Linia komórkowa BxPC-3
BxPC-3 to pochodząca od człowieka linia komórkowa raka trzustki. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad rakiem. Naukowcy wykorzystują te komórki głównie do badania biologii raka trzustki, identyfikacji celów terapeutycznych i opracowywania leków przeciwnowotworowych.
Niniejszy artykuł zawiera kluczowe informacje na temat linii komórkowej BxPC-3, które mogą znacząco pomóc w pracy z nią. Omówione zostaną przede wszystkim
- Informacje ogólne i pochodzenie linii komórkowej BxPC-3
- Hodowla komórek BxPC-3
- Linia komórkowa BxPC-3: Zalety i ograniczenia
- Zastosowania komórek BxPC-3 w badaniach naukowych
- Publikacje badawcze dotyczące komórek BxPC-3
- Zasoby dotyczące linii komórkowej BxPC-3: Protokoły, filmy i nie tylko
1. informacje ogólne i pochodzenie linii komórkowej BxPC-3
Wiedza na temat pochodzenia linii komórkowej ma kluczowe znaczenie dla jej przydatności badawczej. Znajomość jej cech, w tym morfologii, wielkości komórek i ploidii, sprawia, że jej użycie jest prostsze i wygodniejsze. Poniżej przedstawiamy pochodzenie i ogólne cechy komórek BxPC-3: Czym są komórki BxPC-3? Czym jest linia komórkowa BxPC-3? Jakie jest pochodzenie linii komórkowej BxPC-3? Jaka jest morfologia BxPC-3?
- Komórki ludzkiego raka trzustki BxPC-3 zostały uzyskane od 61-letniej Europejki z gruczolakorakiem trzustki w 1986 roku. Komórki te zostały potwierdzone jako nowotworowe nawet po tym, jak pacjentka przeszła kilka sesji radio- i chemioterapii. Tak więc, ustalona linia komórkowa jest nieocenionym modelem do badania rozwoju i progresji raka.
- Komórki BxPC-3 posiadają morfologię podobną do komórek nabłonkowych.
- Modalna liczba chromosomów dla BxPC-3 wynosi 59. Komórki te mają homozygotyczną delecję na chromosomie 18q, który koduje białko SMAD4/DPC4. Ponadto, linia komórkowa nie posiada mutacji BxPC-3 kras powszechnej wśród nowotworów trzustki. Delecja BxPC-3 braf również występuje w tych komórkach raka trzustki.
Jaka jest różnica między BxPC3 a PANC-1?
Komórki BxPC-3 PADC (pancreatic ductal adenocarcinoma) i PANC-1 to pierwotne linie komórkowe raka trzustki o morfologii nabłonkowej. W tym przypadku pierwsze komórki mają bardziej nabłonkowe właściwości, podczas gdy późniejsze wykazują więcej cech mezenchymalnych [1].
2. hodowla komórek BxPC-3
Linia komórkowa BxPC-3 jest szeroko stosowana w laboratoriach badań nad rakiem. Aby skutecznie hodować tę linię komórek raka trzustki, należy znać następujące kluczowe punkty. Dowiesz się: Jaki jest czas podwojenia dla bxpc3? Jak hodować linię komórkową BxPC-3?
Kluczowe punkty hodowli komórek BxPC-3
|
Czas podwojenia populacji: |
Czas podwojenia komórek BxPC-3 wynosi od 48 do 60 godzin. |
|
Adherentne lub w zawiesinie: |
BxPC-3 jest linią komórek przylegających. |
|
Współczynnik podziału: |
Komórki BxPC-3 są subkulturowane w stosunku od 1:2 do 1:4. Komórki są przemywane 1 x PBS i inkubowane z roztworem do pasażowania o nazwie accutase. Po 8-10 minutach do komórek dodawana jest świeża pożywka, a komórki są odwirowywane. Osad jest ponownie zawieszany w pożywce, a komórki są przelewane do nowego naczynia hodowlanego w celu wzrostu. |
|
Podłoże hodowlane: |
Do hodowli linii komórkowej BxPC-3 używana jest pożywka RPMI 1640. Jest ona uzupełniona 10% płodową surowicą bydlęcą, 2,1 mM stabilną glutaminą i 2,0 g/L NaHCO3 w celu osiągnięcia idealnego wzrostu komórek. Pożywka powinna być wymieniana 2-3 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Hodowle komórek BxPC-3 są utrzymywane w nawilżanym inkubatorze o temperaturze 37 °C, podłączonym do 5% CO2. |
|
Przechowywanie: |
Zamrożone komórki są zazwyczaj przechowywane w temperaturze poniżej -150 °C lub w fazie pary ciekłego azotu w celu ochrony żywotności komórek. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
CM-1 lub CM-ACF mogą być używane do zamrażania kultur komórkowych BxPC-3. Stosuje się powolny proces zamrażania, który pozwala na spadek temperatury tylko o 1°C, aby zapobiec szokowi komórek. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone komórki BxPC-3 są rozmrażane we wstępnie ustawionej łaźni wodnej o temperaturze 37 °C przez 40 do 60 sekund. Po pozostawieniu niewielkiej bryły lodu, komórki są dodawane do świeżego podłoża hodowlanego i odwirowywane w celu usunięcia zamrożonych elementów podłoża. Następnie osad komórkowy jest ponownie zawieszany, a komórki są dozowane do kolby w celu wzrostu. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Hodowle komórkowe BxPC-3 są utrzymywane w laboratoriach o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1. |
3. linia komórkowa BxPC-3: Zalety i ograniczenia
BxPC-3 jest dobrze znaną linią komórkową gruczolakoraka trzustki związaną z kilkoma zaletami i ograniczeniami. Poniżej wymieniono kluczowe zalety i wady tej linii komórkowej.
Zalety
Główne zalety komórek BxPC-3 to:
-
Model in vitro raka trzustki
Komórki BxPC-3, pochodzące od pacjentów z gruczolakorakiem trzustki, wykazują istotne cechy, co czyni je odpowiednim modelem do badania zachowania raka trzustki in vitro.
-
Nowotworowa linia komórkowa
Komórki BxPC-3 posiadają właściwości nowotworowe i mogą tworzyć guzy po wstrzyknięciu ich myszom nagim lub myszom z obniżoną odpornością. Guzy te bardzo przypominają pierwotne guzy gruczolakoraka trzustki, dzięki czemu model ksenoprzeszczepu BxPC-3 jest idealny do badania wzrostu i progresji raka.
Ograniczenia
Ograniczenia związane z linią komórkową BxPC-3 są następujące:
-
Zanieczyszczenie krzyżowe
Linia komórkowa BxPC-3, jak każda inna, niesie ze sobą ryzyko zanieczyszczenia krzyżowego. Badacze powinni zachować ostrożność i przestrzegać ścisłych protokołów zapobiegania zanieczyszczeniom podczas pracy z tymi komórkami.
-
Wolne tempo wzrostu
Komórki BxPC-3 wykazują stosunkowo wolne tempo proliferacji, z czasem podwojenia wynoszącym od 48 do 60 godzin. Ta cecha może wymagać dłuższych okresów inkubacji dla określonych eksperymentów, potencjalnie powodując opóźnienia w postępie badań.
4. zastosowania komórek BxPC-3 w badaniach naukowych
Komórki BxPC-3 oferują wiele zastosowań w badaniach nad rakiem. Najpopularniejsze z nich to
- Badania nad rakiem trzustki: Komórki BxPC-3 imitują gruczolakoraka trzustki i dlatego są wykorzystywane do badania genetycznych i molekularnych mechanizmów leżących u podstaw rozwoju i wzrostu guza. Ponadto naukowcy odkrywają nowe biomarkery i cele terapeutyczne przy użyciu tych komórek. Co więcej, komórki BxPC-3 wykazują znaczną ekspresję czynników angiogennych, tj. interleukiny-8 (IL-8), prostaglandyny E2 (PGE2) i czynnika wzrostu śródbłonka naczyniowego (VEGF), co czyni je odpowiednimi do badania angiogenezy. W tym przypadku angiogeneza jest kluczowym procesem związanym ze wzrostem raka i przerzutami. Badanie opublikowane w 2022 roku wykazało, że nadekspresja lamininy-5 gamma-2 (LAMC2) w BxPC3 PDAC (gruczolakorak przewodowy trzustki) nasila jego nowotworzenie poprzez regulację szlaku sygnałowego BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR [2].
- Odkrywanie i rozwój leków: Linia komórkowa BxPC-3 służy jako nieoceniony model do testowania leków przeciwnowotworowych. Naukowcy badają cytotoksyczne, przeciwprzerzutowe i apoptotyczne działanie potencjalnych leków na PDAC BxPC3. W badaniu przeprowadzonym przez Alexandrię Turner i współpracowników w 2020 r. zbadano apoptotyczne właściwości ekstraktów z owoców Elaeocarpus reticulatus w komórkach raka trzustki BxPC-3 [3]. Podobnie, w 2020 r. przeprowadzono badania, które określiły potencjał przeciwnowotworowy metanolowego ekstraktu z rośliny o nazwie Oxialis obtriangulata w komórkach BxPC-3. Poza tym naukowcy zbadali również szlak mechanizmu komórkowego, poprzez który ekstrakt roślinny wywierał działanie terapeutyczne [4].
5.publikacje badawcze dotyczące komórek BxPC-3
W tej sekcji wymieniono niektóre z najczęściej cytowanych i interesujących publikacji dotyczących linii komórkowej BxPC-3.
Likokumaron indukuje śmierć komórek gruczolakoraka trzustki BxPC-3 poprzez hamowanie DYRK1A
W tej publikacji w Chemico-Biological Interactions (2020) zbadano apoptotyczne działanie naturalnego produktu, licokumaronu, na komórki raka trzustki BxPC-3.
Ten artykuł badawczy został opublikowany w Anticancer Research (2022). W badaniu zaproponowano, że hydroksychlorochina powoduje śmierć komórek BxPC3 poprzez hamowanie genu BCL-XL.
Badania te zostały opublikowane w 2020 roku w Journal of Cellular Biochemistry. W badaniu stwierdzono, że naturalny związek, salidrozyd, wykazuje działanie przeciwnowotworowe w komórkach BxPC-3 poprzez regulację kaskady sygnalizacyjnej HIF-1α (czynnik indukowany hipoksją) i LOXL2.
Artykuł opublikowany w czasopiśmie Biomedicine & Pharmacotherapy sugeruje, że ibrutynib może być stosowany jako doskonały lek radiosensybilizujący u pacjentów z rakiem trzustki. Badanie in vitro na komórkach BxPC-3 wskazuje, że zmniejsza on fosforylację EGFR BxPC3 i ekspresję pAKT oraz genów niższego szczebla regulowanych przez radioterapię.
Chelidonina indukuje apoptozę poprzez regulację GADD45a-p53 w ludzkich komórkach raka trzustki
W badaniu opublikowanym w Integrative Cancer Therapies zaproponowano, że naturalny produkt, chelidonina, wywiera działanie apoptotyczne w ludzkich komórkach trzustki BxPC-3 poprzez regulację sygnalizacji BxPC3 p53 i GADD45a.
6. zasoby dla linii komórkowej BxPC-3: Protokoły, filmy i inne
Linia komórkowa BxPC-3 ma wiele urzekających zalet, które sprawiają, że nadaje się do użytku badawczego. Wiele zasobów internetowych dotyczących linii komórkowej BxPC-3 wspomina o jej obsłudze, konserwacji i protokole transfekcjis.
- Transfekcja BxPC3: Ten film jest przewodnikiem krok po kroku do nauki protokołu transfekcji komórek BxPC-3.
Ta sekcja artykułu zawiera kilka linków wyjaśniających protokoły hodowli komórek BxPC3.
- Hodowla komórek BxPC3: Ta strona internetowa pomoże ci poznać protokoły subkulturowania i postępowania z kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi kulturami BxPC-3.
Referencje
- Kim, Y., et al., Porównawcze profilowanie proteomiczne linii komórkowych gruczolakoraka przewodowego trzustki. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Nadekspresja lamininy-5 gamma-2 promuje nowotworzenie gruczolakoraka przewodowego trzustki poprzez kaskadę EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Ekstrakty z owoców Elaeocarpus reticulatus zmniejszają żywotność i indukują apoptozę w komórkach raka trzustki in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Potencjał przeciwnowotworowy Oxialis obtriangulata w komórkach raka trzustki poprzez regulację szlaku ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.