เผยแพร่: 2023 | ตรวจสอบล่าสุด: พฤษภาคม 2026

การทำความเข้าใจ "หมายเลขตอน"

แนวคิดของ "หมายเลขรุ่น" เป็นสิ่งสำคัญในวัฒนธรรมเซลล์ และหมายถึงจำนวนครั้งที่สายพันธุ์เซลล์ถูกเพาะเลี้ยงหรือย้ายไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่หลังจากฟื้นฟูจากการแช่แข็งหรือรับมาจากธนาคารเซลล์อ้างอิง ตัวชี้วัดนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งในการติดตามลำดับสายพันธุ์และประวัติของวัฒนธรรมเซลล์

ภาพรวมของกระบวนการ

ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ตามปกติ เมื่อเซลล์มีจำนวนหนาแน่นถึงระดับหนึ่งแล้ว จะถูกย้ายไปยังอาหารเลี้ยงเชื้อชุดใหม่เพื่อคงการเจริญเติบโตและป้องกันการรวมตัวกันแน่นเกินไป การย้ายเซลล์แต่ละครั้งนี้จะถูกบันทึกไว้เป็นรุ่น (passage)
ตามปกติ เมื่อเราได้รับเซลล์ไลน์ เช่น ที่การผ่านครั้งที่ 60 จากผู้ฝาก เราจะดำเนินการต่อจากหมายเลขการผ่านนี้ โดยเพิ่มหมายเลขในแต่ละครั้งที่ทำการเพาะเลี้ยงย่อย การปฏิบัตินี้ แม้ว่าจะรักษาประวัติความเป็นมาไว้ แต่ก็มักทำให้ได้หมายเลขการผ่านที่สูงตั้งแต่เริ่มต้น เนื่องจากการใช้เซลล์ไลน์บางชนิดอย่างกว้างขวางและยาวนานหลายทศวรรษ เช่น เซลล์ไลน์ HeLa ที่ถูกสร้างขึ้นในปี 1951 จึงไม่สามารถระบุจำนวนครั้งที่เซลล์ถูกผ่านรุ่นทั้งหมดนับตั้งแต่เริ่มก่อตั้งเซลล์ไลน์นี้ได้
เพื่อเพิ่มความชัดเจนและคุณภาพในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์ของเรา เราได้ปรับปรุงแนวทางนี้ตั้งแต่ต้นปี 2023 เป็นต้นไป ขณะนี้เมื่อเราเริ่มเพาะเลี้ยงจากขวดใหม่ ไม่ว่าจำนวนครั้งที่ผ่านจากผู้ฝากจะอยู่ที่ใด เราจะรีเซ็ตและเริ่มนับใหม่จากครั้งที่หนึ่งสำหรับแต่ละชุดการผลิต

เหตุผล

การเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นขั้นตอนสำคัญที่จำเป็นเพื่อรับประกันสุขภาพและความสามารถในการใช้งานของเซลล์เพาะเลี้ยงสำหรับการวิจัย เมื่อเซลล์เจริญเติบโตมากเกินไป เซลล์จะเกิดการยับยั้งการเจริญเติบโตจากการสัมผัสซึ่งจะลดอัตราการเพิ่มจำนวนเซลล์ลง ซึ่งอาจส่งผลเสียต่อผลลัพธ์ของการทดลองได้ เพื่อบรรเทาปัญหาเหล่านี้ Cytion ได้ดำเนินการควบคุมอย่างเข้มงวดต่อความหนาแน่นของเซลล์ในระหว่างการเพาะเลี้ยงต่อรุ่น ซึ่งช่วยให้จำนวนรุ่นการเพาะเลี้ยงในระหว่างการผลิตสายพันธุ์เซลล์ของพวกเขามีจำนวนน้อย การระมัดระวังนี้ช่วยป้องกันผลกระทบที่ไม่พึงประสงค์จากการเพาะเลี้ยงซ้ำมากเกินไป เช่น ความผิดปกติทางสัณฐานวิทยา การเปลี่ยนแปลงอัตราการเจริญเติบโต และการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม ซึ่งอาจทำให้เซลล์แตกต่างจากสภาพเดิมอย่างเห็นได้ชัด การเพาะเลี้ยงต่อเนื่องเป็นระยะเวลานานยังเพิ่มความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนของจุลินทรีย์อีกด้วย

คำมั่นสัญญาของเรา

เราให้การรับประกันว่าเซลล์ที่จัดส่งให้กับนักวิจัยมีความใกล้เคียงกับโครงสร้างทางพันธุกรรมและลักษณะทางฟีโนไทป์ของต้นฉบับมากที่สุดเท่าที่เป็นไปได้ ซึ่งช่วยเพิ่มความน่าเชื่อถือของข้อมูลการทดลอง นอกจากนี้ ด้วยการบันทึกการผ่านแต่ละครั้งอย่างละเอียด Cytion ยังช่วยส่งเสริมการตรวจสอบย้อนกลับและการทำซ้ำได้ของการวิจัย ซึ่งเป็นคำมั่นสัญญาที่สะท้อนถึงมาตรฐานการปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่สูง นักวิจัยได้รับการสนับสนุนให้บันทึกหมายเลขการผ่านอย่างถูกต้องทั้งบนภาชนะเพาะเลี้ยงและในสมุดบันทึกห้องปฏิบัติการของตน เพื่อใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับสุขภาพและประวัติของเซลล์เพาะเลี้ยงของพวกเขา

คำแนะนำและข้อผิดพลาดที่พบบ่อย

การปฏิบัติตามขั้นตอนที่ถูกต้องเป็นสิ่งจำเป็นอย่างยิ่ง แต่การเข้าใจข้อผิดพลาดที่พบบ่อยก็มีความสำคัญไม่แพ้กัน ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์มีความไวต่อการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อยในเทคนิค เวลา และคุณภาพของสารที่ใช้ คำแนะนำต่อไปนี้สะท้อนถึงแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดซึ่งได้รับการแนะนำโดยทีมวิทยาศาสตร์ของ Cytion จากประสบการณ์การเพาะเลี้ยงเซลล์อย่างกว้างขวาง

ควรอุ่นรีเอเจนต์ให้ถึง 37°C ก่อนใช้งานเสมอ เพื่อลดการเกิดช็อกจากความร้อนต่อเซลล์
ทำงานอย่างรวดเร็วแต่ระมัดระวัง — ลดเวลาที่เซลล์อยู่นอกตู้บ่มให้น้อยที่สุด
ใช้สารรีเอเจนต์ที่ได้รับการรับรองและผ่านการทดสอบเชื้อไมโคพลาสมาเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนที่อาจส่งผลต่อความถูกต้องของผลการทดลอง
บันทึกทุกขั้นตอนรวมถึงหมายเลขตอน วันที่ และการสังเกตลักษณะของเซลล์
ตรวจสอบความถูกต้องของโปรโตคอลของคุณด้วยการทดลองนำร่องขนาดเล็กก่อนที่จะขยายขนาดเพื่อหลีกเลี่ยงการสูญเสียสารเคมีที่มีราคาแพง

น้ำยา Cytion ที่แนะนำ

Cytion นำเสนอชุดสารเคมีสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ได้รับการตรวจสอบคุณภาพแล้ว ซึ่งออกแบบมาโดยเฉพาะเพื่อสนับสนุนโปรโตคอลนี้ สารเคมีทุกชนิดได้รับการทดสอบประสิทธิภาพกับสายพันธุ์เซลล์ที่ใช้กันทั่วไป และมีเอกสารประกอบครบถ้วน สามารถเยี่ยมชม cytion.com/Media-Reagents เพื่อดูผลิตภัณฑ์ทั้งหมด