Cellule SiHa - Fare luce sulla ricerca sul cancro cervicale

Le celluleSiHa sono cellule di cancro cervicale ampiamente utilizzate nella ricerca biomedica. Sono un ottimo ospite per la trasfezione e quindi sono adatte per gli studi di espressione genica. Grazie alla loro origine umana e alla rilevanza del cancro cervicale, queste cellule sono impiegate principalmente negli studi di biologia del cancro, virologia e sviluppo di farmaci.

Caratteristiche generali e origine delle cellule SiHa

Comprendere l'origine e le caratteristiche generali di una linea cellulare è fondamentale, in quanto ne influenza l'utilizzo nell'ambito della ricerca. In questa sezione dell'articolo, scoprirete l'origine della linea cellulare SiHa, le caratteristiche distintive e molto altro ancora: Cos'è la linea cellulare SiHa per il cancro? Cosa sono le cellule SiHa HPV? Qual è l'origine della linea cellulare SiHa? Qual è la morfologia di SiHa?

SiHa, la linea cellulare del carcinoma cervicale, è stata derivata da frammenti di una biopsia uterina primaria di una donna asiatica (55 anni) con cancro a cellule squamose [1].
La linea cellulare SiHa presenta un cariotipo ipertriploide. La maggior parte delle cellule ha un numero medio di cromosomi compreso tra 69 e 72. Tuttavia, circa il 24% delle cellule possiede un numero medio di cromosomi compreso tra 69 e 72. Tuttavia, circa il 24% delle cellule possiede un numero cromosomico modale pari a 71.
Le cellule SiHa sono positive al virus 16 del papilloma umano. Presentano un'integrazione di circa 1 o 2 copie del genoma HPV per cellula [2].
Queste cellule di cancro cervicale presentano una morfologia epiteliale.

Divisione di cellule di cancro cervicale HeLa al microscopio.

Linea cellulare SiHa: Informazioni sulla coltura

Mantenere in coltura una linea cellulare non è facile se non si conoscono tutti i punti chiave della coltura. Dovete sapere che: Qual è il tempo di raddoppio di SiHa? Che cos'è il terreno cellulare SiHa? Come si coltiva la linea cellulare SiHa?

Punti chiave per la coltura delle cellule SiHa

Tempo di raddoppio:	Il tempo di raddoppiamento delle cellule SiHa è di circa 17 ore.
Aderenti o in sospensione:	SiHa è una linea cellulare aderente.
Rapporto di subcoltivazione:	Il rapporto di subcoltivazione per le cellule SiHa è compreso tra 1:2 e 1:4. Per il passaging, le cellule aderenti vengono risciacquate con 1x PBS. Si aggiunge la soluzione di accutasi e le cellule vengono incubate per 8-10 minuti a temperatura ambiente. Successivamente, si aggiunge il terreno di coltura e le cellule vengono centrifugate. Il pellet cellulare viene risospeso e le cellule vengono versate nella nuova fiasca per la coltura.
Terreno di coltura:	Per la crescita ideale delle cellule SiHa si utilizza il terreno minimo essenziale di Eagle (EMEM) contenente il 10% di FBS, 2 mM di L-Glutamina, 2,2 g/L di NaHCO3 e la soluzione salina bilanciata di Earle (EBSS). Il terreno di coltura viene sostituito da 2 a 3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:	Le cellule SiHa sono mantenute in un incubatore umidificato a 37°C con un apporto di CO2 del 5%.
Conservazione:	Le fiale di linea cellulare di cancro cervicale SiHa congelate vengono conservate a una temperatura inferiore a -150°C in un congelatore elettrico o nella fase vapore dell'azoto liquido per un periodo più lungo.
Processo e terreno di congelamento:	Per il congelamento delle cellule SiHa si utilizza il terreno di congelamento CM-1 o CM-ACF. Le cellule vengono congelate con un metodo di congelamento lento che consente una riduzione di solo 1 °C al minuto per proteggere la vitalità delle cellule.
Processo di scongelamento:	Le cellule congelate vengono tenute per 40-60 secondi in un bagno d'acqua a 37°C finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Successivamente, si aggiunge del terreno di crescita fresco e le cellule vengono centrifugate per rimuovere i componenti del terreno di congelamento. Il pellet cellulare viene risospeso e le cellule vengono distribuite in una fiasca di coltura per la crescita.
Livello di biosicurezza:	Per la manipolazione e la manutenzione delle colture di cellule SiHa è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1.

Strato aderente di cellule SiHa con ingrandimento 10× e 20×.

Vantaggi e svantaggi della linea cellulare SiHa

Come altre linee cellulari di carcinoma umano, anche SiHa possiede alcune caratteristiche distinte associate a determinati vantaggi e svantaggi. Qui di seguito ne abbiamo discussi alcuni significativi.

Vantaggi della linea cellulare SiHa per il cancro cervicale

Modello di cancro cervicale
- Derivata dal carcinoma cervicale a cellule squamose.
- Utilizzata per studiare i meccanismi, la crescita e lo sviluppo del cancro cervicale.
- Esprime i geni p53+ e pRB+ che sono correlati alla riparazione del DNA, alla regolazione del ciclo cellulare e alla soppressione del tumore.
Potenziale tumorigenico
- Le cellule SiHa sono tumorigeniche e possono indurre tumori epidermoidi di grado III scarsamente differenziati in topi nudi.
- Sono utilizzate per la ricerca in vivo sul cancro e per testare trattamenti antitumorali.

Svantaggi delle cellule SiHa

Tasso di proliferazione
- Le cellule SiHa proliferano rapidamente, portando a una crescita eccessiva.
- Richiedono frequenti passaggi, aumentando il rischio di instabilità genetica, che può influire sul comportamento delle cellule nel tempo.

Applicazioni di ricerca delle cellule SiHa

La linea cellulare SiHa è ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro cervicale. Qui di seguito vengono discusse alcune applicazioni specifiche di questa linea cellulare.

Studi sul papillomavirus umano (HPV): Le cellule SiHa sono positive all'HPV 16 e sono quindi preziose per lo studio dell'infezione da papillomavirus umano, dei suoi meccanismi molecolari e del suo ruolo nello sviluppo e nella progressione del cancro cervicale. I ricercatori utilizzano queste cellule anche per studiare la replicazione virale, l'integrazione e il suo impatto sui processi delle cellule ospiti. Uno studio condotto nel 2020 ha utilizzato la linea cellulare SiHa per esaminare il ruolo delle oncoproteine HPV E6/E7 nello sviluppo del tumore del collo dell'utero, puntando su di esse con la tecnologia CRISPR. I risultati hanno rivelato che l'abbattimento dei geni E6/E7 ha causato l'inibizione della crescita e l'apoptosi delle cellule SiHa. Pertanto, questi geni virali possono servire come bersagli farmacologici cruciali per lo sviluppo di terapie contro il cancro cervicale associato all'HPV [3].
Biologia del cancro: Le cellule SiHa costituiscono un modello prezioso per lo studio della biologia del cancro cervicale, compresi lo sviluppo, la progressione, le metastasi e l'invasione. I ricercatori utilizzano queste cellule per esplorare le mutazioni genetiche e le vie molecolari sottostanti che contribuiscono allo sviluppo e alla crescita del cancro cervicale, come ad esempio uno studio che ha utilizzato le cellule SiHa e ha scoperto che l'upregolazione di SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) favorisce la proliferazione delle cellule del cancro cervicale attraverso l'attivazione della cascata MAPK [4].
Screening e test farmacologici: SiHa è una linea di cancro cervicale ampiamente utilizzata per valutare l'efficacia di potenziali farmaci antitumorali specifici per il cancro cervicale associato all'HPV. I ricercatori esplorano il potenziale antiproliferativo, apoptotico e antimetastatico dei farmaci utilizzando queste cellule. Ad esempio, uno studio condotto nel 2019 ha analizzato il potenziale citotossico degli estratti di frutta di Vatica diospyroides Symington Type SS sulla linea cellulare di cancro cervicale SiHa [5].

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Pubblicazioni di ricerca sulle cellule SiHa

Alcune pubblicazioni di ricerca significative e frequentemente citate riguardano la linea cellulare di carcinoma squamoso cervicale SiHa.

L'effetto antitumorale dell'aloe-emodina sulle cellule di carcinoma cervicale è associato al papillomavirus umano E6/E7 e al metabolismo del glucosio

Questa pubblicazione su OncoTargets and Therapy (2019) propone che un composto naturale, l'aloe-emodina, eserciti effetti apoptotici associati al papillomavirus umano E6/E7 e al metabolismo del glucosio nelle cellule di cancro cervicale SiHa.

Valutazione del potenziale antitumorale dell'estratto di foglie di Excoecaria agallocha (L.) su linee cellulari di cancro cervicale umano (SiHa) e valutazione del meccanismo d'azione sottostante

Questo articolo è stato pubblicato sul Future Journal of Pharmaceutical Sciences nel 2022. Questo studio ha analizzato le attività antitumorali dell'estratto di foglie di Excoecaria agallocha (L.) nella linea cellulare di cancro cervicale SiHa.

Effetto antiproliferativo della 1, 10-fenantrolina accoppiata a nanoparticelle di ZnO solfatato nella linea cellulare di cancro della cervice SiHa

Questo studio pubblicato sul Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) propone che la molecola 1,10-fenantrolina, accoppiata a nanoparticelle di solfato di zinco, eserciti significativi effetti antiproliferativi nelle cellule SiHa.

L'astragaloside IV inibisce l'invasione e la metastasi delle cellule di cancro cervicale SiHa attraverso le vie PI3K e MAPK mediate dal TGF-β1

Questa ricerca è stata pubblicata su Oncology Reports nel 2019. Lo studio ha rivelato che l'astragaloside IV, un prodotto naturale, sopprime la migrazione e l'invasione delle cellule SiHa modulando le vie di segnalazione PI3K e MAPK mediate dal TGF-β1.

L'IFI16 promuove la progressione del cancro cervicale attraverso l'upregolazione di PD-L1 nell'immunomicroambiente attraverso la via STING-TBK1-NF-kB

Questo studio pubblicato su Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) ha rivelato che IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) regola il gene PD-L1 attraverso l'attivazione della via STING-TBK1-NF-kB per favorire la crescita delle cellule di cancro cervicale SiHa.

Risorse per la linea cellulare SiHa: Protocolli, video e altro

Ecco alcune risorse online relative alle cellule SiHa.

Trasfezione delle cellule SiHa: Questo articolo di ricerca contiene un protocollo per il mantenimento delle cellule di cancro cervicale SiHa e per la trasfezione delle cellule SiHa.

Il seguente link contiene informazioni sulla coltura cellulare delle cellule SiHa.

Linea cellulare SiHa: Questo sito web contiene molti dati preziosi sulla linea cellulare SiHa. Include informazioni sui mezzi di crescita, sulle condizioni di coltura, sui protocolli per la subcultura delle cellule SiHa e sulla gestione delle colture proliferative e crioconservate.

FAQ per le cellule di carcinoma cervicale SiHa

Riferimenti

Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Cellule staminali, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Investigation of the influence of high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., Inibizione della crescita in vitro e in vivo delle cellule di cancro cervicale umano attraverso il clivaggio degli mRNA del papillomavirus umano E6/E7 da parte del sistema CRISPR/Cas13a. Ricerca antivirale, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G promuove la proliferazione del cancro cervicale attivando la via di segnalazione MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Potenziale antitumorale degli estratti di frutta di Vatica diospyroides symington tipo SS e loro effetto sulla morte cellulare programmata di linee cellulari di cancro cervicale. The Scientific World Journal, 2019. 2019.