Linia komórkowa BEWO

BeWo to ludzka linia komórkowa pochodząca z choriocarcinoma, szeroko stosowana w badaniach biomedycznych. Służy ona jako cenny model in vitro do badania skomplikowanego procesu rozwoju łożyska i syncytializacji ludzkich trofoblastów. Naukowcy wykorzystują również te komórki do badania zachowania komórek trofoblastów, produkcji hormonów i transportu substancji przez łożysko. Poza tym, komórki BeWo znajdują również zastosowanie w toksykologii, badaniach nad infekcjami i przenoszeniem chorób.

Niniejszy artykuł zawiera podstawową wiedzę na temat komórek BeWo, która może pomóc w ich wykorzystaniu w badaniach. Obejmuje on:

Ogólną charakterystykę i pochodzenie komórek BeWo
Linia komórkowa BeWo: Informacje na temat hodowli
Zalety i wady linii komórkowej BeWo
Zastosowania badawcze komórek BeWo
Publikacje badawcze dotyczące komórek BeWo
Zasoby dotyczące linii komórkowej BeWo: Protokoły, filmy i nie tylko

1. Ogólna charakterystyka i pochodzenie komórek BeWo

Wcześniejsza wiedza na temat pochodzenia i ogólnej charakterystyki linii komórkowej ma kluczowe znaczenie dla jej wykorzystania w badaniach. W tej części artykułu omówiono pochodzenie linii komórkowej BeWo, jej charakterystyczne cechy i wiele więcej. Tutaj dowiesz się: Czym jest linia komórkowa choriocarcinoma BeWo? Czym jest syncytializacja BeWo? Skąd pochodzą komórki BeWo? Jaka jest morfologia komórek BeWo? Jaka jest ploidia komórek BeWo?

Linia komórek łożyskowych BeWo pochodzi ze złośliwego choriocarcinoma ciążowego łożyska płodu płci męskiej w 1968 roku [1]. Służy ona zatem jako nieoceniony model do badań nad łożyskiem.
Komórki BeWo wykazują morfologię podobną do nabłonka.
Komórki BeWo są stosunkowo małe i mają wielkość od 20 do 30 µM [2].
Komórki BeWo wykazują stabilny kariotyp. Ich liczba linii macierzystych jest hipo-tetraploidalna. Modalna liczba chromosomów w komórkach BeWo wynosi 86. Może się ona wahać od 71 do 178.
Komórki BeWo produkują kilka hormonów, tj. ludzką somatomammotropinę kosmówkową, ludzką gonadotropinę kosmówkową (hCG) i hormony steroidowe.
Komórki BeWo wyrażają markery molekularne, w tym CK 7, E-kadherynę i VE-kadherynę.

Podlinia B30

B30 jest podlinią komórek BeWo. Jest ona wykorzystywana do badania pobierania i transportu składników odżywczych. Jest to związane z ich energicznym wzrostem na porowatych membranach.

BeWo i JEG-3

Linie komórkowe BeWo i JEG-3 pochodzą z raka kosmówki i są wykorzystywane w badaniach nad łożyskiem. Komórki BeWo produkują hormony na niższych poziomach niż JEG-3, takie jak ludzka gonadotropina kosmówkowa (hCG) i estradiol.

Wizualizacja poklatkowa płodności ludzkiej komórki jajowej, ilustrująca etapy tworzenia blastocysty, obserwowane pod mikroskopem.

2. Linia komórkowa BeWo: Informacje o hodowli

Utrzymanie hodowli komórkowej może być trudne, jeśli nie znasz kluczowych szczegółów. Takich jak: Jaki jest czas podwojenia liczby komórek BeWo? Co to jest pożywka dla komórek BeWo? Jak hodować linię komórkową BeWo i jak zamrażać komórki BeWo?

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek BeWo

Czas podwojenia:	Czas podwojenia populacji komórek BeWo wynosi około 30 godzin.
Adherentne lub w zawiesinie:	BeWo jest linią komórek adherentnych.
Gęstość wysiewu komórek:	Gęstość wysiewu zalecana dla komórek BeWo wynosi 1 x¹⁰⁴ ^komórki/cm2. W celu wysiewu z komórek usuwa się starą pożywkę, a komórki płucze się 1 x PBS. Następnie dodawana jest Accutase (roztwór do pasażowania), a komórki są inkubowane przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Następnie oderwane komórki dodaje się do pożywki i odwirowuje. Zebrane komórki są następnie ponownie zawieszane i przelewane do nowej kolby.
Podłoże hodowlane:	Do hodowli komórek BeWo używana jest pożywka Ham's F12K zawierająca 10% FBS, 2,0 mM L-glutaminy, 2,0 mM pirogronianu sodu i 2,5 g/L NaHCO3. Pożywka dla komórek BeWo powinna być wymieniana 2 do 3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Komórki BeWo są utrzymywane w nawilżanym inkubatorze ustawionym na temperaturę 37 stopni Celsjusza i przy 5% podaży CO2.
Przechowywanie:	Zamrożone komórki BeWo są przechowywane w temperaturze poniżej -150°C w elektrycznej zamrażarce niskotemperaturowej lub w fazie gazowej ciekłego azotu.
Proces zamrażania i medium:	Komórki BeWo zaleca się zamrażać w pożywce CM-1 lub CM-ACF. Komórki są zamrażane przy użyciu metody powolnego zamrażania. Metoda ta pozwala jedynie na spadek temperatury o 1 stopień na minutę, zapobiegając w ten sposób szokowi komórek i chroniąc ich żywotność.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki są rozmrażane poprzez zanurzenie ich we wstępnie ustawionej łaźni wodnej o temperaturze 37°C na 40 do 60 sekund, aż do pozostawienia małej grudki lodu. Następnie dodawana jest świeża pożywka wzrostowa, a komórki są odwirowywane w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. Zebrany osad komórkowy jest ponownie zawieszany i dozowany do kolby hodowlanej w celu wzrostu.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 1 jest niezbędne do obsługi i utrzymania hodowli komórek BeWo.

Uchwycenie nabłonkowej, wielokątnej morfologii i wzrostu przypominającego wysepkę ludzkiej linii komórek choriocarcinoma, BEWO, w powiększeniu 10x i 20x pod mikroskopem.

3. Zalety i wady linii komórkowej BeWo

Komórki BeWo wykazują unikalne cechy i mają określone wady i zalety. W tej sekcji omówimy niektóre z nich.

Zalety

Główne zalety linii komórkowej raka kosmówki BeWo są następujące:

Model komórek łożyskowych in vitro
Komórki BeWo zapewniają model in vitro do badania zachowania komórek trofoblastu i syncytializacji łożyska, replikując procesy trudne do zaobserwowania in vivo.
Produkcja hormonów
Komórki BeWo wydzielają hormony, takie jak hCG i laktogen łożyskowy, co czyni je cennymi dla badań nad regulacją hormonalną i badań w zakresie biologii reprodukcyjnej.

Wady

Wady komórek trofoblastu BeWo są następujące:

Nowotworowa linia komórkowa
Komórki BeWo pochodzą z raka kosmówki, który jest nowotworem łożyska. Pochodzenie to może nie w pełni odzwierciedlać normalną funkcję komórek łożyska.

4. Zastosowania badawcze komórek BeWo

Linia komórkowa BeWo jest szeroko stosowana w badaniach nad łożyskiem. Poniżej wymieniono kilka konkretnych zastosowań tej linii komórkowej:

Badania nad łożyskiem i ciążą: Komórki BeWo odgrywają kluczową rolę w badaniach nad łożyskiem i ciążą. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania transportu substancji, w tym leków, składników odżywczych i toksyn, przez barierę łożyskową. Poza tym badają również produkcję i regulację hormonów, w tym ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (hCG), laktogenu łożyskowego i hormonów steroidowych. Jest to ważne dla zrozumienia zmian hormonalnych podczas ciąży. Badania przeprowadzone w 2018 roku dotyczyły wpływu bromowanych środków zmniejszających palność (BFR) na aktywność sulfotransferazy w ludzkiej linii komórek trofoblastycznych (BeWo). Enzym ten bierze udział w regulacji wewnątrzkomórkowego poziomu hormonu tarczycy [3].
Badania nad infekcjami i chorobami: Komórki BeWo są również wykorzystywane do badania interakcji między patogenami a komórkami łożyska. Badania te są cenne dla zrozumienia chorób, które mogą być przenoszone z matki na płód oraz dla opracowania strategii ochrony zdrowia płodu. Co więcej, ta linia komórkowa pomaga naukowcom badać powikłania, które pojawiają się w czasie ciąży, takie jak stan przedrzucawkowy. Na przykład w badaniu przeprowadzonym przez Michalinę Bralewską w 2023 r. wykorzystano model komórkowy trofoblastu BeWo i stwierdzono, że zarówno chromogranina A (CgA), jak i pochodzący z niej peptyd, katestatyna (CST), mogą odgrywać rolę w skomplikowanym procesie patogenezy stanu przedrzucawkowego (PE) [4]. Idąc dalej, w innym badaniu zbadano potencjał przeciwnowotworowy trichosantyny przy użyciu linii komórkowej choriocarcinoma BeWo. W badaniu podjęto również dodatkowy wysiłek w celu odkrycia biomarkerów poprzez przeprowadzenie porównawczej analizy proteomicznej przed i po eksperymencie [5].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 300123

5. Publikacje badawcze dotyczące komórek BeWo

Oto kilka ważnych publikacji naukowych dotyczących komórek trofoblastów BeWo.

Sygnalizacja AMPK reguluje mitofagię i mitochondrialną produkcję ATP w ludzkiej linii komórkowej trofoblastów BeWo

W badaniu opublikowanym w czasopiśmie Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) zaproponowano, że sygnalizacja AMPK aktywuje mitofagię w komórkach trofoblastów BeWo poprzez szlaki mitofagii wspierane przez FUNDC1 i PRKN. W rezultacie mitofagia pomaga utrzymać produkcję ATP i potencjał błony mitochondrialnej.

Etyloparaben indukuje apoptotyczną śmierć komórek ludzkiego łożyska BeWo poprzez szlak kaspazy-3

Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie Animal Cells and Systems (2020). W badaniu zaproponowano, że etyloparaben pośredniczy w apoptozie komórek BeWo poprzez regulację szlaku kaspazy 3.

Charakterystyka potencjału dyspozycyjnego ksenobiotyków i steroidów ludzkiej tkanki łożyskowej i linii komórkowych (BeWo, JEG-3, JAR i HTR-8/SVneo) za pomocą ilościowej proteomiki

W badaniu opublikowanym w czasopiśmie Metabolism and Disposition (2023) wykorzystano łożyskowe linie komórkowe, w tym BeWo, JAR, JEG-3 i HTR-8/SVneo, do zbadania odkładania się ksenobiotyków i steroidów w komórkach.

Apelina i receptor apeliny w ludzkim łożysku: Ekspresja, szlak sygnałowy i regulacja proliferacji i cyklu komórkowego komórek trofoblastu JEG-3 i BeWo

W artykule badawczym opublikowanym w International Journal of Molecular Medicine (2020) zaproponowano, że apelina, ligand receptora APJ, promuje proliferację komórek BeWo poprzez sygnalizację APJ i ERK1/2, stat3 i AMPK. W związku z tym może być istotną adipokiną regulującą rozwój łożyska.

Leki przeciwpadaczkowe i składniki odżywcze płodu: wpływ na transportery choliny w ludzkiej linii komórkowej łożyska

W badaniu opublikowanym w Epilepsia (2021) zbadano wpływ płodowych składników odżywczych i leków przeciwpadaczkowych na transportery choliny w linii komórek trofoblastycznych pochodzenia ludzkiego, BeWo.

6. Zasoby dla linii komórkowej BeWo: Protokoły, filmy i nie tylko

Oto kilka dostępnych w Internecie zasobów dotyczących komórek BeWo:

Transfekcja in vitro: Ten film pomoże ci nauczyć się protokołu transfekcji plazmidowego DNA in vitro dla komórek adherentnych.

Poniższy link zawiera informacje na temat hodowli komórek BeWo:

Komórki BeWo: Ta strona internetowa zawiera niezbędne informacje na temat hodowli komórek linii BeWo. Obejmuje to informacje dotyczące pożywek komórkowych i warunków hodowli. Zawiera również protokoły subkulturowania i postępowania z kulturami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.

Odniesienia

Weber, M., et al., Cytogenomika sześciu ludzkich trofoblastycznych linii komórkowych. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
Kolokol'tsova, T., et al., Charakterystyka trofoblastów w hodowli długoterminowej. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: p. 259-265.
Leonetti, C.P., C.M. Butt i H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Reduction in CgA-Derived CST Protein Level in HTR-8/SVneo and BeWo Trophoblastic Cell Lines Caused by the Preeclamptic Environment. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
Hu, Y., et al., Porównawcza analiza proteomiczna dodatku trichosantyny do linii komórkowej BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.