Komórki B16-F10 – badanie linii komórkowej czerniaka B16-F10 w badaniach nad przerzutami
Komórki B16-F10 stanowią linię komórkową czerniaka pochodzącą od myszy C57BL/6J. Są one szeroko stosowane w badaniach nad rakiem skóry. Naukowcy wykorzystują te komórki do badania rozwoju i progresji nowotworów oraz interwencji terapeutycznych. Niniejszy artykuł omówi podstawowe aspekty komórek czerniaka B16-F10. W szczególności zawiera on:
- Pożywka
- Komórki B16-F10 są hodowane w pożywce DMEM. Pożywka jest uzupełniona 10% FBS, 4 mM L-glutaminą, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l glukozą i 1,0 mM pirogronianem sodu w celu zapewnienia idealnych warunków wzrostu komórek. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
- Czas podwojenia
- Czas podwojenia komórek B16-F10 wynosi około 20,1 godziny. Może on wynosić od 17 do 21 godzin, w zależności od warunków hodowli.
- Typ wzrostu
- B16-F10 to linia komórek adhezyjnych. Komórki rosną szybko i tworzą monowarstwy.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- BSL-1
- Dostępne w
- Cytion — Zamów B16-F10
- Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej B16-F10
- Informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
- Komórki B16-F10: zalety i wady
- Zastosowania badawcze komórek B16-F10
- Publikacje dotyczące linii komórkowej B16-F10
- Materiały dotyczące linii komórkowej B16-F10: protokoły, filmy i inne
- Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej B16-F10
- Informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
- Komórki B16-F10: zalety i wady
- Zastosowania badawcze komórek B16-F10
- 5. Publikacje dotyczące linii komórkowej B16-F10
- Materiały dotyczące linii komórkowej B16-F10: protokoły, filmy i inne
- Często zadawane pytania
Pochodzenie i ogólna charakterystyka linii komórkowej B16-F10
W tej sekcji znajdziesz informacje na temat pochodzenia i charakterystycznych cech komórek nowotworowych czerniaka B16F10. Pomoże Ci to efektywnie wykorzystać tę linię komórkową w Twoich badaniach. Dowiedziesz się przede wszystkim: Czym są komórki B16-F10? Skąd pochodzi B16F10? Jaka jest morfologia linii komórkowej B16F12? Jaka jest wielkość komórki B16F10?
- B16-F10 to subklon linii komórek nowotworowych B16 pochodzących z tkanki skóry myszy C57BL/6J. Komórki czerniaka B16F10 zostały wyhodowane po dożylnym wstrzyknięciu linii B16 myszom z obniżoną odpornością lub myszom syngenicznym. Komórki te zostały wyselekcjonowane ze względu na ich potencjał do tworzenia przerzutowych kolonii w płucach in vivo, a następnie ustanowione po dziesięciu cyklach tworzenia kolonii w płucach in vitro [1]. Została ona opracowana przez Fidlera i współpracowników w 1976 roku.
- Linie komórkowe B16-F10 mają wygląd podobny do komórek nabłonkowych i są wrzecionowate.
- Przybliżony rozmiar komórek B16-F10 wynosi 15,4 ± 1,4 μm [2].
Komórki B16-F1 i B16-F10
Komórki B16-F1 i B16-F10 pochodzą z macierzystej linii komórkowej B16. Obie wywodzą się z tego samego źródła i mają niemal identyczne cechy. Główna różnica polega jednak na ich zdolności do tworzenia przerzutów. Komórki B16-F10 mają wysoki potencjał przerzutowy, podczas gdy komórki B16-F1 mają niski [3].
Informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
Przed rozpoczęciem pracy z linią komórkową i jej hodowlą należy zapoznać się z czasem podwojenia, pożywkami, warunkami oraz protokołami hodowli komórek. W tej sekcji omówimy: Jaki jest czas podwojenia komórek B16-F10? Jak hoduje się komórki B16-F10? Jakie są pożywki do komórek B16-F10? Jakie warunki hodowli są zalecane dla komórek B16-F10?
Kluczowe informacje dotyczące hodowli komórek B16-F10
Czas podwojenia:
Czas podwojenia komórek B16-F10 wynosi około 20,1 godziny. Może on wynosić od 17 do 21 godzin, w zależności od warunków hodowli.
Komórki przylegające lub w zawiesinie:
B16-F10 to linia komórek przylegających. Komórki rosną szybko i tworzą monowarstwy.
Współczynnik podziału:
Komórki B16-F10 są subkultywowane przy współczynniku podziału od 1:2 do 1:4. Komórki są przemywane buforem fosforanowo-solnym (1x), a następnie inkubowane z roztworem do pasażowania Accutase przez 8 do 10 minut w temperaturze otoczenia. Do komórek dodaje się świeżą pożywkę i odwirowuje. Zebrany osad komórkowy ponownie zawiesza się, a komórki rozdziela się do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę zgodnie ze współczynnikiem podziału.
Pożywka wzrostowa:
Komórki B16-F10 hoduje się w pożywce DMEM. Pożywkę uzupełnia się 10% FBS, 4 mM L-glutaminą, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l glukozą i 1,0 mM pirogronianem sodu w celu zapewnienia idealnych warunków wzrostu komórek. Pożywkę należy wymieniać 2–3 razy w tygodniu.
Warunki wzrostu:
Komórki B16-F10 hoduje się w inkubatorze z nawilżaniem w temperaturze 37 °C przy stężeniu CO2 wynoszącym 5%.
Przechowywanie:
Zamrożone komórki przechowuje się w temperaturze poniżej -150 °C w elektrycznej zamrażarce ultra-niskotemperaturowej lub w fazie gazowej ciekłego azotu w celu zachowania żywotności komórek.
Proces zamrażania i pożywka:
Komórki B16-F10 zamraża się w pożywkach CM-1 lub CM-ACF w celu przechowywania. W tym celu zaleca się powolny proces zamrażania, który pozwala na spadek temperatury o zaledwie 1°C na minutę, aby zapobiec szokowi termicznemu komórek.
Proces rozmrażania:
Zamrożone komórki B16-F10 rozmraża się w ściśle ustawionej łaźni wodnej o temperaturze 37°C przez 40 do 60 sekund. Następnie komórki dodaje się do świeżego podłoża i odwirowuje w celu usunięcia składników podłoża zamrażającego. Zebrane komórki zawiesza się ponownie w podłożu wzrostowym i przelewa do kolb w celu hodowli.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego:
Do obsługi i utrzymywania linii komórkowej B16-F10 wymagane jest laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 1.
Komórki B16-F10: zalety i wady
Podobnie jak inne linie komórkowe, B16-F10 również ma pewne zalety i wady. W tej sekcji omówiono niektóre istotne zalety i wady tej linii komórkowej czerniaka skóry.
Zalety
Linia komórkowa B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem. Zalety komórek B16-F10 to:
Potencjał przerzutowy
Komórki czerniaka skóry B16F10 wykazują wysoki potencjał przerzutowy, co czyni je cennymi w badaniach nad przerzutami nowotworowymi i leżącymi u ich podstaw mechanizmami.
Model nowotworu in vitro
Komórki B16-F10 służą jako model in vitro do badania progresji i wzrostu nowotworów, pomagając naukowcom zrozumieć mechanizmy komórkowe i molekularne leżące u podstaw nowotworów.
Wady
Wady związane z linią komórkową B16-F10 to:
Linia komórkowa pochodzenia mysiego
B16-F10 to linia komórkowa pochodząca od myszy, co ogranicza jej zastosowanie w badaniach dotyczących wyłącznie ludzi. Wyniki badań nad tymi komórkami nie zawsze mogą być w pełni przełożone na biologię człowieka.
Zastosowania badawcze komórek B16-F10
Linia komórkowa B16-F10 jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem. Poniżej omówiono kilka obiecujących zastosowań tej linii komórkowej.
- Badania nad rakiem: Linia komórkowa B16-F10 stanowi cenny model do badania procesów zachodzących w komórkach nowotworowych, w tym proliferacji, inwazji, migracji oraz śmierci komórkowej lub apoptozy. Ponadto pomaga naukowcom w uzyskaniu wglądu w mechanizmy molekularne i szlaki regulujące te procesy komórkowe. W badaniu przeprowadzonym w 2018 r. zbadano rolę CCR5 (receptora chemokinowego typu C-C nr 5) w przejściu komórek czerniaka z epitelialnych do mezenchymalnych oraz w przerzutach. Wyniki badań wykazały, że niedobór CCR5 ogranicza wzrost guza i przerzuty, podczas gdy wysoka ekspresja prowadzi do wzmożonego wzrostu i przerzutów komórek B16-F10. Dalsze badania wykazały, że CCR5 reguluje ekspresję TGFβ1, który z kolei reguluje szlak sygnałowy PI3K/AKT/GSK3β, sprzyjając przejściu nabłonkowo-mezenchymalnemu i migracji komórek [4].
- Badania i rozwój leków: Komórki nowotworowe czerniaka B16F10 są wysoce agresywne, a zatem nadają się do testowania potencjalnych leków przeciwnowotworowych i metod leczenia. Naukowcy wykorzystują te komórki i oceniają wpływ różnych związków na wzrost komórek, proliferację i przerzuty, co pomaga w opracowywaniu leków. W badaniu przeprowadzonym w 2018 roku przez Valentinę Nanni i współpracowników zbadano działanie terapeutyczne wodno-alkoholowego wyciągu z kwiatów Spartium junceum. W badaniu stwierdzono, że ekstrakt z kwiatów skutecznie indukował starzenie się komórek B16-F10, co prowadzi do zahamowania wzrostu komórek i melanogenezy, a tym samym może wykazywać potencjalne działanie przeciwnowotworowe [5].
5. Publikacje dotyczące linii komórkowej B16-F10
Oto kilka istotnych publikacji naukowych dotyczących linii komórkowej czerniaka B16-F10:
Badanie to zostało opublikowane w czasopiśmie „Nutrients” (2020). Sugeruje ono, że ekstrakt etanolowy z Sorghum bicolor wykazuje działanie przeciwmelanogenne w komórkach czerniaka skóry B16F10.
Kalcytriool hamuje proliferację i potencjalnie indukuje apoptozę w komórkach B16–F10
Badania opublikowane w czasopiśmie „Medical Science Monitor Basic Research” (2022) sugerują, że kalcytriol wywiera działanie przeciwnowotworowe w komórkach czerniaka B16-F10 poprzez hamowanie proliferacji i indukowanie apoptozy.
Artykuł ten został opublikowany w czasopiśmie „Biochemical and Biophysical Research Communications” (2022). Wyniki badań wykazały, że kardole, czyli lipidy rezorcynolowe, wywierają intensywne działanie cytotoksyczne na linię komórkową B16-F10.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine” (2018) zbadano potencjał przeciwprzerzutowy ekstraktu z egzorpatu miłorzębu japońskiego (Ginkgo biloba) na komórkach B16-F10.
W badaniu opublikowanym w czasopiśmie „World Neurosurgery” (2018) zasugerowano, że tymochinon może być skuteczną terapią przeciwko ogniskom przerzutowym w mózgu, ponieważ hamuje wzrost komórek B16-F10 i indukuje apoptozę.
Materiały dotyczące linii komórkowej B16-F10: protokoły, filmy i inne
Komórki śródbłonka B16F10 są szeroko stosowane w badaniach nad rakiem skóry. Oto kilka zasobów internetowych wyjaśniających protokoły ich hodowli i transfekcji:
- Transfekcja komórek czerniaka B16F10: ten film instruktażowy pomoże Ci poznać protokół transfekcji komórek B16-F10.
- Transfekcja B16-F10: Ten dokument wyjaśnia protokół transfekcji DNA in vitro dla komórek czerniaka skóry B16F10.
Poniższy link zawiera protokół hodowli komórek B16-F10:
- Subkultury B16-F10: Ta strona internetowa zawiera przydatne informacje na temat komórek nowotworowych czerniaka B16F10. Obejmuje ona pożywki wzrostowe, czas podwojenia, warunki hodowli i protokół subkultury komórek, a także postępowanie z hodowlami kriokonserwowanymi i proliferacyjnymi.
Referencje
- Poste, G. i in., Porównanie właściwości przerzutowych klonów czerniaka B16 izolowanych z hodowanych linii komórkowych, guzów podskórnych i pojedynczych przerzutów do płuc. Cancer Research, 1982. 42(7): s. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono i S. Sugita, Mechanofenotypowanie wariantów komórek czerniaka B16 w celu oceny skuteczności leczenia galusanem (-)-epigalokatechiny przy użyciu stożkowego urządzenia mikroprzepływowego. Micromachines, 2019. 10(3): s. 207.
- Danciu, C. i in., Zachowanie czterech różnych podlinii mysich komórek czerniaka B16: skóra C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): s. 73–80.
- Liu, J. i in., Wysoka ekspresja CCR5 w czerniaku wzmacnia przejście nabłonkowo-mezenchymalne i przerzuty poprzez TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): s. 481-493.
- Nanni, V. i in., Wodno-alkoholowy ekstrakt z kwiatów Spartium junceum L. hamuje wzrost i melanogenezę w komórkach B16-F10 poprzez indukcję starzenia się. Phytomedicine, 2018. 46: s. 1-10.