, tumores subcutáneos y metástasis pulmonares individuales. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono y S. Sugita, «Mecanofenotipado de variantes de células de melanoma B16 para la evaluación de la eficacia del tratamiento con (-)-galato de epigalocatequina utilizando un dispositivo microfluídico cónico». Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., «Comportamiento de cuatro sublíneas diferentes de células de melanoma murino B16: piel de C57BL/6J». Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., La alta expresión de CCR5 en el melanoma potencia la transición epitelial-mesenquimal y la metástasis a través del TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., El extracto hidroalcohólico de las flores de Spartium junceum L. inhibe el crecimiento y la melanogénesis en las células B16-F10 al inducir la senescencia. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.