เซลล์ CHO ในการผลิตชีวภาพ: การประยุกต์ใช้และนวัตกรรม
เซลล์ไลน์ CHO ซึ่งสกัดจากรังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน เป็นแหล่งพลังงานสำคัญในการวิจัยทางการแพทย์และชีววิทยาด้วยขอบเขตการใช้งานที่หลากหลาย เซลล์ไลน์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมนี้มอบความเป็นไปได้ที่ไม่มีที่สิ้นสุด ตั้งแต่การผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ การแสดงออกของยีน การคัดกรองความเป็นพิษ โภชนาการ และการศึกษาทางพันธุกรรม
- อาหารเลี้ยงเชื้อ
- ดูหน้าสินค้า
- เวลาสองเท่า
- ดูหน้าสินค้า
- ประเภทการเติบโต
- ยึดติด
- ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ
- BSL-1
- มีจำหน่ายจาก
- ไซเทียน — สั่งซื้อ CHO
บทความของเราจะพาคุณดำดิ่งสู่โลกอันน่าหลงใหลของเซลล์ CHO สำรวจว่าเซลล์เหล่านี้ได้ปฏิวัติการวิจัยทางชีวเภสัชภัณฑ์และปูทางสู่การรักษาที่ช่วยชีวิตได้อย่างไร เตรียมพร้อมที่จะไขความลับของเซลล์ CHO อันทรงพลังและค้นพบวิธีที่พวกมันขับเคลื่อนความก้าวหน้าอันน่าทึ่งในวงการแพทย์และอื่นๆ อีกมากมาย! คุณจะได้เรียนรู้ทุกสิ่งที่คุณจำเป็นต้องรู้ก่อนเริ่มต้น รวมถึง:
- เซลล์ไลน์ CHO คืออะไร?
- เซลล์ CHO: ทางเลือกหลักของอุตสาหกรรมชีวเภสัชภัณฑ์สำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์
- มุมมองในอนาคตในการวิจัยเซลล์ CHO
- ค้นพบประโยชน์ของเซลล์ CHO ที่ทรงพลัง
- คุณสมบัติเด่นของเซลล์ CHO
- การเปรียบเทียบเซลล์ไลน์ CHO กับ CHO-K1
- ปลดล็อกความก้าวหน้าครั้งสำคัญด้วยเซลล์ CHO ของเรา
- สิบเคล็ดลับสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO
- ระเบียบวิธี, วิดีโอ และสิ่งพิมพ์ล่าสุดเกี่ยวกับเซลล์ CHO
- สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่น่าสนใจโดยใช้เซลล์ CHO
- คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับเซลล์ CHO
- เอกสารอ้างอิง
- คำถามที่พบบ่อย
เซลล์ไลน์ CHO คืออะไร?
นับตั้งแต่ก่อตั้งขึ้นในปี พ.ศ. 2500 โดยธีโอดอร์ ที. พัค เซลล์รังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน (CHO) ได้กลายเป็นสิ่งสำคัญในการวิจัยทางชีววิทยาและการแพทย์ เนื่องจากมีการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและสามารถผลิตโปรตีนได้ในปริมาณสูง เซลล์เยื่อบุผิวเหล่านี้ซึ่งได้มาจากรังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในกระบวนการผลิตทางชีวภาพ พันธุศาสตร์ การคัดกรองความเป็นพิษ โภชนาการ และการศึกษาการแสดงออกของยีน
เซลล์ CHO สามารถผลิตโปรตีนที่มีการดัดแปลงหลังการแปล (PTMs) ที่คล้ายกับที่พบในมนุษย์ได้ พวกมันยังขาดการสังเคราะห์โพรลีนและไม่แสดงตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGFR) ทำให้เหมาะสำหรับการศึกษาการกลายพันธุ์ของ EGFR ต่างๆ
ในการผลิตชีวภาพ เซลล์ CHO ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอล โปรตีนรีคอมบิแนนท์ และวัคซีน มีโปรตีนบำบัดมากกว่า 60 ชนิดที่ผลิตจากเซลล์ CHO ได้รับการอนุมัติให้ผลิตแล้ว และการใช้งานยังคงขยายตัวอย่างต่อเนื่อง บทความของเราจะสำรวจคุณสมบัติที่น่าทึ่งและการประยุกต์ใช้ที่หลากหลายของเซลล์ CHO โดยเน้นบทบาทสำคัญในการขับเคลื่อนความก้าวหน้าในชีวการแพทย์และสาขาอื่น ๆ เตรียมพร้อมที่จะสำรวจโลกที่น่าหลงใหลของเซลล์ CHO และค้นพบศักยภาพที่ไม่มีใครเทียบได้ในงานวิจัยทางชีวการแพทย์!
เซลล์ CHO: ทางเลือกหลักของอุตสาหกรรมชีวเภสัชภัณฑ์สำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์
ในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพ เซลล์รังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน (CHO) ถูกนำมาใช้บ่อยครั้งในการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์ เช่น แอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล โปรตีนรีคอมบิแนนท์ และวัคซีน
แม้ว่าคุณอาจไม่ทราบ แต่เซลล์รังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีน (CHO) อาจเป็นสาเหตุหากคุณเคยได้รับการบำบัดด้วยแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล เซลล์ที่ปรับตัวได้เหล่านี้ถูกใช้บ่อยในอุตสาหกรรมชีวเภสัชภัณฑ์เพื่อผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ใช้ในการวิจัยทางชีวการแพทย์ การวินิจฉัย และยารักษาโรคหลากหลายชนิด ยาที่มีโปรตีนเป็นฐานซึ่งเรียกว่าแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล (mAbs) ถูกนำมาใช้ในการรักษาโรคต่างๆ เช่น มะเร็ง โรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง และโรคติดเชื้อ เนื่องจากเซลล์ CHO ทำการปรับเปลี่ยนหลังการแปลรหัสซึ่งคล้ายกับที่เกิดขึ้นในเซลล์มนุษย์ เซลล์ CHO จึงมักถูกนำมาใช้ในการผลิตแอนติบอดีชนิด mAb การปรับเปลี่ยนเหล่านี้มีความจำเป็นเพื่อให้ยาชีววัตถุเหล่านี้สามารถทำงานได้อย่างมีประสิทธิภาพ
โปรตีนที่สร้างขึ้นผ่านการวิศวกรรมพันธุกรรมเรียกว่าโปรตีนรีคอมบิแนนท์ นอกจากจะเป็นสารทดลองทางวิจัยแล้ว ยังสามารถใช้เป็นยาและเครื่องมือวินิจฉัยได้อีกด้วย เนื่องจากเซลล์ CHO สามารถผ่านการดัดแปลงหลังการแปลโปรตีน (post-translational modifications) และมีการไกลโคซิเลชันที่ซับซ้อนคล้ายกับที่พบในเซลล์มนุษย์ เซลล์ CHO จึงเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ เนื่องจากมีการเจริญเติบโตอย่างรวดเร็ว การแสดงออกของโปรตีนในระดับสูง และความสามารถในการผลิตโปรตีนในปริมาณมาก ด้วยผลผลิตตั้งแต่ 3 ถึง 10 กรัมต่อลิตรของวัฒนธรรมเซลล์ สายพันธุ์เซลล์ CHO ได้กลายเป็นตัวเปลี่ยนเกมในวงการชีวเภสัชภัณฑ์ ด้วยความสามารถที่ไม่มีใครเทียบได้ในการผลิตโปรตีนบำบัดในปริมาณมาก เซลล์ CHO เป็นองค์ประกอบที่สำคัญอย่างยิ่งในชีวการแพทย์สมัยใหม่ ด้วยการปรับปรุงทางพันธุกรรม ซึ่งช่วยเพิ่มศักยภาพในการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนต์ในปริมาณมาก
วัคซีนเป็นผลิตภัณฑ์ชีวเภสัชภัณฑ์ที่ใช้ในการป้องกันและรักษาการติดเชื้อที่เกิดจากไวรัสและแบคทีเรีย วัคซีนป้องกันโรคโควิด-19 เป็นหนึ่งในวัคซีนที่ผลิตจากเซลล์ CHO นักวิทยาศาสตร์ได้สร้างเทคนิคต่าง ๆ ขึ้นมาหลายวิธี รวมถึงวิศวพันธุกรรม การปรับแต่งสื่อเลี้ยงเซลล์ และการพัฒนากระบวนการ เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของเซลล์ CHO ในการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์ เทคนิคเหล่านี้ส่งผลให้เกิดระบบการเพาะเลี้ยงที่มีผลผลิตสูงและมีต้นทุนต่ำสำหรับการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์โดยใช้เซลล์ CHO การใช้งานที่หลากหลายของเซลล์ CHO ได้แก่:
เซลล์ CHO ในการผลิตชีวเภสัชภัณฑ์
เซลล์ CHO ถูกใช้ในการผลิตชีวภัณฑ์ทางการแพทย์หลากหลายชนิด รวมถึงโปรตีนรีคอมบิแนนท์และแอนติบอดีโมโนโคลนอลที่ใช้ในการรักษาโรคต่างๆ เช่น มะเร็ง โรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเอง และโรคติดเชื้อ การนำเซลล์ CHO มาใช้ในชีวเภสัชภัณฑ์ส่วนใหญ่เป็นผลมาจากความสามารถในการทำปฏิกิริยาดัดแปลงหลังการแปลรหัส (post-translational modifications) ที่คล้ายคลึงกับเซลล์มนุษย์ ทำให้เซลล์ CHO เป็นโฮสต์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการผลิตโปรตีนบำบัดที่เข้ากันได้กับมนุษย์ ความเข้าใจอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับโปรไฟล์โปรตีนของเซลล์โฮสต์ CHO และการประยุกต์ใช้เทคนิค ELISA ของโปรตีนโฮสต์เป็นส่วนสำคัญในการรับประกันความบริสุทธิ์และความปลอดภัยของชีวเภสัชภัณฑ์ที่ผลิตในระบบเซลล์ CHO ด้วยเหตุนี้ เซลล์ CHO จึงได้เสริมสร้างตำแหน่งของตนในฐานะแพลตฟอร์มอเนกประสงค์ในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพ
ความก้าวหน้าในการผลิตแอนติบอดีโดยใช้เซลล์ CHO
เซลล์ CHO ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล ซึ่งได้ปฏิวัติวงการชีวการแพทย์ด้วยการให้การรักษาแบบเฉพาะเจาะจงสำหรับโรคต่างๆ เซลล์ CHO ได้กลายเป็นรากฐานสำคัญในการแสดงออกของแอนติบอดีรีคอมบิแนนท์และการผลิตยาโปรตีน เนื่องจากความสามารถในการพับ ประกอบ และดัดแปลงโปรตีนของมนุษย์ได้อย่างถูกต้อง การผลิตแอนติบอดีจากเซลล์ CHO ได้พัฒนาไปพร้อมกับการปรับปรุงเทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์และวิศวกรรมเซลล์ CHO ส่งผลให้ได้เซลล์ CHO คุณภาพสูงซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการพัฒนาชีวเภสัชภัณฑ์ วิธีการทางเทคโนโลยีชีวภาพแบบองค์รวม รวมถึงเทคโนโลยี DNA และวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ซับซ้อน ได้ถูกนำมาใช้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของระบบเซลล์ CHO ในการผลิตแอนติบอดีให้มากขึ้น
ชีววิทยาโมเลกุลและวิศวกรรมเซลล์ CHO
การผสมผสานเทคนิคชีววิทยาโมเลกุลกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO ได้นำไปสู่การสร้างสายพันธุ์เซลล์ CHO ที่มีการดัดแปลงพันธุกรรมและการปรับเปลี่ยนเซลล์กลายพันธุ์ของหนูแฮมสเตอร์จีนเพื่อให้ได้ลักษณะที่ต้องการ ความก้าวหน้าในวิศวกรรมเซลล์และเทคโนโลยี DNA เหล่านี้ได้เอื้ออำนวยต่อการพัฒนาเซลล์ CHO ที่สามารถผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์เฉพาะชนิดได้อย่างมีประสิทธิภาพสูง การสำรวจวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ยูคาริโอต รวมถึงเซลล์ CHO และ HeLa ได้มีส่วนช่วยในการทำความเข้าใจกลไกของเซลล์และการเพิ่มประสิทธิภาพการเพาะเลี้ยงเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมสำหรับการผลิตโปรตีนเพื่อการบำบัดให้ดียิ่งขึ้น
แต่นั่นยังไม่หมด! เซลล์ CHO ยังมีการประยุกต์ใช้ที่น่าสนใจอื่น ๆ ในการวิจัยทางชีวการแพทย์ รวมถึง:
- การคัดกรองความเป็นพิษ: เซลล์ CHO ถูกใช้ในการประเมินความเป็นพิษของยา รวมถึงยาต้านมะเร็งและยาต้านไวรัส ตัวอย่างเช่น มีการศึกษาที่สำรวจกิจกรรมเฉพาะในการต้านมะเร็งเต้านมของกรดไขมันที่สกัดจากสาหร่ายขนาดเล็กในแอนตาร์กติกา โดยใช้เซลล์ CHO เป็นสายเซลล์ควบคุม
- การแสดงออกของยีน: เซลล์ CHO ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงออกของยีนอย่างคงที่และชั่วคราวสำหรับการศึกษาการทำงานของยีนหรือการผลิตโปรตีนเป้าหมาย เครื่องมือแก้ไขยีนถูกนำมาใช้เพื่อพัฒนาแบบจำลองการแทรกยีนและการลบยีนในสายพันธุ์เซลล์ CHO
มุมมองในอนาคตในการวิจัยเซลล์ CHO
การวิจัยและพัฒนาอย่างต่อเนื่องในระบบเซลล์ CHO มุ่งเน้นไปที่การเพิ่มประสิทธิภาพและความหลากหลายของเซลล์เหล่านี้ในการผลิตยาชีวเภสัชภัณฑ์ เนื่องจากเซลล์ CHO ยังคงเป็นแนวหน้าในการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์เพื่อการรักษาโรค บทบาทของเซลล์เหล่านี้ในอนาคตของวงการแพทย์และเทคโนโลยีชีวภาพจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง โดยมีความหวังว่าจะนำไปสู่ความก้าวหน้าใหม่ในการพัฒนาแอนติบอดีและการผลิตยารักษาชีวิต
ค้นพบประโยชน์ของเซลล์ CHO ที่ทรงพลัง
นี่คือข้อได้เปรียบหลักบางประการของสายพันธุ์เซลล์ CHO ที่ทำให้เป็นเครื่องมือวิจัยที่น่าสนใจ
- ความง่ายในการเพาะเลี้ยง: ขั้นตอนและสภาพแวดล้อมในการเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ CHO ไม่มีความยุ่งยากซับซ้อน เซลล์เหล่านี้มีความทนทานสูง สามารถปรับตัวต่อการเปลี่ยนแปลงของอุณหภูมิและค่าความเป็นกรด-ด่างได้ดี จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงในปริมาณมาก
- การดัดแปลงหลังการแปล: เซลล์เหล่านี้มีความคล้ายคลึงกับเซลล์มนุษย์และสามารถสร้างการดัดแปลงหลังการแปลที่คล้ายคลึงกันได้ ดังนั้น เซลล์ CHO จึงสามารถใช้ในการผลิตผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพที่มีความเข้ากันได้ทางชีวภาพและมีฤทธิ์ทางเภสัชกรรมที่ยอดเยี่ยม
- ประสิทธิภาพการผลิตสูง: เซลล์ CHO ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณสูง การปรับปรุงพันธุกรรมของสายพันธุ์เซลล์ CHO ส่งผลให้สามารถผลิตโปรตีนได้ประมาณ 3-10 กรัมต่อลิตรของวัฒนธรรมเซลล์
- การแสดงออกของยีน: เซลล์ CHO ง่ายต่อการถ่ายโอนยีน; ดังนั้นจึงมักถูกใช้สำหรับการศึกษาการแสดงออกชั่วคราวและคงที่ นอกจากนี้ยังมีเครื่องมือทางพันธุกรรมหลายชนิดที่ใช้ในการพัฒนาแบบจำลองการเพิ่มและการลบยีนโดยใช้สายพันธุ์เซลล์ CHO
- การอนุมัติจากหน่วยงานรัฐบาล: เซลล์ CHO ได้ถูกนำไปใช้ในผลิตภัณฑ์ชีวบำบัดเกือบ 50 รายการที่ได้รับการอนุมัติในสหรัฐอเมริกาและสหภาพยุโรป
- ความไวต่อไวรัสต่ำ: เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากหนูแฮมสเตอร์ ความเสี่ยงในการแพร่กระจายของไวรัสในมนุษย์จึงลดลง ส่งผลให้สูญเสียการผลิตน้อยลงและเพิ่มความปลอดภัยทางชีวภาพ
คุณสมบัติเด่นของเซลล์ CHO
สัณฐานวิทยา: เซลล์ CHO มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว โดยมีความยาวและรูปร่างคล้ายไฟโบรบลาสต์ เซลล์เหล่านี้เกาะติดกันและมักเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว
ขนาดเซลล์: เส้นผ่านศูนย์กลางเฉลี่ยของเซลล์ CHO อยู่ระหว่าง 12-14 ไมโครเมตร
จีโนมและพลอยดี้: เซลล์ CHO เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมผิดปกติ (aneuploid) โดยมีโครโมโซม 21 แท่ง ซึ่งแตกต่างจากจำนวนโครโมโซมปกติ (euploid) ที่พบในหนูแฮมสเตอร์จีน ลักษณะทางโครโมโซมของเซลล์ CHO คือมีการจัดเรียงโครงสร้างซ้ำซ้อนหลายตำแหน่ง รวมถึงการสูญเสียบางส่วนของโครโมโซมที่ 2 และวัสดุของโครโมโซม X
การเปรียบเทียบเซลล์ไลน์ CHO กับ CHO-K1
ตั้งแต่มีการรายงานสายพันธุ์เซลล์ CHO ดั้งเดิมในปี 1956 ได้มีการสร้างสายพันธุ์เซลล์หลากหลายรูปแบบขึ้นเพื่อวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกัน CHO-K1 ถูกสร้างขึ้นจากโคลนเดียวของเซลล์ CHO ในปี 1957 และ CHO-DXB11 (หรือที่รู้จักในชื่อ CHO-DUKX) ถูกสร้างขึ้นต่อมาผ่านการกลายพันธุ์ด้วยเอทิล เมทิลีนซัลโฟนเอต อย่างไรก็ตาม ความสามารถในการใช้งานของพวกมันมีจำกัดเนื่องจากความสามารถในการกลับสู่กิจกรรม DHFR เมื่อถูกทำให้กลายพันธุ์ ต่อมา เซลล์ CHO ถูกทำให้กลายพันธุ์ด้วยรังสีแกมมาเพื่อผลิต CHO-DG44 ซึ่งทั้งสองอัลลีลของ DHFR ถูกกำจัดออกไปทั้งหมด สายพันธุ์ที่ขาด DHFR เหล่านี้ต้องการไกลซีน ไฮโปแซนทีน และไทมีดีนเพื่อการเจริญเติบโต และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการผลิตโปรตีนเชิงอุตสาหกรรม ระบบการเลือกสรรอื่น ๆ ได้กลายเป็นที่นิยมมากขึ้นในเวลาต่อมา และเซลล์โฮสต์เช่น CHO-K1, CHO-S, และ CHO-Pro minus ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถผลิตโปรตีนได้ในระดับสูง เนื่องจากความไม่เสถียรทางพันธุกรรม สายเซลล์เหล่านี้มักถูกเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ปราศจากส่วนประกอบจากสัตว์หรืออาหารเลี้ยงเชื้อที่กำหนดด้วยสารเคมีในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพแบบแขวนลอย ความซับซ้อนของพันธุกรรมของเซลล์ CHO และการสืบพันธุ์แบบโคลนก็ได้รับการอภิปรายเช่นกัน
ปลดล็อกความก้าวหน้าครั้งสำคัญด้วยเซลล์ CHO ของเรา
สิบเคล็ดลับสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO
- สายพันธุ์เซลล์ CHO เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ต้องการการดูแลน้อยและเพาะเลี้ยงได้ง่าย
- เซลล์ CHO มีเวลาการเพิ่มจำนวนประชากรอย่างรวดเร็วอยู่ที่ 14–17 ชั่วโมง
- เซลล์ CHO เป็นเซลล์ที่เกาะติดและเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียวหรือสามารถปรับให้เจริญเติบโตในสภาพแขวนลอยได้
- เพาะเลี้ยงเซลล์ CHO ชนิดย่อยที่ความหนาแน่น 80–90% โดยใช้ Accutase
- เพาะเซลล์ CHO ที่ความหนาแน่น 1 x 104 เซลล์/ซม.² เพื่อให้ได้ชั้นเซลล์เดียวที่หนาแน่นเต็มที่ภายในประมาณ 4 วัน
- สำหรับการเพาะเลี้ยงที่เหมาะสมที่สุด ให้ใช้ส่วนผสมของ DMEM และ Ham's F12 ในอัตราส่วน 50:50 เสริมด้วย FBS 5% และ L-glutamine
- เปลี่ยนวัสดุเพาะปลูก 2-3 ครั้งต่อสัปดาห์
- เพาะเลี้ยงเซลล์ CHO ในตู้บ่มที่มีอากาศชื้นและเติมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% ที่อุณหภูมิ 37°C
- เก็บเซลล์ CHO ในสถานะไอหรือของเหลวของไนโตรเจนเหลว (-196°C)
- ปฏิบัติตามแนวทางความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 สำหรับการจัดการและการเพาะเลี้ยงสายพันธุ์เซลล์ CHO
ระเบียบวิธี, วิดีโอ และสิ่งพิมพ์ล่าสุดเกี่ยวกับเซลล์ CHO
นี่คือแหล่งข้อมูลที่ยอดเยี่ยมสำหรับการเรียนรู้เกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาสายพันธุ์เซลล์ CHO
- โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบละเอียดสำหรับเซลล์ CHO: ลิงก์นี้สามารถช่วยให้คุณเรียนรู้ทุกเรื่องเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO และการถ่ายโอนยีน
- เซลล์ CHO: เว็บไซต์นี้จะให้ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์เกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ CHO รวมถึงการแบ่งเซลล์ การเก็บรักษา การแช่แข็ง และการละลายเซลล์ เป็นต้น
- การละลายเซลล์ CHO: วิดีโอนี้แสดงขั้นตอนการละลายตัวอย่างสำหรับเซลล์ CHO ที่แช่แข็ง
โปรโตคอลการถ่ายโอนยีนสำหรับสายพันธุ์เซลล์ CHO
เซลล์ CHO มีความเหมาะสมสูงต่อการถ่ายโอนยีนทั้งแบบชั่วคราวและแบบถาวร ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลที่ให้ข้อมูลที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับวิธีการถ่ายโอนยีนในสายพันธุ์เซลล์ CHO
- การถ่ายยีนในเซลล์ CHO: บทความที่ตีพิมพ์นี้ให้โปรโตคอลการถ่ายยีนชั่วคราวสำหรับสายพันธุ์เซลล์ CHO โดยใช้พอลิเอทิลีนอิไมน์เชิงเส้น (PEI)
- วิธีการทรานส์เฟคชันสำหรับเซลล์ CHO: บทความนี้อธิบายกลยุทธ์ต่าง ๆ สำหรับการทรานส์เฟคชันที่มีประสิทธิภาพของสายพันธุ์เซลล์ CHO โดยใช้สารทรานส์เฟคชันที่แตกต่างกัน
- การถ่ายโอนยีนชั่วคราวในเซลล์ CHO: วิดีโอนี้ใช้ภาพประกอบเพื่ออธิบายแนวคิดพื้นฐานเกี่ยวกับการศึกษาการแสดงออกชั่วคราวในเซลล์ CHO
สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่น่าสนใจโดยใช้เซลล์ CHO
ต่อไปนี้คือบทสรุปของการศึกษาต่าง ๆ ที่ได้ใช้เซลล์ CHO:
การศึกษา: "การผลิตโดเมนเอ็กโทโดเมนเต็มรูปแบบของโปรตีนสไปค์ SARS-CoV-2 อย่างรวดเร็วและให้ผลผลิตสูงโดยการแสดงออกของยีนชั่วคราวในเซลล์ CHO" (2021)
- วัตถุประสงค์: เพื่อแสดงออกของเอ็กโทโดเมนสไปค์ของไวรัส SARS-CoV-2 ในเซลล์ CHO โดยใช้วิธีการถ่ายยีนชั่วคราวสามวิธีเพื่อเพิ่มผลผลิตสูง
- วิธีการ: เซลล์ CHO ถูกถ่ายยีนด้วยพลาสมิดที่เข้ารหัสโดเมนเอ็กโทโดเมนเต็มรูปแบบของ SARS-CoV-2 สไปค์ โดยใช้วิธีการถ่ายยีนชั่วคราวสามวิธี การแสดงออกของโปรตีนถูกประเมินโดยวิธี ELISA และ Western blot
- ผลการวิจัยที่สำคัญ: วิธีการถ่ายโอนยีนชั่วคราวทั้งสามวิธีแสดงให้เห็นถึงระดับการแสดงออกของโปรตีนที่สูง โดยวิธีการโพลีเอทิลีนอิไมน์ให้ผลผลิตสูงสุด
การศึกษา: "การวิศวกรรมเซลล์ไลน์ CHO ที่เสถียรสำหรับการแสดงออกของแอนติเจนวัคซีนไวรัสโคโรนา MERS" (2018)
- วัตถุประสงค์: เพื่อผลิตแอนติเจนของไวรัสโคโรนา MERS ในเซลล์ CHO สำหรับใช้เป็นวัคซีนทางเลือกในอนาคต
- วิธีการ: เซลล์ CHO ถูกถ่ายโอนยีนด้วยพลาสมิดที่เข้ารหัสแอนติเจนของไวรัสโคโรนา MERS และคัดเลือกเพื่อแสดงออกอย่างคงที่โดยใช้ยาเกนิติน การแสดงออกของโปรตีนถูกประเมินโดยวิธี ELISA และ Western blot
- ผลการค้นพบที่สำคัญ: สายพันธุ์เซลล์ CHO ที่เสถียรแสดงให้เห็นถึงระดับการแสดงออกของโปรตีนสูงและความเสถียรตลอดหลายรอบการเพาะเลี้ยง
การศึกษา: "ฤทธิ์ทำลายเซลล์ของกรดไขมันจากสาหร่ายขนาดใหญ่ในแอนตาร์กติกาต่อการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งเต้านมในมนุษย์" (2018)
- วัตถุประสงค์: เพื่อใช้เซลล์ CHO เป็นตัวควบคุมในการประเมินความเป็นพิษของสารต้านมะเร็งต่อเซลล์ปกติ
- วิธีการ: เซลล์ CHO ถูกเพาะเลี้ยงและได้รับการบำบัดด้วยกรดไขมันจากสาหร่ายขนาดใหญ่ในแอนตาร์กติกา และประเมินความมีชีวิตของเซลล์โดยใช้การทดสอบ MTT
- ผลการค้นพบที่สำคัญ: กรดไขมันจากสาหร่ายขนาดใหญ่ในแอนตาร์กติกาไม่แสดงผลความเป็นพิษต่อเซลล์ CHO ซึ่งบ่งชี้ถึงศักยภาพในการใช้เป็นสารต้านมะเร็งที่มีความจำเพาะต่อเซลล์มะเร็ง
การศึกษา: "การกำจัดยีน caspase-7 ช่วยปรับปรุงการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในสายพันธุ์เซลล์ CHO ผ่านการหยุดวงจรเซลล์ในระยะ G2/M" (2022)
- วัตถุประสงค์: เพื่อดัดแปลงพันธุกรรมเซลล์ CHO เพื่อปรับปรุงการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์
- วิธีการ: ยีน caspase-7 ถูกทำให้หายไปในเซลล์ CHO โดยใช้เทคโนโลยี CRISPR/Cas9 และการแสดงออกของโปรตีนถูกประเมินโดยการทดสอบ Western blot และกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์
- ผลการวิจัยที่สำคัญ: การกำจัดยีน caspase-7 ในเซลล์ CHO ส่งผลให้การแสดงออกของโปรตีนดีขึ้น ซึ่งน่าจะเกิดจากการหยุดชะงักของวัฏจักรเซลล์ในระยะ G2/M ที่เกิดจากการสูญเสีย caspase-7
การศึกษา: "การพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ CHO สำหรับการผลิตแอนติบอดีรีคอมบิแนนท์ต่อ MMP9 ของมนุษย์อย่างเสถียร" (2015)
- วัตถุประสงค์: เพื่อผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลต่อโปรตีน MMP9 ของมนุษย์ในเซลล์ CHO
- วิธีการ: เซลล์ CHO ถูกถ่ายโอนยีนด้วยพลาสมิดที่เข้ารหัสแอนติบอดีต่อ MMP9 ของมนุษย์ และคัดเลือกเพื่อแสดงออกอย่างคงที่โดยใช้ยาเกนิทีน การแสดงออกของโปรตีนถูกประเมินโดยวิธี ELISA และ Western blot
- ผลการวิจัยที่สำคัญ: สายพันธุ์เซลล์ CHO ที่เสถียรแสดงให้เห็นถึงการแสดงออกของแอนติบอดีในระดับสูงและมีความเสถียรตลอดหลายรอบการเพาะเลี้ยง ซึ่งบ่งชี้ถึงศักยภาพในการนำไปใช้ในด้านการรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ MMP9 ในมนุษย์
คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับเซลล์ CHO
เอกสารอ้างอิง
- Reinhart, D., และคณะ, การผลิตชีวภาพของ CHO-K1, CHO-DG44, และ CHO-S: เชื้อโฮสต์ CHO ที่เหมาะสมกับการผลิต mAb หรือการผลิตไบโอแมส. วารสารเทคโนโลยีชีวภาพ, 2019. 14(3): หน้า 1700686
- Pan, X., และคณะ, การวิเคราะห์ลักษณะเมตาบอลิซึมของระยะการเพิ่มขนาดเซลล์ CHO ในวัฒนธรรมแบบเติมอาหารต่อเนื่อง. Applied microbiology and biotechnology, 2017. 101: หน้า 8101–8313.
- ตูริโลวา, วี.ไอ., ที.เอส. โกรยาชายา, และ ที.เค. ยาคอฟเลวา, สายเซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน DXB-11: ความไม่เสถียรของโครโมโซมและความหลากหลายของโครโมโซม. โมเลกุลาร์ไซโตจีเนติกส์, 2021, 14(1): หน้า 1–12.
- Hunter, M., และคณะ, การเพิ่มประสิทธิภาพการแสดงออกของโปรตีนในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม. โปรโตคอลปัจจุบันในวิทยาศาสตร์โปรตีน, 2019. 95(1): หน้า e77.
- Nyon, M.P., et al., การวิศวกรรมสายพันธุ์เซลล์ CHO ที่เสถียรสำหรับการแสดงออกของแอนติเจนวัคซีนไวรัสโคโรนา MERS. Vaccine, 2018. 36(14): p. 1853–1862.
- ปาเชโก, บี.เอส., และคณะ, กิจกรรมต้านเซลล์ของกรดไขมันจากสาหร่ายขนาดใหญ่ในแอนตาร์กติกาต่อการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งเต้านมมนุษย์. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 2018. 6: หน้า 185.
- Ryu, J., และคณะ, การพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ CHO สำหรับการผลิตแอนติบอดีรีคอมบิแนนท์ต่อ MMP9 ของมนุษย์อย่างคงที่. BMC biotechnology, 2022. 22(1): หน้า 8.