Komórki Ramos - Badania nad chłoniakiem z komórek B: Znaczenie komórek Ramos
KomórkiRamos to linia komórkowa limfocytów B szeroko stosowana w badaniach biomedycznych. W szczególności znajdują one główne zastosowanie w immunologii i badaniach nad rakiem. Naukowcy wykorzystują te komórki do oceny leków cytotoksycznych i badania antygenów powierzchniowych komórek B, mutacji i mechanizmów apoptotycznych.
Pochodzenie i ogólne cechy komórek Ramos s
Zrozumienie pochodzenia i podstawowych atrybutów linii komórkowej odgrywa kluczową rolę w podejmowaniu decyzji o jej przydatności do badań. Dlatego zaleca się dokładną ocenę tych informacji przed rozpoczęciem jakiejkolwiek pracy nad nimi. Ta sekcja obejmuje następujące często zadawane pytania: Czym jest rakowa linia komórkowa Ramos? Co to jest linia komórkowa Ramos CD19? Czym jest linia komórkowa Ramos CD20? Jakie jest pochodzenie komórek Ramos? Jakie są markery na linii komórek Ramos? Jaki jest rozmiar komórek Ramos? Jaka jest morfologia linii komórkowej Ramos?
- Linia komórek Ramos została utworzona w 1972 roku. Komórki te pochodzą z płynu puchlinowego 3-letniego chłopca rasy kaukaskiej z chłoniakiem Burkitta typu amerykańskiego [1].
- Wyrażają one kluczowe markery komórek B, w tym immunoglobulinę M (IgM), CD19, CD20 i CD22.
- Komórki Ramos są komórkami ujemnymi pod względem wirusa Epsteina. Mogą one jednak zostać trwale zmienione w komórki Epstein-Barr-dodatnie.
- Te komórki limfoblastów B mają morfologię okrągłego kształtu.
Niebieskie komórki Ramos a komórki Ramos B
Niebieskie komórki Ramos i komórki Ramos B są ludzkimi komórkami chłoniaka Burkitta. Obie są ujemne pod względem wirusa Epstein bar. Różnica między tymi komórkami polega na tym, że niebieskie komórki Ramos wyrażają gen reporterowy indukowany przez NF-κB/AP-1 o nazwie SEAP (wydzielany embrionalny fosforan alkaliczny), podczas gdy białe komórki Ramos nie.
Hodowla komórek Ramos
Ta część artykułu poświęcona jest pomocy w uzyskaniu niezbędnych informacji na temat hodowli komórek Ramos. Tutaj dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia linii komórkowych? Jakie jest zalecane podłoże? Jak hodować komórki Ramos?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek Ramos
|
Czas podwojenia: |
Czas podwojenia komórek Ramos wynosi około 20,4 ± 1,5 godziny. Może się on jednak różnić w zależności od zapewnionych warunków hodowli komórek. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
Komórki Ramos rosną w zawiesinie. |
|
Gęstość komórek: |
Optymalna gęstość komórek dla linii komórkowej Ramos wynosi 3 x105 komórek/ml . W celu podhodowli, zawieszone komórki są zbierane poprzez odwirowanie. Komórki dodaje się do świeżej pożywki i ostrożnie zawiesza. Następnie komórki zostały przelane do nowej kolby w gęstości od 3 do 9 x105 komórek/ml . |
|
Pożywka wzrostowa: |
Do hodowli komórek Ramos stosuje się pożywkę RPMI 1640 uzupełnioną 10% płodową surowicą bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą i 2,0 g/L NaHCO3. Pożywkę należy wymieniać 2 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Linia komórkowa ludzkiego chłoniaka Burkitta (Ramos) jest hodowana w nawilżanym inkubatorze przy 5% CO2 i temperaturze 37°C. |
|
Przechowywanie: |
Zamrożone komórki Ramos są przechowywane w temperaturze poniżej -150 stopni Celsjusza lub w fazie pary ciekłego azotu w celu ochrony żywotności komórek przez dłuższy czas. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
Do zamrażania komórek Ramos zaleca się stosowanie pożywki CM-1 lub CM-ACF. Stosowany jest powolny proces zamrażania, który pozwala na stopniowy spadek temperatury o 1 stopień Celsjusza na minutę. Takie powolne zamrażanie chroni komórki przed szokiem i zwiększa ich żywotność. |
|
Proces rozmrażania: |
W celu rozmrożenia, zamrożone komórkisą trzymane we wstępnie ogrzanej łaźni wodnej w temperaturze 37°C przez 40 do 60 sekund, aż do pozostawienia małej grudki lodu. Następnie dodawana jest świeża pożywka, a komórki są odwirowywane w celu usunięcia zamrożonych elementów pożywki. Pelet jest ponownie zawieszany, a komórki są dozowane do nowej kolby zawierającej pożywkę hodowlaną. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 1 jest niezbędne do utrzymywania kultur komórek Ramos ujemnych pod względem wirusa Epsteina-Barr. Jednak poziom bezpieczeństwa biologicznego zostaje przesunięty do 2, gdy komórki Ramos są trwale przekształcone w dodatnie pod względem wirusa Epsteina-Barr. |
Ramos: Zalety i ograniczenia
Podobnie jak inne linie komórkowe, komórki Ramos mają również wyraźne zalety i ograniczenia. W tej sekcji omówimy niektóre z nich, które mogą znacząco wpłynąć na ich wykorzystanie w badaniach.
Zalety
- Model komórkowy chłoniaka Burkitta: Komórki Ramos zostały uzyskane od pacjenta z chłoniakiem Burkitta, co czyni je odpowiednim modelem komórkowym do badania nowotworów limfoidalnych
- Łatwość hodowli: Komórki Ramos są łatwe w hodowli i utrzymaniu w laboratorium. Mają one proste wymagania i warunki hodowli komórkowej
Ograniczenia
- Model in vitro: Komórki Ramos mogą nie odzwierciedlać w pełni złożoności genetycznej guzów występujących u pacjentów, co ogranicza ich zastosowanie. Co więcej, wyniki eksperymentów z wykorzystaniem linii komórkowej Ramos mogą nie odzwierciedlać w pełni warunków in vivo, potencjalnie prowadząc do wyzwań translacyjnych
zastosowania komórek Ramos w badaniach naukowych
Ramos oferuje obiecujące zastosowania w dziedzinie biomedycyny. Niektóre z najważniejszych zastosowań badawczych komórek Ramos obejmują:
- Biologia chłoniaka: Komórki Ramos są szeroko stosowane do badania biologii chłoniaka. Są one wykorzystywane do badania czynników genetycznych i molekularnych leżących u podstaw nowotworów limfoidalnych. Poza tym, badacze uzyskują wgląd w inicjację, progresję i heterogeniczność choroby, wykorzystując te komórki chłoniaka Burkitta. Badane są również mutacje genetyczne i szlaki sygnalizacyjne, co może prowadzić do opracowania bardziej precyzyjnych podejść diagnostycznych i terapeutycznych. Badanie przeprowadzone w 2019 r. wykazało, że hamowanie acetylotransferazy histonowej GCN5 (General control non-depressible 5) zmniejsza nowotworowość ludzkich komórek chłoniaka Burkitta (Ramos) poprzez zakłócanie sygnalizacji BCR. Dlatego też GCN5 jest sugerowany jako realny cel dla rozwoju terapii lekowej chłoniaka [2].
- Badania przesiewowe i testowanie leków: Linia komórkowa Ramos jest szeroko wykorzystywana do badań przesiewowych i testowania leków. Badacze oceniają skuteczność potencjalnych związków terapeutycznych w hamowaniu proliferacji i wzrostu komórek oraz indukowaniu ich śmierci w komórkach chłoniaka. Pomaga to zidentyfikować obiecujących kandydatów na leki, ułatwiając w ten sposób rozwój ukierunkowanych terapii dla pacjentów z chłoniakiem. Badania wykazały, że ekstrakt metanolowy ze skórki, miąższu i nasion owoców Annona wywierał umiarkowany, podczas gdy ekstrakt chloroformowy wykazywał silny wpływ na proliferację komórek Ramos. W związku z tym w badaniu zaproponowano, że owoce Annona mogą okazać się skuteczne w zapobieganiu i leczeniu chłoniaka [3].
Komórki Ramos do badań naukowych
Publikacje z udziałem komórek Ramos
W tej części artykułu wymieniono kilka interesujących publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej Ramos:
Ciągła sygnalizacja CD 79b i CD 19 jest wymagana dla sprawności komórek B chłoniaka Burkitta
Badanie to zostało opublikowane w czasopiśmie EMBO w 2018 roku. Badanie wykazało, że komórki B Ramos wymagają ekspresji markerów CD19 i CD79b (składnik sygnalizacji BCR Igβ) dla ich kondycji i konkurencyjnego wzrostu.
W badaniu opublikowanym w Neoplasia (2021) wykorzystano komórki Ramos i zaproponowano, że domena kinazy mieszanej linii (MLKL) jest regulowana epigenetycznie w komórkach chłoniaka Burkitta (Ramos). Jest to zatem obiecujący marker prognostyczny dla powodzenia terapii związanych z nekroptozą.
Fosforylacja PBK/TOPK Tyr74 przez JAK2 promuje wzrost guza chłoniaka Burkitta
Ten artykuł badawczy w Cancer Letters (2022) sugeruje, że oś sygnalizacyjna JAK2/TOPK/histon H3 odgrywa kluczową rolę w proliferacji linii komórkowych chłoniaka B in vitro.
Artykuł ten został opublikowany w 2020 r. w czasopiśmie Toxins. W badaniu zaproponowano, że leczenie werotoksyną-1 indukuje stres retikulum endoplazmatycznego (ER) w komórkach Ramos B. Prowadzi to do zainicjowania sygnalizacji apoptotycznej lub przeżycia w liniach komórkowych chłoniaka.
Sylimaryna hamuje ekspresję genu receptora Toll-podobnego 8 i apoptozę w linii komórkowej raka Ramos
Badanie opublikowane w Avicenna Journal of Phytomedicine (2020) wykazało, że naturalny związek, sylimaryna, hamuje ekspresję TLR8 (receptora Toll-podobnego 8) i apoptozę w linii komórkowej Ramos.
Zasoby dla linii komórkowej Ramos: Protokoły, filmy i inne
Poniżej znajduje się kilka zasobów internetowych dotyczących komórek Ramos:
- Transfekcja komórek Ramos: Ten dokument pomoże zapoznać się z protokołem transfekcji linii komórek Ramos.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek Ramos:
- Komórki Ramos: Ta strona internetowa zawiera podstawowe informacje na temat linii komórek Ramos. Zawiera również protokół subkulturowania komórek Ramos oraz postępowania z proliferującymi i kriokonserwowanymi kulturami. Ponadto dostępne są również informacje dotyczące pożywek dla komórek Ramos, czasu podwojenia i gęstości komórek.
Kluczowe informacje na temat komórek Ramos: Często zadawane pytania
Piśmiennictwo
- Kerntke, C.G., Analysis of the organization and signaling capacity of the membrane IgE during its interaction with CD19 and CD23 in B lymphocytes. 2021, Georg-August-Universität Göttingen.
- Farria, A.T., et al., Zahamowanie GCN5 HAT zmniejsza przeżywalność ludzkich komórek chłoniaka Burkitta poprzez zmniejszenie ekspresji genu docelowego MYC i hamowanie szlaków sygnałowych BCR. Oncotarget, 2019. 10(56): p. 5847.
- Al-Shaya, H.M., et al., Phytochemical profile and antioxidation activity of annona fruit and its effect on lymphoma cell proliferation. Food Science & Nutrition, 2020. 8(1): p. 58-68.