Клітини Wilms3

800,00 EUR*

Продукти відправляються в замороженому вигляді на сухому льоді в кріопробірках. Кожна кріопробірка зазвичай містить 3 × 10 ⁶ клітин для адгезивних ліній або 5 × 10⁶ клітин для суспензійних ліній (детальніше див. сертифікат аналізу партії).

Ціни без урахування податків та витрат на доставку

cryovial

Номер продукту: 300414

Паспорт безпеки

Листок з описом продукції

Сертифікат аналізу (CoA)

Угода про передачу матеріалів

Опис	Клітинну лінію Wilms3 було отримано з первинної пухлини Вільмса у педіатричного пацієнта, що характеризується соматичною мутацією WT1. На відміну від багатьох інших клітинних ліній пухлини Вільмса, лінія Wilms3 має гетерозиготну мутацію зсуву рамки в гені WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), що призводить до вироблення усіченого білка WT1. Ця часткова втрата функції WT1 пов'язана з розвитком пухлин, які мають стромальний або мезенхімальний фенотип. Однак мутація WT1 у Wilms3 не є гомозиготною, що додає складнощів у її вивченні, оскільки вона зберігає певну функцію WT1, яка може впливати на біологію пухлини інакше, ніж клітинні лінії з повною втратою WT1. Wilms3 також несе мутацію в гені CTNNB1, що впливає на треонін 41 (p.T41A), який відіграє важливу роль у сигнальному шляху Wnt. Ця мутація стабілізує β-катенін, запобігаючи його деградації та призводить до конститутивної активації шляху Wnt. Стійка активація сигнального шляху Wnt стимулює проліферацію клітин і сприяє пухлиноутворенню в лінії Wilms3, що робить її ключовою моделлю для вивчення впливу мутацій CTNNB1 в контексті частково функціонального фону WT1. Фенотипічно клітини Wilms3 мають мезенхімальну морфологію, експресують віментин і не містять цитокератину, що відповідає стромальним характеристикам, які спостерігаються у вихідній пухлині. Ці клітини мають обмежений потенціал диференціювання, але здатні до мезенхімального диференціювання за певних умов. Протеомний аналіз Wilms3 виявив активацію декількох рецепторних тирозинкіназ (RTK), включаючи PDGFRβ і AXL, які підтримують виживання і проліферацію клітин. Крім того, активуються наступні сигнальні шляхи, такі як MAPK і PI3K/AKT, що посилює злоякісні властивості клітин Wilms3. Одним з унікальних аспектів Wilms3 є часткова функціональність WT1, що дає чітке уявлення про те, як мутації WT1 впливають на біологію пухлини Вільмса, коли мутація не є повною. Взаємодія між сигналами WT1 і Wnt у Wilms3 дає цінну можливість вивчити нюанси ролі цих шляхів у розвитку пухлин. В цілому, Wilms3 слугує важливою моделлю для дослідження молекулярних механізмів, що лежать в основі пухлини Вільмса за наявності часткової втрати WT1 та конститутивної активації шляху Wnt.
Організм	Людина
Тканина	Нирка
Хвороба	Пухлина Вільмса
Додатки	Модель культури клітин in vitro. Біохімічні дослідження

Вік	11-12 місяців
Стать	Чоловік
Етнічна приналежність	Кавказець
Морфологія	Веретеноподібна форма
Тип клітини	Клітини Вільмса
Ростові властивості	Адепт

Цитування	Wilms3 (номер за каталогом Cytion 300414)
Рівень біобезпеки	1
NCBI_TaxID	9606
ЦелозаврПриєднання	CVCL_A5SF

Мутаційний профіль	Статус мутації WT1: гомозиготний c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, статус мутації CTNNB1: дикий тип

Поживне середовище	Комплект MSCGM (від Lonza)
Реагент для дисоціації	Аккутаза
Субкультура	Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Заморожуюче середовище	Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Розморожування та культивування клітин	Переконайтеся, що віал залишається глибоко замороженим після доставки, оскільки клітини транспортуються на сухому льоду для підтримання оптимальної температури під час транспортування. Після отримання негайно зберігайте кріовіал при температурі нижче -150°C, щоб забезпечити збереження клітинної цілісності, або перейдіть до кроку 3, якщо потрібне негайне культивування. Для негайного культивування швидко розморозьте віал, зануривши його у водяну баню з чистою водою і антимікробним засобом при температурі 37°C, обережно перемішуючи протягом 40-60 секунд, поки не залишиться невелика крижана грудка. Всі наступні кроки виконуйте в стерильних умовах у проточній витяжній шафі, дезінфікуючи кріовіал 70% етанолом перед відкриттям. Обережно відкрийте продезінфікований флакон і перенесіть клітинну суспензію в 15 мл центрифужну пробірку, що містить 8 мл культурального середовища кімнатної температури, обережно перемішуючи. Відцентрифугуйте суміш при 300 x g протягом 3 хвилин, щоб відокремити клітини, і обережно викиньте надосадову рідину, що містить залишки заморожувального середовища. Обережно ресуспендуйте осад клітин у 10 мл свіжого культурального середовища. Для адгезивних клітин розділіть суспензію між двома культуральними колбами T25; для суспензійних культур перенесіть все середовище в одну колбу T25, щоб сприяти ефективній взаємодії та росту клітин. Дотримуйтесь встановлених протоколів субкультивування для продовження росту і підтримання клітинної лінії, забезпечуючи надійні результати експерименту.
Інкубаційна атмосфера	37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.
Покриття колби	Ні
Процедура заморожування	Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання.
Умови доставки	Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і негайно перемістіть віали у відповідне місце для зберігання.
Умови зберігання	Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Стерильність	Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми. Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
HLA алелі	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Номер лота	Тип сертифікату	Дата	Номер за каталогом
300414-221	Сертифікат аналізу	23. May. 2025	300414

Якщо ви маєте намір використовувати клітинні лінії Cytion виключно для внутрішніх досліджень в одному дослідницькому центрі, заповніть та підпишіть нашу Угоду про передачу матеріалів (MTA) і надішліть її разом із вашим замовленням.

Для будь-яких комерційних застосувань, включаючи, але не обмежуючись, роботу за плату, тестування контролю якості, випуск продукції, діагностичне використання або регуляторні дослідження, заповніть форму передбачуваного використання, щоб ми могли підготувати відповідну угоду, адаптовану до вашого проекту.

Зверніть увагу: угода MTA застосовується лише до певних клітинних ліній. Якщо це повідомлення та документ MTA з'являються на сторінці продукту, угода є чинною. Для клітинних ліній, на які не поширюється дія угоди MTA, посилання на угоду не відображається. Угода MTA не є чинною для клієнтів в Америці, Китаї або Тайвані. Зверніться до нашого представництва в США, щоб отримати відповідну угоду.

Клітини Wilms3

Загальна інформація

Характеристики

Нормативні дані

Біомолекулярні дані

Обробка

Контроль якості / Генетичний профіль / HLA

Сертифікат аналізу (CoA)

Угода про передачу матеріалів