Linia komórkowa INS-1

INS-1 to dobrze scharakteryzowana szczurza linia komórkowa insulinoma, szeroko stosowana w badaniach nad cukrzycą. Komórki INS-1 wydzielają insulinę po stymulacji glukozą, dlatego są wykorzystywane do badania metabolizmu glukozy, fizjologii komórek beta i regulacji wydzielania insuliny. Co więcej, komórki te są również wykorzystywane do badań przesiewowych, testowania i opracowywania potencjalnych środków terapeutycznych przeciwko cukrzycy.

Ten artykuł dostarczy ci wszystkich niezbędnych informacji na temat komórek beta INS-1, które musisz znać przed użyciem ich w swoich badaniach. Dowiesz się przede wszystkim następujących rzeczy:

Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek INS-1
Linia komórkowa INS-1: Informacje na temat hodowli
Zalety i wady linii komórkowej INS-1
Zastosowania badawcze szczurzych komórek insulinoma INS-1
Publikacje badawcze dotyczące komórek beta INS-1
Zasoby dla linii komórkowej INS-1: Protokoły, filmy i nie tylko

1. Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek INS-1

Wiedza na temat ogólnych cech i pochodzenia linii komórkowej może znacznie pomóc w wydajnym i skutecznym wykorzystaniu jej w badaniach. Ta sekcja artykułu zawiera informacje na temat pochodzenia i ogólnej charakterystyki INS-1. Dowiesz się: Czym jest linia komórkowa INS-1 szczurzego insulinoma? Jaka jest ogólna charakterystyka INS-1? Co to jest linia komórkowa INS-1 832/3? Co to jest INS-1E?

Komórki INS-1 zostały pierwotnie wyizolowane od 666-dniowego szczura z przeszczepialnym insulinoma wywołanym promieniowaniem rentgenowskim.
Komórki INS-1 są bi-hormonalne. Jednocześnie wyrażają białka insuliny i proglukagonu. Komórki te są uważane za niedojrzałe, ponieważ wykazują niski poziom ekspresji czynnika transkrypcyjnego Nkx6.1 i są pozbawione markerów komórek alfa [1].
Istnieją dwa podklony komórek INS-1, tj. INS-1E i INS-1 832/3.
INS-1E różni się od macierzystej linii komórkowej INS-1 pod względem sekretnych odpowiedzi na glukozę i zawartość insuliny.
INS-1 832/3 lub INS-1 832/13 jest również podklonem linii komórkowej INS-1. Jest to nieoceniony model do badania funkcji komórek beta wysepek trzustkowych i regulacji wydzielania insuliny. Różni się również od macierzystych komórek INS-1 w kontekście wydzielania insuliny stymulowanego glukozą (GSIS).

modelowanie 3D wychwytu glukozy za pośrednictwem insuliny.

2. Linia komórkowa INS-1: Informacje dotyczące hodowli

Aby skutecznie obsługiwać i utrzymywać linię komórkową, należy znać następujące informacje na jej temat. W tej części artykułu omówione zostaną wszystkie kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek INS-1: Jak hodować komórki beta INS-1? Co to jest protokół hodowli komórek INS-1? Jaki jest czas podwojenia komórek INS-1? Co to jest pożywka dla komórek INS-1 insulinoma szczura?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek INS-1

Czas podwojenia:	Czas podwojenia populacji komórek INS-1 wynosi około 44 godzin.
Adherentne lub w zawiesinie:	Komórki INS-1 rosną zarówno w zawiesinie, jak i w formie przylegającej.
Stosunek podhodowli:	Komórki INS-1 są podhodowane w stosunku podziału 1:3. W skrócie, zawieszone komórki są zbierane. Komórki adherentne są płukane PBS i inkubowane z roztworem Accutase. Po odłączeniu komórki są dodawane ze świeżą pożywką. Następnie zarówno zawieszone, jak i przylegające komórki są odwirowywane i zbierane. Komórki są ostrożnie ponownie zawieszane i dozowane do nowych kolb w celu wzrostu.
Pożywka wzrostowa:	Pożywka RPM1 1640 jest używana do hodowli linii komórkowej INS-1rat insulinoma. Pożywka jest uzupełniona 10% inaktywowaną termicznie płodową surowicą bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 i 1 mM pirogronianem sodu.
Warunki wzrostu:	Komórki INS-1 są przechowywane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37°C i z ciągłym dopływem 5% CO2.
Przechowywanie:	Komórki INS-1 beta mogą być przechowywane w fazie gazowej ciekłego azotu lub w temperaturze poniżej -150°C w zamrażarce elektrycznej przez długi czas.
Proces zamrażania i pożywka:	Pożywki CM-1 lub CM-ACF są używane do zamrażania komórek INS-1 w procesie powolnego zamrażania. Pozwala to na spadek temperatury tylko o 1°C na minutę w celu ochrony żywotności komórek.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki INS-1 są rozmrażane w łaźni wodnej wstępnie ustawionej na temperaturę 37 stopni Celsjusza przez 40 do 60 sekund. Po rozmrożeniu komórki są dodawane do świeżego podłoża i bezpośrednio wlewane do nowej kolby w celu wzrostu. Po 24 godzinach pożywka jest wymieniana w celu wyeliminowania składników pożywki zamrażającej.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Do hodowli komórek insulinoma szczura INS-1 wymagane jest laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 1.

Komórki INS-1 rosnące w wysepkach w powiększeniu 10x i 20x.

3. zalety i wady linii komórkowej INS-1

Podobnie jak inne linie komórkowe, INS-1 również posiada pewne odrębne cechy związane z pewnymi zaletami i wadami. Poniżej wymieniliśmy kilka istotnych z nich.

Zalety

Główne zalety linii komórkowej INS-1 to:

Dobrze scharakteryzowana
INS-1 to ugruntowana i dobrze scharakteryzowana linia komórkowa. Była ona wykorzystywana w licznych badaniach naukowych. Utrzymuje swoje cechy fenotypowe i zdolność wydzielania insuliny przez dłuższy czas, zapewniając w ten sposób wiarygodne i spójne wyniki eksperymentalne.
Model komórek beta
Komórki INS-1 są wykorzystywane do badania funkcji komórek beta wysp trzustkowych, ponieważ wydzielają one insulinę i reagują na wahania poziomu glukozy.

wady

Wadami komórek INS-1 są

Pochodzenie inne niż ludzkie
Komórki beta INS-1 nie pochodzą od człowieka. Zostały one uzyskane z insulinoma szczura. Może to powodować różnice gatunkowe i ograniczać bezpośrednie przełożenie wyników eksperymentalnych na fizjologię człowieka.

4 Zastosowania badawcze komórek INS-1 insulinoma szczura

Komórki beta INS-1 są szeroko wykorzystywane w badaniach nad cukrzycą. Poniżej wymieniono kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej.

Badania nad wydzielaniem insuliny: Komórki INS-1 mają zdolność wydzielania insuliny i dlatego są szeroko wykorzystywane do badania podstawowych mechanizmów komórkowych wydzielania insuliny. Naukowcy badają podstawowe czynniki związane z uwalnianiem insuliny, w tym metabolizm glukozy, szlaki sygnalizacyjne, hormony i środki farmakologiczne. Badanie wykazało, że szlak zależny od kanału jonowego K + ATP reguluje wydzielanie insuliny w komórkach beta INS-1 [2]. Ponadto badania wykazały, że szlaki GLP-1R i AKT/PDX1 są również zaangażowane w wydzielanie insuliny w komórkach INS-1 szczurzego insulinoma [3].
Badania funkcji komórek beta: Komórki INS-1 mają właściwości podobne do komórek beta wysp trzustkowych, takie jak reakcja na metabolizm glukozy i wydzielanie insuliny. Dlatego są one wykorzystywane do badania procesów fizjologicznych i funkcji komórek beta. W badaniu przeprowadzonym w 2022 r. wykorzystano komórki INS-1 i opracowano model dysfunkcji komórek beta za pomocą _H2O2. Badano żywotność komórek, wydzielanie insuliny i markery związane ze stresem oksydacyjnym w tych komórkach w odpowiedzi na leczenie związkami naturalnymi [4].
Odkrywanie i rozwój leków: Komórki insulinoma szczura INS-1 są szeroko stosowane do badań przesiewowych i testowania związków lub leków przeciwcukrzycowych. Mogą być wykorzystywane do badania potencjalnego wpływu środków terapeutycznych na wydzielanie insuliny i inne istotne parametry. Badanie wykazało, że loganina, składnik chińskiej formuły ziołowej, chroniła funkcję wydzielania insuliny przez komórki INS-1 i wywierała potencjalne działanie przeciwcukrzycowe. Składnik ten pośredniczył w tych korzystnych efektach poprzez hamowanie translokacji jądrowej genu FOXO1 poprzez szlak PI3K/AKT [5].

550,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 300471

5. Publikacje naukowe dotyczące komórek beta INS-1

Oto kilka ważnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej INS-1 szczurzego insulinoma.

Alfa-mangostyna poprawia wydzielanie insuliny i chroni komórki INS-1 przed uszkodzeniami wywołanymi streptozotocyną

Badanie to zostało opublikowane w Internation Journal of Molecular Sciences w 2018 roku. W badaniu zaproponowano, że żółty krystaliczny naturalny związek, alfa-mangostyna, promuje wydzielanie insuliny w komórkach beta INS-1 i chroni je przed uszkodzeniami indukowanymi przez streptozotocynę.

Epikatechina nasila stymulowane glukozą wydzielanie insuliny w komórkach INS-1 nie zależy od jej aktywności przeciwutleniającej

Badanie to zostało opublikowane w acta pharmacologica sinica w 2018 roku. Wyniki badania wykazały, że związek epikatechiny promuje stymulowane glukozą wydzielanie insuliny w komórkach beta INS-1 osłabionych nasyconymi kwasami tłuszczowymi poprzez aktywację szlaku CaMKII.

Nowo odkryty glikozyd fenyloetanoidowy ze Stevia rebaudiana Bertoni wpływa na wydzielanie insuliny w komórkach β wysepek INS-1 szczura

W artykule opublikowanym w Molecules (2019) zaproponowano, że nowy naturalny związek glikozyd fenyloetanoidowy wpływa na wydzielanie insuliny w komórkach insulinoma szczura INS-1, a tym samym ma potencjał przeciwcukrzycowy.

Loureirin B promuje wydzielanie insuliny poprzez szlaki GLP-1R i AKT/PDX1

Badania te zostały opublikowane w European Journal of Pharmacology (2022). W badaniu zaproponowano, że Loureirin B, produkt naturalny, zwiększa wydzielanie insuliny w komórkach beta wysepek trzustkowych INS-1 poprzez modulację szlaków AKT/PDX1 i GLP-1R.

Aktywność przeciwnowotworowa in vitro Withania coagulans przeciwko komórkom nowotworowym HeLa, MCF-7, RD, RG2 i INS-1 oraz analiza fitochemiczna

W artykule Integrative Medicine Research (2018) oceniono potencjał przeciwnowotworowy ekstraktu Withania coagulans przy użyciu komórek rakowych INS-1.

6. Zasoby dla linii komórkowej INS-1: Protokoły, filmy i nie tylko

Oto kilka zasobów internetowych dotyczących komórek INS-1:

Subkultura komórek zawiesinowych: Ten film jest kompleksowym przewodnikiem po podhodowli komórek rosnących w kulturach zawiesinowych.
Hodowla komórek przylegających: Ten film pomoże ci poznać ogólny protokół pasażowania komórek adherentnych.

Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek INS-1:

Linia komórkowa INS-1: Ta strona zawiera wszystkie informacje na temat hodowli komórek INS-1. Obejmuje ona informacje na temat hodowli komórek INS-1 i pożywek do zamrażania, protokoły subkulturowania oraz postępowanie z kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi kulturami INS-1.

Odniesienia

Acosta-Montalvo, A., et al., Ekspresja i wydzielanie peptydów pochodzących z proglukagonu w komórkach INS-1 insulinoma szczura. Front Cell Dev Biol, 2020. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells. Nutrition Research and Practice, 2018. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al., Loureirin B promuje wydzielanie insuliny poprzez szlaki GLP-1R i AKT/PDX1. European Journal of Pharmacology, 2022. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenina i swietenolid z króla Swietenia macrophylla poprawiają wydzielanie insuliny i osłabiają apoptozę w komórkach INS-1 indukowanych H2O2. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Przeciwcukrzycowe działanie loganiny poprzez hamowanie translokacji jądrowej FOXO1 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt w komórce INS-1. Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.