Komórki B16 - Podstawowy przewodnik po komórkach czerniaka B16 w badaniach onkologicznych

B16 to linia komórek raka skóry (czerniaka) pochodzenia mysiego. Ta linia komórkowa jest skutecznym modelem in vitro do badania ludzkich nowotworów skóry. Jest ona często wykorzystywana do badania powstawania guzów litych i przerzutów komórek nowotworowych.

Ten artykuł pomoże ci zrozumieć podstawy linii komórkowej czerniaka B16. W szczególności omówione zostaną następujące kwestie:

1.ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej B16

W tej części artykułu omówione zostaną charakterystyczne cechy linii komórkowej czerniaka B16. Poznasz odpowiedzi na następujące często zadawane pytania. Co to jest linia komórek nowotworowych B16? Skąd pochodzą komórki B16? Jaki jest rozmiar komórek B16?

Linia komórkowa B16 została stworzona w 1954 roku. Komórki te pochodzą od myszy C57BL/6J, które spontanicznie dostały guza skóry w Jackson Laboratories w Maine.
Są to komórki nabłonkowe wytwarzające melaninę, mające zdolność do tworzenia przerzutów w śledzionie, wątrobie i płucach.
Komórki czerniaka B16 rosną jako monowarstwy i wykazują morfologię komórek nabłonkowych i wrzecionowatych.
Rozmiar linii komórek B16 wynosi około 15,4 μm.
Istnieją różne podklony komórek B16, w tym B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 i B16F10. Podklony te różnią się od macierzystych komórek B16 i zachowują pewne specyficzne cechy. Posiadają one różnice w morfologii, rozmiarze komórek i innych właściwościach. B16F10 ma wysoką zdolność do tworzenia przerzutów do płuc, a B164A5 jest najbardziej agresywną linią komórkową raka skóry w porównaniu do B16F10, B16-GMCSF i B16FLT3 [1].

animacja 3D zbliżenia rosnącego raka skóry, takiego jak czerniak złośliwy, który rozpala otaczającą tkankę.

2.informacje dotyczące hodowli linii komórkowej B16

Przed utrzymaniem lub hodowlą linii komórkowej można szukać kluczowych informacji na temat czasu podwojenia, typu komórek, pożywki wzrostowej, warunków hodowli itp. Ta sekcja zawiera wszystkie niezbędne informacje dotyczące hodowli komórek B16.

Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek B16

Czas podwojenia populacji:	Średni czas podwojenia populacji komórek B16 szacuje się na 24 godziny.
Adherentne lub w zawiesinie:	Komórki B16 są przylegające i rosną w monowarstwach.
Gęstość wysiewu:	Komórki B16 zaleca się wysiewać w gęstości od 1 do 2 x¹⁰⁴ ^komórek/cm2. Przyczepione komórki B16 są płukane 1 x PBS i odłączane od powierzchni za pomocą roztworu Accutase. Komórki są odwirowywane, a osad komórkowy jest ponownie zawieszany w pożywce wzrostowej. Później komórki te są dozowane do nowej kolby w celu wzrostu.
Pożywka wzrostowa:	Komórki B16 są hodowane w pożywce EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) zawierającej 10% płodowej surowicy bydlęcej (FBS). Pożywka powinna być odnawiana 2-3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:	Do hodowli linii komórkowej B16 stosuje się nawilżany inkubator z 5-procentowym dopływem_CO2 i temperaturą 37°C.
Przechowywanie:	Komórki te są przechowywane w temperaturze poniżej -150 °C lub w fazie pary ciekłego azotu w celu ochrony żywotności komórek.
Proces zamrażania i pożywka:	Pożywka CM-1 lub CM-ACF jest używana do zamrażania komórek B16 w procesie powolnego zamrażania.
Proces rozmrażania:	Zamrożone komórki B16 są rozmrażane w temperaturze 37 °C w łaźni wodnej zawierającej środek przeciwdrobnoustrojowy. Rozmrożone komórki mogą być bezpośrednio hodowane poprzez dozowanie ich do kolb zawierających pożywkę wzrostową. Ponadto, komórki te można odwirować w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej, a następnie hodować w nowej pożywce.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:	Linia komórkowa B16 powinna być obsługiwana lub utrzymywana w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

Półzbieżna warstwa komórek czerniaka B16 w powiększeniu 10x i 20x.

3. linia komórkowa B16: Zalety i wady

Podobnie jak inne linie komórkowe, B16 posiada unikalną mieszankę zalet i wad. W tej sekcji wymieniono kilka istotnych zalet i wad tej linii komórek czerniaka.

Zalety

B16 jest pierwszym skutecznym narzędziem mysim szeroko stosowanym w badaniach nad przerzutami ze względu na zalety, jakie oferuje. Niektóre zalety tej linii komórek raka skóry są następujące:

Łatwość hodowli	Linia komórkowa B16 jest łatwa w hodowli w laboratoriach badawczych. Jest szeroko stosowana do badania biologii komórek nowotworowych, szlaków sygnałowych i innych.
Szybki wzrost	Linia komórkowa czerniaka B16 wykazuje wysoki wskaźnik proliferacji, dzięki czemu nadaje się do badania procesów podziału i wzrostu komórek.
Nowotworowość	B16 to nowotworowa linia komórkowa o właściwościach podobnych do nowotworów, takich jak inwazja, migracja i proliferacja. Jest cenna do badania powstawania, progresji i przerzutów nowotworów.

Wady

Wady związane z linią komórkową B16 są następujące:

Brak przydatności dla ludzi	Ze względu na to, że B16 jest mysią linią komórkową czerniaka, może niedokładnie reprezentować biologię ludzkiego raka skóry, ograniczając możliwość przenoszenia wyników badań.
Heterogeniczność	Komórki B16 są heterogeniczne, wykazując różne właściwości genetyczne i fenotypowe w tej samej hodowli. Może to wpływać na wiarygodność i powtarzalność wyników.

4. zastosowania komórek B16

Linia komórkowa B16 jest szeroko stosowana w badaniach naukowych. Kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej to

Biologia nowotworów: Ta linia komórkowa mysiego raka skóry jest nowotworotwórcza i szeroko wykorzystywana do zrozumienia biologii nowotworów. Przeprowadzono kilka badań w celu zbadania mechanizmów komórkowych stojących za wzrostem, proliferacją i przerzutami komórek nowotworowych przy użyciu komórek B16. W badaniu przeprowadzonym w 2020 r. wykorzystano komórki B16 do zbadania roli długiego niekodującego RNA, LncRNA MEG3, w powstawaniu, wzroście i przerzutach czerniaka. Badanie to wykazało, że niekodujące RNA moduluje oś miRNA-21/E-Cadherin w celu stymulowania tych zdarzeń komórkowych [2]. Podobnie, przeprowadzono badania w celu zbadania potencjalnej roli sygnalizacji Notch1 w immunosupresji indukowanej nowotworem przy użyciu komórek B16 [3].
Odkrywanie leków: Komórki B16 są wykorzystywane do walidacji i testowania potencjalnych efektów terapeutycznych kandydatów na leki. W badaniu oceniano działanie przeciwnowotworowe kwasu neogambogowego, naturalnego związku, przy użyciu linii komórkowej B16. Wyniki badania wykazały, że związek ten moduluje szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR, powodując śmierć komórek nowotworowych [4]. W innym badaniu zbadano działanie przeciwczerniakowe Ginsenoside Rg3, saponiny, przy użyciu linii komórkowej B16. Badania wykazały, że ten naturalny związek powodował działanie przeciwnowotworowe poprzez obniżenie aktywności szlaków ERK i Akt [5].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305154

5.publikacje badawcze dotyczące komórek B16

Oto kilka ważnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej czerniaka B16.

LncRNA MEG3 promuje wzrost, przerzuty i powstawanie czerniaka poprzez modulowanie osi miR-21/E-kadheryny

W publikacji w czasopiśmie Cancer Cell International (2020) zaproponowano, że długi niekodujący RNA MEG3 zwiększa tworzenie, wzrost i przerzuty komórek czerniaka B16 poprzez modulację osi miRNA-21/E-kadheryny.

Nowa pochodna psoralenu - MPFC nasila melanogenezę poprzez aktywację szlaków sygnałowych p38 MAPK i PKA w komórkach B16

Ten artykuł został opublikowany w International Journal of Molecular Medicine w 2018 roku. W badaniu tym zbadano działanie melanogenne i mechanizmy pochodnej psoralenu - 4-metylo-6-fenylo-2H-furo[3,2-g] chromen-2-onu (MPFC) w komórkach B16. W badaniu zaproponowano, że pochodna ta promuje melanogenezę poprzez stymulację sygnalizacji komórkowej PKA i p38 MAPK.

Sygnalizacja Notch1 w komórkach czerniaka promowała immunosupresję indukowaną nowotworem poprzez regulację w górę TGF-β1

Badania te zostały opublikowane w 2018 roku w Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Wyniki badania sugerują, że aktywacja sygnalizacji Notch1 w komórkach B16 może zapobiegać odporności przeciwnowotworowej poprzez zwiększenie ekspresji genu TGF-β1.

Kwas neogambogowy indukuje apoptozę komórek czerniaka B16 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR

Badanie to zostało przeprowadzone przez Chunlana Wu i jego współpracowników w 2020 roku i opublikowane w czasopiśmie Acta Biochimica Polonica. Badania te stwierdzają, że kwas neogambogowy, naturalny związek, może powodować śmierć komórek czerniaka B16 poprzez modulację kaskady sygnalizacyjnej PI3K/Akt/mTOR.

Kompleks irydu (III) jako silny środek przeciwnowotworowy indukuje apoptozę i autofagię w komórkach B16 poprzez hamowanie szlaku AKT/mTOR

Ten artykuł badawczy został opublikowany w European Journal of Medicinal Chemistry w 2018 roku. W badaniu tym naukowcy zbadali aktywność przeciwnowotworową związku, kompleksu irydu (III), przy użyciu komórek czerniaka B16.

Ailanton indukuje zatrzymanie cyklu komórkowego i apoptozę w komórkach czerniaka B16 i A375

W badaniu tym zaproponowano, że bioaktywny roślinny ailanton ma potencjał przeciwnowotworowy, ponieważ może indukować apoptozę i zatrzymanie cyklu komórkowego w komórkach czerniaka B16 i A375. Artykuł został opublikowany w Biomolecules w 2019 roku.

6. zasoby dla linii komórkowej B16: Protokoły, filmy i nie tylko

Istnieją ograniczone zasoby dotyczące linii komórkowej B16 wyjaśniające protokoły jej hodowli i transfekcji.

Hodowla komórek czerniaka: Ten film zawiera cenne wskazówki dotyczące hodowli linii komórkowych czerniaka.
Subkultura linii komórkowej: Ten film wyjaśnia ogólny protokół podhodowli linii komórkowej.
Transfekcja linii komórkowej B16F10: Ten film wyjaśnia protokół transfekcji dla podlinii komórek czerniaka B16. Może to pomóc w optymalizacji protokołu transfekcji komórek B16.

Poniżej przedstawiono niektóre protokoły hodowli komórek B16.

Hodowla komórek B16: Ta strona internetowa zawiera wszystkie niezbędne informacje dotyczące hodowli komórek B16, w tym pożywki, podhodowli, rozmrażania i zamrażania komórek.

Odniesienia

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J skin. International Journal of Experimental Patology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 promuje wzrost, przerzuty i powstawanie czerniaka poprzez modulowanie osi miR-21/E-kadheryny. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Sygnalizacja Notch1 w komórkach czerniaka promuje immunosupresję indukowaną nowotworem poprzez regulację w górę TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Kwas neogambogowy indukuje apoptozę komórek czerniaka B16 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Aktywność przeciwnowotworowa ginsenozydu Rg3 w czerniaku poprzez obniżenie regulacji szlaków ERK i Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.