SH-SY5Y Cellen - Neuroblastoomonderzoek en de neurowetenschappelijke relevantie van SH-SY5Y Cellen

De SH-SY5Y cellijn, afgeleid van humaan neuroblastoom, wordt veel gebruikt in medisch onderzoek voor het onderzoeken van neurodegeneratieve ziekten en het ontwikkelen van medicijnen. Onderzoekers gebruiken deze cellen in hun oorspronkelijke ongedifferentieerde vorm of differentiëren ze in cellen die op neuronen lijken.

Algemene informatie en oorsprong van de SH-SY5Y cellijn

In dit gedeelte wordt basisinformatie gegeven over de SH-SY5Y cellijn, waaronder zijn oorsprong, definitie en cellulaire structuur. We gaan in op vragen zoals de morfologie en de oorsprong van de cellen.

  • SH-SY5Y is een van mensen afgeleide cellijn die is ontstaan door subklonering van de neuroblastoomcellijn SK-N-SH in 1970.
  • De oudercellijn, SK-N-SH, werd ontwikkeld uit het beenmergbiopt van een vierjarige vrouwelijke neuroblastoompatiënt.
  • SH-SY5Y cellen zijn fenotypisch adrenerg en brengen dopaminerge markers tot expressie, waardoor ze een nuttig in vitro model zijn voor het bestuderen van neurodegeneratieve ziekten, neurogenese en hersencelkenmerken [1].
  • SH-SY5Y-cellen groeien als klompjes levensvatbare neuroblastische cellen met neurieten en zijn losjes aan elkaar gehecht.
  • De celgrootte van SH-SY5Y-cellen is 12 μm.
  • Het modale chromosoomnummer voor SH-SY5Y cellen is 47, en ze bezitten een zeldzame marker van chromosoomnummer 1, trisomie van 1q, veroorzaakt door de insertie van een extra kopie van het 1q segment in de lange arm van chromosoom 1.

SH-SY5Y-cellen kweken

In neurobiologische onderzoekslaboratoria zijn SH-SY5Y cellen de meest gekweekte neuroblastoomcellen. Om met deze cellen te werken, is het essentieel om te begrijpen welk type groeimedium geschikt is voor hun kweek, hun groeikenmerken, optimale zaaidichtheid en de juiste methode om ze in te vriezen. In dit gedeelte vindt u essentiële informatie over het kweken van SH-SY5Y cellen om u bij deze aspecten te helpen.

Belangrijke punten voor het kweken van SH-SY5Y cellen

Populatieverdubbelingstijd: De gemiddelde populatieverdubbelingstijd voor SH-SY5Y cellen is ongeveer 3 tot 4 dagen.

Adherent of in suspensie: SH-SY5Y zijn losjes aanhangende cellen. Ze groeien als klompjes wanneer ze bij een hoge dichtheid worden uitgezaaid.

Zaaidichtheid: De optimale zaaidichtheid voor SH-SY5Y is 1 x 104 cellen/cm2. SH-SY5Y-culturen bestaan uit zowel aanhangende als drijvende cellen.

Groeimedium: DMEM:Ham's F12 media aangevuld met 3,1 g/L glucose, 10% FBS en 1,6 mM L-glutamine is ideaal voor het kweken van de SH-SY5Y cellijn.

Groeicondities (temperatuur, CO2): SH-SY5Y cellen worden gekweekt bij 37°C temperatuur in een bevochtigde incubator met 5% CO2 toevoer.

Opslag: Om de levensvatbaarheid van SH-SY5Y-cellen te behouden, worden ze opgeslagen in de dampfase van vloeibare stikstof bij een temperatuur lager dan -150°C.

Invriesproces en medium: CM-1 of CM-ACF invriesmedia worden gebruikt om SH-SY5Y cellen in te vriezen. Voor het invriezen van deze neuroblastoomcellijn wordt gekozen voor een langzame vriesmethode waarbij de temperatuur geleidelijk met 1°C daalt.

Ontdooiproces: Bevroren flacons met SH-SY5Y-cellen worden in een waterbad van 37 °C geplaatst. De flacon wordt snel geschud totdat de cellen ontdooien en er alleen nog een klein ijsklontje overblijft.

Bioveiligheidsniveau: SH-SY5Y-cellen kunnen worden gekweekt in een laboratorium met bioveiligheidsniveau 1.

SH-SY5Y-cellen bij gemiddelde en hoge confluentie.

SH-SY5Y-cellen: Voordelen en beperkingen

Voordelen

  • Differentiatie in neuronen: SH-SY5Y cellen kunnen gedifferentieerd worden in functionele neuronen met behulp van specifieke verbindingen, wat een handiger alternatief biedt voor primaire neuronen en ethische bezwaren vermijdt die geassocieerd worden met het gebruik ervan [2].
  • In vitro model voor neurodegeneratieve ziekten: De expressie van moleculaire markers, waaronder dopaminerge neurale markers, maakt SH-SY5Y cellen geschikt voor het bestuderen van neurodegeneratieve aandoeningen zoals Parkinson.

Beperkingen

  • Niet gesynchroniseerde celcyclus: SH-SY5Y celculturen vertonen onsynchrone celcycli in een ongedifferentieerde staat [3].
  • Ongedefinieerde differentiatiestaat: SH-SY5Y cellen hebben een ongedefinieerde differentiatie die varieert van een tumorigene neuroblastoomtoestand tot postmitotische neuronen of neurale progenitorcellen. Ze brengen geen moleculaire markers tot expressie die volwassen neuroncellen wel hebben [4].

SH-SY5Y-cellen voor in vitro neurofarmacologie en het ontdekken van geneesmiddelen

Toepassingen van SH-SY5Y cellen

Onderzoek naar neurodegeneratieve ziekten: SH-SY5Y cellen worden gebruikt om neurodegeneratieve aandoeningen te bestuderen, zoals de ziekte van Alzheimer en Parkinson. In een studie werden SH-SY5Y cellen bijvoorbeeld behandeld met amyloïde β peptide 1-42 om een in vitro model van de ziekte van Alzheimer te ontwikkelen. De ontwikkelde cellijn werd vervolgens getransfecteerd met pcDNA-17A en 17A shRNA om het effect van lang niet-coderend RNA 17A op cellen die lijken op de ziekte van Alzheimer te onderzoeken. De studie toonde aan dat LncRNA-17A de apoptose en autofagie van SH-SY5Y-cellen reguleert, waardoor de ziekte van Alzheimer wordt nagebootst [5].

Ontwikkeling van geneesmiddelen: SH-SY5Y-cellen worden gebruikt om geneesmiddelen te screenen en te valideren op hun therapeutische effect tegen neurodegeneratieve ziekten. Een studie uit 2021 induceerde bijvoorbeeld parkinsonisme in SH-SY5Y cellen met een herbicide (Paraquat) en gebruikte deze cellen vervolgens om het therapeutische potentieel van een flavonoïde, Naringenine, te onderzoeken. De verbinding toonde een beschermend effect tegen door de ziekte van Parkinson veroorzaakte neurodegeneratie en neurotoxiciteit in celmodellen, wat duidt op het potentieel ervan voor de ontwikkeling van behandelingen tegen PD [6].

Onderzoekspublicaties met SH-SY5Y-cellen

Er zijn tal van onderzoeken naar SH-SY5Y cellen. In deze paragraaf worden enkele belangrijke voorbeelden besproken.

Bronnen voor SH-SY5Y-cellen: Protocollen, video's en meer

Er zijn verschillende online bronnen beschikbaar over deze beroemde neuroblastoomcellijn. Deze bronnen kunnen u informeren over de behandeling en het onderhoud van SH-SY5Y culturen.

Protocollen voor celkweek

De volgende website artikelen kunnen u helpen bij het leren van methoden voor het kweken, invriezen en ontdooien van SH-SY5Y cellen.

We verwachten dat dit artikel nuttige informatie zal bieden over de behandeling, kweek en het gebruik van SH-SY5Y cellen in onderzoek. Als je met deze neuroblastoom cellijn wilt werken, overweeg dan om bij ons te bestellen.

SH-SY5Y-cellijn: Veelgestelde vragen

Referenties

  1. Carvajal-Oliveros, A., et al., De BE (2)-M17 cellijn heeft een beter dopaminerg fenotype dan de traditioneel voor Parkinson onderzoek gebruikte SH-SY5Y, die voornamelijk serotonerg is. IBRO Neuroscience Reports, 2022. 13: p. 543-551.
  2. Kovalevich, J. and D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronale celkweek: methoden en protocollen, 2013: p. 9-21.
  3. Martin, E.-R., J. Gandawijaya, and A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells using B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: p. 4042.
  4. Feles, S., et al., Streamlining culture conditions for the neuroblastoma cell line SH-SY5Y: a prerequisite for functional studies. Methoden en protocollen, 2022. 5(4): p. 58.
  5. Wang, X., M. Zhang, and H. Liu, LncRNA17A regulates autophagy and apoptosis of SH-SY5Y cell line as an in vitro model for Alzheimer's disease. Biowetenschappen, biotechnologie en biochemie, 2019. 83(4): p. 609-621.
  6. Ahmad, M.H., et al., Naringenin alleviates paraquat-induced dopaminergic neuronal loss in SH-SY5Y cells and a rat model of Parkinson's disease. Neurofarmacologie, 2021. 201: p. 108831.

We hebben vastgesteld dat u zich in een ander land bevindt of een andere browsertaal gebruikt dan momenteel is geselecteerd. Wilt u de voorgestelde instellingen accepteren?

Sluit