เซลล์ NCH612

€1,080.00*การแปล: "การแปล"

ผลิตภัณฑ์จะถูกจัดส่งในสภาพแช่แข็งบนน้ำแข็งแห้งในหลอดเก็บตัวอย่างแบบฉนวนความเย็น (cryotubes) โดยแต่ละหลอดจะบรรจุเซลล์ประมาณ 3 × 10 ⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์ที่เกาะผนัง หรือ 5 × 10⁶ เซลล์ สำหรับสายเซลล์แบบแขวนลอย (โปรดดูรายละเอียดเพิ่มเติมในใบรับรองการวิเคราะห์ (CoA) ของแต่ละล็อต)

ราคาไม่รวมภาษีและค่าจัดส่ง

cryovial

หมายเลขสินค้า: 300121

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

แผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

ข้อตกลงบุคคลที่สาม

คำอธิบาย	NCH612 เป็นสายเซลล์ oligodendrocytic ที่ได้จากผู้ป่วยซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อสมองมนุษย์ และใช้เป็นแบบจำลองการวิจัยที่เกี่ยวข้องสำหรับ anaplastic oligodendroglioma (WHO grade III) สายเซลล์นี้มีลักษณะการกลายพันธุ์ IDH1 R132H ซึ่งเป็นลักษณะทางพันธุกรรมที่พบได้บ่อยใน oligodendrogliomasการกลายพันธุ์นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงทางอีพิเจเนติก รวมถึงลักษณะทางฟีโนไทป์ของเกาะ CpG ในเนื้องอกสมองชนิดกลิโอมา (glioma CpG island methylator phenotype หรือ G-CIMP) ซึ่งมีส่วนช่วยในการพัฒนาและการลุกลามของเนื้องอก ที่น่าสังเกตคือ NCH612 แสดงการลบบางส่วนของแขนโครโมโซม 1p และ 19q ซึ่งเป็นลักษณะทางพันธุกรรมที่พบบ่อยในเนื้องอกสมองชนิดโอลิโกเดนโดรกลีโอมา (oligodendrogliomas) และเกี่ยวข้องกับการพยากรณ์โรคที่ดีขึ้นและการตอบสนองต่อการรักษาบางประเภท การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่า NCH612 มีความไวเป็นพิเศษต่อตัวยับยั้งเอนไซม์เมทิลทรานสเฟอเรสของดีเอ็นเอที่ชื่อว่าเดซิทาบีน (DAC) การรักษาด้วย DAC ส่งผลให้การเพิ่มจำนวนเซลล์และการสร้างโคโลนีลดลง โดยหลักเกิดจากการลดการแสดงออกของ TERT (เทโลเมอเรส รีเวิร์ส ทรานสคริปเทส) และการเพิ่มการแสดงออกของ p21 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งไคเนสที่ขึ้นอยู่กับไซคลินและมีบทบาทในการตอบสนองต่อความเสียหายของดีเอ็นเอที่น่าสนใจคือ ความไวต่อการตอบสนองนี้ดูเหมือนจะเชื่อมโยงกับการมีอยู่ของทั้งการกลายพันธุ์ IDH1 และการลบยีนร่วม 1p/19q เนื่องจากเซลล์เนื้องอกในสมองชนิด IDH1-กลายพันธุ์อื่นๆ ที่ไม่มีการลบยีนนี้ เช่น NCH1681 แสดงให้เห็นถึงความต้านทานต่อ DACผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการบำบัดด้วยวิธีอีพิเจเนติก เช่น DAC อาจมีประสิทธิภาพเป็นพิเศษในเนื้องอกสมองชนิดอะนาพลาสติกโอลิโกเดนโดรกลีโอมาที่มีการกลายพันธุ์ของยีน IDH1 พร้อมกับการสูญเสียโครโมโซม 1p/19q ร่วมด้วย การตรวจสอบทางโมเลกุลเพิ่มเติมเผยให้เห็นว่าการรักษาด้วย DAC ในเซลล์ NCH612 นำไปสู่การเพิ่มปริมาณของเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการจำลองดีเอ็นเอ การควบคุมวงจรเซลล์ และการทำงานของไลโซโซม ซึ่งช่วยเปิดเผยกลไกการออกฤทธิ์ของยาการกดขี่ TERT โดย DAC นั้นถูกควบคุมโดย p21 ซึ่งเน้นย้ำถึงบทบาทสำคัญของเส้นทางนี้ในการตอบสนองต่อการบำบัดแบบอีพิเจเนติก ด้วยลักษณะทางพันธุกรรมและอีพิเจเนติกที่ชัดเจน NCH612 จึงเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกอะนาพลาสติกโอลิโกเดนโดรกลีโอมา และสำหรับการพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าที่มุ่งเน้นต่อเนื้องอกซึ่งมีการกลายพันธุ์ของ IDH1 พร้อมกับการสูญเสียโครโมโซม 1p/19q
สิ่งมีชีวิต	มนุษย์
เนื้อเยื่อ	สมอง
โรค	อะนาพลาสติกโอลิโกเดนโดรกลีโอมา, WHO ระดับ III, IDH1 กลายพันธุ์ (R132H)

อายุ	39 ปี
เพศ	ชาย
เชื้อชาติ	คอเคเชียน
คุณสมบัติการเติบโต	วัฒนธรรมทรงกลม

การอ้างอิง	NCH612 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300121)
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ	1
NCBI TaxID	9606
เซลโลซอรัสหมายเลขทะเบียน	CVCL_x913

อาหารเลี้ยงเชื้อ	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
อาหารเสริม	เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, เฮปาริน 5 มก./ลิตร, bFGF 20 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, EGF 20 ไมโครกรัม/ลิตรอินซูลิน 5 มก./ล., ทรานส์เฟอร์ริน 100 มก./ล., โซเดียม-ซีลีไนต์ 5.2 ไมโครกรัม/ล., โปรเจสเตอโรน 6.3 ไมโครกรัม/ล., พูเทรสซิน 161.1 ไมโครกรัม/ล., ไฮโดรคอร์ติซอน 50 มก./ล.
การเพาะเลี้ยงเชื้อแบบแยกส่วน	สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ทรงกลมแบบย่อย ให้เริ่มต้นด้วยการแยกเซลล์ออกจากกันทางกลไกโดยการดูดและปล่อยของเหลวขึ้นลง 5 ถึง 10 ครั้ง โดยใช้ปิเปต Eppendorf พร้อมปลายกรองขนาด 1000 μl หลังจากนั้น นำส่วนผสมไปปั่นเหวี่ยงที่ความเร็ว 300g เป็นเวลา 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง เพื่อให้เซลล์ตกตะกอน กำจัดส่วนใสที่ลอยอยู่ด้านบนทิ้ง แล้วนำไปแขวนลอยเซลล์ที่ตกตะกอนในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่สุดท้าย ให้ถ่ายโอนเซลล์ที่แขวนลอยกลับเข้าไปในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่เพื่อส่งเสริมการก่อตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมต่อไป วิธีการนี้ช่วยให้การสลายตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมมีประสิทธิภาพและเตรียมพร้อมสำหรับการเจริญเติบโตต่อไปในสภาพแวดล้อมใหม่
ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด	1 x 10^⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
การฟื้นฟูของเหลว	ต้องเติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ทุก 2 ถึง 3 วัน (2 ถึง 5 มิลลิลิตร ขึ้นอยู่กับขนาดของขวดเพาะเลี้ยงเซลล์)
การฟื้นฟูหลังการละลาย	ช้า. หลังจากละลายแล้ว ให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งอย่างน้อย 48 ชั่วโมง.
สื่อเลี้ยงเซลล์แบบแช่แข็ง	ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
การละลายและการเพาะเลี้ยงเซลล์	ยืนยันว่าขวดยังคงแช่แข็งอย่างสมบูรณ์เมื่อได้รับสินค้า เนื่องจากเซลล์ถูกจัดส่งบนน้ำแข็งแห้งเพื่อรักษาอุณหภูมิที่เหมาะสมระหว่างการขนส่ง เมื่อได้รับแล้ว ให้เก็บ cryovial ทันทีที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 องศาเซลเซียส เพื่อรักษาความสมบูรณ์ของเซลล์ หรือดำเนินการตามขั้นตอนที่ 3 หากจำเป็นต้องเพาะเลี้ยงทันที สำหรับการเพาะเลี้ยงทันที ให้ละลายน้ำแข็งในหลอดอย่างรวดเร็วโดยแช่หลอดในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมน้ำสะอาดและสารต้านจุลชีพ คนเบา ๆ เป็นเวลา 40-60 วินาที จนกระทั่งเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก ดำเนินการขั้นตอนต่อไปทั้งหมดภายใต้สภาวะปลอดเชื้อในตู้ลมไหล โดยฆ่าเชื้อขวดแช่แข็งด้วยแอลกอฮอล์ 70% ก่อนเปิด เปิดขวดยาฆ่าเชื้ออย่างระมัดระวัง และถ่ายโอนสารแขวนลอยเซลล์ลงในหลอดปั่นเหวี่ยงขนาด 15 มิลลิลิตรที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิห้อง 8 มิลลิลิตร โดยคนเบา ๆ ปั่นเหวี่ยงส่วนผสมที่ความเร็ว 300 x g เป็นเวลา 3 นาที เพื่อแยกเซลล์ออกจากกัน แล้วเทส่วนใสที่อยู่ด้านบนซึ่งมีสารแช่แข็งตกค้างออกอย่างระมัดระวัง ค่อยๆ ผสมเซลล์ที่ตกตะกอนให้ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ 10 มิลลิลิตร สำหรับเซลล์ที่เกาะติด ให้แบ่งสารแขวนลอยลงในขวดเลี้ยงเชื้อ T25 สองขวด สำหรับการเลี้ยงแบบแขวนลอย ให้ถ่ายอาหารเลี้ยงเชื้อทั้งหมดลงในขวด T25 ขวดเดียว เพื่อส่งเสริมการปฏิสัมพันธ์และการเจริญเติบโตของเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ ปฏิบัติตามระเบียบปฏิบัติของกลุ่มวัฒนธรรมย่อยที่กำหนดไว้สำหรับการเติบโตและการบำรุงรักษาของเซลล์ไลน์อย่างต่อเนื่อง เพื่อให้มั่นใจในผลลัพธ์การทดลองที่เชื่อถือได้
บรรยากาศการบ่มเพาะ	37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น
การเคลือบขวด	ไม่มี
ขั้นตอนการแช่แข็ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการจัดส่ง	เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
เงื่อนไขการเก็บรักษา	สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

ความปราศจากเชื้อ	การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
อัลลีลของ HLA	เอ: '02:01:01 บีสตาร์: '57:01:01, '57:01:01G C: '04:01:01 DRB1: เวลา 11:01:01 DQA1: '05:05:01 DQB1: '03:01:01 DPB1: '04:02:01 อี: '01:03:02

โปรดทราบว่าสายเซลล์นี้ไม่สามารถใช้ได้ภายใต้ข้อตกลง Cytion MTA มาตรฐาน เนื่องจากต้องใช้ข้อตกลงกับบุคคลที่สามและ/หรือต้องเจรจากับผู้ให้สิทธิ์เดิม

เซลล์ NCH612

ข้อมูลทั่วไป

ลักษณะ

ข้อมูลด้านกฎระเบียบ

ข้อมูลชีวโมเลกุล

การจัดการ

การควบคุมคุณภาพ / โปรไฟล์ทางพันธุกรรม / HLA

ข้อตกลงบุคคลที่สาม