Komórki B16 – podstawowy przewodnik po komórkach czerniaka B16 w badaniach onkologicznych

B16 to linia komórkowa raka skóry (czerniaka) pochodzenia mysiego. Linia ta stanowi skuteczny model in vitro do badania nowotworów skóry u ludzi. Jest często wykorzystywana do badania powstawania guzów litych i przerzutów komórek nowotworowych.

📋 Linia komórkowa B16 — najważniejsze informacje

Pożywka: Komórki B16 hoduje się w pożywce EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) zawierającej 10% surowicy płodowej bydlęcej (FBS). Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Czas podwojenia: Średni czas podwojenia populacji komórek B16 szacuje się na 24 godziny.
Typ wzrostu: Komórki B16 są komórkami przylegającymi i rosną w monowarstwach.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: BSL-1
Dostępne w: Cytion — Zamów B16

Ten artykuł pomoże Ci zrozumieć podstawowe informacje na temat linii komórkowej czerniaka B16. W szczególności omówi następujące kwestie:

📋 Spis treści

Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej B16
Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej B16
Linia komórkowa B16: zalety i wady
Zastosowania komórek B16
5. Publikacje naukowe dotyczące komórek B16
Materiały dotyczące linii komórkowej B16: protokoły, filmy i inne
Często zadawane pytania

Ogólna charakterystyka i pochodzenie linii komórkowej B16

W tej części artykułu omówimy cechy charakterystyczne linii komórkowej czerniaka B16. Znajdziesz tu odpowiedzi na najczęściej zadawane pytania, takie jak: Czym jest linia komórkowa nowotworowa B16? Skąd pochodzą komórki B16? Jakie są wymiary komórek B16?

Linia komórkowa B16 została utworzona w 1954 roku. Komórki te pochodzą od myszy C57BL/6J, u których spontanicznie pojawił się nowotwór skóry w Jackson Laboratories w stanie Maine.
Są to komórki nabłonkowe wytwarzające melaninę, które mają zdolność do tworzenia przerzutów w śledzionie, wątrobie i płucach.
Komórki czerniaka B16 rosną w postaci monowarstw i wykazują morfologię komórek nabłonkowych oraz wrzecionowatą.
Rozmiar komórek linii B16 wynosi około 15,4 μm.
Istnieją odrębne subklony komórek B16, w tym B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 i B16F10. Te sublinie różnią się od macierzystych komórek B16 i zachowują pewne specyficzne cechy. Na przykład różnią się one morfologią, wielkością komórek i innymi właściwościami. B16F10 charakteryzuje się wysoką zdolnością do tworzenia przerzutów w płucach, a B164A5 jest najbardziej agresywną linią komórek raka skóry w porównaniu z B16F10, B16-GMCSF i B16FLT3 [1].

Animacja 3D przedstawiająca zbliżenie rozwijającego się nowotworu skóry, takiego jak czerniak złośliwy, który powoduje stan zapalny otaczających tkanek.

Informacje dotyczące hodowli linii komórkowej B16

Przed rozpoczęciem hodowli linii komórkowej warto zapoznać się z kluczowymi informacjami dotyczącymi czasu podwojenia, typu komórek, pożywek wzrostowych, warunków hodowli itp. Niniejsza sekcja zawiera wszystkie niezbędne informacje dotyczące hodowli komórek B16.

Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek B16

Czas podwojenia populacji:: Szacuje się, że średni czas podwojenia populacji komórek B16 wynosi 24 godziny.
Komórki przylegające lub w zawiesinie:: Komórki B16 są komórkami przylegającymi i rosną w monowarstwach.
Gęstość wysiewu:: Zaleca się wysiew komórek B16 w gęstości od 1 do 2 x 10⁴ komórek/cm². Przylegające komórki B16 płucze się 1 x PBS i oddziela od powierzchni za pomocą roztworu Accutase. Komórki odwirowuje się, a osad komórkowy zawiesza ponownie w pożywce wzrostowej. Następnie komórki te są przenoszone do nowej kolby w celu wzrostu.
Pożywka wzrostowa:: Komórki B16 hoduje się w pożywce EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) zawierającej 10% surowicy płodowej bydlęcej (FBS). Pożywkę wzrostową należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki hodowli:: Do hodowli linii komórkowej B16 stosuje się inkubator z nawilżaniem, z dopływem 5% CO₂ i temperaturą 37°C.
Przechowywanie:: Komórki te przechowuje się w temperaturze poniżej -150 °C lub w fazie gazowej ciekłego azotu w celu zachowania ich żywotności.
Proces zamrażania i pożywka:: Do zamrażania komórek B16 w procesie powolnego zamrażania stosuje się pożywkę CM-1 lub CM-ACF.
Proces rozmrażania:: Zamrożone komórki B16 rozmraża się w temperaturze 37 °C w łaźni wodnej zawierającej środek przeciwbakteryjny. Rozmrożone komórki można bezpośrednio hodować, umieszczając je w kolbach zawierających pożywkę wzrostową. Ponadto komórki te można odwirować w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej, a następnie hodować w nowej pożywce.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:: Linia komórkowa B16 powinna być obsługiwana lub utrzymywana w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.

B16 cells

Półzlewająca się warstwa komórek czerniaka B16 w powiększeniu 10x i 20x.

Linia komórkowa B16: zalety i wady

Podobnie jak inne linie komórkowe, B16 charakteryzuje się specyficznym zestawem zalet i wad. W niniejszym rozdziale wymieniono niektóre istotne zalety i wady tej linii komórkowej czerniaka.

Zalety

B16 jest pierwszym skutecznym narzędziem mysim szeroko stosowanym w badaniach nad przerzutami ze względu na oferowane przez nią zalety. Niektóre zalety tej linii komórkowej raka skóry to:

Łatwość hodowli: Linia komórkowa B16 jest łatwa w hodowli w laboratoriach badawczych. Jest szeroko stosowana do badania biologii komórek nowotworowych, szlaków sygnałowych i nie tylko.
Szybki wzrost: Linia komórkowa czerniaka B16 charakteryzuje się wysokim tempem proliferacji, co sprawia, że nadaje się do badania procesów podziału i wzrostu komórek.
Tumorogenność: B16 to linia komórkowa o właściwościach nowotworowych, takich jak inwazja, migracja i proliferacja. Jest cenna w badaniach nad powstawaniem nowotworów, ich progresją i przerzutami.

Wady

Wady związane z linią komórkową B16 to:

Brak znaczenia dla człowieka: Ponieważ B16 jest mysią linią komórkową czerniaka, może nie odzwierciedlać dokładnie biologii ludzkiego raka skóry, co ogranicza możliwość przełożenia wyników badań na praktykę kliniczną.
Heterogeniczność: Komórki B16 są heterogeniczne, wykazując zróżnicowane właściwości genetyczne i fenotypowe w obrębie tej samej hodowli. Może to wpływać na wiarygodność i powtarzalność wyników.

Zastosowania komórek B16

Linia komórkowa B16 jest szeroko stosowana w badaniach naukowych. Kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej to:

Biologia nowotworów: Ta mysia linia komórek raka skóry ma właściwości nowotworowe i jest szeroko stosowana do badania biologii nowotworów. Przeprowadzono kilka badań mających na celu zbadanie mechanizmów komórkowych leżących u podstaw wzrostu, proliferacji i przerzutów komórek nowotworowych z wykorzystaniem komórek B16. W badaniu przeprowadzonym w 2020 r. wykorzystano komórki B16 do zbadania roli długiego niekodującego RNA, LncRNA MEG3, w powstawaniu, wzroście i przerzutach czerniaka. Badania te wykazały, że niekodujący RNA moduluje oś miRNA-21/E-kadheryna, stymulując te procesy komórkowe [2]. Podobnie przeprowadzono badania mające na celu zbadanie potencjalnej roli sygnalizacji Notch1 w immunosupresji wywołanej przez nowotwór z wykorzystaniem komórek B16 [3].
Odkrywanie leków: Komórki B16 są wykorzystywane do weryfikacji i testowania potencjalnych efektów terapeutycznych potencjalnych leków. W jednym z badań oceniano działanie przeciwnowotworowe kwasu neogambogowego, związku naturalnego, z wykorzystaniem linii komórkowej B16. Wyniki badania wykazały, że związek ten moduluje szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR, powodując śmierć komórek nowotworowych [4]. W innym badaniu zbadano działanie przeciwnowotworowe ginsenozydu Rg3, saponiny, przy użyciu linii komórkowej B16. Badanie sugerowało, że ten naturalny związek wykazuje działanie przeciwnowotworowe poprzez hamowanie szlaków ERK i Akt [5].

430,00 €*

Treść: 1.5 milliliter

Ceny bez podatków plus koszty wysyłki

cryovial

Numer produktu: 305154

5. Publikacje naukowe dotyczące komórek B16

Oto kilka istotnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej czerniaka B16.

LncRNA MEG3 sprzyja wzrostowi, przerzutom i powstawaniu czerniaka poprzez modulowanie osi miR-21/E-kadheryna

W publikacji w czasopiśmie Cancer Cell International (2020) wysunięto hipotezę, że długie niekodujące RNA MEG3 wzmacnia powstawanie, wzrost i przerzuty komórek czerniaka B16 poprzez modulowanie osi miRNA-21/E-kadheryna.

Nowatorska pochodna psoralenu – MPFC – wzmacnia melanogenezę poprzez aktywację szlaków sygnałowych p38 MAPK i PKA w komórkach B16

Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „International Journal of Molecular Medicine” w 2018 r. W badaniu tym analizowano działanie melanogeniczne i mechanizmy działania pochodnej psoralenu – 4-metylo-6-fenylo-2H-furo[3,2-g]chromen-2-onu (MPFC) – w komórkach B16. W badaniu wysunięto hipotezę, że pochodna ta sprzyja melanogenezie poprzez stymulację szlaków sygnałowych PKA i p38 MAPK w komórkach.

Sygnalizacja Notch1 w komórkach czerniaka sprzyjała indukowanej przez nowotwór immunosupresji poprzez regulację w górę TGF-β1

Badanie to zostało opublikowane w 2018 roku w czasopiśmie „Journal of Experimental & Clinical Cancer Research”. Wyniki badania sugerują, że aktywacja szlaku sygnałowego Notch1 w komórkach B16 może hamować odporność przeciwnowotworową poprzez zwiększenie ekspresji genu TGF-β1.

Kwas neogambogowy indukuje apoptozę komórek czerniaka B16 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR

Badanie to zostało przeprowadzone przez Chunlana Wu i jego współpracowników w 2020 roku i opublikowane w czasopiśmie „Acta Biochimica Polonica”. Badanie to wskazuje, że kwas neogambogowy, związek naturalny, może powodować śmierć komórek czerniaka B16 poprzez modulowanie kaskady sygnałowej PI3K/Akt/mTOR.

Kompleks irydu (III) jako silny środek przeciwnowotworowy indukuje apoptozę i autofagię w komórkach B16 poprzez hamowanie szlaku AKT/mTOR

Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „European Journal of Medicinal Chemistry” w 2018 roku. W badaniu tym naukowcy zbadali działanie przeciwnowotworowe związku, jakim jest kompleks irydu (III), wykorzystując komórki czerniaka B16.

Ailantona indukuje zatrzymanie cyklu komórkowego i apoptozę w komórkach czerniaka B16 i A375

W badaniu tym wysunięto hipotezę, że bioaktywna substancja pochodzenia roślinnego, ailantona, ma potencjał przeciwnowotworowy, ponieważ może wywoływać apoptozę i zatrzymanie cyklu komórkowego w komórkach czerniaka B16 i A375. Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Biomolecules” w 2019 roku.

Materiały dotyczące linii komórkowej B16: protokoły, filmy i inne

Istnieje niewiele materiałów dotyczących linii komórkowej B16, wyjaśniających protokoły jej hodowli i transfekcji.

Hodowla komórek czerniaka: Ten film zawiera cenne wskazówki dotyczące hodowli linii komórkowych czerniaka.
Subkulturowanie linii komórkowej: Ten film wyjaśnia ogólny protokół subkulturowania linii komórkowej.
Transfekcja linii komórkowej B16F10: Ten film wyjaśnia protokół transfekcji podlinii komórek czerniaka B16. Może pomóc w optymalizacji protokołu transfekcji komórek B16.

Poniżej przedstawiono kilka protokołów hodowli komórek B16.

Hodowla komórek B16: Ta strona internetowa zawiera wszystkie niezbędne informacje dotyczące hodowli komórek B16, w tym pożywki wzrostowe, subkultury, rozmrażanie i zamrażanie komórek.

Referencje

Danciu, C. i in., Zachowanie czterech różnych podlinii mysich komórek czerniaka B 16: skóra C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): s. 73-80.
Wu, L. i in., LncRNA MEG3 sprzyja wzrostowi, przerzutom i powstawaniu czerniaka poprzez modulowanie osi miR-21/E-kadheryna. Cancer cell international, 2020. 20: s. 1-14.
Yang, Z. i in., Sygnalizacja Notch1 w komórkach czerniaka sprzyjała indukowanej przez nowotwór immunosupresji poprzez regulację w górę TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): s. 1-13.
Wu, C. i in., Kwas neogambogowy indukuje apoptozę komórek czerniaka B16 poprzez szlak sygnałowy PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197-202.
Meng, L. i in., Działanie przeciwnowotworowe ginsenozydu Rg3 w czerniaku poprzez hamowanie szlaków ERK i Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): s. 2069-2079.