Linia komórkowa HT-29

HT-29 to ludzka linia komórkowa raka jelita grubego o szerokim zakresie zastosowań w badaniach nad rakiem i toksykologią. Komórki te są wrażliwe na standardowe terapie chemioterapeutyczne stosowane w leczeniu raka jelita grubego. Ponadto linia komórkowa HT-29 stanowi dobrze scharakteryzowany model in vitro do badania reakcji nabłonka jelitowego na infekcję bakteryjną. Komórki HT-29 naśladują cechy dojrzałych komórek jelitowych, tj. enterocytów, dzięki czemu nadają się do badań nad przyleganiem i mechanizmami.

Komórki HT-29: pochodzenie i informacje ogólne

Przed użyciem jakiejkolwiek linii komórkowej warto poznać jej ogólną charakterystykę i pochodzenie. W tej sekcji dowiesz się: Czym są komórki HT-29? Czy HT-29 to linia komórkowa raka jelita grubego? Jaka jest morfologia komórek HT-29?

Czym jest linia komórkowa HT-29? HT-29 to linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego, ustanowiona w 1964 roku przez Trempe'a i Fogha. Komórki pochodziły pierwotnie z guza pierwotnego u kobiety rasy kaukaskiej (44 lata) z gruczolakorakiem jelita grubego [1]. Od momentu utworzenia linia ta jest wykorzystywana do badań nad biologią nowotworów.

Morfologia komórek HT-29: Linia komórkowa HT-29 ma ogólnie morfologię podobną do nabłonkowej. Zróżnicowane komórki rosną w monowarstwach, tworzą ścisłe połączenia międzykomórkowe i posiadają apikalną krawędź szczoteczkową. Jeśli komórki te są hodowane w pożywce z niedoborem glukozy lub poddane działaniu induktorów, takich jak maślan lub kwas, wykazują cechy podobne do enterocytów.

Wielkość komórek: Średnica komórek linii komórkowej raka jelita grubego HT-29 wynosi 11 μm.

Genom i ploidia: Liczba modalna chromosomów dla linii komórkowej HT-29 wynosi 71. Może ona wynosić od 68 do 72. Ponadto uproszczona liczba chromosomów dla komórek HT-29 jest hipertriploidalna, przy czym składnik 2S występuje z częstotliwością 2,4 %.

Czym jest HT29 MTX? HT29 MTX to linia komórkowa oporna na metotreksat, wyizolowana z pierwotnej ludzkiej linii komórkowej raka jelita grubego HT-29 poprzez adaptację do 10 µM metotreksatu. Komórki te wykazują cechy dojrzałych komórek kubkowych wydzielających śluz.

Komórki HT-29: zalety i ograniczenia

Każda linia komórkowa ma swoje unikalne zalety i wady, które odróżniają ją od innych linii komórkowych. W tej sekcji omówimy główne zalety i ograniczenia związane z komórkami HT-29.

Zalety

Główne zalety komórek HT-29 to:

• Łatwość hodowli

  Linia komórkowa HT-29 jest łatwa w obsłudze i utrzymaniu, nie ma skomplikowanych wymagań dotyczących hodowli. Jest szeroko hodowana w laboratoriach badawczych.

• Model komórek jelitowych in vitro

  Komórki HT-29 mogą różnicować się w dojrzałe komórki jelitowe (enterocyty i komórki wytwarzające śluz) w określonych warunkach hodowli. Są one wykorzystywane jako model komórkowy do badania trawienia pokarmu i biodostępności.

• Wysoka skuteczność transfekcji

  Komórki raka jelita grubego HT-29 charakteryzują się wysoką wydajnością transfekcji, co sprawia, że nadają się do badań nad ekspresją i regulacją genów. Za pomocą różnych metod można przeprowadzać zarówno eksperymenty z transfekcją przejściową, jak i stabilną.

• Wrażliwość na leki

  Komórki HT-29 są wrażliwe na leki chemioterapeutyczne, takie jak fluorouracyl i oksaliplatyna, powszechnie stosowane w leczeniu raka jelita grubego. Wykorzystuje się je do badania oporności na leki oraz do przesiewania potencjalnych leków terapeutycznych stosowanych w leczeniu raka jelita grubego.

Ograniczenia

• Heterogeniczność

  Komórki HT-29, podobnie jak inne linie komórkowe nowotworowe, wykazują heterogenność i mogą nie tworzyć jednolitej populacji komórkowej. Może to wpływać na powtarzalność wyników w niektórych testach i prowadzić do niewielkich różnic w wynikach eksperymentów.

• Ograniczone różnicowanie

  Komórki HT-29 mają ograniczony potencjał różnicowania. Nie różnicują się one w pełni w komórki jelitowe lub okrężnicy, a wykazują jedynie kilka charakterystycznych cech. To ograniczenie może utrudniać ich wykorzystanie w badaniach bardziej złożonych procesów biologicznych.

Komórki HT-29: Zastosowania

Linia komórkowa HT-29 jest szeroko hodowana w laboratoriach badawczych ze względu na szeroki zakres zastosowań. W tej sekcji omówimy tylko kilka istotnych zastosowań komórek HT-29.

Badania nad rakiem: HT-29 to linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego, dlatego jest wykorzystywana do badania progresji nowotworu, jego rozwoju oraz leżących u jego podstaw mechanizmów molekularnych. W badaniu przeprowadzonym w 2018 r. wykorzystano linię komórkową HT-29 do zbadania cząsteczek komórkowych odpowiedzialnych za przerzuty. W badaniu tym zaobserwowano, że geny wimentyny i CXCR4 regulują przerzuty komórkowe. Natomiast transfekcja mimika mikroRNA-193a-5p może obniżyć poziom mRNA tych genów i skutecznie zmniejszyć przerzuty komórek nowotworowych [2].

Badania toksykologiczne: Linia komórkowa HT-29 jest szeroko stosowana w badaniach toksykologicznych. Komórki raka jelita grubego są wykorzystywane do oceny toksyczności różnych potencjalnych leków przy użyciu różnych testów. Na przykład w jednym z badań zbadano potencjał toksyczny etanolowego ekstraktu z rośliny Syzygium cumini na linii komórkowej HT-29. Wyniki wykazały znaczące zahamowanie wzrostu komórek HT-29, co wskazuje na obiecujące właściwości przeciwnowotworowe ekstraktu [3].

Mikrobiologia: HT-29 może być wykorzystywana jako system komórek gospodarza do badania patogenezy potencjalnych mikroorganizmów, tj. bakterii i wirusów. Naukowcy mogą zakażać komórki HT-29 mikroorganizmami w celu zbadania ich zjadliwości i reakcji gospodarza. W jednym z takich badań wykorzystano komórki HT-29 do zbadania właściwości probiotycznych bakterii kwasu mlekowego [4]. W innym badaniu wykorzystano komórki HT-29 do oceny skuteczności i bezpieczeństwa terapii bakteriofagowych [5].

5. Publikacje naukowe dotyczące komórek HT-29

W tej sekcji omówiono kilka znaczących publikacji dotyczących komórek HT-29, które pomogą w opracowaniu projektu badawczego.

Ocena działania przeciwnowotworowego ekstraktu etanolowego z Syzygium cumini na linię komórek raka jelita grubego HT-29

W badaniu tym zaproponowano ekstrakt etanolowy z Syzygium cumini jako potencjalny środek przeciwnowotworowy przeciwko linii komórkowej raka jelita grubego HT-29. Ekstrakt ten znacząco hamował wzrost komórek nowotworowych.

Tetrandryna hamuje wzrost komórek raka jelita grubego HT-29 poprzez szlak Bcl-2/kaspaza 3/PARP oraz fazę G1/S

W publikacji w czasopiśmie „Bioscience Reports” zbadano działanie przeciwnowotworowe związku o nazwie tetrandryna na komórki HT-29. Wyniki wykazały, że tetrandryna hamuje proliferację i wzrost komórek nowotworowych poprzez regulację szlaków sygnałowych komórek.

mikroRNA-193a-5p hamuje migrację ludzkich komórek raka jelita grubego HT-29 poprzez hamowanie szlaku przerzutów

W badaniu tym wysunięto hipotezę, że miRNA-193a-5p może potencjalnie regulować przerzuty komórek HT-29 poprzez regulację genów związanych z przerzutami.

Bakteriofagi są bardziej zjadliwe dla bakterii w komórkach ludzkich niż w hodowli bakteryjnej; wnioski z badań nad komórkami HT-29

Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Nature Scientific Reports” w 2018 r. W badaniu tym wykorzystano nowotworową linię komórkową HT-29 jako model komórkowy jelita w celu oceny skuteczności proponowanego leczenia bakteriofagami.

Właściwości probiotyczne bakterii z rodzaju Lactobacillus i ich zdolność do hamowania adhezji bakterii enteropatogennych do komórek Caco-2 i HT-29

W tym badaniu naukowcy wykorzystali komórki HT-29 do zbadania działania probiotycznego bakterii kwasu mlekowego. Co ciekawe, badanie wykazało, że bakterie z rodzaju Lactobacillus zapobiegają przyleganiu bakterii chorobotwórczych do komórek okrężnicy.

Komórki HT-29 – zasoby: protokoły, filmy i inne materiały

W tej sekcji omówimy niektóre zasoby internetowe dotyczące komórek HT-29, które pomogą w nauce protokołów ich utrzymania, hodowli i transfekcji.

Protokoły hodowli komórkowej

Poniższe zasoby zawierają wskazówki dotyczące subkultury komórek HT-29.

• Hodowla komórek HT-29: Ten link zawiera podstawowe informacje na temat pożywki wzrostowej, rozmrażania i subkultury komórek HT-29.
• Utrzymywanie hodowli HT-29: Ten artykuł zawiera wszystkie przydatne informacje na temat hodowli i utrzymania komórek HT-29.

Protokoły transfekcji

Linia komórkowa HT-29 charakteryzuje się wysoką wydajnością transfekcji i jest często wykorzystywana w badaniach ekspresji genów. Poniższe zasoby opisują możliwe protokoły transfekcji dla tych komórek.

• Transfekcja HT-29: Ten link do strony internetowej zawiera szczegółowy protokół transfekcji komórek HT-29.
• Transfekcja linii komórkowej HT-29: Niniejszy dokument opisuje protokół transfekcji linii komórkowej HT-29 za pomocą plazmidowego DNA.

Filmy związane z linią komórkową HT-29

Oto kilka filmów dotyczących hodowli i utrzymania tej nowotworowej linii komórkowej.

• Pasażowanie komórek: Ten film pokazuje protokół pasażowania komórek dla linii komórkowych przylegających.
• Transfekcja komórek HT-29: Ten film przedstawia metodę transfekcji stosowaną w przypadku komórek HT-29.

Mamy nadzieję, że informacje zawarte w tym artykule okażą się przydatne i wystarczające do obsługi i utrzymania linii komórkowej HT-29. Jeśli planujesz wykorzystać komórki HT-29 w swoich badaniach, zamów je u nas.

Referencje

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles i I. Recio, Linia komórkowa HT29. Wpływ bioaktywnych składników żywności na zdrowie: modele in vitro i ex vivo, 2015: s. 113-124.
2. Shirafkan, N. i in., microRNA‐193a‐5p hamuje migrację ludzkich komórek raka jelita grubego HT‐29 poprzez supresję szlaku przerzutów. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): s. 8775-8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean i R. Safaralizadeh, Ocena działania przeciwnowotworowego ekstraktu etanolowego z Syzygium cumini na linię komórek raka jelita grubego HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: s. 575-581.
4. Fonseca, H.C. i in., Właściwości probiotyczne bakterii z rodzaju Lactobacillus i ich zdolność do hamowania adhezji bakterii enteropatogennych do komórek Caco-2 i HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: s. 102-112.
5. Shan, J. i in., Bakteriofagi są bardziej zjadliwe dla bakterii w komórkach ludzkich niż w hodowli bakteryjnej; wnioski z badań nad komórkami HT-29. Scientific reports, 2018. 8(1): s. 5091.