U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300444

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Tredjepartsavtale

Beskrivelse	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP er en genmodifisert osteosarkomcellelinje som er avledet fra den humane cellelinjen U-2 OS. Denne cellelinjen har blitt konstruert gjennom CRISPR/Cas9-mediert genomredigering for å inkorporere en SNAP-tag ved NUP96-genet, noe som gjør det mulig å visualisere og studere dynamikken i kjerneporkomplekset. Kjerneporkomplekser (NPC) er avgjørende for reguleringen av nukleocytoplasmatisk transport, og NUP96 er en viktig komponent i NPC, og spiller en sentral rolle i dets strukturelle integritet og funksjon. I U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klon nr. 33 gjør integrasjonen av SNAP-taggen i NUP96-lokuset det mulig å feste fluorescerende substrater eller andre kjemiske prober som kan brukes til avbildning av levende celler og andre biokjemiske analyser, på en spesifikk og kovalent måte. Denne egenskapen gjør den til et uvurderlig verktøy for å undersøke den molekylære dynamikken i nukleocytoplasmatisk transport, forstå NPC-relaterte patologier og screene for terapeutiske forbindelser som påvirker NPC-funksjonen. Cellelinjen beholder også egenskapene til foreldrelinjen U-2 OS, som inkluderer en høy grad av genetisk stabilitet og enkel dyrking, noe som gjør den egnet for screening med høy gjennomstrømning og utvidede studier innen cellebiologi. På grunn av spesifisiteten til modifikasjonen i NUP96-genet er U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP-klon nr. 33 en unik modell for detaljerte studier av NPC-komponenter i forbindelse med cellefunksjon og -dysfunksjon. Forskere kan utnytte SNAP-tag-systemet til å merke NUP96 selektivt og raskt, noe som muliggjør sanntidsvisualisering av NPC-dynamikken under fysiologiske og patologiske forhold. Denne spesifikke klonen kan fungere som en robust plattform for både grunnforskning og anvendte biomedisinske studier, og kan bidra betydelig til fagområdene cellebiologi, genetikk og onkologi.
Organisme	Menneskelig
Vev	Bein
Sykdom	Osteosarkom

Alder	15 år
Kjønn	Kvinne
Etnisitet	Kaukasisk
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (Cytion-katalognummer 300444)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FL
Innskyter	Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
GMO-status	GMO-S1: Denne humane osteosarkomcellelinjen (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP, klone 33) inneholder en CRISPR-konstruert NUP96-SNAP-fusjon som muliggjør kjemisk merking av kjerneporer med SNAP-tag. Modifikasjonen er stabilt integrert. Denne klassifiseringen gjelder bare i Tyskland og kan variere andre steder.

Proteinuttrykk	NUP96-SNAP (kjernepore-kompleks protein 96, SNAP-tag)

Kulturmedium	McCoys 5a, m: 3,0 g/L glukose, m: stabil glutamin, m: 2,0 mM natriumpyruvat, m: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820200a)
Kosttilskudd	Suppler med 10 % FBS, 3,0 g/L glukose, stabil glutamin, 2,0 mM natriumpyruvat, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Delingsforhold	Et forhold på 1:4 til 1:6 anbefales
Såtetthet	1 x 10⁴ celler/cm²
Fornyelse av væske	2 til 3 ganger per uke
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	For optimal feste og levedyktighet etter tining anbefaler vi å bruke kollagenbelagte kolber eller plater.
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,y

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300444-040724	Analysesertifikat	23. May. 2025	300444

Vær oppmerksom på at denne cellelinjen ikke er tilgjengelig under en standard Cytion MTA, da den krever en tredjepartsavtale og/eller er gjenstand for forhandlinger med den opprinnelige lisensgiveren.

Drevet av Bioz Se mer informasjon om Bioz

U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Tredjepartsavtale