Bunky U2OS-ZFN-SNAP-Nup107

Mraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion je najmodernejšie kryokonzervačné médium navrhnuté na zabezpečenie najvyššej úrovne životaschopnosti a funkčnosti buniek po rozmrazení. Toto univerzálne médium je vhodné pre široké spektrum typov buniek vrátane ľudských aj živočíšnych buniek, čo z neho robí základný nástroj pre rôzne výskumné aplikácie. Médium Freeze Medium CM-1, ktorého zloženie obsahuje starostlivo vyváženú kombináciu kryoprotektantov a základných živín, minimalizuje tvorbu ľadových kryštálov a bunkový stres počas procesu zmrazovania, čím zachováva bunkovú integritu.
Kľúčové vlastnosti Freeze Medium CM-1 zahŕňajú:

Široká kompatibilita: Účinné pre širokú škálu typov buniek vrátane primárnych buniek, kmeňových buniek a zavedených bunkových línií.
Vysoká životaschopnosť: Optimalizované na maximalizáciu obnovy a životaschopnosti buniek po rozmrazení, čo zaručuje spoľahlivé výsledky experimentov.
Pripravené na použitie: Pohodlne pripravené a sterilizované na okamžité použitie, čo skracuje čas prípravy a znižuje riziko kontaminácie.
Zvýšená stabilita: Zachováva konzistentný výkon za štandardných podmienok kryokonzervácie, čím zabezpečuje reprodukovateľné výsledky.
Dlhá skladovateľnosť: CM-1 je médium na kryokonzerváciu s obsahom séra, pripravené na použitie, ktoré sa môže skladovať v chladničke až jeden rok.


Používanie CM-1 na zmrazovanie buniek

Ak chcete použiť CM-1 na zmrazovanie adherentných aj suspenzných buniek, postupujte podľa nasledujúcich krokov

V prípade adherentných buniek ich umyte a oddeľte od kultivačného substrátu. V prípade suspenzných buniek prejdite priamo na ďalší krok.
Spočítajte bunky, aby ste sa uistili, že majú správnu koncentráciu.
Odstreďte bunky, aby sa z nich vytvorili pelety, a potom ich znovu rozpusťte v zmrazovacom médiu CM-1.
Resuspendované bunky preneste do kryovínií.
Pred prenosom buniek na dlhodobé uskladnenie použite metódu pomalého zmrazovania





Metóda
Popis
Kroky





❄️
Manuálne zmrazenie

Postupná metóda zahŕňajúca postupné znižovanie teploty na zabezpečenie životaschopnosti buniek

1️⃣ Umiestnite bunky do zmrazovacieho média do mrazničky s teplotou 4 °C na 40 minút.
2️⃣ Preneste do mrazničky s teplotou -80 °C na 24 hodín.
3️⃣ Uskladnite bunky v tekutom dusíku na dlhodobé uchovanie



❄️
Používanie pána Frostyho

Praktické zariadenie, ktoré umožňuje kontrolovanú rýchlosť zmrazovania bez elektrickej energie

1️⃣ Pripravte bunky v kryovíniách s mraziacim médiom.
2️⃣ Umiestnite kryovílie do nádoby Mr. Frosty.
3️⃣ Pred prenesením do tekutého dusíka uchovávajte pri teplote -80 °C po dobu 24 hodín



❄️
Mraznička s riadenou rýchlosťou

Vysoko presná mraznička od spoločnosti Thermo Fisher alebo iných výrobcov určená na riadené znižovanie teploty

1️⃣ Naprogramujte zariadenie na postupné znižovanie teploty.
2️⃣ Umiestnite pripravené bunky do mrazničky.
3️⃣ Po skončení zmrazovacieho cyklu preneste bunky do tekutého dusíka









Kryovílie skladujte pri teplote nižšej ako -130 °C alebo v tekutom dusíku na dlhodobé uchovávanie.


Zloženie

Obsahuje FBS, DMSO, glukózu, soli
Pufrovacia kapacita: pH = 7,2 až 7,6


Mraziace médium CM-1 spoločnosti Cytion ponúka spoľahlivé riešenie na kryokonzerváciu, ktoré zabezpečuje vysokú životaschopnosť a funkčnosť buniek po rozmrazení pre širokú škálu výskumných aplikácií.

McCoy's 5A Medium je vysoko odporúčané a špecializované médium určené na podporu rastu a replikácie vírusov v primárnych bunkových kultúrach. Získalo si významné uznanie vďaka svojim výnimočným vlastnostiam v rôznych biologických výskumných aplikáciách. Jednou z významných aplikácií McCoy's 5A Medium je jeho využitie pri kultivácii ľudských buniek karcinómu hrubého čreva. Konkrétne sa používa pri štúdiu receptora G-proteínu s opakujúcimi sa sekvenciami bohatými na leucín (LGR5) a jeho úlohy pri metastázovaní rakoviny hrubého čreva. Toto médium bolo efektívne použité pri kultivácii viacerých bunkových línií karcinómu hrubého čreva, vrátane HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b a TENN, čo umožnilo výskumníkom hlbšie preskúmať mechanizmy, ktoré sú základom metastázovania rakoviny hrubého čreva. Okrem použitia vo výskume rakoviny sa McCoy's 5A Medium ukázalo ako nenahraditeľné pri štúdiu osteoblastov. Výskumníci, ktorí skúmajú iontovú reaktivitu hydroxyapatitu s nedostatkom vápnika v štandardných kultivačných médiách, využili toto médium na kultiváciu osteoblastov. Toto použitie umožnilo lepšie pochopiť interakcie medzi osteoblastmi a hydroxyapatitom s nedostatkom vápnika, čo prispelo k pokroku v oblasti výskumu kostí. McCoyovo médium 5A bolo starostlivo vyvinuté úpravou aminokyselín nachádzajúcich sa v bazálnom médiu Eagle, aby poskytovalo optimálnu podporu pre bunky nádorov pečene. Toto obohatené zloženie umožňuje jeho použiteľnosť pre širokú škálu etablovaných bunkových línií, ako aj primárnych buniek, čím sa ďalej zvyšuje jeho univerzálnosť a použiteľnosť v rôznych výskumných prostrediach. McCoy's 5A Medium rozširuje svoje biochemické a fyziologické účinky aj mimo buniek pečene. Úspešne sa používa na podporu rastu v primárnych kultúrach kostnej drene, kože, ďasien, obličiek, omenta, nadobličiek, pľúc, sleziny, embryí potkanov a iných typov buniek. Toto široké spektrum aplikácií svedčí o širokej využiteľnosti McCoy's 5A Medium pri podpore rastu a udržaní rôznych typov buniek pre komplexný biologický výskum. Zloženie Toto McCoy's 5A medium (modifikované) obsahuje 3,0 g/l glukózy, stabilný glutamín, 2,0 mM pyruvátu sodného a 2,2 g/l NaHCO3. Kontrola kvality pH = 7,2 +/
- 0,02 pri 20-25 °C.  Každá šarža bola testovaná na sterilitu a neprítomnosť mykoplazmy a baktérií. Skladovanie Skladujte v chladničke pri teplote +2 °C až +8 °C v tme. Zmrazenie a oteplenie na +37 °C znižuje kvalitu produktu.  Nezohrievajte médium na viac ako 37 °C a nepoužívajte nekontrolovateľné zdroje tepla (napr. mikrovlnné rúry).  Ak sa má použiť len časť média, odoberte toto množstvo z fľaše a zohrejte ho na izbovú teplotu. Skladovateľnosť všetkých médií okrem základného média je 6 až 8 týždňov od dátumu otvorenia. Zloženie Zložky mg/L Anorganické soliChlorid vápenatý x 2H2O132,00 Síran horečnatý97,67 Chlorid draselný400 Chlorid sodný6 460,00 Hydrogénfosforečnan sodný (bezvodý)504,00 Ostatné zložkyD(+)-glukóza (bezvodá)3 000,00 Glutatión (redukovaný)0 Mäsový peptón600,00 Fenolová červená sodná soľ11 AminokyselinyL-alanín13,36 L-arginín x HCl42,14 L-asparagín x H2O45,03 Kyselina L-asparagová19,97 L-cysteín x HCl x H2O31,75 L-glutamín (stabilný)219,15 Kyselina L-glutámová22,07 Glycín7,51 L-histidín x HCl x H2O20,96 L-hydroxyprolín19,67 L-izoleucín39,36 L-leucín39,36 L-lyzín x HCl36,54 L-metionín14,92 L-fenylalanín16,52 L-prolín17,27 L-serín26,28 L-treonín17,87 L-tryptofán3,06 L-tyrozín disodná soľ26,10 L-valín17,57 Vitamínyp-Aminobenzoová kyselina1,0 Kyselina askorbová0,56 D(+)-biotín0,20 D-pantotenát vápenatý0,2 Cholinchlorid5,0 Kyselina listová10 Myo-inositol36 Nikotínamid0,5 Kyselina nikotínová0,5 Pyridoxal HCl0,50 Pyridoxín HCl0,50 Riboflavín0,2 Tiamín HCl0,2 Vitamín B122,0

Roztok na uvoľňovanie buniek Accutase s EDTA a fenolovou červenou – 100 ml

Accutase je pripravený na použitie, sterilne filtrovaný roztok na oddelenie buniek, navrhnutý ako šetrná alternatíva k trypsínu/EDTA na disociáciu adhezívnych cicavčích buniek zo štandardných plastových nádob na tkanivové kultúry a povrchov s adhezívnou vrstvou. Kombinuje proteolytickú a kolagenolytickú enzýmovú aktivitu vo vyváženom soľnom roztoku, aby zabezpečil účinnú, ale kontrolovanú disociáciu, zachoval proteíny na povrchu buniek a podporil vysokú životaschopnosť po pasáži a rýchle opätovné pripojenie.

Zloženie Accutase je založené na Dulbeccovom fosfátovom pufrovanom fyziologickom roztoku (DPBS) s EDTA a fenolovou červenou ako vizuálnym indikátorom pH. Enzýmy sú nemamalského a nebakteriálneho pôvodu, vďaka čomu je Accutase obzvlášť vhodný pre výskum kmeňových buniek, pracovné postupy pri výrobe vakcín a akékoľvek použitie, kde je potrebné minimalizovať kontamináciu pochádzajúcu zo zvierat alebo mikroorganizmov. Roztok sa pri 37 °C automaticky inhibuje, takže po oddelenie nie je potrebné žiadne neutralizačné činidlo ani médium obsahujúce sérum – bunky je možné preniesť priamo do čerstvého média.

Kľúčové vlastnosti

Pripravená na použitie 1x sterilne filtrovaná kvapalina – nie je potrebné riedenie ani rekonštitúcia
Kombinovaná proteolytická a kolagenolytická enzýmová aktivita pre šetrnú disociáciu
Každá šarža je štandardizovaná na definovanú disociačnú aktivitu pre konzistentnosť medzi šaržami
Enzýmy nepochádzajúce z cicavcov ani z baktérií
Automatická inhibícia pri 37 °C – nie je potrebný neutralizačný roztok
Formulované v Dulbeccovom PBS s EDTA
Obsahuje fenolovú červenú ako vizuálny indikátor pH
pH 6,8 – 7,8


Typické použitie
Accutase jemne disociuje širokú škálu adhezívnych a citlivých typov buniek, vrátane ľudských embryonálnych kmeňových buniek (hESCs), ľudských indukovaných pluripotentných kmeňových buniek (iPSCs), neurálnych kmeňových buniek, primárnych neurónov a bežne kultivovaných adhezívnych línií, ako sú HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 a A549. Typické prípady použitia zahŕňajú:

Bežnú subkultiváciu a pasážovanie adhezívnych cicavčích buniek
Šetrná disociácia jednotlivých buniek hESCs, iPSCs a iných citlivých línií
Príprava vzoriek pre prietokovú cytometriu a analýzu FACS
Analýzu markerov na povrchu buniek, kde záleží na integritě epitopu
Testovanie migrácie, proliferácie a apoptózy buniek
Testovanie kľudového stavu prostredníctvom štúdií o deprivácii séra a transfekcii onkogénov
Testovanie migrácie nádorových buniek a buniek neurálnej lišty
Zvýšenie produkcie v pracovných postupoch s bioreaktormi

Pri bežnej práci naneste približne 10 ml Accutase na 75 cm2 kultivačnej plochy a inkubujte 5–10 minút pri izbovej teplote. Optimálny čas inkubácie by sa mal stanoviť pre každú bunkovú líniu a nemal by presiahnuť jednu hodinu. Pred pridaním opláchnite bunkovú vrstvu roztokom soli bez Ca2+/Mg2+, napríklad DPBS bez vápnika a horčíka, aby ste odstránili zvyšky séra a dvojmocné katióny.

Manipulácia a skladovanie
Neotvorenú fľašu skladujte zmrazenú pri teplote -15 °C alebo nižšej. Rozmrazujte buď pri izbovej teplote, alebo cez noc pri teplote +2 °C až +8 °C. Accutase nerozmrazujte vo vodnom kúpeli pri teplote 37 °C, pretože zvýšené teploty znižujú aktivitu enzýmu. Po rozmrazení sa roztok môže skladovať až 2 mesiace pri teplote +2 °C až +8 °C; neskladujte pri izbovej teplote. Pred použitím nereagent nezahrievajte na 37 °C – pridajte ho priamo do prepláchnutých buniek pri izbovej teplote. Pre dlhodobú skladovateľnosť sa odporúča rozdelenie na jednorazové dávky, aby sa zabránilo opakovaným cyklom rozmrazovania. Vždy pracujte v aseptických podmienkach.

Kvalita
Vyrobené podľa prísnych noriem kvality. Každá šarža Accutase je sterilizovaná filtráciou a testovaná na sterilitu, pH, vzhľad a disociačnú aktivitu, aby sa zabezpečil konzistentný a reprodukovateľný výkon v rámci jednotlivých šarží.

Špecifikácie produktu



Špecifikácia
Podrobnosti



Typ produktuReagent na uvoľňovanie/disociáciu buniek
FormátSterilne filtrovaná kvapalina, pripravená na použitie
Objem100 ml
Pracovná koncentrácia1x (pripravené na použitie)
Enzymatická aktivitaKombinovaná proteolytická a kolagenolytická
Pôvod enzýmuNesavčí a nebakteriálny
Pufrový systémDulbeccoho PBS s EDTA
Indikátor pHFenolová červená
Rozsah pH6,8 – 7,8
VzhľadČíry, bledočervený až oranžový roztok
Skladovacia teplota-15 °C alebo nižšia
Stabilita po rozmrazeníAž 2 mesiace pri teplote +2 °C až +8 °C
Odporúčaný objem použitia~10 ml na 75 cm2 kultivačnej plochy
Typická doba inkubácie5 – 10 minút pri izbovej teplote
Prepravné podmienkyZmrazené v suchom ľade
Určené použitieIba na výskumné účely a ďalšiu výrobu



Zloženie (zloženie na liter)



Zložka
Koncentrácia (mg/l)




Anorganické soli

Chlorid sodný (NaCl)8000,00
Hydrogénfosforečnan disodný (Na2HPO4)1150,00
Chlorid draselný (KCl)200,00
Dihydrogénfosforečnan draselný (KH2PO4)200,00

Ostatné zložky

EDTA · 4Na (tetrasodný EDTA)220,00
Fenolová červená3,00
Vlastná zmes enzýmov (proteolytická a kolagenolytická aktivita)1x



Accutase je registrovaná ochranná známka spoločnosti Innovative Cell Technologies, Inc.

Prehľad produktov
Objem: 100 ml Skladovanie: ≤-15 °C Sterilita: Sterilná filtrácia
Roztok antibiotík/antimykotík (100x ) je sterilný koncentrát pripravený na použitie určený na zníženie rizika mikrobiálnej kontaminácie v bunkových kultúrach a súvisiacich laboratórnych aplikáciách. Tento 100x roztok obsahuje osvedčenú kombináciu penicilínu, streptomycínu a amfotericínu B, ktorá poskytuje široké spektrum antimikrobiálnej aktivity proti grampozitívnym a gramnegatívnym baktériám, kvasinkám a vláknitým hubám. Prípravok je vhodný na použitie v kultúrach eukaryotických buniek, bakteriálnych médiách a iných systémoch citlivých na kontamináciu, čím podporuje čistú a konzistentnú laboratórnu prevádzku.
Použitie a výhody Tento roztok optimalizovaný pre bežné výskumné protokoly sa široko používa na udržiavanie aseptických podmienok v pracovných postupoch bunkových kultúr. Ponúka spoľahlivý výkon v prostrediach citlivých na kontamináciu, čím pomáha výskumníkom znížiť riziko nadmerného rastu mikroorganizmov bez toho, aby bolo ohrozené zdravie buniek alebo reprodukovateľnosť experimentov. Sterilne filtrované zloženie eliminuje potrebu ďalších krokov solubilizácie, čím podporuje zjednodušenú prípravu médií a znižuje variabilitu každodenných laboratórnych postupov.
Použitie a kompatibilita Na dosiahnutie štandardných pracovných koncentrácií roztok zrieďte v pomere 1:100 do kompletného kultivačného média. Produkt je kompatibilný so širokou škálou bunkových línií cicavcov a základných médií. Vďaka stálej dostupnosti zásob môžu výskumní pracovníci využívať výhody spoľahlivej kontinuity dodávok a zjednodušeného plánovania logistiky. Roztok by sa mal skladovať pri teplote ≤ -15 °C a chrániť pred opakovanými cyklami zmrazovania a rozmrazovania, aby sa zachovala jeho stabilita. Len na výskumné účely. Nie je určený na použitie pri diagnostických alebo terapeutických postupoch. Nie je určený na použitie u ľudí alebo zvierat.

Roztok fosfátového tlmivého roztoku (PBS)
Fyziologický roztok s fosfátovým pufrom (PBS) je široko používaný tlmivý roztok v biologickom a chemickom výskume. Zohráva kľúčovú úlohu pri udržiavaní rovnováhy pH a osmolarity počas rôznych experimentálnych postupov vrátane spracovania tkanív a bunkových kultúr. Náš roztok PBS je starostlivo pripravený z vysoko čistých zložiek, aby sa zabezpečila stabilita a spoľahlivosť pri každom experimente. Osmolarita a koncentrácie iónov nášho roztoku PBS presne kopírujú koncentrácie v ľudskom tele, takže je izotonický a netoxický pre väčšinu buniek.

Zloženie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je zmesou fosfátových pufrov a fyziologických roztokov ultračistej kvality s upraveným pH. V 1X pracovnej koncentrácii obsahuje:

8000 mg/l chloridu sodného (NaCl)
200 mg/L chlorid draselný (KCl)
1150 mg/L fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý (Na2HPO4)
200 mg/L Fosforečnan draselný jednozložkový bezvodý (KH2PO4)

Toto zloženie zabezpečuje optimálne pH a iónovú rovnováhu, vhodné pre širokú škálu biologických aplikácií.

Aplikácie nášho roztoku PBS
Náš roztok PBS je ideálny na rôzne aplikácie v biologickom výskume. Vďaka svojim izotonickým a netoxickým vlastnostiam je vhodný na riedenie látok a oplachovanie bunkových nádob. Roztoky PBS obsahujúce EDTA sú účinné na uvoľnenie prichytených a zhlukovaných buniek. Do PBS by sa však nemali pridávať dvojmocné kovy, ako napríklad zinok, pretože môžu spôsobiť zrážanie. V takýchto prípadoch sa odporúčajú Goodove pufre. Okrem toho je náš roztok PBS prijateľnou alternatívou vírusového transportného média na transport a skladovanie RNA vírusov vrátane SARS-CoV-2.

Kontrola kvality

Sterilne filtrované


Skladovanie a trvanlivosť

Skladujte pri teplote +2 °C až +25 °C, chránené pred svetlom.
Po otvorení skladujte pri teplote 2 °C až 25 °C a spotrebujte do 24 mesiacov.


Podmienky prepravy

Okolitá teplota


Údržba

Uchovávajte v chlade pri teplote +2°C až +8°C v tme. Vyhnite sa zmrazovaniu a častému zohrievaniu na +37 °C, pretože sa tým znižuje kvalita výrobku.
Neohrievajte médium na teplotu vyššiu ako 37 °C ani nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, napríklad mikrovlnné zariadenia.
Ak sa má použiť len časť média, odoberte požadované množstvo a pred použitím ho zohrejte na izbovú teplotu.

Zloženie



Kategória
Zložky
Koncentrácia (mg/l)


Soli
Chlorid draselný
200



Fosforečnan draselný monobázický bezvodý
200



Chlorid sodný
8000



Fosforečnan sodný dvojzložkový bezvodý
1150

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosť, holenná kosť
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm

Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Kosti
Choroba	Osteosarkóm