Komórki B16-F10 - badanie linii komórek czerniaka B16-F10 w badaniach nad przerzutami
KomórkiB16-F10 stanowią linię komórek czerniaka pochodzącą od myszy C57BL/6J. Są one szeroko stosowane w badaniach nad rakiem skóry. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania rozwoju i progresji nowotworu oraz interwencji terapeutycznych. Niniejszy artykuł obejmuje podstawowe aspekty komórek czerniaka B16-F10. W szczególności będzie on obejmował
- Pochodzenie i ogólną charakterystykę linii komórkowej B16-F10
- Informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
- Komórki B16-F10: Zalety i wady
- Zastosowania badawcze komórek B16-F10
- Publikacje dotyczące linii komórkowej B16-F10
- Zasoby dotyczące linii komórkowej B16-F10: Protokoły, filmy i nie tylko
1. Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej B16-F10
Ta sekcja zawiera informacje na temat pochodzenia i charakterystycznych cech komórek nowotworowych czerniaka B16-F10. Pomoże to w efektywnym wykorzystaniu tej linii komórkowej w pracy badawczej. Dowiesz się przede wszystkim: Czym są komórki B16-F10? Z czego wywodzi się B16F10? Jaka jest morfologia linii komórkowej B16F12? Jaki jest rozmiar komórki B16F10?
- B16-F10 to podklon linii komórek nowotworowych B16 pochodzących z tkanki skórnej myszy C57BL/6J. W tym przypadku komórki czerniaka B16F10 zostały opracowane po dożylnym wstrzyknięciu linii B16 myszom z obniżoną odpornością lub syngenicznym. Komórki te zostały wybrane ze względu na ich potencjał do tworzenia kolonii przerzutowych w płucach in vivo, a następnie utworzone po dziesięciu cyklach tworzenia kolonii w płucach in vitro [1]. Zostały one opracowane przez Fidlera i współpracowników w 1976 roku.
- Linie komórkowe B16-F10 mają nabłonkowy i wrzecionowaty wygląd.
- Przybliżony rozmiar komórek B16-F10 wynosi 15,4 ± 1,4 μm [2].
Komórki B16-F1 i B16-F10
Komórki B16-F1 i B16-F10 pochodzą z macierzystej linii komórkowej B16. Obie powstały w tym samym miejscu i mają prawie podobne cechy. Jednak główną różnicą jest ich zdolność do tworzenia przerzutów. Komórki B16-F10 mają wysoki, a B16-F1 niski potencjał przerzutowy [3].
2.informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
Przed przystąpieniem do obsługi i hodowli linii komórkowej należy poznać jej czas podwojenia, pożywki wzrostowe, warunki i protokoły hodowli komórkowej. W tej sekcji omówimy: Jaki jest czas podwojenia komórek b16-f10? Jak hodować komórki B16-F10? Jakie jest podłoże dla komórek B16-F10? Jakie warunki hodowli są zalecane dla komórek B16-F10?
Kluczowe punkty dotyczące hodowli komórek B16-F10
|
Czas podwojenia: |
Czas podwojenia komórek B16-F10 wynosi około 20,1 godziny. Może on wynosić od 17 do 21 godzin, w zależności od warunków hodowli. |
|
Przylegające lub w zawiesinie: |
B16-F10 jest linią komórek przylegających. Komórki rosną szybko i tworzą monowarstwy. |
|
Współczynnik podziału: |
Komórki B16-F10 są subkulturowane w stosunku podziału od 1:2 do 1:4. Komórki są płukane buforem fosforanowym (1x), a następnie inkubowane z roztworem pasażującym Accutase przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane. Zebrany osad komórkowy jest ponownie zawieszany, a komórki są przenoszone do nowej kolby zawierającej świeże podłoże hodowlane zgodnie ze stosunkiem podziału. |
|
Pożywka hodowlana: |
Komórki B16-F10 są hodowane w pożywce DMEM. Pożywka jest uzupełniona 10% FBS, 4 mM L-glutaminą, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L glukozą i 1,0 mM pirogronianem sodu dla idealnego wzrostu komórek. Pożywka powinna być wymieniana 2-3 razy w tygodniu. |
|
Warunki wzrostu: |
Komórki B16-F10 są hodowane w nawilżanym inkubatorze w temperaturze 37 °C z 5% podażą CO2. |
|
Przechowywanie: |
Zamrożone komórki są przechowywane w temperaturze poniżej -150 °C w elektrycznej zamrażarce niskotemperaturowej lub w fazie gazowej ciekłego azotu w celu utrzymania żywotności komórek. |
|
Proces zamrażania i pożywka: |
Komórki B16-F10 są zamrażane w podłożu CM-1 lub CM-ACF do przechowywania. W tym celu zaleca się powolny proces zamrażania, który pozwala tylko na spadek temperatury o 1°C na minutę, aby zapobiec szokowi komórek. |
|
Proces rozmrażania: |
Zamrożone komórki B16-F10 są rozmrażane we wstępnie ustawionej łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez 40 do 60 sekund. Następnie komórki są dodawane do świeżej pożywki i odwirowywane w celu usunięcia składników pożywki zamrażającej. Zebrane komórki są ponownie zawieszane w pożywce wzrostowej i wlewane do kolb w celu hodowli. |
|
Poziom bezpieczeństwa biologicznego: |
Do obsługi i utrzymania linii komórkowej B16-F10 wymagane jest laboratorium poziomu bezpieczeństwa biologicznego 1. |
3.komórki B16-F10: Zalety i wady
Podobnie jak inne linie komórkowe, B16-F10 również wykazuje pewne zalety i wady. Niektóre istotne zalety i wady tej linii komórek czerniaka skóry zostały omówione w tej sekcji.
Zalety
Linia komórkowa B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem. Zalety komórek B16-F10 są następujące:
|
Potencjał przerzutowy |
Komórki czerniaka skóry B16-F10 wykazują wysoki potencjał przerzutowy, co czyni je cennymi w badaniach nad przerzutami raka i mechanizmami leżącymi u ich podstaw. |
|
Model nowotworu in vitro |
Komórki B16-F10 służą jako model in vitro do badania progresji i wzrostu nowotworu, pomagając naukowcom zrozumieć komórkowe i molekularne mechanizmy napędzające raka. |
Wady
Wady związane z linią komórkową B16-F10 są następujące:
|
Linia komórkowa pochodząca od myszy |
B16-F10 to linia komórkowa pochodząca od myszy, co ogranicza jej zastosowanie do badań na ludziach. Wyniki badań przeprowadzonych na tych komórkach nie zawsze przekładają się na biologię człowieka. |
4.zastosowania badawcze komórek B16-F10
Linia komórkowa B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem. Poniżej omówiono kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej.
- Badania nad rakiem: Linia komórkowa B16-F10 jest cennym modelem do badania procesów zachodzących w komórkach nowotworowych, w tym proliferacji, inwazji, migracji i śmierci komórek lub apoptozy. Poza tym pomaga naukowcom uzyskać wgląd w mechanizmy molekularne i szlaki napędzające te procesy komórkowe. W badaniu przeprowadzonym w 2018 roku zbadano rolę CCR5 (receptora chemokiny C-C typu piątego) w przejściu komórek czerniaka z komórek nabłonkowych do mezenchymalnych i przerzutach. Odkrycia wykazały, że niedobór CCR5 ogranicza wzrost guza i przerzuty, podczas gdy wysoka ekspresja prowadzi do zwiększonego wzrostu i przerzutów komórek B16-F10. Dalsze badania wykazały, że CCR5 reguluje ekspresję TGFβ1, który reguluje sygnalizację PI3K/AKT/GSK3β w celu promowania przejścia nabłonkowego do mezenchymalnego i migracji komórek [4].
- Testowanie i rozwój leków: Komórki nowotworowe czerniaka B16F10 są bardzo agresywne i dlatego nadają się do testowania potencjalnych leków i terapii przeciwnowotworowych. Naukowcy wykorzystują te komórki i oceniają wpływ różnych związków na wzrost komórek, proliferację i przerzuty, wspomagając opracowywanie leków. W badaniu przeprowadzonym w 2018 r. przez Valentinę Nanni i współpracowników zbadano działanie terapeutyczne ekstraktu wodno-alkoholowego z kwiatów Spartium junceum . W badaniu zaproponowano, że ekstrakt z kwiatów był skuteczny w indukowaniu starzenia się komórek B16-F10, co prowadzi do wzrostu komórek i tłumienia melanogenezy, dzięki czemu może wywierać potencjalne działanie przeciwnowotworowe [5].
5.publikacje z udziałem linii komórkowej B16-F10
Oto kilka ważnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej czerniaka B16-F10:
Badanie to zostało opublikowane w Nutrients (2020). Zaproponowano w nim, że etanolowy ekstrakt z Sorghum bicolor ma działanie anty melanogenne w komórkach czerniaka skóry B16F10.
Kalcytriol hamuje proliferację i potencjalnie indukuje apoptozę w komórkach B16-F10
Badania opublikowane w Medical Science Monitor Basic Research (2022) wykazały, że kalcytriol wywiera działanie przeciwnowotworowe w komórkach czerniaka B16-F10 poprzez hamowanie proliferacji i indukowanie apoptozy.
Ten artykuł został opublikowany w Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Odkrycia ujawniły, że kardole, lipidy rezorcynolowe, wywierają intensywną cytotoksyczność na linię komórkową B16-F10.
W badaniu opublikowanym w Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) zbadano potencjał przeciwprzerzutowy ekstraktu z egzokarpu miłorzębu japońskiego przy użyciu komórek B16-F10.
W badaniu opublikowanym w World Neurosurgery (2018) zaproponowano, że tymochinon może być skuteczną terapią przeciwko śródmózgowym zmianom przerzutowym, ponieważ hamuje wzrost komórek B16-F10 i indukuje apoptozę.
6.zasoby dla linii komórkowej B16-F10: Protokoły, filmy i więcej
Komórki śródbłonka B16-F10 są szeroko stosowane w badaniach nad rakiem skóry. Oto kilka zasobów internetowych wyjaśniających protokoły ich hodowli i transfekcji:
- Transfekcja komórek czerniaka B16F10: Ten samouczek wideo może pomóc w zapoznaniu się z protokołem transfekcji komórek B16-F10.
- Transfekcja B16-F10: Ten dokument wyjaśnia protokół transfekcji DNA in vitro komórek czerniaka skóry B16F10.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek B16-F10:
- Podhodowla B16-F10: Ta strona internetowa zawiera pomocne informacje na temat komórek nowotworowych czerniaka B16F10. Obejmuje ona pożywki wzrostowe, czas podwojenia, warunki hodowli i protokół subkulturowania komórek oraz postępowanie z kulturami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.
Referencje
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines: C57BL/6J skin. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalkoholowy ekstrakt z kwiatów Spartium junceum L. hamuje wzrost i melanogenezę w komórkach B16-F10 poprzez indukowanie starzenia. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.