COS-1-cellen
Overzicht van de COS-1 cellijn
Beschrijving | COS-1 cellen, een fibroblast-achtige cellijn afgeleid van nierweefsel van Afrikaanse groene apen, hebben sinds hun ontwikkeling in 1981 door J.W.F. Cowell en collega's een revolutie teweeggebracht op het gebied van de biologische wetenschap. Deze cellen bieden een uitstekend platform voor het bestuderen van verschillende aspecten van cellulaire biologie, waaronder eiwitexpressie en eiwit-eiwit interacties. Een van de cruciale voordelen van COS-1 cellen is hun opmerkelijke vermogen om exogene eiwitten tot expressie te brengen, waardoor ze een onschatbaar hulpmiddel zijn voor het produceren van recombinante eiwitten en het onderzoeken van eiwitgerelateerde fenomenen. Het constitutief actieve c-src-gen en de aanwezigheid van SV40's grote T-antigeen verbeteren de vertaalefficiëntie, wat resulteert in verhoogde niveaus van eiwitexpressie in deze cellen. Onderzoekers hebben COS-1 cellen uitgebreid gebruikt om de cytopathische effecten van virussen en de reacties van gastcellen op virale infecties te bestuderen. COS-1 cellen zijn gevoelig voor verschillende virussen, waaronder herpes simplex, vesiculaire stomatitis en influenza A. Deze eigenschap maakt COS-1 cellen een uitstekend modelsysteem voor het onderzoeken van virale pathogenese, gastheercelreacties en de ontwikkeling van antivirale geneesmiddelen. Bovendien heeft de COS-1 cellijn aanzienlijk bijgedragen tot ons begrip van verschillende biologische mechanismen. De populariteit in moleculair en celbiologisch onderzoek komt voort uit de vaardigheid om exogene eiwitten tot expressie te brengen en de tolerantie voor verschillende virale stammen. Deze eigenschappen stellen wetenschappers in staat om de complexe werking van cellulaire processen nauwkeurig en betrouwbaar te onderzoeken. De COS cellijnen zijn afgeleid van de CV-1 cellen, die afkomstig zijn uit de nieren van de Afrikaanse groene meerkat. Door immortalisatie met een gemodificeerd SV40 virus dat groot T-antigeen kan produceren, behouden de COS cellen hun fibroblast-achtige morfologie en erven ze de gunstige eigenschappen van het SV40 genetisch materiaal. COS-1 en COS-7 zijn de meest gebruikte varianten onder de COS cellijnen. Onderzoekers gebruiken deze cellijnen vaak bij het onderzoeken van het apenvirus SV40 en het uitvoeren van moleculaire biologie-, biochemie- en celbiologie-experimenten. Met name de COS-1-cellen hebben een opmerkelijk potentieel voor eiwitexpressie door transfectie met een SV40-replicatieoorsprong. Het grote T-antigeen dat deze genetisch gemodificeerde COS-1 cellen produceren, maakt aanzienlijke afbeeldingen van geïntroduceerde vectoren mogelijk, waardoor efficiënte recombinante eiwitproductie mogelijk wordt. COS-1 cellen spelen een cruciale rol in het bevorderen van ons begrip van complexe biologische processen. Met hun oorsprong in het weefsel van de nier van de Afrikaanse groene aap en hun morfologie als fibroblasten, vormen deze cellen een betrouwbaar en veelzijdig platform voor vele wetenschappelijke toepassingen. Hun uitgebreide gebruik, zoals blijkt uit meer dan 1400 productcitaties, onderstreept hun belang in verschillende onderzoeksgebieden. Wat praktische overwegingen betreft, COS-1 cellen hebben een verdubbelingstijd van ongeveer 48 uur, waardoor efficiënte celkweek en experimentele procedures mogelijk zijn. Bovendien worden deze cellen gecategoriseerd als dierlijke cellen en behoren ze tot het organisme Cercopithecus aethiops, met de nier als oorsprongsweefsel. COS-1 cellen staan in de voorhoede van baanbrekend biologisch onderzoek en vergemakkelijken doorbraken in ons begrip van moleculaire en cellulaire processen. Met hun uitzonderlijke capaciteit voor eiwitexpressie, gevoeligheid voor virale infecties en belang in verschillende studiegebieden, blijven COS-1 cellen een hoeksteen van wetenschappelijk onderzoek. Onderzoekers blijven gebruik maken van de opmerkelijke eigenschappen van COS-1 cellen om de fijne kneepjes van biologische mechanismen te ontrafelen en de weg vrij te maken voor nieuwe ontwikkelingen in de natuurwetenschappen. |
---|---|
Organisme | Cercopithecus aethiops (Groene meerkat) |
Weefsel | Nieren |
Synoniemen | Cos-1, COS 1, Cos 1, COS1, Cos1, CV-1 in oorsprong Simian-1 |
Kenmerken
Geslacht | Mannelijk |
---|---|
Morfologie | Fibroblast |
Groei eigenschappen | Aanhangend |
Documentatie over COS1 cellen
Citeren | COS-1 (Cytion catalogusnummer 305005) |
---|---|
Bioveiligheidsniveau | 1 |
Expressie / Mutatie
Eiwitexpressie | T-antigeen, dit is een Afrikaanse groene apennier fibroblast-achtige cellijn die geschikt is voor transfectie door vectoren die expressie van Sv40 T-antigeen vereisen. De cellen zijn ebna-negatief, negatief voor Fc-receptoren en negatief voor complementreceptoren. |
---|
Kweekmethoden
Kweekmedium | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a) |
---|---|
Medium supplementen | Vul het medium aan met 10% FBS |
Oplossing voor passeren | Accutase |
Subcultuur | Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten. |
Splitsingsverhouding | 1:2 tot 1:4 |
Vloeistofvernieuwing | 2 tot 3 keer per week |
Middel invriezen | CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) of CM-ACF (Cytion catalogusnummer 806100) |
Behandeling van gecryopreserveerde culturen |
|
Kwaliteitscontrole
Steriliteit | Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden. Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties. |
---|